高含量油脂饲料在加工、贮存和运输过程中,受到光照、温度等因素影响极易发生氧化酸败,部分金属盐矿物质的添加也会促进饲料的氧化酸败,导致饲料营养价值降低、变质、变味,降低饲料的适口性,严重影响畜禽的机体健康。因此,预防饲料油脂的氧化酸败,提高饲料稳定性,延长饲料贮存期成为亟待解决的问题。目前,主要通过在饲料中添加一定剂量的抗氧化剂,延缓或预防油脂的氧化酸败。饲料抗氧化剂分为单体抗氧化剂(包括乙氧基喹啉、二丁基羟基甲苯、丁基羟基茴香醚等)和复合抗氧化剂两种。乙氧基喹啉(EQ)是一种可以清除过氧化脂质自由基的化学合成抗氧化剂[1]。常见饲料级EQ主要包括95%原油、60%粉剂和30%粉剂三种形式,均能够较好地与饲料混合,对油脂、蛋白质、维生素起到良好的抗氧化保护效果[2-3]。复合抗氧化剂主要由EQ、二丁基羟基甲苯(BHT)、丁基羟基茴香醚(BHA)、增效剂柠檬酸以一定比例复合而成,具有流动性好、安全性高、适口性好、对饲料颜色影响小、价格低廉等优势。单体抗氧化剂EQ和复合抗氧化剂均已被运用于防止饲料原料或饲料产品的氧化。但实际应用中抗氧化剂的添加量,单体、复合抗氧化剂的选择,无足够的试验以供参考。本试验选取单体抗氧化剂与复合抗氧化剂两种,按照6个浓度梯度添加到25%浓缩料中(油脂另外添加),筛选能够有效防止浓缩料油脂氧化的抗氧化剂,并确定适宜的添加量,以供实际生产参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1抗氧化剂单体抗氧化剂:乙氧基喹啉粉剂EQ,有效成分含量为60%。复合抗氧化剂:EQ 14.5%、BHT 5%、BHA 0.5%、柠檬酸3%(有效成分含量为20%,柠檬酸作增效剂)。1.1.225%猪浓缩料豆粕:80%;5%预混料:20%。1.1.3试验仪器与试剂HWS-010恒温培养箱(江苏富奇恒温设备有限公司)、RE-2 000A旋转蒸发器(郑州特尔仪器设备有限公司)、UV-2 000分光光度计(尤尼柯仪器有限公司)、HHS-21-6恒温水浴锅(常州诺基仪器有限公司)。冰乙酸、三氯甲烷、异丙醇、石油醚、三氯乙酸、乙二胺四乙酸二钠、硫代巴比妥酸,均购自国药集团化学试剂有限公司。1.2试验设计试验分对照组、单体抗氧化剂组和复合抗氧化剂组。对照组未添加任何抗氧化剂。单体抗氧化剂组含有效成分60%。复合抗氧化剂组含有效成分20%。参照添加到25%浓缩料抗氧化剂有效成分含量一致原则,复合抗氧化剂相应梯度的添加量为单体抗氧化剂同相应梯度的添加量的3倍。试验25%浓缩料各组抗氧化剂的添加量见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.017.T001表125%浓缩料中各组抗氧化剂的添加量组别抗氧化剂添加量/(mg/kg)对照组K0单体抗氧化剂组(含有效成分60%)M-1100M-2200M-3300M-4400M-5500M-6600复合抗氧化剂组(含有效成分20%)C-1300C-2600C-3900C-41 200C-51 500C-61 8001.3试验方法试验采用逐级混合均匀的方式。25%浓缩料与添加量8%食用大豆油混合均匀,为1次混合料。按各组要求添加量的抗氧化剂添加到1次混合料,并混合均匀。放置温度37 ℃、湿度60%的恒温恒湿培养箱贮存,每隔14 d,取样进行油脂氧化检测,每组每次测定3个重复,试验期为90 d。1.4测定指标及方法按照GB 5009.229—2016《食品安全国家标准 食品中酸价的测定》提取油脂的酸价(AV,mg/g);按照GB 5009.227—2016《食品安全国家标准 食品中过氧化值的测定》测定过氧化值(POV,g/100 g);按照GB 5009.181—2016《食品安全国家标准 食品中丙二醛的测定》测定丙二醛含量(MDA,mg/kg)[4-6]。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel 2016初步整理,SPSS 22.0统计软件的One-way ANOVA进行单因素方差分析,LSD法进行多重比较,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同剂量抗氧化剂对猪浓缩料POV的影响(见表2)由表2可知,对照组浓缩料的POV值呈现先增后减的曲线形式。第4周时,POV值突增,油脂严重氧化酸败;第6周时,POV值达到峰值,为244.63 g/100 g;第8~12周时,POV值逐渐递减,油脂进入氧化末期。除C-1组外,其他抗氧化剂组的POV值随抗氧化剂添加量的增加而提高,油脂的氧化酸败程度逐渐严重。试验期内,抗氧化剂组的M-4组、M-5组、M-6组的POV值一直处于较低且相对平稳水平,均低于6 g/100 g,油脂的氧化酸败程度无明显差异,但M-6组浓缩料的POV值最低。第4周以后,各组浓缩料的油脂均出现不同程度的加速氧化酸败。第4~10周时,对照组、C-1组、M-1组浓缩料的POV值均显著高于其他各组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.017.T002表2不同剂量抗氧化剂对猪浓缩料POV的影响时间/周对照组C-1组C-2组C-3组C-4组C-5组C-6组M-1组M-2组M-3组M-4组M-5组M-6组SEMP值02.061.981.932.062.052.012.072.072.062.022.02.062.060.820.87213.97a3.97de3.87e3.70f3.41g3.31g3.04h4.60b4.35c4.06d2.86i2.85i2.68j0.070.014192.66a7.58b4.38d3.94de3.93de3.71de3.98de5.18c4.39d4.10de3.43e3.35e3.33e0.360.016244.63a67.60b7.92d5.56de4.87e3.98e3.99e14.83c5.19de4.19e3.63e3.40e3.40e1.340.018172.28b256.62a36.34d12.09e6.47e5.32e5.21e83.06c6.60e4.71e4.56e3.97e3.86e3.510.0110111.00d204.79a135.54c32.98e13.77f7.91h7.27h198.23b12.47g5.31i4.63ij4.03j4.01j0.520.011289.15e156.60c178.89b123.18d39.35g17.18h11.53i233.10a48.80f7.19j5.41k5.28k4.77k0.680.01注:同行数据肩标相同或无字母表示差异不显著(P0.05),不同字母表示差异显著(P0.05);下表同。g/100 g2.2不同剂量抗氧化剂对猪浓缩料AV值的影响(见表3)试验持续至第6周、第8周时,由于对照组和C-1组提取的油脂量不足,未能测定AV值,故放弃测定试验。由表3可知,除去对照组和C-1组,其他各组浓缩料的AV值随时间的延长而不断增大。第6~12周时,C-2组、C-3组、C-4组浓缩料的AV值显著高于有效成分含量60%的单体抗氧化剂各组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.017.T003表3不同剂量抗氧化剂对猪浓缩料AV值的影响时间/周对照组C-1组C-2组C-3组C-4组C-5组C-6组M-1组M-2组M-3组M-4组M-5组M-6组SEMP值01.441.521.461.511.461.521.531.481.431.421.531.511.520.040.0924.80e5.86c6.48a6.42a6.46a6.35a6.52a5.56d5.91c6.11b5.93bc6.11b6.04bc0.090.0148.58f9.02f9.86de10.09cde10.72ab10.73ab10.91a9.67e10.19bcde10.47abc10.26bcd10.19bcde10.38abcd0.240.016—11.26d14.08a14.15a14.05a13.09bc14.13a12.32c12.88bc13.02bc12.86bc12.99bc13.16b0.350.018——16.92a16.94a16.59ab15.79bc17.35a12.76d13.32d15.55c14.78c15.28c15.30c0.460.0110——19.71a19.63a19.63a19.10ab19.59a15.17e16.09d18.30bc17.71c17.40c17.53c0.430.0112——22.46a22.52a21.90a21.60ab21.58ab18.49d19.32cd20.41bc20.11bc20.39bc20.16bc0.640.01注:”—“表示未进行试验测定;下表同。mg/g2.3不同剂量抗氧化剂对猪浓缩料MDA含量的影响(见表4)试验持续至第6周时,因对照组提取的油脂量不足,未能测定MDA含量,故放弃测定试验。由表4可知,第0~4周时,抗氧化剂各组浓缩料的MDA含量显著低于对照组(P0.05)。第6~12周时,C-1组、C-2组和M-1组浓缩料MDA含量显著高于其他各组(P0.05)。第10~12周时,C-3组、C-4组、M-2组浓缩料MDA含量显著高于C-5组、C-6组及M-3~M-6各组的MDA含量(P0.05)。试验期内M-3~M-6各组浓缩料MDA含量之间差异不显著(P0.05),M-6组浓缩料的MDA含量最低。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.017.T004表4不同剂量抗氧化剂对猪浓缩料MDA含量的影响时间/周对照组C-1组C-2组C-3组C-4组C-5组C-6组M-1组M-2组M-3组M-4组M-5组M-6组SEMP值00.770.920.830.970.871.010.960.870.900.880.960.771.060.090.0622.03a1.11cdef0.99ef1.06def1.19bcd1.31b1.27bc1.17bcde1.08def0.96f1.09def1.08def1.13cdef0.080.01411.46a2.20b1.61c1.12d1.29d1.27d1.29d1.71c1.24d1.10d1.29d1.12d1.16d0.120.016—6.82a1.69c1.21d1.17d1.07d1.05d3.51b1.24d1.18d1.24d1.17d1.17d0.120.018—14.88a6.63c2.69d1.56d1.15d1.07d9.09b1.73d1.42d1.33d1.29d1.24d0.950.0110—20.66a12.03c6.59d2.31e1.21f1.13f14.12b2.75e1.43f1.35f1.32f1.26f0.380.0112—15.42b12.35c10.06d5.53f2.92g1.79h16.38a6.01e1.70h1.58h1.48h1.30h0.230.01mg/kg3讨论3.1抗氧化剂对猪浓缩料POV的影响POV值是通过评价过氧化物中氧含量衡量饲料油脂氧化程度的一种指标[7-8]。本试验中,对照组第4周时油脂出现严重氧化。与对照组相比,抗氧化剂组的POV值显著低于对照组。第4~12周时,单体抗氧化剂组与复合抗氧化剂组相比较,二者均对浓缩料具有抗氧化保护作用,单体抗氧化剂的作用效果明显。原因在于单体抗氧化剂EQ能够有效清除自由基,发挥有效的抗氧化保护作用[9]。阮剑均等[10]研究发现,米糠毛油中添加0.03%EQ可有效延缓或抑制油脂等营养成分的氧化。卢豪良等[11]研究比较同一饲料公司的3种不同抗氧化剂发现,单体抗氧化剂的抗氧化效果优于复合抗氧化剂组。宋鸽[12]研究发现,40%乳猪浓缩料中分别添加EQ、BHT、VE和复合抗氧化剂,4种抗氧化剂均可以降低或延缓饲料油脂的氧化酸败,EQ组和VE组抗氧化效果最佳,与本试验结果一致。王小花等[13]研究发现,仔猪前期配合饲料中添加复合抗氧化剂,结果显示复合抗氧化剂对饲料的抗氧化保护效果优于单一抗氧化剂EQ的抗氧化效果,与本试验结果相反,原因在于复合抗氧化剂含有多种不同成分,能够发挥主要抗氧化作用的成分的含量各不相同所致。3.2抗氧化剂对猪浓缩料AV的影响酸价是指中和1 g油脂中的游离脂肪酸所消耗的氢氧化钾的质量,是检验饲料油脂质量的重要指标[14]。本试验中,各组的AV值均随时间的延长而不断提高,各组间无明显差异和规律。原因在于氢过氧化物作为油脂氧化的初级产物,性质一般不稳定,能够经过一系列的分解和相互作用,产生小分子的挥发性物质,如醛、酮、酸、醇环氧化物,油脂本身也会进行分解产生游离脂肪酸,导致油脂酸价不断上升[15]。3.3抗氧化剂对猪浓缩料MDA的影响MDA是氧化反应的次级产物,含量的高低与初级氢过氧化物密切相关,代表着浓缩料的氧化程度[12]。本试验中,MDA含量的变化趋势与POV值相似,呈现逐渐递增,原因在于初期阶段的MDA产生的速度比氢过氧化物产生的速度快[16]。本试验中,M-5组和M-6组的MDA含量试验期内变化均不明显,单体抗氧化剂组与对应剂量复合抗氧化剂组相比,MDA含量均相对较低,说明单体抗氧化剂比复合抗氧化剂更能阻止丙二醛的生成。4结论抗氧化剂的添加量越高,对浓缩料中油脂的保护效果越好;等浓度的单体抗氧化剂对浓缩料中油脂的保护效果优于复合抗氧化剂;油脂含量为8%的猪浓缩料中添加600 mg/kg的60%单体抗氧化剂可起到良好的保护效果。

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