母猪妊娠中后期羊水不足会影响胎儿肺和肠道的健康，延长母猪产程，增加死胎、弱仔和哺乳仔猪死亡的概率，导致每头母猪每年提供的合格断奶仔猪数量（PSY）减少。提高妊娠后期母猪羊水量对解决母猪PSY具有实际意义。羊水来源于母体、胎儿和胎盘组织间的物质循环[1]，由胎盘渗透液、胎儿肺泡液和胎儿尿液组成[2-3]。羊水具有保护胎儿、为胎儿健康发育提供营养和缩短产程功能[4]。妊娠中晚期，羊水量取决于胎儿的尿液生成量和肺泡液分泌量[5]。调查显示，当前猪场普遍存在母猪羊水不足现象，原因在于妊娠母猪便秘产生的毒素和饲料霉菌毒素会不同程度地损伤胎儿肺和泌尿系统[6-7]。中药含有生物碱、多糖、挥发油、萜类、多酚、黄酮和萜类等化学物质[8-12]，此类化学物质具有消炎、抗氧化、扩张血管、增加膜通透性和利尿作用[13-14]，经发酵处理能够提高适口性和药效。本试验旨在研究妊娠后期母猪补饲发酵复方中药饲料添加剂是否具有提高母猪羊水量和繁殖性能的效果，为发酵复方中药饲料添加剂在妊娠后期母猪生产中的合理应用提供参考。1材料与方法1.1发酵复方中药饲料添加剂的制备发酵复方中药饲料添加剂由鱼腥草等中药、白糖、小麦、豆粕、黑曲霉和酵母组成。中药原料、小麦和豆粕采用孔径80目的粉碎机粉碎，搅拌均匀，按复方中药饲料添加剂组方与自来水的质量比为1∶1计算，加热至40 ℃，白糖、黑曲霉和酵母菌放入热水中，搅拌放置30 min，形成发酵液；加到复方中药混合物，拌匀装入塑料袋，于33 ℃烘箱发酵36 h，取出分装真空袋内真空密封，室温下放置15 d。1.2发酵复方中药饲料添加剂中活性成分检测采用超高效液相色谱串联四极杆轨道离子阱质谱系统（UHPLC-QE-MS）进行中药非靶标代谢组检测。1.2.1主要仪器设备1290-超高效液相色谱系统（美国安捷伦）、Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（1.7 μm，2.1 mm×100 mm）、Q Exactive Focus四极杆串联轨道离子阱高分辨质谱系统（美国Thermo Fisher Scientific)。1.2.2色谱条件流动相：水（0.1%甲酸）和乙腈（0.1%甲酸）；柱温箱温度：55 ℃；流速：0.5 mL/min；进样量：5 μL。梯度洗脱程序：0~11 min，85%~25%水溶液；11~12 min，25%~2%水溶液；12~14 min，2%~2%水溶液；14.0~14.1 min，2%~85%水溶液；14.1~15.0 min，85%~85%水溶液；15~16 min，85%~85%水溶液。1.2.3质谱条件离子源：电喷雾电离源；正负离子交替扫描；扫描模式为：Full scan/ddMS2；质量扫描范围：m/z 50~1 000 Da；毛细管温度：400 ℃；喷雾电压：正离子模式4 000 V，负离子模式3 600 V；气体流速：鞘气35 Arb，辅助气10 Arb；采用低中高3种碰撞能量对母离子进行二级碎裂：15、30和45 V；质谱分辨率：一级质谱70 000 FWHM ，二级质谱（MS/MS）17 500 FWHM。1.2.4测定指标及方法利用XCMS软件对LC-QE生成的数据进行组分提取，获得包括保留时间、质荷比与峰面积的二维数据阵；数据导入SIMCA-P软件（Version16.0.2，Sartorius Stedim Data Analytics AB，Umea，Sweden），进行数据处理，建立模式识别，获得变量；通过METLIN，HMDB，PUBCHEM，Chemspider和KEGG COMPOUND数据库进行谱库匹配，选择MS2 score0.95的二级物质作为发酵复方中药饲料添加剂中的主要活性物质。1.3试验设计与饲养管理将20头胎龄和与配公猪相同、体况相近的“长×大”妊娠母猪随机分成2组，每组10个重复，每个重复1头猪。试验组与对照组母猪饲喂参照NRC猪营养需要配制的同一全价配合饲粮。基础饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.005.T001表1基础饲粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米60.00代谢能/(MJ/kg)11.91麦麸15.00粗蛋白质17.35豆粕15.00粗脂肪4.73菜粕4.00粗纤维4.12进口鱼粉2.00钙0.83预混料4.00总磷0.65赖氨酸0.94蛋氨酸+半胱氨酸0.72苏氨酸0.53注：1.每千克预混料为饲粮提供：VA 421 000 IU、VD 61 000 IU、VE 940 IU、VK3 125 mg、VB1 65 mg、VB2 230 mg、VB6 75 mg、VB12 1.0 mg、烟酸1 100 mg、泛酸680 mg、叶酸45 mg、胆碱12 g、铁1.5 g、铜0.8 g、锌1.6 g、锰85 g、碘8 mg、钴30 mg、硒7 mg、钙185 mg、磷18 mg、氯化钠100 000 mg。2.营养水平中代谢能和氨基酸为计算值，其他均为实测值。试验从母猪妊娠104 d开始至哺乳仔猪25日龄断奶结束。试验期间，试验组母猪每头每天补饲50 g发酵复方中药饲料添加剂。试验组和对照组母猪按猪场正常程序进行管理。哺乳仔猪于10日龄开始补饲某品牌的哺乳仔猪全价配合饲粮。1.4样品采集及数据记录母猪分娩时将尿垫铺在母猪后半身下面，用于收集分娩过程中排出的羊水，待所有仔猪产出后将尿垫取出并称重，前后重量之差为母猪排出的羊水重量。记录母猪的产程、窝产活仔数、仔猪初生窝重、仔猪腹泻头数、窝断奶仔猪数和断奶窝重。哺乳仔猪腹泻率=∑[(仔猪腹泻天数×腹泻仔猪头数)/(试验仔猪总头数×正试期天数)]×100%[15] （1）哺乳仔猪成活率=(断奶仔猪数/活产仔猪数)×100%（2）1.5数据统计与分析数据采用Excel 2003处理，SPSS 17.0软件进行t检验，结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1发酵复方中药饲料添加剂的主要活性成分（见表2）由表2可知，通过非靶标代谢组技术检测到47种二级质谱评分大于0.95的化学物质，包括25种负离子模式化学物质和22种正离子模式化学物质。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.005.T002表2发酵复方中药饲料添加剂的主要活性成分二级质谱物质名称二级质谱物质类别二级质谱匹配分二级质谱物质的相对定量负离子模式焦性没食子酸酚类1.000 00.000 2±0.000 07-羟基香豆素香豆素及其衍生物类0.999 80.000 2±0.000 0山柰酚黄酮类0.999 10.000 1±0.000 0鸢尾黄酮乙素B黄酮类0.996 90.000 5±0.000 1三七素生物碱0.993 60.000 8±0.000 3大豆苷元黄酮类0.993 50.001 1±0.000 1棕榈酸甲酯脂肪酰类0.991 90.000 1±0.000 0对羟基安息香醛酚类0.987 50.000 1±0.000 0没食子酸乙酯酚类0.986 90.015 5±0.002 9甘油酸糖类及其衍生物0.986 10.000 2±0.000 0二羟基苯甲酸酯糖类多酮类0.986 00.000 5±0.000 2没食子酸丙酯酚类0.984 90.000 1±0.000 0去甲蟛蜞菊内酯苯丙素类0.983 30.000 2±0.000 0水杨酸酚类0.981 40.003 9±0.001 4没食子酸甲酯酚类0.980 70.000 3±0.000 0山柰素黄酮类0.980 50.000 4±0.000 0柠檬酸盐有机酸及其衍生物0.979 10.017 5±0.002 3右旋奎宁酸有机金属氧化合物0.978 70.002 5±0.000 2龙胆酸山酮类0.977 30.002 2±0.000 7没食子酸酚类0.976 70.017 7±0.000 2咖啡酸苯丙素类0.975 50.023 5±0.002 5鞣花酸酚类0.972 60.000 5±0.000 1琥珀酸有机酸及其衍生物0.969 70.001 7±0.000 4咖啡酸乙酯萜类0.969 50.019 4±0.003 3原儿茶醛酚类0.955 10.001 9±0.000 1正离子模式腺嘌呤生物碱1.000 00.001 9±0.000 1桉脂素苯丙素类1.000 00.000 4±0.000 0鸟嘌呤生物碱1.000 00.000 9±0.000 0盐酸葫芦巴碱生物碱0.999 90.001 8±0.000 3L-脯氨酸氨基酸衍生物0.999 60.000 3±0.000 1亚麻酸甘油酯其他类0.999 30.015 7±0.002 3红景天苷酚类0.998 90.000 1±0.000 0龙血素查尔酮类0.996 60.000 1±0.000 0染料木素黄酮类0.996 30.000 6±0.000 1对甲氧基苯甲醛酚类0.994 50.000 2±0.000 1泽兰黄酮黄酮类0.993 50.000 1±0.000 0角黄素异戊烯醇脂类0.991 00.000 5±0.000 06-姜烯酚酚类0.984 40.000 5±0.000 1对羟基肉桂酸苯丙素类0.979 00.000 2±0.000 1鹰嘴豆芽素A黄酮类0.977 30.000 2±0.000 0秦皮素香豆素及其衍生物类0.976 00.000 2±0.000 17,8-二羟基黄酮黄酮类0.972 40.001 0±0.000 1樟脑萜类0.970 90.000 2±0.000 0石吊兰素黄酮类0.968 70.000 1±0.000 0短叶苏木酚酸酚类0.967 60.002 4±0.000 6洛伐他汀萜类0.952 30.000 1±0.000 0乙酰胆碱季铵盐类0.950 30.004 5±0.000 42.2补饲发酵复方中药饲料添加剂对母猪羊水量和产程的影响（见表3）由表3可知，试验组的每头母猪的羊水量显著多于对照组（P0.05）；试验组仔猪的平均产出时间低于对照组（P0.05），说明给妊娠母猪补饲50 g发酵复方中药饲料添加剂有助于增加羊水量，并缩短仔猪的产出时间。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.005.T003表3补饲发酵复方中药饲料添加剂对母猪羊水量和产程的影响组别羊水量/(g/头)产出时间/(min/头)对照组23.53±1.55b22.01±3.88试验组35.08±4.82a20.36±2.79注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.3补饲发酵复方中药饲料添加剂对母猪繁殖性能的影响（见表4）由表4可知，试验组的平均窝产活仔猪数、断奶仔猪数和成活率分别高于对照组，但均无显著差异（P0.05），说明母猪补饲50 g发酵复方中药饲料添加剂有助于提高窝产活仔猪数和哺乳仔猪成活率，提高母猪的窝断奶仔猪数，即提高母猪的繁殖能力。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.005.T004表4补饲发酵复方中药饲料添加剂对母猪繁殖性能的影响组别产活仔猪数/(头/窝)断奶仔猪数/(头/窝)成活率/%对照组9.70±0.999.50±0.9598.33±1.11试验组11.50±1.2211.30±1.1798.47±1.082.4补饲发酵复方中药饲料添加剂对哺乳仔猪生长性能的影响（见表5）由表5可知，试验组仔猪的平均初生体重、平均断奶体重、平均日增重和平均腹泻率和对照组之间均无显著性差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.005.T005表5补饲发酵复方中药饲料添加剂对哺乳仔猪生长性能的影响组别初生体重/(kg/头)断奶体重/(kg/头)平均日增重/[g/(头·d)]腹泻率/%对照组1.43±0.107.76±0.40253.10±14.043.23±1.12试验组1.38±0.077.58±0.30248.09±11.652.12±0.763讨论妊娠期母猪便秘所产生的有毒、有害物质以及体内长期累积的霉菌毒素不同程度地损害胎儿的心血管、肺和肾脏[16-17]，使得妊娠后期胎儿的肺泡液和尿液分泌不足，以致妊娠后期羊水不足。目前未见中药饲料添加剂改善母猪羊水量的报道。本试验表明，与对照组相比，妊娠后期母猪补饲50 g/(头·d)发酵复方中药饲料添加剂能够显著增加羊水量，与发酵复方中药饲料添加剂含消炎、抗氧化、扩张血管、增加膜通透性和利尿的化学物质有关。妊娠后期母猪补饲发酵复方中药饲料添加剂后，进入体内的鞣花酸、没食子酸、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯和山柰素通过其抗氧化和降低损伤的功效[18-20]，修复受损伤的心血管、肺和肾；原儿茶醛能够促进微循环和舒张血管[21]；染料木素和山柰酚能够减轻肾炎和修复肾损伤[22]；山柰酚、咖啡酸和红景天苷则能够保护胎儿肺动脉血管的正常发育，保证胎肺的正常供血[23]。上述药效成分的协同作用，使得试验组胎儿的心血管、肺和泌尿系统比对照组发育得更好，分泌的肺泡液和尿液量比对照组多，试验组母猪的羊水量显著高于对照组。分娩时充足的羊水能够使母猪产道顺滑，能够更好地扩张和软化子宫颈，便于胎儿的顺利产出，减少胎儿在产道内因停留时间过长出现窒息死亡[24]，有助于提高母猪的窝产活仔数；充足的羊水还能够抑制细菌以减少产道感染，减轻母猪产后炎症，提高奶水质量。本试验结果表明，妊娠后期母猪每头每天补饲发酵复方中药饲料添加剂能够增加羊水量并缩短胎儿排出产道的时间，使得试验组的窝产活产数和窝断奶仔猪数均高于对照组。4结论本试验中，给母猪补饲50 g/(头·d)发酵复方中药饲料添加剂，有助于提高母猪羊水量，缩短胎儿的产出时间，增加母猪窝产活仔数和断奶仔猪数。