正畸治疗的核心目标是通过施加机械力实现牙齿的移动，同时促进牙槽骨和牙周组织的动态重建，以达到理想的咬合和美观效果［1］。然而，牙齿移动的效率不仅取决于机械力的施加，更受到牙周组织生物学反应的显著影响，其中成骨细胞和破骨细胞的动态平衡起着关键作用［2］。随着全球代谢性疾病负担加重，患有高脂血症的正畸患者日益增多。高脂血症不仅与心血管疾病密切相关，还可能通过诱发全身性炎症和氧化应激，对牙周健康产生负面影响［3］。这类患者常使用他汀类药物进行降脂治疗。近年来研究［4］显示，他汀类药物如阿托伐他汀（atorvastatin， ATV）除调节血脂外，还具有多效性药理作用，包括抗炎与影响骨代谢，可能通过促进骨形成和抑制骨吸收参与牙周改建。既往研究［5–7］多聚焦于辛伐他汀等对破骨细胞的抑制及其对正畸牙移动（orthodontic tooth movement， OTM）的减缓作用，而ATV在成骨分化及牙周组织重塑中的作用尚不明确。因此，该研究旨在探讨ATV对大鼠多种干细胞成骨细胞分化和OTM的影响和潜在机制，为优化正畸治疗方案提供理论支持。1材料与方法1.1主要试剂与仪器阿托伐他汀钙片（美国辉瑞制药有限公司，货号：1014091）；二甲基亚砜（DMSO）、茜素红 S 染色试剂、中性蛋白酶、胶原酶（美国Sigma-Aldrich公司，货号：20139、A5533、P6911、C5138）；α-MEM培养基（美国HyClone公司，货号：SH30265.01）；CCK-8试剂盒、BCA蛋白定量试剂盒、4%多聚甲醛（上海碧云天生物技术有限公司，货号：C0038、P0012、P0099）；碱性磷酸酶（alkaline phosphatase， ALP）检测试剂盒（北京百优泰生物科技有限公司，货号：AK003）；蛋白酶及磷酸酶抑制剂混合物（上海瑞真生物技术有限公司，货号：P0100）；PVDF膜（美国Millipore公司，货号：24937799）；牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）（德国BioFroxx公司，货号：4240GR025）；一抗 I型胶原（collagen type I， COL-I；1∶1 000）、Runt相关转录因子2（runt-related transcription factor 2， Runx2，1∶1 000）、骨形态发生蛋白-2（bone morphogenetic protein-2， BMP-2，1∶1 000）、β-肌动蛋白（β-actin；1∶5 000）（杭州华安生物有限公司，货号：HA750188、ER1802-78、ER80602、EM21002）；一抗骨钙素（osteocalcin， OCN，1∶1 000）（英国 Abcam 公司，货号：ab93876）；一抗牙本质涎磷蛋白（dentin sialophosphoprotein， DSPP，1∶1 000）（美国 Novus Biologicals 公司，货号：NBP1-89449）；HRP 标记二抗（杭州华安生物有限公司，货号：HR6001）；ECL化学发光底物试剂盒（上海天能科技有限公司，货号：180-501）；TRIzol试剂（美国Invitrogen公司，货号：15596026）；PrimeScript RT试剂盒、SYBR Green Premix Ex Taq（日本TaKaRa公司，货号：RR036A、RR420A）；10% EDTA脱钙液（北京莱宝科技有限公司，货号：D0021）；中性蛋白酶、胶原酶（美国Sigma-Aldrich公司，货号：P6911、C5138）；成骨诱导培养基（南京赛业生物科技有限公司，货号：HUXMA-90021）。酶标仪（美国BioTek仪器有限公司，型号：ELx800）；凝胶成像系统（上海天能科技有限公司，型号：Tanon-5200）；超净工作台（苏州苏净安泰公司，型号：SW-CJ-1FD）；CO₂培养箱、NanoDrop微量分光光度计（美国Thermo Fisher Scientific公司，型号：Heracell 150i、NanoDrop 2000）；微量离心机（德国Eppendorf公司，型号：5424R）；石蜡切片机（德国Leica公司，型号：RM2235）；实时荧光定量PCR仪（美国Bio-Rad Laboratories公司，型号：CFX96）。1.2细胞的分离和培养使用购自安徽省实验动物中心的3~4周龄（体质量约50～80 g）、SPF级的雄性Sprague-Dawley大鼠进行体外细胞分离。通过组织酶消化法，从大鼠体内分离并培养3种细胞：骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells， BMSCs）、牙周韧带干细胞（periodontal ligament stem cells， PDLSCs）和牙髓干细胞（dental pulp stem cells， DPSCs）。DPSCs来源于切牙牙髓，BMSCs来源于大鼠骨髓。将组织切成1 mm3小块，用中性蛋白酶和胶原酶消化。从切牙根部中1/3表面提取牙周韧带，用于PDLSCs的分离与培养。细胞在37 ℃、5% CO₂的培养箱中培养，取P3代细胞用于实验。1.3ATV溶液的制备ATV钙片在室温下溶于DMSO，溶解度≥10 mg/mL。当DMSO终浓度低于0.1%时，细胞毒性可忽略。将2.418 mg ATV钙片粉末溶于200 µL DMSO过夜，次日加入α-MEM培养基至20 mL，过滤后得到1×10⁻4 mol/L的ATV储存液。1.4细胞分组与培养根据前期预实验，骨髓干细胞在1×10⁻6或1×10⁻7 mol/L ATV处理下增殖和成骨能力增强。因此，本研究将BMSCs、PDLSCs和DPSCs分别用0、1×10⁻6和1×10⁻7 mol/L ATV处理，分为对照组（-）、ATV-6组和ATV-7组。细胞染色实验中，加入成骨诱导培养基作为阳性对照（+）组。1.5细胞增殖实验使用CCK-8试剂盒检测细胞增殖。将3种细胞以3×10³个/孔的密度接种于96孔板中，分别在第1、4、7天加入10 µL CCK-8溶液，37 ℃孵育2 h后，用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度。1.6ALP和茜素红染色为研究ATV对BMSCs和PDLSCs成骨分化的影响，用含或不含ATV的成骨诱导培养基处理细胞。ALP染色使用ALP检测试剂盒，茜素红染色使用Sigma试剂。将细胞以5×104个/孔的密度接种于12孔板中，分别在第7、14、21天检测染色效果，并通过ImageJ软件分析染色强度。1.7Western blot实验用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的裂解液提取细胞总蛋白，使用BCA试剂盒定量。蛋白经10% SDS-PAGE分离后，转至PVDF膜，用5% BSA封闭1 h。随后，分别加入以下特异性一抗，4 ℃孵育过夜：COL-I、 Runx2、BMP-2、OCN、DSPP），以β-actin作为内参。使用HRP标记的二抗（1∶2 000）室温孵育1 h。使用ECL底物试剂盒显色，凝胶成像系统采集信号。1.8大鼠正畸牙移动模型雄性Sprague-Dawley大鼠12只（3月龄；体质量250~290 g），购自安徽省实验动物中心，饲养于SPF级实验室，温度25 ℃，12 h光照/黑暗循环，自由饮食饮水，动物实验伦理经安徽医科大学实验动物伦理委员会批准（批号：LLSC20221066）。在大鼠左侧上颌骨安装镍钛螺旋弹簧装置，右侧作为对照。正畸持续21 d，每日检查装置，脱落时当天重置。将造模后的大鼠随机分为两组：ATV组每日灌胃20 mg/kg ATV溶液，ctrl组灌胃等量生理盐水。ATV溶液配制基于预实验结果，采用含10% DMSO的生理盐水作为溶剂体系（终浓度5 mg/mL），20 mg/kg对应人类临床用药等效剂量，且同时具备有效性和安全性。实验过程中每7 d称重1次。1.9qRT-PCR使用TRIzol试剂提取大鼠牙周组织总RNA，经NanoDrop测定浓度及纯度（A260 nm/A280 nm=1.8~2.0）；取1 μg RNA通过PrimeScript RT试剂盒反转录为cDNA；采用SYBR Green Premix Ex Taq进行扩增，反应体系含10 μmol/L引物各0.4 μL、cDNA 2 μL、SYBR Mix 10 μL，ddH₂O补至20 μL；扩增程序：95 ℃ 30 s预变性，95 ℃ 5 s、60 ℃ 30 s，共40个循环；以β-actin为内参，采用2-ΔΔCT法计算基因相对表达量。引物序列如下，BMP-2：（F）5′-CAGCCAC GTCCAGCCATCTT-3′，（R）5′-TCCCGGTCTCAGGT ATCAGCA-3′，Runx2：（F）5′-CCGCACGACAACCG CACCAT-3′，（R）5′-CGCTCCGGCCCACAAATCTC-3′，OCN：（F）5′-CTCTCTCTGCTCACTCTGCTG-3′，（R）5′-GGAGCTGCTGTGACATCCAT-3′；β-actin：（F）5′-CCCGCGAGTACAACCTTCTT-3，（R）5′-CG TCATCCATGGCGAACT-3′。1.10组织学分析实验结束后，对大鼠实施安乐死。取上颌骨，用4%多聚甲醛固定，10% EDTA脱钙，石蜡包埋后沿矢状面切取5 µm切片。分别进行HE染色、Masson染色和免疫组化分析以观察第一磨牙牙周韧带及周围牙槽骨的再生情况：HE染色经苏木精-伊红染色显示组织基本形态；Masson染色通过丽春红、酸性品红及苯胺蓝三色法区分胶原纤维；免疫组化分析为经过抗原修复、一抗BMP-2（1∶200）、Runx2（1∶200）及OCN抗体（1∶200），于4 ℃孵育过夜，辣根过氧化物酶标记的二抗（1∶500），于室温孵育60 min，最后进行DAB显色，标记特定蛋白。。1.11统计学处理使用SPSS（IBM SPSS Statistics 26.0）进行数据分析，GraphPad Prism 9.0绘图。数据以均数±标准差表示，两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间多个时间点比较采用重复测量资料的方差分析。P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1ATV对干细胞增殖的影响为了探究ATV对牙周相关细胞增殖的影响，本研究在大鼠BMSCs、PDLSCs和DPSCs的培养液中加入了适量浓度的ATV。预实验结果提示ATV在1×10⁻6 mol/L和1×10⁻7 mol/L浓度下对骨髓干细胞的增殖和成骨能力具有显著促进作用，因此本研究选择了0、1×10⁻7 mol/L和1×10⁻6 mol/L 3个浓度进行实验。CCK-8检测显示，与对照组相比，1×10⁻6 mol/L浓度的ATV在第4天和第7天显著促进了BMSCs、PDLSCs和DPSCs（均P0.01）的增殖，而1×10⁻7 mol/L浓度的ATV仅在第7天显著促进了BMSCs（P0.05）和DPSCs（P0.05）的增殖（图1）。结果表明，ATV能够有效促进牙周相关细胞的增殖，且1×10⁻6 mol/L的ATV具有最佳的促增殖效果。10.19405/j.cnki.issn1000–1492.2026.02.001.F001图1ATV对干细胞增殖的影响Fig. 1The effects of ATV on stem cell proliferationA-C： The proliferation of BMSCs （A）， PDLSCs （B） and DPSCs （C） treated with ATV at the concentration of 0， 1×10-6 or 1×10-7 mol/L for 1，4 and 7 days were detected by CCK-8 assays； *P0.05， **P0.01， ***P0.001 vs （-） group on the same day； ＃P0.05 vs ATV-6 group on the same day.2.2ATV对大鼠BMSCs、PDLSCs成骨分化的影响为了明确ATV对成骨分化的影响，本研究对BMSCs和PDLSCs进行了ALP染色和茜素红染色，并设置了成骨诱导培养基作为阳性对照组（+）。与对照组相比，除了PDLSCs中ATV-7组第21天外，ATV-6组和ATV-7组中BMSCs（均P0.05）（图2A、2C）和PDLSCs（P0.05）（图2B、2E）的ALP活性在成骨分化的各时间均显著增强，并且在第14天ALP染色最深；而ATV-7组在诱导ALP活性增强方面与成骨诱导组（+）无显著差异（P0.05），而BMSCs中ATV-6组在第14天以及PDLSCs中ATV-6组在第7、14、21天ALP活性显著大于成骨诱导组（+），说明ATV-6组的效果更为显著。茜素红染色显示，与对照组（-）相比，除了ATV-7组在第7天外，ATV-6组和ATV-7组中BMSCs（均P0.05）（图2A、2D）和PDLSCs（均P0.001）（图2B、2F）矿化结节的形成显著增加，且ATV-6组在第21天表现出最高的矿化水平。上述结果表明，ATV能够显著促进BMSCs和PDLSCs的成骨分化，且1×10⁻6 mol/L ATV的效果总体优于成骨诱导组，1×10⁻⁷ mol/L ATV的效果总体与成骨诱导组相当。10.19405/j.cnki.issn1000–1492.2026.02.001.F002图2ATV对大鼠BMSCs、PDLSCs成骨分化的影响Fig. 2The effects of ATV on osteogenic differentiation of BMSCs and PDLSCs in ratsA， B： ALP and alizarin red staining results of BMSCs and PDLSCs from rats in different groups on day 7， day 14， and day 21 × 50； C， D： Analysis of ALP staining results and alizarin red staining results of BMSCs in different groups on day 7， 14， and 21 of osteogenic differentiation； E， F： Analysis of ALP staining results and alizarin red staining results of PDLSCs in different groups on day 7， 14， and 21 of osteogenic differentiation； *P0.05， **P0.01， ***P0.001 vs （-） group； △P0.05， △△P0.01， △△△P0.001 vs （+） group；#P0.05， ##P0.01 vs ATV-6 group； （-）： negative control group； （+）： positive control group； ATV-6： 1×10-6 mol/L ATV incubation group； ATV-7： 1×10-7 mol/L ATV culture group.2.3ATV对大鼠BMSCs、PDLSCs成骨分化相关蛋白及DPSCs成牙本质分化相关蛋白的影响为了研究ATV对成骨和成牙本质分化相关蛋白的影响，本研究对BMSCs、PDLSCs和DPSCs的相关蛋白进行了Western blot分析。与对照组相比，ATV-6组BMSCs（图3A、3B）和PDLSCs（图3C、3D）中的成骨分化相关蛋白COL-I、Runx2、BMP-2和OCN在成骨分化的各个时间表达均上调（均P0.05），而部分时间ATV-7组的上调程度低于ATV-6组。同时，ATV-6组DPSCs（图3E、3F）分泌的成牙本质分化相关蛋白DSPP在各个时间点与对照组相比均上调（均P0.001）。结果表明，ATV能够显著促进BMSCs和PDLSCs的成骨分化，而DPSCs作为牙髓再生核心细胞，在ATV作用下高表达DSPP，表明其向功能性成牙本质细胞定向分化。10.19405/j.cnki.issn1000–1492.2026.02.001.F003图3ATV对大鼠BMSCs、PDLSCs成骨分化相关蛋白及DPSCs成牙本质分化相关蛋白的影响Fig. 3The effects of ATV on osteogenic differentiation-associated proteins of rat BMSCs and PDLSCs and dental differentiation-associated proteins of DPSCs 138 A， B： The expression of COL-Ⅰ， Runx2， BMP-2， and OCN proteins in rat BMSCs； C， D： The expression of COL-Ⅰ， Runx2， BMP-2， and OCN proteins in rat PDLSCs； E， F： The expression of DSPP protein in rat DPSCs； *P0.05， **P0.01， ***P0.001 vs （-） group； #P0.05， ##P0.01 ， ###P0.001 vs ATV-6 group.2.4ATV对大鼠正畸牙齿移动的影响为了探究ATV对OTM的影响，本研究建立了大鼠OTM模型（图4A），并通过Micro-CT测量牙齿移动距离（图4B）。结果显示，随着正畸时间的延长，各组大鼠牙齿移动的距离逐渐增加。与对照组（-）相比，ATV组的牙齿移动距离在第14天（P0.05）和第21天（P0.05）减少，特别是第21天，减少幅度更大（图4C）。21天内，各组大鼠的体质量与治疗前相比均无显著差异（P0.05），说明OTM和ATV灌胃对大鼠几乎无全身影响（图4D）。结果表明，ATV能够有效抑制正畸牙齿移动。10.19405/j.cnki.issn1000–1492.2026.02.001.F004图4ATV对大鼠正畸牙齿移动的影响Fig. 4The effects of ATV on orthodontic tooth movement in ratsA： Schematic diagram of rat orthodontic device； B： Sagittal scanning results of the control side and the orthodontic side of rat maxilla by micro-CT； C： Mesial movement distance of the first molars in after 21 days of orthodontics； D： Body weight changes after 21 days of orthodontic treatment； *P0.05 vs ctrl group.2.5ATV对大鼠牙周韧带和牙槽骨的影响为了明确ATV对牙周组织的影响，本研究对OTM 21天大鼠的牙周韧带和牙槽骨进行了HE染色和Masson染色。HE结果显示，在对照组和ATV组的非正畸侧，第一磨牙附近的牙周膜显示出一致的宽度，并与牙槽骨明显分离（图5A、5B）。在OTM+ctrl组的受压侧，牙周膜显得狭窄，局部血管受压，表明正畸力导致了牙周组织的压缩（图5C）。相比之下，OTM +ATV组的第一磨牙两侧牙周膜宽度更加均匀，压迫侧的牙周膜中致密的纤维束和成纤维细胞排列规则，牙槽骨表面观察到大量成骨细胞，细胞呈圆形且细胞质丰富，血管分布明显增加（图5D）。此外，OTM +ATV组的张力侧牙槽骨显示出伸入牙周膜的指状突起，表明有新骨形成。10.19405/j.cnki.issn1000–1492.2026.02.001.F005图5ATV对大鼠牙周韧带和牙槽骨影响的HE染色Fig. 5HE staining showed the effects of ATV on the periodontal ligament and alveolar bone in ratsA： Non-orthodontic side of the control group； B： Non-orthodontic side of the ATV group； C： Orthodontic side of the control group； D： Orthodontic side of the ATV group； HE staining of sagittal sections of maxillary and molar teeth on both sides （×50） and localized periodontal HE staining of the proximal and distal mesial roots of the first molar （×200）； R： Root； PDL： Periodontal ligament； Ab： Alveolar bone.Masson染色结果显示，对照组和ATV组非正畸侧的牙周胶原纤维笔直、排列规则且几乎相互平行，牙齿静态地悬浮在牙槽窝中（图6A、6B）。然而，OTM+ctrl组正畸侧的牙周胶原纤维排列变得紊乱，表明正畸力对牙周组织的结构造成了破坏（图6C）。相比之下，OTM +ATV组的牙周胶原纤维分布更加均匀，排列更加致密，显示出更好的组织修复状态（图6D）。这说明，ATV能够显著改善牙周组织的压缩状态，促进牙周膜和牙槽骨的重建，并维持胶原纤维的有序排列。10.19405/j.cnki.issn1000–1492.2026.02.001.F006图6ATV对大鼠牙周韧带和牙槽骨影响的Masson染色Fig. 6Masson staining showed the effect of ATV on the periodontal ligament and alveolar bone in ratsA： Non-orthodontic side of the control group； B： Non-orthodontic side of the ATV group； C： Orthodontic side of the control group； D： Orthodontic side of the ATV group； Masson staining of sagittal sections of maxillary and molar teeth on both sides （×50） and localized periodontal Masson staining of the proximal and distal mesial roots of the first molar （×200）； R： Root； PDL： Periodontal ligament； Ab： Alveolar bone.2.6ATV对大鼠上颌骨成骨相关基因和蛋白表达的影响为了研究ATV对成骨相关基因表达的影响，本研究通过qRT-PCR检测了OTM 21天大鼠上颌骨张力侧成骨标志物的转录组表达情况。结果显示，与Ctrl组相比，ATV组在第一磨牙张力侧的BMP⁃2、Runx2和OCN的表达均增加（均P0.001）（图7A-7C）。10.19405/j.cnki.issn1000–1492.2026.02.001.F007图7ATV对大鼠上颌骨成骨相关基因表达的影响Fig. 7The effects of ATV on the expression of osteogenesis-related genes in rat maxillaA： Relative mRNA expression of BMP⁃2 on the tension side of the rat maxilla； B： Relative mRNA expression of Runx2 on the tension side of the rat maxilla； C： Relative mRNA expression of OCN on the tension side of the rat maxilla； SAL： Normal saline by gavage； ATV： ATV by gavage； ***P0.001 vs （-） group.为了研究ATV对成骨相关蛋白表达的影响，通过免疫组化检测了OTM 21天大鼠上颌骨张力侧成骨标志物的蛋白表达。结果显示，与Ctrl组相比，ATV组在第一磨牙张力侧的BMP-2、Runx2和OCN的表达均增加（均P0.05）（图8A-8C）。结果表明，ATV能够通过上调成骨相关基因和蛋白的表达，促进牙周骨质形成，减少正畸牙移动。10.19405/j.cnki.issn1000–1492.2026.02.001.F008图8ATV对大鼠上颌骨成骨相关蛋白表达的影响Fig. 8The effects of ATV on the expression of osteogenesis-related proteins in rat maxillaA： Images and quantitative analysis of BMP-2 immunohistochemical staining of rat maxillary sections； B： Images and quantitative analysis of Runx2 immunohistochemical staining of rat maxillary sections； C： Immunohistochemical staining images and quantitative analysis of OCN in rat maxillary sections； The observation area： periodontal ligament and alveolar bone in the middle 1/3 region of the mesial root distal side of rat first molars； Immunohistochemical staining of sagittally oriented sections of maxillary and molar teeth on both sides （×20） and localized periodontal immunohistochemical staining of the proximal-middle portion of the first molar （×200）； R： root； PDL： periodontal ligament； Ab： alveolar bone； *P0.05 vs ctrl group.3讨论流行病学数据显示，21岁以上人群约36.7%（7 810 万人）需接受降脂治疗，其中55.5%使用他汀类药物［8］。近年研究发现，他汀类药物除降脂外，还可调控骨代谢。例如，洛伐他汀和辛伐他汀能增加卵巢切除啮齿动物的骨量［9］，并促进软骨细胞增殖［10］。鉴于他汀类药物在口腔正畸领域的作用机制尚不明确，本研究以ATV为研究对象，探讨其对正畸牙周组织改建及牙齿移动的影响。OTM本质是机械力介导的牙槽骨吸收与沉积及牙周膜改建过程，同时伴随牙髓组织的适应性反应。正畸机械刺激可激活DPSCs分化为成牙本质细胞，以维持牙髓稳态［11］。本研究通过分离培养大鼠牙槽骨BMSCs、PDLSCs及DPSCs，发现ATV能够显著促进三者增殖，并上调BMSCs和PDLSCs中COL-I、BMP-2等成骨蛋白，以及DPSCs中牙本质分化相关蛋白的表达。这表明ATV可能通过增强牙槽骨改建能力与牙髓修复潜能，对正畸所致的牙槽骨过度吸收和牙髓损伤产生保护作用。动物实验证实，局部注射辛伐他汀可减少破骨细胞性骨吸收从而抑制牙齿移动［12］。本研究建立的大鼠21天OTM模型显示，与对照组相比，ATV组（15 mg/kg·d）在第14和21天的牙齿移动距离显著减小，与既往报道［13］相符。组织学染色进一步显示，ATV组压力侧牙周膜纤维排列更规则致密，牙槽骨表面成骨细胞数量增多，提示ATV可改善牙周压缩状态并促进组织重建，有利于牙齿稳定。他汀类药物已知可通过BMP-2促进成骨细胞增殖分化［14］；ATV还可经Wnt/5α通路促进Runx2表达，在防治激素性股骨头坏死中发挥作用［15］。本研究证实ATV可上调BMSCs中BMP-2及其下游Runx2的表达，但其具体调控机制仍需深入解析。随着高脂血症年轻化趋势，长期服用他汀类药物的正畸患者日益增多。本研究证实，ATV通过促进牙周成骨分化显著抑制牙齿移动，这一效应具有双重临床价值：一方面，ATV延缓牙齿移动可能延长矫治周期，临床医生对长期服药患者需提前评估并告知相关风险，优化矫治方案；另一方面，ATV可减轻牙周膜压缩性损伤、促进张力侧新骨形成，有助于增强治疗中牙齿稳定性并降低复发风险。此外，针对伴牙周炎的正畸患者，ATV的成骨特性或为减少牙槽骨吸收、降低牙齿松动风险提供局部应用前景，但其安全性与有效性尚需进一步临床验证。需指出的是，骨代谢的动态平衡依赖于成骨细胞与破骨细胞的协同作用。既往研究［5，13］已充分证实他汀类药物（包括ATV）可通过抑制核因子κB受体活化因子配体（RANKL） 信号通路或直接干预破骨前体细胞分化，从而降低破骨活性。这表明ATV可能通过双向调控，即既促进成骨又抑制破骨，来共同抑制牙齿移动。由于本研究聚焦于成骨/成牙本质分化机制，未涉及破骨细胞相关检测，未来可结合抗酒石酸酸性磷酸酶/碱性磷酸酶（TRAP/ALP）双荧光染色或单细胞测序［16］等技术，同步分析ATV对牙周微环境中成骨-破骨细胞互作的分子网络，以全面揭示其对正畸牙移动的调控机制。