肉鸡饲料中添加抗生素可促进肉鸡的快速增长,预防病害,但过量使用抗生素易导致肉、蛋、奶中抗生素残留超标,细菌的耐药性增强,危害消费者健康[1]。目前国家已发布禁抗条例,因此需要研究较为安全、可靠、高效的抗生素添加剂替代品在肉鸡的饲养中应用。中草药具有来源广泛、食药同源、多靶向与多功能的显著优点[2]。在疾病治疗领域,中草药提取物具有疗效显著、方便给药、高利用率和安全绿色等特点,是抗生素替代产品之一。中草药刺五加含有皂苷、黄酮、多糖、微量元素和氨基酸等有效成分,具有性温、味辛和无毒的特性,可入脾肾经,有祛风除湿、舒筋活血、益气健脾和补肾安神等作用[3]。刺五加多糖(ASP)是从中草药刺五加的根和茎中提取的一种中草药多糖[4],具有促进生长、增强免疫力和抗氧化能力等功效[5],能够调节动物肠道微生态平衡,可作为抗生素的替代品。本试验研究ASP对肉鸡生长性能、免疫功能和抗氧化能力的影响,为ASP在肉鸡饲养中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料采用热水浸提工艺提取ASP,提取条件为液料比25 L/mg、提取温度90 ℃、提取时间2.5 h、提取3次[6],ASP的产率为23.95 mg/g。1.2试验设计选取240只1日龄体质健康的爱拔益加肉鸡(AA),随机分为4组,每组6个重复,每个重复10只鸡。对照组肉鸡饲喂基础日粮,ASP低量组肉鸡饲喂基础日粮+500 mg/kg ASP,ASP中量组肉鸡饲喂基础日粮+1 000 mg/kg ASP,ASP高量组肉鸡饲喂基础日粮+2 000 mg/kg ASP。试验期42 d。1.3试验日粮试验日粮参照鸡饲养标准(NY/T 33—2004)制定基础日粮配方,基础日粮以玉米和豆粕为主原料,经加工制作成颗粒饲料。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.04.012.T001表1基础日粮组成及营养水平(风干基础)项目1~21 d22~42 d原料组成/%玉米57.0062.00次粉2.304.00玉米蛋白粉2.001.80豆粕28.0023.00膨化豆粕3.002.20进口鱼粉3.002.50磷酸氢钙1.651.45重质碳酸钙1.401.30食盐0.300.30L-赖氨酸0.200.25蛋氨酸0.150.20预混料1.001.00合计100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)12.5612.78粗蛋白/%21.6019.35钙/%1.090.97总磷/%0.750.65有效磷/%0.520.44赖氨酸/%1.081.04蛋氨酸/%0.650.56注:1.预混料为每千克日粮提供:铁100 mg、铜5.5 mg、锌90 mg、锰70 mg、硒0.30 mg、碘0.45 mg、VA 4 600 IU、VD3 1 200 IU、VE 40 IU、VK3 2.7 mg、VB1 8.5 mg、VB2 30 mg、VB6 17 mg、VB12 0.1 mg、叶酸5.0 mg、泛酸40 mg、烟酸55 mg、生物素0.28 mg。2.营养水平中粗蛋白为实测值,其余均为计算值。1.4饲养管理试验前7 d对养殖用具和养殖圈舍进行清扫消毒,试验肉鸡采用双层封闭鸡舍笼养,上、下交错布局。饲养分为2个阶段,1阶段为第1 w至第3 w,2阶段为第4 w至第6 w。1阶段肉鸡按每笼饲养10只,2阶段肉鸡按每笼饲养5只分笼。试验开始第1 w,鸡舍温度从35 ℃逐渐降至33 ℃,此后每周下降3 ℃左右,当鸡舍温度降温至21 ℃后保持稳定直至试验结束。试验肉鸡饲养采用定时上料,自由采食和饮水,昼夜不间断光照,鸡舍条件符合肉鸡饲养管理标准,肉鸡免疫接种和鸡舍消毒按照常规程序开展。1.5测定指标及方法1.5.1生长性能指标试验开始第1 d和试验结束第2 d,7:00以每个重复组为单位对肉鸡进行空腹称重,记录肉鸡每日采食量,计算每组的平均日采食量、平均日增重和料重比。平均日增重=(末重-初重)/(试验天数×试验鸡只数)(1)平均日采食量=(上料量-剩料量)/(试验天数×试验鸡只数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.5.2血液采集与处理试验结束,每个重复随机抽取2只健康肉鸡,翅静脉采血10 mL,室温条件下静置3 h,3 000 r/min离心15 min,上清液-20 ℃保存。1.5.3免疫功能指标采用酶联免疫吸附试验法测定血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM),所用试剂盒购自南京建成生物工程研究所,测定操作严格按照试剂盒操作说明进行。1.5.4血清抗氧化指标血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量,均采用酶联免疫吸附法测定,所用试剂盒购自南京建成生物工程研究所,测定操作严格按照试剂盒操作说明进行。1.6数据统计与分析试验数据采用SPSS 20.0软件进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1ASP对肉鸡生长性能的影响(见表2)由表2可知,与对照组相比,ASP低量组、ASP中量组和ASP高量组肉鸡末重均有所增加,但差异不显著(P0.05),其中以ASP中量组肉鸡的末重最高;ASP中量组和ASP高量组肉鸡的平均日增重均显著提高,分别为7.94%、5.85%(P0.05),ASP中量组肉鸡的料重比显著降低了5.82%(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.04.012.T002表2ASP对肉鸡生长性能的影响组别初重/g末重/g平均日采食量/[g/(只·d)]平均日增重/[g/(只·d)]料重比对照组41.21±1.492 151.07±79.3695.01±5.1150.23±2.11b1.89±0.23aASP低量组40.93±1.622 232.13±110.2496.65±5.0752.17±1.76ab1.85±0.16abASP中量组41.30±1.392 318.40±86.6396.79±5.5254.22±1.56a1.78±0.22bASP高量组41.11±1.722 274.35±90.2596.46±5.8153.17±1.52a1.81±0.20ab注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2ASP对肉鸡血清免疫功能的影响(见表3)由表3可知,与对照组相比,ASP低量组、ASP中量组、ASP高量组肉鸡血清IgA含量均有所提高,分别提高了7.45%、11.18%和9.94%(P0.05);ASP低量组、ASP中量组、ASP高量组肉鸡血清IgM含量比对照组分别提高了3.36%、5.37%、6.04%(P0.05);ASP中量组、ASP高量组肉鸡血清IgG含量分别比对照组显著提高了9.52%、8.20%(P0.05),ASP低量组提高了6.08%(P0.05)。研究表明,ASP能够提高肉鸡血清IgA、IgM和IgG含量,提高肉鸡的免疫功能。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.04.012.T003表3ASP对肉鸡血清免疫功能的影响组别IgAIgMIgG对照组1.61±0.071.49±0.063.78±0.10bASP低量组1.73±0.061.54±0.084.01±0.12abASP中量组1.79±0.041.57±0.054.14±0.15aASP高量组1.77±0.061.58±0.074.09±0.17ag/L2.3ASP对肉鸡血清抗氧化能力的影响(见表4)由表4可知,与对照组相比,ASP中量组和ASP高量组肉鸡血清SOD活性分别显著提高了50.93%和43.67%(P0.05),ASP低量组血清SOD活性提高了14.71%(P0.05);ASP低量组、ASP中量组和ASP高量组肉鸡血清GSH-Px活性分别显著提高了30.05%、41.96%和56.51%(P0.05);ASP低量组、ASP中量组和ASP高量组肉鸡血清MDA含量分别显著降低了27.00%、42.97%和40.77%(P0.05);ASP低量组、ASP中量组和ASP高量组血清T-AOC分别显著提高10.18%、20.64%和14.45%(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.04.012.T004表4ASP对肉鸡血清抗氧化能力的影响组别SOD/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)T-AOC/(U/mL)对照组136.49±20.03b632.55±24.35b3.63±0.16a17.78±2.23bASP低量组156.575±23.23ab816.81±25.84a2.65±0.17b19.59±2.36aASP中量组206.01±18.09a880.74±26.85a2.07±0.13b21.45±2.16aASP高量组196.09±24.55a864.46±23.26a2.15±0.15b20.35±2.26a3讨论3.1ASP对肉鸡生长性能的影响研究表明,一些植物多糖类活性物质能够提高畜禽的生长性能[7]。杨海峰等[8]研究表明,ASP能够提高断奶仔猪的生长性能。ASP具有抗菌作用,饲料中添加ASP具有抗菌消炎防病、保肝护肝的作用,可增强畜禽体质[9]。ASP能够促进胆汁分泌,还可以促进营养物质尤其是脂肪类物质的消化吸收,利于畜禽健康生长[10]。研究表明,添加ASP能够提高肉鸡的生长性能,降低料重比[11]。本试验中,添加ASP可以不同程度提高肉鸡的生长性能,与对照组相比,ASP中量组和ASP高量组的平均日增重分别提高7.94%和5.85%,料重比有显著降低的趋势,因此刺五加多糖能够提高肉鸡生长性能。3.2ASP对肉鸡免疫功能的影响体液免疫应答能够阻止细菌和其他抗原类物质对机体的损害。体液免疫应答可产生抗体,主要抗体包括IgA、IgG和IgM。IgA是机体黏膜局部抗感染免疫的主要抗体,在机体黏膜防御体系中具有重要作用[12]。IgG在免疫应答中起激活补体、中和多种毒素的作用,在血清免疫球蛋白中含量最高;IgM具有强大的杀菌、激活补体、免疫调理和凝集作用,是机体产生较早的一种的抗体,在早期机体免疫中具有重要作用。因此,可通过测定血清免疫球蛋白IgA、IgG和IgM含量判断机体的体液免疫能力;在一定的范围内,血清的免疫球蛋白含量水平越高,则机体的体液免疫能力越强[13]。刺五加作为中药材具有祛风除湿、舒筋活血、益气健脾、补肾安神之功效,ASP具有增强机体抵抗力、抗疲劳和抗氧化等功能[14]。本试验中,ASP低量组、ASP中量组和ASP高量组含量组肉鸡血清IgA水平比对照组分别提高7.45%、11.18%和9.94%,ASP低量组、ASP中量组和ASP高量组肉鸡血清IgG含量比对照组分别提高6.08%、9.52%、8.20%。因此,ASP能够提高肉鸡的免疫功能,与闫雪等[15]报道刺五加多糖能够提高雏鸡的体液免疫功能的结果类似。3.3ASP对肉鸡抗氧化能力的影响SOD是生物体内存在的一种抗氧化金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能够催化超氧阴离子自由基歧化,生成氧和过氧化氢,在生物体氧化与抗氧化的平衡中起关键作用[16]。GSH-Px是生物体内存在的一种重要的分解过氧化物的酶,是一种功能很强的还原酶,能够清除生物体内自由基和防止脂质过氧化,对新血管的内皮细胞功能和脑血管的神经递质功能具有促进其愈合和修复其损伤的功效,对保护心脑血管健康具有较好作用[17]。谷胱甘肽过氧化物酶能够抗肝脏生成过量氧自由基,具有一定的解毒和保护肝脏的作用[18]。生物体内自由基作用于脂质发生过氧化反应,氧化终产物为MDA。MDA会引起蛋白质、核酸等生命大分子的交联聚合,具有细胞毒性,能够加剧膜的损伤。因此,MDA含量是反映机体抗氧化潜在能力的重要参数,可反映生物体脂质过氧化的程度,也能间接反映组织过氧化损伤程度[19]。血清T-AOC反映生物体产生自由基与清除自由基的动态平衡情况,代表生物体的整体抗氧化能力[19],也是综合评定机体中和自由基等易氧因子的整体能力的指标[20]。本试验中,添加ASP能够提高肉鸡血清SOD、GSH-Px的活性和T-AOC,降低肉鸡血清MDA的含量,提高肉鸡的抗氧化能力。4结论添加适量的ASP能够提高肉鸡的生长性能、免疫功能和抗氧化能力,肉鸡饲料中饲喂建议添加量为1 000 mg/kg。
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