饲料禁抗、无抗养殖使中草药在动物养殖的应用成为研究热点[1]。我国具有丰富的中草药资源，但中草药在动物养殖生产中的应用较为丰富[2-8]，如提高肉羊和肉牛生产性能[9-10]和治疗奶牛乳房炎[11-12]，但在改善奶牛泌乳性能、乳品质、血清生化指标中的应用研究很少。本试验选取黄芪、板蓝根、甘草、党参、山楂、当归，六味中草药制成复方制剂，以不同剂量添加在奶牛日粮中，研究复方中草药对奶牛泌乳性能、乳品质和血清指标的影响，探讨添加的最适剂量，为中草药在奶牛养殖生产中的研究和推广应用提供参考。1材料与方法1.1复方中草药制剂的制备黄芪、板蓝根、甘草、党参、山楂、当归置于37 ℃温箱烘干，粉碎，过200目筛，以2∶1∶1∶1∶1∶1比例混匀，分装于小袋密封保存。1.2试验动物成年荷斯坦奶牛由邯郸市肥乡区乳旺奶牛养殖专业合作社提供。1.3主要仪器Lactostar乳品分析仪购自德国Funke Gerber公司；4200A牛奶体细胞测定仪购自华诚睿光（北京）科技发展有限公司。1.4试验设计按照胎次、体重、泌乳期、产奶量均相近原则，选用健康荷斯坦奶牛60头，随机分成4组，每组3个重复，每个重复5头奶牛。对照组为基础日粮，基础日粮组成及营养水平见表1。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组依次在基础日粮中添加0.05%、0.10%、0.20%复方中草药制剂。各组奶牛每日饲喂3次，挤奶3次，定期消毒和驱虫，试验期30 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.10.004.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米青贮45.0泌乳净能/(MJ/kg)6.86玉米24.0粗蛋白/%16.19麸皮8.0钙/%1.24豆粕10.0磷/%0.69菜粕10.5磷酸氢钙0.5碳酸钙0.5食盐0.5预混料1.0注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 3 500 IU、VD 1 200 IU、VE 50 IU、Fe 40 mg、Zn 40 mg、Mn 30 mg、Cu 8 mg、Se 0.3 mg、Co 0.1 mg。2.营养水平中泌乳净能为计算值，其余均为实测值。1.5测定指标及方法1.5.1泌乳性能每日记录每头奶牛的饲料消耗量，计算平均日干物质采食量；每日记录每头奶牛的产奶量，计算平均日产奶量；平均日干物质采食量和平均日产奶量的比值即为料奶比。平均日干物质采食量=采食总量/试验天数(1)平均日产奶量=产奶总量/试验天数(2)料奶比=平均日干物质采食量/平均日产奶量(3)1.5.2乳品质试验结束，利用乳品分析仪测定每头奶牛乳样的乳脂率、乳糖率、乳蛋白率和乳干物质率；利用牛奶体细胞测定仪测定每头奶牛乳样的体细胞数。1.5.3血清指标1.5.3.1血清样品的采集与分离试验结束时，采集每头奶牛的血液2.0 mL，常规方法分离血清，-20 ℃保存。1.5.3.2血清指标利用试剂盒检测总蛋白（TP）、尿素氮（BUN）、甘油三酯（TG）含量及谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活性。利用试剂盒检测总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）含量。利用试剂盒检测免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。以上所用试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.6数据统计与分析试验数据采用SPSS 17.0软件进行统计与分析。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1复方中草药对奶牛泌乳性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，中草药组奶牛的平均日产奶量均显著提高（P0.05）；与对照组和Ⅰ组相比，Ⅱ组、Ⅲ组奶牛的平均日干物质采食量显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.10.004.T002表2复方中草药对奶牛泌乳性能的影响组别平均日干物质采食量/[kg/(头·d)]平均日产奶量/[kg/(头·d)]料奶比对照组18.91±0.68b19.26±0.64c0.98±0.03aⅠ组19.54±0.69b20.18±0.71b0.97±0.04abⅡ组20.47±0.75a21.74±1.31a0.94±0.03bⅢ组20.67±0.78a21.85±1.25a0.95±0.03ab注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2复方中草药对奶牛乳品质的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，中草药组牛奶中的乳蛋白率显著提高（P0.05），体细胞数显著降低（P0.05）；Ⅱ组、Ⅲ组牛奶中乳脂率均显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.10.004.T003表3复方中草药对奶牛乳品质的影响组别乳脂率/%乳糖率/%乳蛋白率/%乳干物质率/%体细胞数/(万个/mL)对照组3.80±0.16b4.87±0.183.24±0.09c11.84±0.8735.54±2.51cⅠ组3.95±0.19ab4.95±0.163.39±0.10b11.91±0.8432.51±2.47bⅡ组4.11±0.18a4.98±0.173.57±0.10a11.98±0.8529.67±2.41aⅢ组4.14±0.20a5.02±0.183.59±0.11a11.96±0.8929.44±2.52a2.3复方中草药对奶牛血清指标的影响2.3.1复方中草药对奶牛血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，中草药组奶牛血清的TP含量均显著提高（P0.05）。与对照组、Ⅰ组相比，试验Ⅱ组、Ⅲ组血清的BUN含量均显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.10.004.T004表4复方中草药对奶牛血清生化指标的影响组别TP/(μg/L)BUN/(mmol/L)TG/(mmol/L)ALT/(U/L)AST/(U/L)对照组90.25±1.25c7.24±0.48a0.38±0.0730.54±1.0241.21±0.85Ⅰ组93.54±1.47b7.15±0.47a0.38±0.0630.61±1.0141.56±0.84Ⅱ组98.52±2.14a6.41±0.41b0.41±0.0631.15±0.9741.67±0.76Ⅲ组98.74±1.98a6.34±0.43b0.42±0.0531.87±0.9441.64±0.812.3.2复方中草药对奶牛血清抗氧化指标的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，Ⅱ组、Ⅲ组奶牛血清的T-AOC、SOD活性均显著升高（P0.05），MDA含量均显著降低（P0.05）。与Ⅰ组相比，Ⅱ组、Ⅲ组血清的T-AOC均显著升高（P0.05）。各组奶牛血清的GSH-Px活性差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.10.004.T005表5复方中草药对奶牛血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)SOD/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)对照组8.12±0.54b14.25±0.94b312.41±10.143.51±0.32aⅠ组8.32±0.51b14.75±0.97ab315.24±11.243.22±0.37abⅡ组8.76±0.49a15.46±0.95a317.54±10.722.94±0.35bⅢ组8.74±0.47a15.54±0.87a320.51±11.412.91±0.31b2.3.3复方中草药对奶牛血清免疫指标的影响（见表6）由表6可知，与对照组相比，中草药组奶牛血清的IgG含量均显著提高（P0.05）；Ⅱ组、Ⅲ组奶牛血清的IL-2、TNF-α含量均显著升高（P0.05）；Ⅲ组奶牛血清的IgM含量显著提高（P0.05）。各组奶牛血清的IgA、IL-6含量差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.10.004.T006表6复方中草药对奶牛血清免疫指标的影响组别IgA/(g/L)IgG/(g/L)IgM/(g/L)IL-2/(ng/L)IL-6/(ng/L)TNF-α(ng/L)对照组0.15±0.041.72±0.08c1.05±0.06b105.62±1.78b112.56±2.5442.51±0.87bⅠ组0.17±0.041.84±0.07b1.09±0.07ab106.87±1.82b113.54±2.4442.85±0.77abⅡ组0.17±0.051.95±0.08a1.10±0.07ab108.54±1.85a114.52±2.3543.61±0.81aⅢ组0.19±0.061.98±0.08a1.13±0.06a108.75±1.75a114.32±2.4643.57±0.78a3讨论3.1复方中草药对奶牛泌乳性能和乳品质的影响本试验选择黄芪、板蓝根、甘草、党参、山楂、当归六味中草药，合理配伍制备复方中草药制剂。黄芪具有保肝利尿、增强免疫力的功效。板蓝根、甘草具有清热解毒、凉血利咽的功效。党参具有益肺健脾的功效。山楂具有促消化、提高胃肠运动的功效。当归具有补血、润肠、通便的功效。本试验结果表明，荷斯坦奶牛基础日粮中添加不同剂量的复方中草药制剂能够显著提高奶牛泌乳性能，改善乳品质；且随着中草药添加剂量增加，作用效果逐步增强；0.1%和0.2%添加剂量的作用效果未表现出显著性差异。原因可能为荷斯坦奶牛对复方中草药的需求量和吸收量均具有一个限值，超过这个限值的复方中草药很难被吸收。临床上中草药的添加量并不是越高越好，而是根据自身养殖条件、中草药的组方、纯度合理确定。3.2复方中草药对奶牛血清指标的影响妊娠、分娩、泌乳等内分泌生理的显著变化以及环境应激因素的影响，泌乳期奶牛的免疫力和抗病力下降，免疫功能降低，极易发生奶牛乳房炎等各种代谢性疾病。提高泌乳期奶牛的健康状况，降低动物疫病的发生率对保障奶牛养殖经济效益至关重要[13]。血清指标的检测具有血清样品采集制备方便、操作简单快速、检测成本低廉、检测敏感性高等优点，在动物健康状况评价中的应用越来越广泛[14-15]。血清中生化指标能够反映动物机体的健康状况，总蛋白（TP）直接体现蛋白质的吸收程度；谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）直接体现蛋白质的消化代谢；尿素氮（BUN）为蛋白质代谢的终产物，BUN含量越低，越有利于机体蛋白质的沉积[16]。动物机体的抗氧化功能可以抵抗氧化损伤，总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性能够抵抗外界的氧化应激，清除体内多余的自由基；丙二醛（MDA）为脂质过氧化反应的终产物，丙二醛（MDA）含量越低，动物机体抗氧化功能越强[17]。免疫球蛋白是B淋巴细胞增殖、分化为浆细胞而产生的一类具有抗体活性的球蛋白，主要包括IgA、IgG、IgM三大类。IgG是动物机体内含量最多的免疫球蛋白，具有抑菌、抗病毒等免疫活性；IgA含量仅次于IgG，具有部分抗体活性；IgM是动物机体产生最早的免疫球蛋白，具有激活补体等功能，动物机体内IgA、IgG、IgM三大类免疫球蛋白含量的变化在一定程度上体现机体的免疫功能[18-19]。细胞因子是由免疫细胞产生的一类高活性小分子多肽，IL-2和IL-6为多效性细胞因子，在机体的抗感染免疫反应中起重要作用；TNF-α是一种介导炎症反应的细胞因子，适当增加含量能够提高机体的抗感染能力[20-21]。本研究中，添加复方中草药能够改善奶牛的超氧化物歧化酶（SOD）活性、总抗氧化能力（T-AOC）、总蛋白（TP）、尿素氮（BUN）、、丙二醛（MDA）含量等，增加IgG、IgM等免疫球蛋白的含量及TNF-α等细胞因子指标，随着中草药添加剂量增加，其作用效果逐步增强。本研究中，随着复方中草药添加剂量的增加，乳品中体细胞数量逐步降低，表明复方中草药可以降低奶牛乳房炎等疫病发生率，提高奶牛的免疫力，提高奶牛的泌乳性能和乳品质。中草药能够改善泌乳性能、乳品质、血清指标，可能与其富含的多种活性物质有关，尤其是在预防奶牛乳房炎方面的作用，效果尤为突出[22]。4结论荷斯坦奶牛日粮中添加0.1%和0.2%的复方中草药制剂能够显著改善奶牛的泌乳性能、乳品质和血清指标，临床应用剂量选择添加0.10%。