锌是动物的必需金属元素，参与体内多种酶的组成，也能够影响机体免疫应答的生物化学反应。黄丹萍[1]研究表明，不同锌源对仔猪肠道形态及相关蛋白表达影响差异显著。文敏[2]研究不同锌对肉鸭生长性能及肠道屏障功能的作用，结果发现，锌源对肉鸭肠道形态具有显著影响，对血清中D-乳酸及炎症因子含量影响也有显著影响。仔猪断奶前后饲料中添加高剂量氧化锌可以控制腹泻，但断奶两周以后，饲料中不允许添加高剂量氧化锌。因此，饲料中添加高效锌源可以促进仔猪肠道发育，减少仔猪腹泻。本试验研究等剂量羟基蛋氨酸锌替代硫酸锌对断奶仔猪生长性能、血清抗氧化指标、肠道屏障、免疫蛋白和炎性因子的影响，以期为断奶仔猪日粮中使用羟基蛋氨酸锌替代硫酸锌提供参考。1材料与方法1.1试验设计选取72头35日龄仔猪（杜×长×大）按照体重一致原则，随机分为2组，每组6个重复，每个重复6头猪。试验期28 d：预试期第1~14 d，仔猪饲喂基础日粮；正式试验期第15~28 d，仔猪饲喂试验日粮，各处理组锌水平量配平。试验分组及锌添加水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.024.T001表1试验分组及锌添加水平组别锌源Zn水平/(mg/kg)对照组硫酸锌80试验组羟基蛋氨酸锌801.2试验材料碱式氯化铜、硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸锰、亚硒酸钠、碘酸钙与羟基蛋氨酸锌（锌≥12%）均购自长沙兴嘉生物股份有限公司。1.3试验日粮试验参照2004年猪饲养标准配制基础日粮。两种日粮中的消化能（DE）和粗蛋白（CP）水平保持一致。试验日粮组成及营养水平见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.024.T002表2试验日粮组成及营养水平原料组成/%1~14 d15~28 d营养水平基础日粮对照组试验组合计100.00100.00100.00玉米62.0062.0062.00消化能/(MJ/kg)14.39豆粕11.8011.8011.80粗蛋白/%18.02豆油1.801.801.80赖氨酸/%1.27膨化大豆11.0011.0011.00蛋氨酸/%0.48鱼粉5.005.005.00缬氨酸/%0.86乳清粉4.004.004.00苏氨酸/%0.78磷酸氢钙0.800.800.80色氨酸/%0.23石粉0.500.500.50蛋氨酸+半胱氨酸/%0.80食盐0.500.500.50钙/%0.7698%赖氨酸盐酸盐0.550.550.55磷/%0.64苏氨酸0.150.150.15蛋氨酸(99%)0.100.100.08胆碱(50%)0.200.200.20帝斯曼仔猪多维0.040.040.04植酸酶0.030.030.03抗氧化剂0.030.030.03麦饭石1.261.241.22缬氨酸(98%)0.120.120.12加微100（无锌）0.100.100.10硫酸锌00.020羟基蛋氨酸锌000.06碱铜0.020.020.02注：1.每千克日粮含有：Cu10 mg、Fe 100 mg、Mn 40 mg、Se 0.7 mg、I 0.8 mg、VA 6 400 IU、VD3 2 000 IU、VK3 2 mg、VE15 mg、VB1 2 mg、VB2 5 mg、VB6 2 mg、VB12 0.015 mg、D-生物素0.08 mg、D-泛酸1mg、叶酸1mg、烟酰胺20 mg、氯化胆碱（50%）2 000 mg、植酸酶300 mg、抗氧化剂300 mg。2.营养水平中粗蛋白、钙、磷和总锌为实测值，其余均为计算值。1.4饲养管理仔猪自由采食与饮水，猪舍温度保持在20~25 ℃，湿度控制在50%~65%，保持舍内空气流通，其他按常规饲养管理进行操作。1.5测定指标及方法1.5.1生长性能试验第1、15、28 d分别以重复为单位，对仔猪进行空腹称重，记录每天饲喂量，计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADF）和料重比（F/G）。平均日增重=(末重－初重)/试验天数(1)平均日采食量=消耗饲料/(试验猪头数×试验天数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.5.2腹泻率和腹泻指数采用视觉评估法观察腹泻，每天9：00和17：00逐头对试验仔猪进行检查，观察有无腹泻状况，粪便评分标准见表3，做好记录。腹泻率=试验期间腹泻猪总头数/(每个重复试验猪的头数×试验总天数×每天观察次数)×100%(4)腹泻指数=每个重复粪便评分总和/(每个重复猪头数×试验总天数×每天观察次数）(5)10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.024.T003表3粪便评分标准评分粪便形态0条形或粒形1成形，软粪2稠状，不成形，粪水无分离现象3液状，不成形，粪水有分离现象注：腹泻评分大于或等于2分，判定仔猪腹泻。1.5.3皮毛外观评分试验的第15、28 d对仔猪的皮毛外观进行评分，皮毛外观评分标准见表4。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.024.T004表4皮毛外观评分标准皮毛等级评价内容评分很好皮肤红润、油亮，毛顺直、光亮4普通皮肤较为红润，毛较为顺直3差皮肤偏白，毛暗淡、弯曲、凌乱2很差皮肤苍白，毛卷曲、杂乱、无光11.5.4皮肤红润度通过皮肤红润度测定，能够反映猪的造血机能及健康发育水平，具体方法为：试验第15、28 d，于猪右臀部凸出部位使用色差仪检测试验猪的L*、a*、b*值，检测前确保皮肤表面干净。1.5.5血清指标试验第15、22、28 d，试验猪全部进行前腔静脉采血，制备血清样。采用湖南艾方生物科技有限公司试剂盒检测谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、超氧化物歧化酶（SOD）、二胺氧化酶（DAO）活性；尿素氮（BUN）、丙二醛（MDA）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、干扰素-γ（IFN-γ）、免疫球蛋白G（IgG）、D-乳酸含量。1.6数据统计与分析试验数据采用SPSS 20.0进行单因素方差分析，Ducan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同锌源对断奶仔猪生长性能及皮毛的影响（见表5、表6）由表5可知，1~14 d（预试期）和15~28 d（正式试验期），两组断奶仔猪生长性能无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.024.T005表5不同锌源对断奶仔猪生长性能的影响项目初重/kg末重/kg平均日增重/[g/(只·d)]平均日采食量/[g/(只·d)]料重比1~14 d（预试期）对照组6.58±0.319.81±0.92230.89±70.44291.21±55.761.29±0.17试验组6.52±0.269.80±1.49234.29±71.70295.46±38.311.26±0.45P值0.8600.5090.5520.7830.59515~28 d（正式试验期）对照组9.81±0.9215.24±2.24387.50±114.45730.38±175.181.94±0.39试验组9.80±1.4915.49±1.73406.43±57.69738.43±112.751.82±0.41P值0.5090.8660.7000.9120.597注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。由表6可知，预试期试验组断奶仔猪腹泻程度较为严重；正式试验期试验组断奶仔猪腹泻程度与预试期相比，有减缓趋势，仔猪皮肤亮度显著提升（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.024.T006表6不同锌源对断奶仔猪腹泻和皮毛的影响项目腹泻率/%腹泻指数皮毛评分L*a*b*1~14 d（预试期）对照组0.89±1.790.04±0.092.38±0.2560.51±3.305.02±1.139.24±1.20试验组3.57±4.120.13±0.162.50±0.4161.26±2.784.69±0.749.37±1.50P值0.2780.4050.6200.7420.6400.89315~28 d（正式试验期）对照组2.68±5.360.07±0.142.50±0.0055.96±2.25b8.00±0.62a10.19±1.64试验组0.00±0.000.00±0.002.75±0.5059.40±1.63a6.39±0.87b8.63±0.85P值0.3560.3560.3560.0480.0230.1412.2不同锌源对断奶仔猪血清生化和抗氧化指标的影响（见表7）由表7可知，正式试验前，各组断奶仔猪的血清生化指标无差异（P0.05）。正式试验第8 d以后，与对照组相比，试验组断奶仔猪血清的ALT活性呈下降趋势，血清中的SOD活性呈提升趋势，说明肝脏功能和免疫力有一定的改善；正式试验第14 d以后，试验组断奶仔猪血清中的ALP活性显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.024.T007表7不同锌源对断奶仔猪血清生化及抗氧化指标的影响项目ALT/(U/L)AST/(U/L)UREA/(mmol/L)ALB/(g/L)ALP/(U/L)SOD/(U/mL)MDA(μmol/L)15 d（正式试验期第1 d）对照组73.37±11.5167.61±17.662.74±0.9234.28±4.84370.14±55.08164.18±13.274.32±0.45试验组78.50±20.2258.25±14.142.07±1.1235.34±3.64372.88±74.45184.44±18.824.62±1.25P值0.6750.4390.3960.7390.9550.1290.66422 d（正式试验期第8 d）对照组86.86±9.80a110.36±59.412.63±1.1134.92±6.55340.94±55.98159.81±16.634.39±1.54试验组67.74±14.54b57.02±11.511.91±0.4436.08±2.13301.13±52.14177.65±6.343.56±0.29P值0.0720.1280.2770.7470.3380.0920.32728 d（正式试验期第14 d）对照组73.33±2.7168.26±7.603.21±2.6335.82±3.32483.92±79.83a221.75±15.075.72±1.18试验组58.72±5.1169.60±6.202.04±2.4337.74±3.48321.12±60.26b266.91±51.715.13±1.33P值0.1110.7930.280.4560.0170.1450.5312.3不同锌源对断奶仔猪肠道屏障、免疫蛋白和炎性因子的影响（见表8）由表8可知，正式试验前，各组断奶仔猪的肠道屏障、免疫蛋白和炎性因子相关指标无差异（P0.05）。正式试验第8 d后，与对照组相比，试验组断奶仔猪血清炎性因子水平、D-乳酸含量和DAO活力均低于对照组，说明对照组炎症反应更为严重，肠道屏障功能受损；正式试验第14 d以后，试验组断奶仔猪的各项指标仍呈现下降的趋势，显示肠道黏膜处于显著的修复状态。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.03.024.T008表8不同锌源对断奶仔猪肠道屏障、免疫蛋白和炎性因子的影响项目IFN-γ/(ng/L)IL-1β/(ng/L)TNF-α/(ng/L)IgG/(ng/L)D-乳酸/(μg/L)DAO/(μg/L)15 d（正式试验期第1 d）对照组113.10±49.5641.64±23.53180.33±93.6111.47±4.021 515.01±909.3027.77±16.50试验组101.92±53.7422.54±9.04115.09±53.617.10±1.111 069.07±328.7916.84±9.74P值0.7700.1810.2720.0810.3920.29722 d（正式试验期第8 d）对照组96.97±66.2035.63±14.60125.56±44.4911.27±6.151 577.55±709.5319.56±8.40试验组75.84±31.6632.51±9.52109.38±37.728.75±1.701 016.44±469.8412.76±4.51P值0.5860.7330.5990.4600.2350.20428 d（正式试验期第14 d）对照组82.66±31.3825.70±11.81120.77±36.498.83±1.79a1 200.67±600.8818.32±7.04试验组73.82±20.5631.69±23.22107.08±40.585.62±1.90b886.07±534.5111.65±2.18P值0.6540.6620.6340.0490.4640.1203讨论3.1不同锌源对断奶仔猪生长性能的影响本试验表明，不同锌源对断奶仔猪后期生长性能影响差异不显著。Nitrayova等[3]研究表明，有机锌具有更高的生物学效价，在母猪日粮中用蛋氨酸锌替代无机锌可显著提高母猪的平均日增重。王勤华等[4]研究表明，在仔猪基础日粮中添加80 mg/kg蛋氨酸锌螯合物有提升仔猪平均日增重的趋势。韦习会等[5]研究表明，高剂量的有机锌替代氧化锌可明显改善断奶仔猪生长性能。张纯[6]研究表明，有机锌替代无机锌可显著提高断奶仔猪平均日采食量和平均日增重，但料重比影响差异不显著。伍学荣[7]研究发现，在生长猪基础日粮中使用蛋氨酸锌替代添硫酸锌，可有效改善猪的生长性能。王钰鑫[8]研究发现，断奶仔猪日粮中使用常规量有机锌替代无机锌，对断奶仔猪生长性能无显著差异。本试验中，断奶仔猪日粮中添加高剂量的羟基蛋氨酸螯合锌，断奶仔猪的平均日增重和平均日采食量均有所提升，料重比呈降低趋势，但差异不显著。3.2不同锌源对断奶仔猪血清生化和抗氧化指标的影响IgG含量直接反映机体的免疫情况。SOD是体内重要的抗氧化酶，能够清除自由基带来的氧化应激反应，保护机体的正常生理平衡；MDA含量能够反映应机体氧化程度。吴玉臣等[9]研究表明，氨基酸螯合锌能够提高猪血清免疫球蛋白的含量，增强机体免疫力。吕航[10]研究发现，日粮中添加高剂量的锌源能够显著降低断奶仔猪14 d的血浆MDA含量，提高断奶仔猪14 d的T-SOD活性。薛梅等[11]研究发现，不同锌源和锌水平能够显著影响血清中白蛋白含量。本试验研究结果与前期研究结果相似，试验第14 d羟基蛋氨酸锌显著降低了断奶仔猪血清中ALP活性，并且降低ALT、ASP活性及MDA含量和升高血清中SOD活性的效果，但差异不显著。3.3不同锌源对断奶仔猪肠道屏障、免疫蛋白和炎性因子相关指标的影响Bülow等[12]、Haase等[13]研究发现，锌可通过激活或抑制核因子Raf-1、NF-κB，调节单核细胞的促炎细胞因子的分泌，可基于toll样受体，TLR-4进行信号传导和调控。申俊华[14]研究发现，日粮中添加一定剂量的锌源，有显著降低TNF-α、IL-6的趋势。Hu等[15]结果表明，断奶仔猪的基础日粮中添加异芒石-氧化锌复合物，可以改善早期断奶仔猪肠道屏障功能，调节促炎细胞因子和紧密连接蛋白的表达。本试验结果显示，断奶仔猪的基础日粮中，使用基蛋氨酸锌替代硫酸锌，血清中的IFN-γ、IL-1β和TNF-α呈现下降的趋势，但差异不显著。王惠云等[16]、王裴等[17]研究表明，仔猪断奶应激会损伤肠道黏膜屏障功能，对病原菌先天免疫应答。锌对动物生长发育、上皮完整性、抗氧化、免疫和繁殖等具有重要作用。断奶仔猪日粮中添加锌可以改善肠道屏障功能，降低仔猪腹泻率，缓解断奶应激带来的负面影响。然而锌的过量补充会对动物机体产生一定的毒性效应，损害机体的肠道屏障，通常测定DAO和D-乳酸表达肠道的通透性。研究发现，断奶仔猪的腹泻与血清DAO活性呈显著的相关性，血清DAO活性反映仔猪断奶后肠黏膜受损和修复情况[18-21]。肠道屏障功能受损，肠黏膜通透性异常升高时，肠道细菌产生的大量D-乳酸透过肠黏膜进入血液循环，检测肠道外周血水平可以反映肠黏膜损害程度和通透性变化。因此，基础日粮中添加高剂量的锌源，可显著降低血清DAO和D-乳酸，可有效保护肠道黏膜屏障功能。本试验研究结果显示，断奶仔猪的基础日粮中，使用羟基蛋氨酸锌替代硫酸锌，降低血清中D-乳酸和DAO的功效。4结论本研究中，断奶仔猪基础日粮中添加羟基蛋氨酸锌替代硫酸锌，可降低仔猪肠道炎症效果，显著改善仔猪皮毛亮度。