羔羊培育是养羊业规模化和集约化重要的养殖环节。适宜的早期断奶日龄利于羔羊生长发育，降低饲养成本，缩短育肥周期，能够改善母羊繁育性能，提高繁殖潜力[1-2]。羔羊早期断奶时间无明确概念，传统饲养条件下为90日龄断奶[3]。目前，对羔羊早期断奶技术已有研究，但因羔羊品种、个体差异、代乳品营养水平、饲养管理条件等存在差异，羔羊早期断奶日龄时间确定无统一标准，研究结果不一[4]。法国羔羊体重为初生重2倍时断奶，澳大利亚羔羊10周龄断奶，英国羔羊体重达11~12 kg时断奶[5]。Mao等[6]研究表明，与15日龄断奶的羔羊相比，30日龄断奶的羔羊瘤胃细菌群落随时间变化较大。Qian等[7]研究显示，断奶日龄和代乳品水平对营养物质表观消化率、瘤胃微生物区系的影响有限。槐山羊是我国优良地方山羊品种，集中分布于河南周口、洛阳和商丘等地区[8]。有关断奶日龄对该品种羔羊培育影响的研究尚未见报道。本试验研究早期断奶槐山羊羔羊饲喂代乳粉对羔羊生长性能、营养物质消化和血清生化指标的影响，为确定该品种最佳断奶日龄对羔羊后期培育以及断奶技术提供参考。1材料与方法1.1试验设计试验采取单因素设计，根据出生日龄和体重（2.60±0.12）kg相近原则，选取槐山羊羔羊60只，公、母各半，耳标编号，分成4组，每组15只羊，每组3个重复，每个重复每5只羊。对照组羔羊随母羊哺乳，且自由采食开食料和粗饲料，试验组（A15组、B30组和C45组）羔羊分别在15、30和45日龄断奶饲喂代乳品，且母仔分圈饲养。处理组羔羊均在16 d自由采食开食料和粗饲料。开食料购自北京大鹰美尔农牧科技有限公司，粗饲料主要为青贮玉米秸秆、干草。代乳品、母乳和开食料的营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.04.003.T001表1代乳品、母乳和开食料的营养水平（风干基础）项目代乳品母乳开食料总能/(MJ/kg)18.6525.8016.93干物质/%96.5494.3295.60粗蛋白/%23.6024.0718.96粗脂肪/%17.3143.525.24粗灰分/%7.673.588.85钙/%1.424.250.89磷/%0.570.710.461.2饲养管理试验羊分栏饲养，饲养管理按照羊场日常管理制度进行，每周消毒1~2次，配置充足水槽、食槽，自由采食、饮水。代乳品为液体饲料，由知渔（上海）生物科技有限公司生产，原料为乳清粉、膨化玉米、膨化大豆、维生素、矿物质和氨基酸等，冲泡比例1∶7，55 ℃左右开水冲泡，38 ℃饲喂。饲喂量按照羔羊体重的1.2%进行，每日7：00、12：00和17：00饲喂3次，每2周调整1次。试验组羔羊采取逐渐过渡断奶法，分别于断奶15、30和45 d前3 d，训练饲喂代乳品，开始减少哺乳次数，至相应的断奶日龄完全断奶改为饲喂代乳品，随后母仔分开饲养。开食料购自河南华康生物科技有限公司。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能对照组羔羊在15、30、45和60 d晨饲前空腹称重，试验组羔羊的体重均在断奶日龄和断奶后的第15 d晨饲前空腹称重。即A15组羔羊于15和30 d称重，B30组羔羊于30和45 d称重，C45组羔羊于45和60 d称重，计算各阶段体重变化。记录每日饲喂羔羊开食料的投料量和剩料量，计算断奶日龄至后15 d内各阶段的羔羊平均日增重和平均日干物质采食量。平均日干物质采食量=(投料量－剩料量)/试验天数(1)平均日增重=(末重－初重)/试验天数(2)1.3.2营养物质表观消化率断奶后第15 d，每个重复选取1只羔羊，参考文献[9]的方法采取全收粪法进行消化试验。对照组分别在15~30、31~45和46~60 d作为对照进行消化试验。消化试验期间，试验组羔羊饲喂代乳品次数不变，对照组羔羊饲喂次数与试验组相等，每次哺乳10~15 min，记录哺乳前后羔羊体重，计算哺乳量。每日记录羔羊采食量和排粪量。参照文献[10]的方法测定代乳品、母乳和粪样有机物（OM）、干物质（DM）、总能（GE）、粗脂肪（EE）、氮（N）、钙（Ca）和磷（P）的表观消化率。营养物质表观消化率=(饲喂养分的含量－粪中排出养分的含量)/饲喂养分的含量×100%(3)1.3.3血清生化指标称重前，每个重复选取1只羔羊颈静脉采血10 mL，静置析出血清，2 000 r/min离心10 min，－20 ℃保存。采用日立7600生化仪，以比浊法测定免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）和免疫球蛋白G（IgG）含量；双缩脲法测定总蛋白（TP）含量；溴甲酚法测定白蛋白（ALB）含量；采用ELISA试剂盒（上海劲马实验设备有限公司）测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。1.4数据统计与分析数据采用Excel 2010初步整理，SAS 9.2软件进行t检验。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1断奶日龄对槐山羊生长性能的影响（见表2、表3）由表2可知，与对照组相比，30 d时，A15组羔羊体重显著降低（P0.05）；60 d时，C45组羔羊的体重显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.04.003.T002表2断奶日龄对槐山羊羔羊体重的影响日龄/d对照组A15组B30组C45组154.65±0.494.35±0.68——305.57±0.97a4.87±0.73b5.34±1.09a—456.56±0.90—6.14±1.096.04±1.00608.68±1.20a——7.17±1.02b注：1.同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。2.“—”表示此数据未检测；下表同。由表3可知，与对照组相比，断奶日龄15 d内，A15组和C45组羔羊的平均日增重均显著降低（P0.05），B30组羔羊的日增重显著提高（P0.05）；A15组和B30组羔羊开食料干物质采食量均显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.04.003.T003表3断奶日龄对槐山羊羔羊日增重和干物质采食量的影响日龄/d平均日增重/[g/(只·d)]干物质采食量/[g/(只·d)]对照组A15组B30组C45组对照组A15组B30组C45组15~3060.22±35.26a52.00±30.48b——11.99±2.12b32.26±4.53a——31~4572.30±42.73b—80.00±10.82a—32.69±6.84b—51.61±11.26a—46~6092.50±40.31a——78.70±46.51b127.00±8.50——105.80±31.61注：同行同项目数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。2.2断奶日龄对槐山羊羔羊营养物质表观消化率的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，A15组羔羊的GE、EE、N、Ca和磷P的表观消化率显著降低（P0.05），B30组和C45羔羊的DM、OM、GE、EE、N、Ca和P的表观消化率显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.04.003.T004表4断奶日龄对槐山羊羔羊营养物质表观消化率的影响日龄组别OMDMGEEENCaP15~30 d对照组98.10±1.6097.71±1.9398.44±1.32a99.51±0.43a95.52±3.87a97.82±1.15a96.95±2.55aA15组96.57±2.3395.55±2.6594.75±1.84b96.46±0.97b92.66±1.73b85.16±3.57b92.07±1.45b31~45 d对照组96.55±3.15a95.85±3.70a98.07±1.56a99.02±0.67a95.63±3.46a96.87±1.66a97.19±2.26aB30组94.77±2.92b93.22±3.43b94.24±0.96b94.06±2.51b88.52±4.35b80.13±1.49b90.49±1.18b46~60 d对照组93.14±2.06a91.88±2.45a94.69±1.43a98.78±0.22a92.97±2.47a96.13±1.05a93.91±0.34bC45组85.59±5.48b85.22±4.41b85.12±4.36b90.97±2.48b84.61±3.42b65.00±4.24b87.56±2.76a注：同列同项目数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表5与此同。%2.3断奶日龄对槐山羊羔羊对部分血清生化指标的影响（见表5）10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.04.003.T006项目组别15 d30 d45 d60 dTP/(g/L)A15组50.43±2.2550.62±1.52b——B30组—53.19±3.66a46.53±4.57—C45组——44.38±1.0744.78±3.25b对照组51.33±2.2355.45±3.02a43.18±3.3252.23±0.54aALB/(g/L)A15组32.81±1.3226.53±1.30b——B30组—29.56±1.70a32.07±2.06—C45组——29.60±1.8721.37±4.25b对照组32.04±0.8631.72±1.66a29.18±4.0231.16±1.83aIgA/(g/L)A15组1.25±0.121.32±0.44——B30组—1.37±0.821.57±0.35—C45组——1.42±0.221.57±0.36对照组1.21±0.101.30±0.291.41±0.341.53±0.40IgG/(g/L)A15组20.15±1.8421.30±2.47a——B30组—20.61±1.13b23.54±2.19a—C45组——21.75±2.58b23.15±3.46对照组19.69±4.7920.91±4.89b21.60±3.49b23.01±3.81IgM/(g/L)A15组1.12±0.181.28±0.12——B30组—1.25±0.081.42±0.73—C45组——1.34±0.291.74±0.18对照组1.16±0.101.21±0.171.32±0.131.35±0.09TNF-α/(ng/L)A15组0.97±0.191.37±0.18a——B30组—1.01±0.16b1.12±0.14—C45组——1.13±0.221.21±0.23对照组1.16±0.180.80±0.18b1.03±0.301.15±0.21由表5可知，与对照组相比，断奶后15 d时，A15组和C45组羔羊血清中的TP和ALB含量显著降低（P0.05）。A15和B30组羔羊断奶15 d时血清中的IgG含量显著升高（P0.05），A15组羔羊血清中的TNF-α含量显著升高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.04.003.T005表5断奶日龄对槐山羊羔羊对部分血清生化指标的影响项目组别15 d30 d45 d60 dTP/(g/L)A15组50.43±2.2550.62±1.52b——B30组—53.19±3.66a46.53±4.57—C45组——44.38±1.0744.78±3.25b对照组51.33±2.2355.45±3.02a43.18±3.3252.23±0.54aALB/(g/L)A15组32.81±1.3226.53±1.30b——B30组—29.56±1.70a32.07±2.06—C45组——29.60±1.8721.37±4.25b对照组32.04±0.8631.72±1.66a29.18±4.0231.16±1.83a续表5　断奶日龄对槐山羊羔羊对部分血清生化指标的影响3讨论3.1断奶日龄对槐山羊羔羊生长性能的影响早期断奶后，饲料适口性、营养成分、饲喂方式和母仔分圈等一系列变化均会引起羔羊应激反应，直接影响羔羊的生长发育。王桂秋等[11]研究表明，7、17和27 d早期断乳羔羊的生长性能与对照组无显著差异，但数值均低于对照组。Knight等[12]研究表明，羔羊早期断奶后的体重和平均日增重均低于哺乳羔羊。李佩健[13]研究表明，15和30 d断奶羔羊15 d时体重和平均日增重均低于哺乳羔羊。本试验结果与上述研究结果相似，羔羊在15、30和45 d断奶后15 d内的体重相对于对照组较低，15和45 d断奶后体重显著低于对照组羔羊。B30组羔羊断奶应激对羔羊生长性能产生的影响相对较小，干物质采食量显著高于对照组，体重和日增重虽低于对照组，但差异不显著，可能是因为30 d的羔羊消化道机能逐步完善，瘤胃发育日渐成熟，额外16日龄补饲开食料，刺激了瘤胃发育，代乳品摄入的营养物质能够满足生长需求。B30组羔羊后期的体重、平均日增重低于对照组，影响不显著；采食量差异显著高于对照组，说明30 d断奶对羔羊生长性能的影响最小。因此，早期断奶后15 d内羔羊的体重、日增重呈下降趋势，开食料的采食量呈增加趋势。3.2断奶日龄对槐山羊羔羊营养物质表观消化率的影响羔羊消化道发育程度随日龄增长而不同，羔羊出生至3周龄为无反刍阶段，4~8周龄为过渡阶段[14]。营养物质的来源和浓度是影响动物体内营养物质消化与代谢的主要因素之一[15]。Montagne等[16]研究表明，给犊牛饲喂植物性蛋白质，营养物质表观率降低。本试验中，因代乳品含有植物性蛋白大豆蛋白粉，所以试验组断奶羔羊的营养物质表观消化率均低于对照组，与上述研究相一致。可能是由于早期断奶阶段羔羊消化道功能不完善，各种消化酶分泌不足，且活性低，尤其是瘤胃发育还未达到成年羊的水平，断奶应激造成羔羊消化功能紊乱，进而降低营养物质的表观消化率[17]。依据15~30、30~45和45~60 d的营养物质消化率变化趋势，随断奶日龄的增大，羔羊营养物质消化率逐步降低，说明断奶日龄越早对营养物质表观消化率影响相对小，早期断奶能够显著影响营养物质表观消化率。3.3断奶日龄对槐山羊羔羊血清生化指标的影响TP含量高有利于提高血液代谢水平和机体免疫力，利于动物生长[18]。ALB含量低表明动物蛋白质摄入量不足或代谢出现障碍[19]。本试验A15和C45两组羔羊在断奶15 d时，TP和ALB均低于对照组，说明两组羔羊相对于对照组羔羊的蛋白质吸收利用率不高。B30组羔羊在断奶时胃肠道消化机能够经适应代乳粉，血清蛋白含量比较稳定，TB和ALB含量均显著高于对照组。免疫球蛋白IgA和IgG具有抑菌、抗病毒等免疫活性，IgM具有激活补体等功能[20]。本试验中，试验组羔羊的免疫球蛋白均高于对照组，说明早期断奶有利于羔羊提高免疫功能。TNF-α在炎症反应、细胞免疫和肿瘤免疫等病理和生理中具有关键作用[21]。断奶后羔羊自身的细胞免疫能力和主动免疫抗体水平都较低，易引起“免疫应激”，影响营养物质消化率，导致血清中的TNF-α含量短暂性升高[22]。本试验试验羔羊在断奶15 d时的TNF-α均高于对照组。A15组羔羊在断奶后15 d时TNF-α含量显著高于对照组，说明早期断奶产生的“免疫应激”反应在15 d内还未完全消失。4结论早期断奶应激对槐山羊的生长性能和营养物质表观消化率产生不同程度的影响。本试验条件下，30 d断奶能够缓解断奶应激，促进开食料采食量、体重、日增重，与哺乳羔羊基本一致。建议30 d断奶作为槐山羊早期断奶日龄。