构树(Broussonetia papyrifera)中含有大量蛋白质、维生素、矿物质以及微量元素,营养价值高,粗纤维和木质化程度低,饲喂效果好,是一种优质的木本饲料。目前,将构树作为非常规蛋白饲料使用能够在一定程度上缓解蛋白质原料缺乏的问题[1-3]。但构树直接饲喂适口性差、消化率不高。研究发现,通过青贮处理后木质素和植物纤维显著软化,适口性提高,抗营养因子减少,消化利用率升高,能够有效改善饲喂效果。构树含水量高、糖含量低等因素能够影响青贮品质,需要使用青贮添加剂进行改善[4-7]。王洋等[8]研究发现,全株构树同时添加糖蜜、植物乳杆菌、产朊假丝酵母菌和纤维素酶时青贮品质最佳。姜富贵等[9]研究发现,杂交构树青贮中添加糖蜜能够不同程度提升其营养价值和发酵品质。甲酸是常见的发酵抑制性青贮添加剂,可以抑制青贮发酵过程中有害菌及好氧性微生物的活性,促进有益微生物发酵,有效减少营养物质的损失,提高青贮饲料的营养和青贮品质[10-14]。目前,甲酸在构树青贮中的研究较少,对甲酸青贮发酵品质和营养成分的影响及适宜添加比例尚不明确。本研究以构树为研究对象,探究不同比例甲酸对构树青贮发酵品质及营养成分的影响,为调制优质构树青贮饲料提供参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1材料与试剂杂交构树由中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所十队实验基地提供;甲酸购自国药集团化学试剂有限公司,均分析纯试剂。1.1.2仪器设备高效液相色谱仪(岛津企业管理有限公司)、雷磁精密pH计(上海仪电科学仪器股份有限公司)、抽真空包装机(潍坊和盛精工机械有限公司)、电子天平(上海平轩科学仪器有限公司)。1.2试验方法1.2.1试验设计设4个处理组,对照组(CK组)不加入添加剂,直接青贮;各试验组分别添加0.5、1.0、2.0、4.0 mL/100 g的甲酸(即FA1组、FA2组、FA3组、FA4组),每组3个重复。1.2.2青贮调剂收获构树幼嫩茎叶,剪短至2 cm。称取约200 g,按照各组的添加量加入相应甲酸混匀,使用抽真空包装机密封,青贮袋置于室温(约25 ℃),贮存30 d。1.2.3营养成分测定构树幼嫩茎叶青贮前后均取样,65 ℃烘干48 h,粉碎,密封袋保存,参照张丽英[15]方法测定干物质(DM)、粗蛋白(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)含量。计算饲料相对饲喂价值(RFV)[16]。干物质采食量(DMI)=120/NDF(1)可消化干物质(DDM)=88.9-0.779ADF(2)RFV=DMI×DDM/1.29(3)1.2.4青贮品质测定青贮30 d,开袋取20 g样品,加入80 ml去离子水,4 ℃冰箱中浸提24 h,双层定性滤纸及四层纱布过滤,静置0.5 h。雷磁pH计测定pH值;LC-2010HT高效液相色谱仪测定乳酸、乙酸、丙酸、丁酸含量,分析条件参考文献[17],青贮饲料Flieg氏评分参考刘丹丹[18]的方法。1.3数据统计与分析数据采用Excel 2010进行整理,SAS 9.0软件进行分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1甲酸对构树青贮饲料营养成分的影响(见表1)由表1可知,与CK组相比,FA2组构树青贮饲料的DM含量显著降低;FA2组、FA3组和FA4组构树青贮饲料的CP含量均显著降低(P0.05);FA1组、FA2组、FA3组和FA4组构树青贮饲料的ADF和NDF含量均显著降低(P0.05);FA1组、FA2组、FA3组和FA4组构树青贮饲料RFV值均显著提高(P0.05);FA1组、FA2组、FA3组和FA4组构树青贮饲料OM含量均显著提高(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.04.023.T001表1甲酸对构树青贮饲料营养成分的影响(风干基础)组别DM/%CP/%ADF/%NDF/%RFVOM/%CK组40.36±3.42a15.22±1.89a39.24±3.63a42.34±3.11a128.16±5.87d84.00±5.57cFA1组39.62±2.89a15.16±1.32a34.15±2.24c38.26±3.11c151.47±4.43b89.34±4.61aFA2组37.11±2.25b14.59±0.86b35.89±2.09b40.30±4.21b140.68±6.02c87.60±3.48bFA3组38.96±4.23ab14.25±0.95b31.35±2.17d35.72±2.81d167.91±4.70a91.13±5.73aFA4组40.74±3.51a14.60±1.11b36.47±1.44b37.05±1.69c151.86±3.25b87.01±7.06b注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2甲酸对构树青贮饲料青贮品质的影响(见表2)由表2可知,与CK组相比,添加甲酸后,各组饲料的pH值显著降低;FA1组乳酸含量最高,FA4组乳酸含量最低(P0.05)。FA3组和FA4组甲酸青贮饲料的乙酸含量均显著低于CK组(P0.05)。各组甲酸青贮饲料丙酸含量均显著低于CK组(P0.05)。FA1组总酸含量显著高于其他处理(P0.05)。因此,添加甲酸能够提高乳酸含量,降低饲料pH值、乙酸含量、丙酸含量,但过量添加甲酸则降低青贮品质。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.04.023.T002表2甲酸对构树青贮饲料青贮品质的影响(风干基础)组别pH值乳酸/%乙酸/%丙酸/%丁酸/%总酸/%CK组5.10±0.23a1.32±0.11c3.59±0.27a3.49±0.33a0.008.40±0.55bFA1组4.41±0.18b6.94±0.42a3.54±0.16a0.40±0.03b0.0110.89±0.61aFA2组3.58±0.35c3.75±0.30b1.38±0.09b0.20±0.04c0.005.33±0.44cFA3组2.82±0.14d1.87±0.21c0.78±0.05c0.09±0.01d0.012.75±0.15dFA4组2.29±0.07e0.70±0.05d0.65±0.07c0.08±0.02d0.001.43±0.12e2.3甲酸对构树青贮饲料Flieg氏评分的影响(见表3)由表3可知,CK组Flieg氏青贮总评分为63分,等级为“良”,得分较低,青贮品质较差。FA4组青贮总评分略高于CK组,等级为“良”,青贮品质一般。FA1组、FA2组和FA3组青贮总分较高,等级均为“优”。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.04.023.T003表3甲酸对构树青贮饲料Flieg氏评分的影响组别乳酸乙酸丁酸总分等级CK组0.0013.005063.00良FA1组22.0018.005090.00优FA2组25.0022.005097.00优FA3组25.0020.005095.00优FA4组15.0012.005077.00良因此,添加甲酸能够提高构树的青贮品质,FA1组的青贮效果较好。3讨论3.1甲酸对构树青贮饲料营养成分的影响青贮时添加甲酸可加速青贮饲料酸化,抑制腐败微生物的活性;还具有降低代谢能、抑制青贮饲料原料的呼吸、减少蛋白酶和有害菌对青贮料中蛋白质的分解作用,有效降低营养物质在青贮发酵过程中的损耗,提升青贮饲料品质。李平等[19]在老芒麦青贮中添加甲酸,结果发现,甲酸处理组的DM含量高于对照组,CP含量低于对照组。刘庭玉等[20]研究表明,甲酸处理会提高天然草地牧草的DM、CP含量。本试验中,添加甲酸各组的CP含量均低于对照组,低剂量添加甲酸组的DM含量也低于对照组。原因是低添加量的能够甲酸促进有害微生物的生长,使微生物环境对蛋白质的分解速率加快,且甲酸自身对青贮饲料有酸解作用,造成干物质的损失[21]。NDF和ADF与青贮饲料采食量和消化率有关。李平等[19]研究发现,添加甲酸对老麦芒的ADF、NDF含量无显著影响。本试验中,添加甲酸的各组ADF和NDF含量均显著低于对照组,OM含量和RFV值显著提高,提高了青贮饲料营养价值,与薛春胜等[21]、张亚格等[17]研究结果一致。3.2甲酸对构树青贮饲料青贮品质的影响青贮饲料的pH值和有机酸含量可以评价青贮发酵品质,添加甲酸能够抑制酵母菌、霉菌等好氧菌的活性,为厌氧条件发酵提供足够的发酵底物,促进乳酸菌发酵,降低青贮饲料的pH值,提高青贮发酵成功率。李茂等[22]、薛艳林等[23]和候美玲等[24]研究表明,甲酸能够降低青贮饲料的pH值。侯鑫狄等[25]和刘庭玉等[20]在典型草原牧草青贮和天然草地牧草青贮中添加不同比例的甲酸,结果发现,添加甲酸比例越高pH值越低。本试验中,添加甲酸各组的pH值均显著低于对照组,随添加量的增加pH值降低,与上述研究结果一致。受试验原料和条件的影响,添加甲酸对青贮饲料有机酸含量的影响不同。本试验FA1组、FA2组及FA3组乳酸含量高于对照组,仅FA4组乳酸含量显著低于对照组,乳酸含量随甲酸添加量的增加而降低,因为高添加量甲酸可抑制乳酸菌的活性。薛春胜等[21]研究发现,陇东紫花苜蓿青贮中添加甲酸会降低乙酸含量。王莹等[26]研究发现,甲酸作为青贮添加剂可降低乙酸产量。本试验添加甲酸各组的丙酸含量显著低于对照组,丁酸含量几乎为0,与张亚格等[17]、侯美玲等[24]、侯鑫狄等[25]研究结果一致,说明甲酸可有效抑制构树青贮饲料中不良微生物的活动,起防腐作用[27]。本研究表明,添加低浓度的甲酸可降低pH值,提高乳酸含量,降低乙酸、丙酸含量,对丁酸含量无明显影响,能够改善构树青贮品质。4结论综合考虑青贮发酵品质和营养成分,构树添加甲酸青贮是一种有效的青贮方式。本试验条件下,构树青贮中添加最低浓度为0.5 mL/100 g甲酸可达到较好的效果。
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