中草药含多糖、氨基酸、矿物元素等多种物质[1]。饲料添加适量中草药能够改善饲料口感，促进畜禽生长，增强免疫，提高畜产品质量。中草药具有低毒、无副作用、食用安全、来源广泛等优点，是替抗产品研究的主要内容。鸡新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）所引起的鸡和火鸡等禽类以呼吸困难、仰观天斗、神经症状、减蛋、下痢和高病死率为主的疫病[2]。当前新城疫防控主要以预防免疫接种为主，因病毒变异、疫苗因素、外界环境、禽类自身等多因素影响，不能长期有效防控鸡ND疫情，在禽类养殖场免疫过的鸡常有散发性发病。因此，提高鸡ND免疫效果具有重要研究意义。临床及生产中，可以在疫苗中添加蜂胶、油佐剂、铝佐剂、VA5等多种佐剂，生物制剂联合使用和饲料中添加免疫增强剂等增强畜禽免疫[3]。步卫东等[4]研究表明，在鸽饮水中添加5 mg/(只·d)黄芪多糖（APS）可以提高鸽新城疫HI抗体水平和平均日增重。孙甜甜等[5]研究表明，饲料添加0.70%、1.00%枸杞多糖（LBP）对仔鸡胸肌和腿肌氨基酸组成具有一定的改善作用。侯海锋等[6]研究表明，灌服3 mL/kg当归多糖（ASP）对腹腔注射环磷酰胺致鸡红细胞免疫功能降低具有极显著的逆转作用。张艳等[7]、窦晓群等[8]研究表明，左旋咪唑（LMS）能够诱导胸腺T细胞分化增殖，改善生长和免疫。本试验以1日龄肉雏公鸡为研究对象，探讨4种免疫增强剂对雏鸡生长性能和ND免疫的影响，为禽类健康养殖和研究提供参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1试验动物1日龄健康雏公鸡150只，体重30~35 g，购自铜仁市华鑫禽业有限公司。1.1.2疫苗及试剂当归、枸杞、黄芪购自铜仁市某中药材有限公司，粉碎过40目筛。盐酸左旋咪唑购自四川恒通动物制药有限公司；鸡新城疫活疫苗（La Sota株）购自吉林和元生物工程股份有限公司；鸡新城疫血凝抑制试验抗原，阳性血清、阴性血清，均购自哈尔滨国生生物科技股份有限公司；生理盐水购自广西裕源药业有限公司。1.1.3试验仪器Eppendorf艾本德移液器（50~100 μL、100~1 000 μL、1~10 mL）、配套吸头及耗材购自江苏省科学器材有限公司；电子天平购自美国康州HZ电子有限公司；MH-2购自Kylin-Bell仪器有限公司；L600离心机购自湖南湘仪仪器厂。1.2试验方法1.2.1试验设计将1日龄雏公鸡200只，饲喂全价饲料至7日龄，选取体重相近的150只健康雏鸡，随机分为5组，每组5个重复，每个重复6只鸡，分别为免疫CG组（不添加免疫增强剂）、AM组（饲料添加10 g/kg黄芪粉）、LB组（饲料添加10 g/kg枸杞粉）、AS组（饲料添加10 g/kg当归粉）、LMS组（饲料添加2.4 g/kg左旋咪唑粉），饲料选取正大仔鸡颗粒料。采用滴鼻点眼对雏鸡进行1羽份/只免疫新城疫活疫苗（La Sota株活疫苗），当天开始饲喂试验日粮。1.2.2饲养环境试验期间，各组饲养环境相同，同一禽舍，采用网上饲养方式。第1周间断光照，每天18 h，控温30 ℃；第2周每天光照16 h，控温28 ℃；第3周每天光照14 h，控温25 ℃；后每周每天光照12 h，控温约25 ℃。每日早晨定时加料和水，自由采食和饮水，统一回收料槽并称量剩余饲料。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能肉仔公鸡于免疫后第1、2、3、4周，清晨喂前，称取各组肉仔公鸡空腹质量，测算试验鸡平均日耗料量、平均日增重和饲料转化率。平均日增重=(末重－初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.3.2免疫器官指数肉仔公鸡0、1、2、3、4周时，各组随机选取6只雏公鸡，称重，采血，颈部放血致死，完整摘取脾、法氏囊、胸腺，剔除杂质和筋膜，滤纸吸干脏器表面水分，称重，测定免疫器官指数。免疫器官指数=器官鲜质量/宰前鸡空腹机体质量(4)1.3.3血清ND抗体效价于免疫前和免疫后第1、2、3、4周，各组随机抽取6只鸡，心脏采血，制取血清，参照鸡新城疫抗体水平测定（微量法）方法按《新城疫诊断技术》（GB/T 16550—2008）标准测定试验鸡ND效价。1.4数据统计与分析数据采用Excel 2017进行数据整理，采用SPSS 19.0软件（One-way ANOVA）进行单因素方差分析。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.14种免疫增强剂对肉仔鸡各阶段体重增重的影响（见表1）由表1可知，免疫后第1周，AM组鸡的体重显著高于CG组（P0.05）；免疫后第2周，AM组鸡的体重显著高于CG组和LMS组（P0.05）；免疫后第3周，AM组鸡的体重极显著高于CG组（P0.01），AS组鸡的体重显著高于CG组（P0.05），AM组和AS组鸡的体重显著高于LMS组（P0.05）。免疫后第4周，AM组鸡的体重极显著高于CG组（P0.01），AS组和LB组鸡的体重显著增高于CG组（P0.05），AM组和AS组鸡的体重显著高于LMS组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.011.T001表14种免疫增强剂对肉仔鸡各阶段体重增重的影响组别免疫后1周免疫后2周免疫后3周免疫后4周CG组0.179±0.0110.233±0.0090.271±0.0050.376±0.012LB组0.200±0.0050.242±0.0070.286±0.0050.432±0.011aAS组0.203±0.0130.250±0.0050.301±0.011ab0.437±0.017abLMS组0.188±0.0060.235±0.0050.279±0.0020.399±0.011AM组0.206±0.008a0.257±0.005ab0.312±0.004aab0.462±0.015aab注：同列数据肩标字母a表示与对照组相比差异显著（P0.05），aa表示差异极显著（P0.01），b表示与左旋咪唑相比差异显著（P0.05），无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。kg2.24种免疫增强剂对肉仔鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，AM组、AS组和LB组鸡的平均日增重显著高于CG组（P0.05），AM组鸡的料重比极显著低于CG组（P0.01），显著低于LMS组（P0.05），AS组和LB组鸡的料重比显著低于CG组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.011.T002表24种免疫增强剂对肉仔鸡生长性能的影响组别平均日增重/[g/(只·d)]平均日采食量/[g/(只·d)]料重比CG组12.857±0.25846.079±1.6053.684±0.219LB组14.536±0.393a45.567±1.6013.134±0.034aAS组14.714±0.590a46.062±1.1113.132±0.049aLMS组14.024±0.95145.794±0.7613.429±0.073AM组15.595±0.523a45.689±0.5812.933±0.137aab2.34种免疫增强剂对肉仔鸡各阶段法氏囊指数的影响（见表3）由表3可知，免疫后第2、3周，AM组和AS组鸡的法氏囊指数显著高于CG组（P0.05）。免疫后第4周，AM组、AS组和LB组鸡的法氏囊指数均显著高于CG组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.011.T003表34种免疫增强剂对肉仔鸡各阶段法氏囊指数的影响组别免疫后1周免疫后2周免疫后3周免疫后4周CG组2.362±0.2312.756±0.2093.252±0.0952.938±0.149LB组2.349±0.2073.058±0.1153.426±0.2353.358±0.220aAS组2.579±0.1583.221±0.125a3.734±0.169a3.553±0.289aLMS组2.268±0.2062.948±0.1153.486±0.2353.612±0.206AM组2.731±0.1173.267±0.251a3.768±0.114a3.480±0.047ag/kg2.44种免疫增强剂对肉仔鸡各阶段脾脏指数的影响（见表4）由表4可知，免疫后第1周，AM组鸡的脾脏指数极显著高于CG组（P0.01），AM组鸡的脾脏指数显著高于LMS组（P0.05），AS组显著高于CG组（P0.05）。免疫后第2周，AM组、LB组和AS组鸡的脾脏指数显著高于CG组（P0.05）。免疫后第3周，AM组和LB组鸡的脾脏指数显著高于CG组（P0.05）。免疫后第4周，AM组和AS组鸡的脾脏指数显著高于CG组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.011.T004表44种免疫增强剂对肉仔鸡各阶段脾脏指数的影响组别免疫后1周免疫后2周免疫后3周免疫后4周CG组1.542±0.0571.737±0.1551.761±0.1992.257±0.169LB组1.767±0.0251.998±0.039a2.075±0.014a2.562±0.274AS组1.874±0.124a1.984±0.032a2.001±0.0532.792±0.072aLMS组1.682±0.0921.928±0.0962.016±0.0602.382±0.088AM组2.021±0.091aab1.995±0.025a2.123±0.118a3.072±0.184abg/kg2.54种免疫增强剂对肉仔鸡各阶段胸腺指数的影响（见表5）由表5可知，免疫后第1周，AM组肉仔鸡的胸腺指数显著高于CG组（P0.05）。免疫后第2周，AM组、LB组、LMS组和AS组肉仔鸡的胸腺指数显著高于CG组（P0.05）。免疫后第3周，AM组肉仔鸡的胸腺指数显著高于CG组（P0.05）。免疫后第4周，AM组和AS组肉仔鸡的胸腺指数显著高于CG组和LMS组（P0.05），LB组肉仔鸡的胸腺指数显著高于CG组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.011.T005表54种免疫增强剂对肉仔鸡各阶段胸腺指数的影响组别免疫后1周免疫后2周免疫后3周免疫后4周CG组1.751±0.2002.429±0.3333.374±0.0183.276±0.131LB组1.814±0.1992.990±0.067a3.427±0.0833.597±0.065aAS组2.203±0.1643.103±0.051a3.443±0.0643.865±0.097abLMS组1.853±0.2702.962±0.123a3.423±0.0553.451±0.090AM组2.360±0.111a3.314±0.213a3.608±0.138a3.800±0.133abg/kg2.64种免疫增强剂对肉仔鸡各阶段抗体滴度的影响（见表6）由表6可知，免疫后第1、2周，AM组和AS组肉仔鸡的抗体滴度显著高于CG组（P0.05），LMS组和LB组的抗体滴度高于CG组。免疫后第3周，AM组、AS组和LB组肉仔鸡的抗体滴度显著高于CG组（P0.05），LMS组肉仔鸡的抗体滴度高于CG组。免疫后第4周，各组肉仔鸡的抗体滴度均高于CG组，但无显著差异。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.05.011.T006表64种免疫增强剂对肉仔鸡各阶段抗体滴度的影响组别免疫后1周免疫后2周免疫后3周免疫后4周CG组2.200±1.3034.000±0.7074.600±0.5486.200±0.447LB组3.600±0.5485.800±0.8376.200±0.837a6.400±0.894AS组4.000±0.707a6.400±1.140a6.800±1.304a7.000±0.707LMS组3.400±0.5485.400±1.1406.000±0.7076.400±0.548AM组4.800±0.837a7.000±1.000a7.200±0.447a7.200±0.447nlog23讨论3.1日粮中添加不同免疫增强剂对肉仔鸡生长性能的影响平均日增重和料重比是衡量动物生长性能的指标。研究表明，APS可通过促进免疫调节和调控肠道菌群微生态平衡等方式提高动物的生长性能[9-11]，料重比和体质量与APS在饲料中添加剂量呈正相关[12]。当归通过改善日粮适口性、补充日粮元素、改善造血系统功能和提高免疫细胞活力等改善动物生长性能[13-14]。LBP可通过改善动物机体抗氧化应激、调整肠道结构完整性、清除体内自由基、提高动物机体免疫力等方式提高动物的生长性能[15-16]。孙甜甜等[5]在日粮中分别添加3、5、7 g/kg枸杞粗多糖，研究表明，添加7 g/kg枸杞粗多糖对提高肉鸡的生产性能最优。在对鸡[17-18]、猪[19-20]、犬[21]等动物研究中均表明，LMS对动物无显著的促生长作用。本试验中，日粮中添加10 g/kg AM、AS、LB和2.4 g/kg LMS饲喂雏鸡，结果表明，AM、AS和LB均具有促进肉仔鸡生长性能和提高饲料报酬的作用，以AM和AS改善效果较好，LMS对雏鸡促进生长发育无显著影响。与上述结果不一致的原因可能与添加剂量、饲喂方式、饲养周期、给药方式的不同有关。3.2日粮中添加不同免疫增强剂对肉仔鸡免疫器官指数的影响法氏囊、脾脏和胸腺质量的增加是动物生长发育加快的体现[22]，法氏囊、脾脏和胸腺指数是衡量免疫器官发育的核心标志，也是评估机体免疫性能的重要参数。研究表明，免疫器官指数与饲料添加APS量呈正向促进作用[23-24]，但当免疫器官发育成熟后，APS对免疫器官的影响减弱[25]。LBP对鸡不同生长时期的免疫器官均具有发育促进作用[5]。当归具有活血补血和通便的功能[26]，能够显著提高环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠的免疫器官指数[27]。LMS能够明显提高新城疫LaSota株疫苗特异免疫的免疫器官指数[28]。本试验中，第1周，AM组雏鸡脾脏指数呈现极显著增加；第2周起，AM组雏鸡法氏囊、胸腺和脾脏指数均显著高于CG组；LB组雏鸡胸腺指数和脾脏指数显著高于CG组。AS组第1周仅雏鸡的脾脏指数显著高于CG组；第2周雏鸡的法氏囊指数、胸腺指数和脾脏指数均显著高于CG组。与上述研究结果具有差异，原因在于给药方式和添加剂量不同有关。因此，AM组和AS组对促进动物早期免疫器官发育和增强动物机体免疫功能具有实际意义。3.3日粮中添加不同免疫增强剂对肉仔鸡新城疫免疫抗体效价的影响抗体效价是反映机体体液免疫状态的直接指标之一[29]，也是机体抵抗外部病原微生物入侵的有效屏障。动物机体内，IgM是初次体液免疫应答最早产生的抗体；IgG是血清含量最高，是疫苗免疫后监测的主要抗体。王福厚等[30]研究表明，ASP、APS能够提高鸡ND抗体效价，延长高效价持续时间。枸杞对小鼠B细胞活性和血清IgG含量具有显著性提高作用[31]；LMS对IgA抗体具有促进生成作用，但对IgG抗体无促进生成功能[17]。本研究结果表明，AM和AS可以显著提高早期雏鸡的体液免疫功能，但当雏鸡免疫器官发育成熟或抗体形成后，对机体体液免疫无显著差异。LB组和LMS组对促进雏鸡早期体液免疫无显著影响。4结论本试验条件下，日粮中添加10 g/kg AM和AS，能够有效促进雏鸡早期生长发育，提高机体免疫功能。