目前，寻找优良的抗生素替代品成为动物营养行业的热点之一。研究发现，益生菌、抗菌肽、有机酸等饲料添加剂对改善动物生长性能、免疫力和肠道健康有积极的作用[1-3]。苯甲酸作为一种有机酸，可以透过病原菌细胞膜进入胞内解离抑制细胞的呼吸酶活性，导致其代谢紊乱[4]。在饲料中添加适量的苯甲酸，可以提高动物的平均日增重，降低料重比[5-6]。因此，本试验旨在研究不同浓度水平苯甲酸对断奶仔猪生长性能、腹泻及免疫功能的影响，为提高断奶仔猪免疫力下降等问题提供参考。1材料与方法1.1试验设计选取180头体重（8.88±0.29）kg、健康、同批次产房的“杜×长×大”三元断奶仔猪，按体重相近、公、母一致原则随机分成4组，每组3个重复，每个重复15头仔猪。A组（对照组）为基础日粮，试验B组、C组、D组分别在基础日粮中添加2、4、6 kg/t苯甲酸。试验前3 d使用4种日粮进行1∶1∶1∶1混合饲喂过渡，正式试验期10 d。试验日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.007.T001表1试验日粮组成及营养水平项目A组B组C组D组原料组成/%玉米27.527.327.126.9发酵豆粕12.012.012.012.0膨化玉米22.022.022.022.0面粉8.08.08.08.0乳清粉7.57.57.57.5葡萄糖2.52.52.52.5鱼粉7.07.07.07.0大豆浓缩蛋白2.52.52.52.5白糖2.52.52.52.5豆油2.52.52.52.5预混料6.06.06.06.0苯甲酸0.00.20.40.6合计100.0100.0100.0100.0营养水平消化能/(MJ/kg)14.6414.6414.6414.64粗蛋白质/%18.0018.0018.0018.00赖氨酸/%1.301.301.301.30钙/%0.700.700.700.70磷/%0.600.600.600.60注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 10 000 IU、VD3 2 500 IU、VE 100 mg、VB1 3 mg、VB2 10 mg、VB6 6 mg、VB12 0.05 mg、烟酰胺60 mg、泛酸钙30 mg、叶酸3 mg、生物素0.2 mg、Cu 120 mg、Zn 1 500 mg、Mn 60 mg、Fe 300 mg。2.营养水平均为计算值。1.2饲养管理试验饲喂遵循少量多次原则，平均每天加料5~7次，第2 d的7：30清槽，计算前1 d的采食量。试验猪的管理以猪场实际饲养管理为基础，专人管理，试验在相同的饲养管理和环境条件下进行，保持饲料新鲜，保持猪舍环境舒适。每天观察试验猪采食、健康及活动情况，发现病猪作标记号，跟踪记录发病日期、持续时间、治疗方案、康复情况，严重发病要剔除试验栏，称取病猪的体重，记录日期和体重。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能每天统计各组猪只的采食量；试验结束对试验猪只进行称重，计算各组猪只平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G）。ADFI=饲料消耗量/(每组仔猪头数×试验天数)(1)ADG=(末重－初重)/试验天数(2)F/G=平均日采食量/平均日增重(3)1.3.2腹泻指数每天观察仔猪粪便形态外观，评分并记录，粪便评分标准参照文献[7]，见表2。根据评分结果计算每窝腹泻指数。每窝腹泻指数=观察记录分数总和/（观察总天数×每窝仔猪数）(4)10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.007.T002表2粪便评分标准粪便评分评分依据评定0正常粪便，松软成形无腹泻1粪便松散，部分成形轻度腹泻2半液体粪便，粪水未分离中度腹泻3水样粪，粪水分离重度腹泻1.3.3血清指标于试验最后1 d晨饲前，每个重复挑选5头仔猪，颈静脉采集血液10 mL，静置30 min，3 000 r/min离心15 min，取血清装入1.5 mL的离心管中，-20 ℃下保存。采用贝克曼AU5800全自动生化仪测定血清中总蛋白（TP）、白蛋白(ALB)、球蛋白（GLB）、葡萄糖（GLU）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和尿素氮（BUN）含量；采用ELISA法检测血清中的IgG、IgA、IgM含量，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.4数据统计与分析试验数据采用SPSS软件单因素方差分析模型进行统计分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同浓度苯甲酸对断奶仔猪生长性能的影响（见表3）由表3可知，B组仔猪的ADFI、ADG显著高于A组（P0.05），B组仔猪的ADFI最高。D组仔猪的ADG显著高于A组；C组仔猪的ADG比A组显著提高了10.1%，C组仔猪的F/G显著低于A组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.007.T003表3不同浓度苯甲酸对断奶仔猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kgADFI/[g/(只·d)]ADG/[g/(只·d)]F/GA组（对照组）8.88±0.2912.45±0.09b368.00±9.00b357.00±6.00b1.04±0.09aB组8.88±0.2312.73±0.15a394.00±10.00a384.00±2.00a1.03±0.05aC组8.88±0.2812.82±0.22a377.00±13.00ab393.00±8.00a0.96±0.02bD组8.89±0.2812.50±0.57b384.00±6.00a361.00±9.00b1.07±0.07a注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；表5、表6与此同。2.2不同浓度苯甲酸对断奶仔猪腹泻的影响（见表4）由表4可知，B组、D组仔猪的腹泻指数显著低于A组（P0.05），其中D组腹泻指数最低。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.007.T004表4不同浓度苯甲酸对断奶仔猪腹泻的影响项目A组（对照组）B组C组D组腹泻指数0.036±0.009a0.011±0.008b0.016±0.010ab0.002±0.004b注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）2.3不同浓度苯甲酸对断奶仔猪血清生化指标的影响（见表5）由表5可知，与A组相比，C组断奶仔猪血清中TP和GLB含量显著提高（P0.05），血清中TC和BUN含量显著降低（P0.05）。随着苯甲酸添加量的增加，仔猪血清中GLU含量显著高于A组（P0.05），其中C组最高。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.007.T005表5不同浓度苯甲酸对断奶仔猪血清指标的影响组别TP/(g/L)ALB/(g/L)GLB/(g/L)GLU/(mmol/L)TC/(mmol/L)TG/(mmol/L)BUN/(mmol/L)A组（对照组）52.45±6.24a24.05±1.0228.40±1.45a3.25±0.35a2.38±0.40a0.55±0.044.58±0.32aB组53.67±4.82ab24.34±1.2129.33±2.10ab3.82±0.21b2.12±0.37ab0.50±0.074.24±0.25abC组59.10±2.92b25.50±2.1133.60±3.00b4.24±0.20b2.03±0.35b0.47±0.053.98±0.22bD组54.92±3.21ab24.67±1.4730.25±2.68ab4.02±0.40b2.20±0.42ab0.48±0.064.15±0.33ab2.4不同浓度苯甲酸对断奶仔猪血清免疫指标的影响（见表6）由表6可知，添加苯甲酸可以提高断奶仔猪血清中IgG、IgA、IgM的含量，且随着添加量的增加，免疫球蛋白含量有增加的趋势，但各项指标并未表现出显著性（P0.05）；其中C组各项免疫指标结果最好。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.007.T006表6不同浓度苯甲酸对断奶仔猪血清免疫指标的影响组别IgGIgAIgMA组（对照组）8.49±0.501.14±0.070.95±0.13B组8.80±0.401.19±0.011.00±0.06C组9.05±0.381.22±0.131.06±0.13D组8.82±0.321.20±0.131.03±0.07g/L3讨论3.1不同浓度苯甲酸对断奶仔猪生长性能的影响苯甲酸作为一种有机酸化剂，被广泛应用于饲料行业，对动物的生长性能和健康有积极的正向作用。研究发现，日粮中添加苯甲酸对肉鸡生长和屠宰性能无不利影响，能够提高肠道内优势菌群的数量[8-9]。因此，在断奶仔猪日粮中添加适量的苯甲酸可以促断奶仔猪生长。刚断奶的仔猪由于消化系统发育尚未完善，胃肠道内消化酶分泌不足，不能有效消化饲料中营养物质[3]。添加适量的苯甲酸可以降低日粮的pH值，从而降低肠道内pH值，可以有效抑制病原微生物的增殖，提高胃蛋白酶等消化酶的活性和对营养物质的消化吸收率，进而起促生长的作用[10]。Torrallardona等[11]研究发现，日粮添加0.5%苯甲酸可以显著提高仔猪的日增重和采食量，与刁慧等[12]研究结果一致。本试验结果表明，日粮中添加苯甲酸可以显著提高仔猪的ADG，降低F/G，其中添加4 kg/t苯甲酸效果最佳，与张艳雯等[13]、Chen等[14]、Zhai等[15]研究结果一致。蔡锐芳等[6]研究发现，在断奶仔猪日粮中添加苯甲酸对提高仔猪生长性能无明显差异。Kluge等[16]研究发现，添加10 kg/t苯甲酸，仔猪生长性能才得到显著性改善。导致以上结果的原因可能与猪品种、饲料配方、环境等有关。过量的苯甲酸可能会打乱机体生理状态，造成器官损伤，从而影响仔猪的生长和健康。舒燕[17]研究发现，日粮中添加2.5%苯甲酸会对仔猪脾脏组织造成轻微的损伤，添加量达5.0%会对部分内脏器官的形态结构产生不利影响。因此，在提高仔猪生长性能的时候选择适宜浓度的苯甲酸会产生积极效果。3.2不同浓度苯甲酸对断奶仔猪腹泻率的影响仔猪断奶因自身免疫系统不完善，加上换料和环境的变化，很容易造成腹泻，从而影响仔猪的生长发育，严重时可导致仔猪死亡[18]。苯甲酸进入肠道内，可以改善仔猪空肠绒毛高度和隐窝深度[19]，促进肠道上皮细胞的发育，加快对营养物质的消化吸收，降低营养性腹泻。中性偏碱性环境较适宜病原微生物的生存。苯甲酸进入胃肠道内可以降低pH值，抑制病原菌的生长，调节胃肠道内微生物区系，进而降低仔猪腹泻。有机酸进入肠道后可以减少大肠杆菌的数量，控制仔猪断奶后腹泻[20]。刁慧[21]研究发现，0.5%苯甲酸组断奶仔猪腹泻评分比对照组降低了60%。Silveira等[22]在21日龄断奶仔猪日粮中添加0.75%苯甲酸，结果发现，腹泻率比对照组降低了38.3%。本试验结果表明，日粮中添加2~6 kg/t苯甲酸能够显著降低断奶仔猪的腹泻率，且随着添加量的增加，断奶仔猪腹泻发生率逐渐降低，说明苯甲酸能够调节肠道菌群结构，降低腹泻率。3.3不同浓度苯甲酸对断奶仔猪血清生化指标的影响血清生化指标可以评价动物营养物质代谢能力的强弱和免疫应答水平[23]。血清TP可以反映肝脏生理功能，可以提供蛋白质满足机体修补损伤组织。当血清中TP含量升高时，动物肝脏蛋白质的能力增强，机体的代谢和免疫功能增强[24]。本试验中，添加苯甲酸可以显著提高仔猪血清TP含量，表明苯甲酸可促进断奶仔猪对蛋白质的消化吸收，改善肝功能，提高动物的免疫力。葡萄糖能够反映糖原合成和分解的动态平衡过程，为机体合成蛋白质提供能量。血液TC和TG是评价肝脏脂质代谢的重要指标之一；血清BUN是蛋白质分解代谢的产物，由肾小球滤过排出体外，可反映机体肾脏代谢水平[25]。本试验中，4 kg/t苯甲酸可以显著提高血清TP、GLU含量，降低TC、BUN含量，说明苯甲酸能够在不同程度上提高蛋白质的合成代谢，有利于维持机体内环境的稳态，与李璐[26]、刁慧等[12]研究结果一致。3.4不同浓度苯甲酸对断奶仔猪血清免疫指标的影响免疫球蛋白是一类由淋巴细胞产生的具有抗体活性的蛋白质，具有免疫调节的作用，是动物体内免疫系统重要的部分[27]。IgG是血清免疫球蛋白的主要成分，占血清免疫球蛋白的65%，在对病原体二次免疫应答反应中产生抗体，能够阻止病原体对动物的进一步感染，反映动物免疫器官发育情况[28]。陈佳力等[29]研究发现，添加0.5%苯甲酸可以显著提高第14 d断奶仔猪血清中IgG含量。动物体内免疫球蛋白含量的增加可以增强机体的免疫功能。本试验中，在断奶仔猪日粮中添加苯甲酸对血清中免疫球蛋白含量有提高的趋势，说明苯甲酸在一定程度上可以增强仔猪的免疫功能。4结论断奶仔猪无抗日粮中添加4 kg/t的苯甲酸显著改善了断奶仔猪的生长性能，降低了腹泻率，提高了仔猪的免疫功能。