虾青素又称为虾黄素，化学结构是六节环结构[1]，是一种天然生物色素，并且是一种在动物体内不能自主合成的酮式类胡萝卜素，广泛存在于甲壳类动物的壳、酵母菌和藻类中，起显色作用。赭红色虾青素具有超强的沉积能力[2]，在畜禽饲料中添加可以改变畜禽产品的色泽[3]。畜牧业中，在肉鸡日粮中添加虾青素可以改善肉鸡皮肤和肌肉的颜色[4]。水产养殖业中，虾青素常作为饲料添加剂，不仅可以使鱼的表皮鳞甲变为黄色，还能够使肌肉中虾青素的含量有较大提升[5]。研究发现，虾青素的抗氧化能力极强，是VE的500倍[6]，可以减少脂质过氧化作用，抑制自由基的产生[7]。虾青素的抗氧化功能在家禽养殖业和食品产业的发展中发挥着重要作用，虾青素的研究有非常好的前景[8]。在日粮中添加虾青素可以减少雏鸡的整体死亡率，提高蛋鸡的蛋黄色泽、蛋黄重和产蛋率，降低沙门氏菌等传染病[9]。目前，虾青素在蛋鸡日粮中的应用效果，尤其是在鸡蛋中的富集效果报道较少。本试验在蛋鸡日粮中添加不同水平的虾青素复合剂，研究其对蛋鸡生产性能、蛋品质和蛋黄中虾青素含量的影响，为开发出富含虾青素的功能性鸡蛋提供参考。1材料与方法1.1试验动物与材料试验动物伊莎褐蛋鸡购自石家庄市鹿泉区会元养鸡场。虾青素复合剂购自中科康源（唐山）生物技术有限公司。1.2试验设计试验采用单因子试验设计。选取40周龄、体型、产蛋率以及健康状况相似的伊莎褐蛋鸡432只，鸡的初始体重为（1.60±0.05）kg，随机分成4组，每组6个重复，每个重复18只鸡。对照组蛋鸡饲喂基础日粮，基础日粮参照NRC（1994）和《鸡饲养标准》（NY/T 33—2004）饲养标准，结合《伊莎褐商品代蛋鸡饲养管理手册》进行配制。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.012.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米62.10代谢能/(MJ/kg)11.00豆粕24.55粗蛋白/%16.86石粉9.00蛋氨酸/%0.27鱼粉1.00赖氨酸/%0.85磷酸氢钙1.02钙/%3.65食盐0.33磷/%0.49预混料2.00注：1.每千克预混料为日粮提供：VA 300 000 IU、VD3 100 000 IU、VE 500 IU、VK3 90 mg、VB1 80 mg、VB2 300 mg、VB6 100 mg、VB12 1 mg、烟酸1 500 mg、D-泛酸钙500 mg、叶酸50 mg、生物素5 mg、氯化胆碱20 g、蛋氨酸60 g、铜0.2 g、铁2.0 g、锰3.0 g、锌3.0 g、碘20 mg、硒10 mg。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。试验组饲喂基础日粮中分别添加12.81、16.02 、18.12 g/kg的虾青素复合剂，使日粮中虾青素水平分别为10 、20 、30 mg/kg。1.3饲养管理试验方案选用三层阶梯式笼养，每笼3只鸡，各重复均匀分布。每日8：00和16：00各饲喂1次，每日15：30采集所有鸡蛋并记录整理。蛋鸡自由采食与饮水。鸡舍采用自然通风和纵向负压通风两种方式，按照正常流程进行免疫操作。预试期7 d，正式试验期42 d。1.4测定指标与方法1.4.1生产性能以重复为单位，每天15：30收蛋，对各试验组的产蛋数、总蛋重进行记录，并对试验鸡的健康状态与存栏数进行观测，每周结料，统计耗料量。1~2周为第一阶段，3~4周为第二阶段。试验结束后计算平均日采食量、平均蛋重、产蛋率、日产蛋量和料蛋比。平均日采食量＝总采食量/(试验天数×产蛋鸡的存栏只数)(1)平均蛋重＝周蛋重总质量/周鸡蛋总个数(2)平均产蛋率＝产蛋数/产蛋鸡的存栏只数(3)平均日产蛋量＝产蛋率×平均蛋重(4)料蛋比＝平均日采食量/日产蛋量(5)1.4.2蛋品质试验结束前1 d，从每个重复组中随机抽取3枚鸡蛋，标号。测定蛋品质指标包括蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋形指数、蛋黄颜色、蛋黄重、蛋白高度、蛋黄比例。蛋壳厚度在蛋壳除去壳膜后使用螺旋测微计，分别对顶端、中间、钝端进行测定，取平均值；蛋壳强度使用蛋壳强度测定仪测定每平方厘米蛋壳能够承受的压力；蛋形指数使用游标卡尺对鸡蛋长径和短径分别进行测定，求其比值；蛋黄颜色以罗氏比色扇为工具进行测定；蛋黄重使用电子分析天平测定；蛋白高度使用游标卡尺对蛋白高度进行测定。蛋黄比例=蛋黄重/蛋重(6)哈夫单位＝100×lg（蛋白高度－1.7×蛋重0.37＋7.57）(7)1.4.3蛋黄中虾青素含量每个处理随机选取3枚鸡蛋，取出蛋黄液氮速冻，－80 ℃保存，使用高效液相色谱仪（LC-MS）对蛋黄中虾青素的含量进行测定（根据SC/T 3053—2019标准进行）。测定日期为2021年8月18日至2021年8月25日。1.5数据统计与分析数据采用Excel整理，SPSS 22.0统计软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1虾青素复合剂对蛋鸡生产性能的影响（见表2）由表2可知，第一阶段，30 mg/kg组蛋鸡的产蛋率显著高于0 mg/kg组（P0.05）；10 mg/kg组蛋鸡的平均日采食量显著高于0 mg/kg组（P0.05）；30 mg/kg组蛋鸡的平均日产蛋量显著高于0 mg/kg组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.012.T002表2虾青素复合剂对蛋鸡生产性能的影响项目虾青素复合剂水平/(mg/kg)0102030第一阶段第二阶段第一阶段第二阶段第一阶段第二阶段第一阶段第二阶段产蛋率/%79.79±3.09a84.03±2.6385.30±2.38a82.22±1.2383.33±2.18a85.55±1.5687.73±1.78b84.72±5.59平均蛋重/(g/只)64.15±0.6664.16±0.2763.97±0.7764.15±0.8163.96±0.1464.00±0.0864.89±0.5064.12±0.18平均日采食量/[g/(只·d)]113.49±2.11a121.51±1.19a118.18±0.97b122.78±0.87a114.86±0.88b127.44±1.03b115.65±0.56b126.49±0.82b平均日产蛋量/g51.19±2.26a54.05±1.9954.49±1.34a53.87±1.4053.64±1.65a53.57±1.6956.94±1.39b55.13±1.80料蛋比2.24±0.072.35±0.082.19±0.042.33±0.052.16±0.052.41±0.072.07±0.062.34±0.08注：同行数据同阶段肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。第二阶段，20、30 mg/kg组蛋鸡的平均日采食量显著高于10 mg/kg（P0.05）；其他各组的产蛋率、平均蛋重、平均日产蛋量均无显著差异（P0.05）。2.2虾青素复合剂对蛋鸡蛋品质的影响（见表3）由表3可知，日粮中添加不同水平虾青素复合剂对蛋形指数、蛋壳强度、蛋白高度、哈夫单位、蛋黄比例均无显著影响（P0.05）。与对照组相比，添加10、20以及30 mg/kg的虾青素复合组的蛋黄颜色均显著优于对照组（P0.05），且试验组间的蛋黄颜色存在显著性差异（P0.05），虾青素复合剂量提高，蛋黄颜色显著加深。添加10、20以及30 mg/kg的虾青素复合组的蛋壳厚度均显著高于对照组（P0.05），且试验组间的蛋壳厚度差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.012.T003表3虾青素复合剂对蛋鸡蛋品质的影响项目虾青素复合剂水平/(mg/kg)0102030蛋形指数1.31±0.031.30±0.051.29±0.301.32±0.04蛋壳强度/N35.29±4.0835.73±4.5338.19±8.0436.93±3.79蛋白高度/mm6.24±1.116.38±0.666.38±0.635.74±0.36哈夫单位75.47±8.8477.20±4.8276.17±4.3071.72±3.05蛋黄颜色6.67±0.41a9.75±0.82b10.58±0.92c12.17±0.41d蛋黄比例/%25.71±1.1826.32±1.6226.33±1.2926.15±1.28蛋壳厚度/mm0.40±0.02a0.44±0.02b0.44±0.01b0.43±0.03b2.3虾青素复合剂对蛋黄中虾青素含量的影响（见图1）由图1可知，随着日粮中添加的虾青素复合剂水平的提高，蛋黄中的虾青素含量随之增加。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.012.F001图1虾青素复合剂对蛋黄中虾青素含量的影响注：“*”表示显著高于其他组（P0.05）；“NS”表示与对照组相比差异不显著（P0.05）。添加30 mg/kg虾青素复合组蛋鸡的蛋黄中虾青素含量显著高于对照组和其他试验组（P0.05）。添加10 和20 mg/kg虾青素复合组蛋鸡的蛋黄中虾青素含量差异不显著（P0.05）。2.4虾青素复合剂对蛋鸡鸡蛋经济效益的影响（见表4）由表4可知，0 mg/kg组盈利最多，经济效益最大。10、20、30 mg/kg组盈利分别为570.11元、548.58元、600.43元，与0 mg/kg组相比，分别降低12.47%、16.88%、6.79%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.012.T004表4日粮中添加不同水平虾青素对蛋鸡鸡蛋经济效益的影响组别总蛋重/kg蛋价/(元/kg)耗料/kg料价/(元/kg)盈利/元0 mg/kg组155.2011.74353.553.340 00641.1910 mg/kg组158.3011.74362.913.544 96570.1120 mg/kg组156.9911.74359.583.596 32548.5830 mg/kg组164.7511.74367.423.629 92600.433讨论3.1虾青素复合剂对蛋鸡生产性能与蛋品质的影响虾青素能够显著改善蛋黄颜色与光泽[10]，降低体内促炎因子水平，促进抑炎症因子产生，提高机体免疫力[11]，保护心血管系统，用于癌症、炎症性疾病等方面治疗[12]。付兴周等[13]研究发现，将虾青素复合剂添加到肉鸡日粮中可以提高其生长性能，改善鸡肉的品质。本试验结果显示，蛋鸡日粮中添加虾青素复合剂，蛋鸡的平均产蛋率、平均蛋重和料蛋比均无显著差异。王钧艺[14]和李润桦等[15]在蛋鸡日粮中添加不同水平虾青素，天然虾青素对蛋鸡的平均产蛋率、蛋重、料蛋比均无显著影响，与本试验结果一致。蛋鸡日粮中添加不同水平虾青素复合剂对蛋鸡的平均蛋重、蛋形指数、蛋壳强度无显著影响。吴斯诺等[16]研究发现，在蛋鸡日粮中添加不同水平虾青素能够改善蛋鸡生产性能和蛋品质，与本试验结果一致。蛋壳厚度在鸡蛋的储存、运输和保鲜等环节发挥重要作用[17]。本试验中，蛋鸡日粮中添加虾青素复合剂可以显著提高蛋壳厚度。添加虾青素复合剂可以促进蛋鸡对日粮中钙磷营养的吸收。日粮中添加不同水平虾青素复合剂对鸡蛋的蛋黄重、蛋黄比例均无显著性影响，与李利红等[18]研究结果保持一致。3.2虾青素复合剂对蛋黄颜色的影响类胡萝卜素分为维生素A原和非维生素A原两种，维生素A原类胡萝卜素进入体内后转化为维生素A储存在肝脏中，失去着色能力；非维生素A原类胡萝卜素（如叶黄素、虾青素）可以起到对蛋黄着色的功能。叶黄素微囊添加日粮中能够改善蛋黄颜色[19]。虾青素拥有亮丽的红色和较强的色素沉着能力[20]。蛋鸡自身无法合成叶黄素、虾青素等物质，可以在其日粮中添加适量的虾青素复合剂，补充色素以加深蛋黄颜色。本试验结果显示，各试验组之间蛋黄颜色均存在显著差异，随着虾青素复合剂添加量的增加而加深。刘奥强[21]表示，在蛋鸡日粮中添加虾青素能够显著加深蛋黄颜色。王钧艺等[22]研究表明，添加虾青素复合剂能够显著加深蛋黄颜色。以上试验结果均与本试验结果一致。虾青素是一种可调控色素沉积的类胡萝卜素[23]，以棕油酸二酯的形式在蛋鸡体内存在，经过小肠并与低密度脂蛋白相结合从而被机体吸收，血液中保持游离状态，通过脂蛋白这一载体进入蛋黄并沉积，从而显著增加蛋黄色泽[24-25]。蛋品质评价的一个重要感官指标是蛋黄颜色。蛋黄颜色高的鸡蛋具有更高的市场竞争力，可以提高经济效益。3.3虾青素复合剂对蛋黄中虾青素含量的影响本试验中，30 mg/kg虾青素水平组可以显著提高蛋黄中虾青素的含量。研究发现，饲料中添加虾青素可以提高鱼类及甲壳类动物的着色能力和组织中虾青素的浓度[26]。采用法夫酵母法进行的动物色素沉积试验表明，虾青素在蛋黄中有较高水平的沉积[27]。Dansou等[28]研究表明，蛋黄中虾青素的浓度与添加剂量之间呈线性关系。随虾青素复合剂添加量的增加，蛋黄中虾青素含量逐渐提高。虾青素具有的抗氧化功能，能够保护肝脏和提高免疫系统[29]。虾青素还可以通过影响人类的氧化应激、炎症、细胞死亡和脂质代谢，对皮肤状况、眼睛健康、心血管系统、神经功能、运动表现和免疫反应产生益处[30]。Sori等[31]研究表明，虾青素通过激活癌细胞内NADPH氧化酶活性和提高癌细胞内活性氧的水平从而破坏癌细胞，具有一定的抗癌功能。消费者通过食用富含虾青素的鸡蛋，能够提高免疫力，从而保护身体的健康。因此，富含虾青素的功能性鸡蛋更容易被消费者接受，具有较高的市场竞争力。3.4虾青素复合剂对蛋鸡鸡蛋经济效益的影响本试验中，经济效益根据普通商品鸡蛋价格，按照公式“盈利=（总蛋重×鸡蛋单价）－（总耗料量×饲料单价）”计算得出。结果显示，30 mg/kg虾青素组的经济效益为600.45元，相比对照组的641.19元，仅降低6.79%；但从蛋鸡的蛋黄中虾青素含量的结果可知，30 mg/kg虾青素组的蛋黄中虾青素含量能够显著提高，从而能够开发出一种富含虾青素的功能性鸡蛋。市场调查显示，富含虾青素的鸡蛋价格在40~80元/kg，远高于普通鸡蛋市场价格，盈利会随之提高。富含虾青素的鸡蛋可为养殖企业带来可观的经济效益。4结论本试验研究表明，采用添加虾青素复合剂水平为10~30 mg/kg的日粮饲喂蛋鸡，能够显著改善鸡蛋的蛋品质，提高鸡蛋的蛋黄颜色，增加鸡蛋的蛋壳厚度。添加30 mg/kg虾青素复合剂的日粮饲喂蛋鸡能够显著提高鸡蛋的蛋黄中虾青素的含量，但对蛋鸡的生产性能及鸡蛋的其他蛋品质指标无显著影响。