早期断奶会导致仔猪产生断奶应激综合征，影响仔猪生长发育、机体免疫力及健康状况[1-2]。在断奶仔猪日粮中添加益生菌、植物多糖等添加剂改善断奶仔猪的生长性能成为目前研究的热点。研究发现，中草药添加剂可以促进动物肠道内有益益生菌的繁殖与代谢[3-4]。刘明生等[5]研究发现，在蛋鸡日粮中联合使用黄芪多糖（APS）和益生菌可以显著提高蛋鸡生产性能，改善机体抗体水平和抗氧化功能。吕鑫[6]和李亚杰[7]研究发现，在蛋鸡和肉鸡养殖中，与单独使用益生菌和APS相比，联合益生菌和APS对蛋鸡的生产性能及免疫功能的效果较好。张阳等[8-9]研究表明，在生长育肥猪日粮中联合使用复合益生菌和APS对育肥猪的生长性能及血液指标未产生互作效应，对育肥猪的免疫和抗氧化功能产生显著的互作效应。目前，关于复合益生菌与APS联合在断奶仔猪的养殖营养中的研究较少。因此，本试验以断奶仔猪为研究对象，探讨日粮中添加复合益生菌与APS对仔猪生长性能、腹泻率、免疫、抗氧化功能及血清生化指标的影响，为复合益生菌与APS联合在断奶仔猪养殖生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料复合益生菌由北京爱地科技有限公司提供，主要包含酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌，酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌有效活菌数均为5×108 CFU/g。APS由西安明泽生物科技有限公司提供，有效含量≥60%。1.2试验设计选取21日龄、体重（7.45±0.40）kg、公、母各半的断奶仔猪200头，随机分为4组，每组5个重复，每个重复10头猪，分别饲喂玉米-豆粕型基础日粮（对照组），基础日粮+0.3%复合益生菌（复合益生菌组），基础日粮+0.1%APS（APS组），基础日粮+0.3%复合益生菌+0.1%APS（复合益生菌+APS组）。试验时间为2021年7月3日至2021年8月6日，预试期7 d，正式试验期28 d。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.007.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米64.26消化能/(MJ/kg)13.47豆粕（44%）21.50粗蛋白/%18.39鱼粉4.50钙/%0.68麸皮（15%）5.00有效磷/%0.37豆油1.00赖氨酸/%0.95食盐0.30苏氨酸/%0.63DL-蛋氨酸0.25蛋氨酸＋半胱氨酸/%0.62L-赖氨酸（98%）0.40磷酸氢钙1.24石粉0.55预混料1.00注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 12 500 IU、VD3 3 000 IU、VE 30 IU、VK3 5.0 mg、生物素0.35 mg、叶酸0.50 mg、烟酸60 mg、铜40 mg、铁120 mg、锰20 mg、锌100 mg、碘0.15 mg、硒0.25 mg。2.营养水平中消化能为计算值，其余均为实测值。1.3饲养管理试验开始前对试验猪舍使用消毒剂全面消毒，通风晾干进行试验。预试验期间，所有断奶仔猪饲喂基础日粮。控制猪舍的温度、湿度、通风等环境条件。试验期间，断奶仔猪自由采食、饮水，免疫、驱虫等程序均按照猪场的日常管理进行。观察仔猪的健康、腹泻等情况。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验开始和结束前1 d，断奶仔猪禁食12 h，称重，计算断奶仔猪试验期间的平均日增重（ADG）；每日准确记录各组断奶仔猪的采食量，计算平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）；记录各组断奶仔猪的腹泻情况，计算仔猪腹泻率。平均日增重=(末重－试验)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)腹泻率=[总腹泻头数/(仔猪头数×试验天数)]×100%(4)1.4.2免疫指标试验第28 d，每组选取体重相近的断奶仔猪10头，颈静脉采血10 mL，4 000 r/min离心5 min，取上层血清-20 ℃保存，使用试剂盒（南京建成生物工程研究所）检测断奶仔猪免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量，检测方法参考试剂盒说明书。1.4.3抗氧化指标使用试剂盒（南京建成生物工程研究所）检测超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性以及丙二醛（MDA）含量、总抗氧化能力（T-AOC），检测方法参考试剂盒说明书。1.4.4血清生化指标使用试剂盒（北京卓越励新科学仪器有限责任公司）检测总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）含量及谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）活性，检测方法参考试剂盒说明书。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel 2020进行整理，采用SPSS 22统计软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以平均值和标准误表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1复合益生菌与APS对断奶仔猪生长性能及腹泻率的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，日粮中分别添加复合益生菌和APS，断奶仔猪的末重和平均日增重显著提高（P0.05），料重比、腹泻率显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.007.T002表2复合益生菌与APS对断奶仔猪生长性能及腹泻率的影响项目初重/kg末重/kgADG/[g/(头·d)]ADFI/[g/(头·d)]F/G腹泻率/%对照组7.4014.69260.00487.001.874.65复合益生菌组7.4515.16275.00491.001.751.41APS组7.3815.20279.00493.001.762.58复合益生菌+APS组7.5015.24276.00493.001.781.32SEM0.581.0210.0612.430.130.45P值复合益生菌组0.3190.0400.0440.6420.0210.005APS组0.4370.0350.0310.7310.0260.009复合益生菌×APS组0.3040.1040.2190.6600.1740.231注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2复合益生菌与APS对断奶仔猪免疫指标的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，断奶仔猪日粮中添加APS，断奶仔猪血清中IgG、IL-2含量显著提高（P0.05）；TNF-α含量显著降低（P0.05）；添加复合益生菌，断奶仔猪血清中的TNF-α含量显著降低（P0.05）。复合益生菌与APS对断奶仔猪血清TNF-α含量具有显著的交互作用（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.007.T003表3复合益生菌与APS对断奶仔猪免疫指标的影响项目IgA/(g/L)IgM/(g/L)IgG/(g/L)IL-2/(ng/L)IL-6/(ng/L)TNF-α/(ng/L)对照组1.270.283.29165.9348.76248.34a复合益生菌组1.300.343.50167.3045.21176.43bAPS组1.330.364.36197.0546.59165.05b复合益生菌+APS组1.350.324.23190.4344.69153.41bSEM0.100.050.528.433.219.47P值复合益生菌组0.2100.4510.5210.4200.5930.007APS组0.3610.3980.0350.0380.3190.004复合益生菌×APS组0.2780.3470.2150.1840.4200.0392.3复合益生菌与APS对仔猪血清抗氧化功能的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，日粮中添加复合益生菌，可以显著提高断奶仔猪血清中GSH-Px活性（P0.05）；日粮中添加APS可以显著降低断奶仔猪血清中MDA含量（P0.05），显著提高GSH-Px活性（P0.05）。复合益生菌与APS共同作用对断奶仔猪血清中的GSH-Px活性具有显著的交互作用（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.007.T004表4复合益生菌与APS对仔猪血清抗氧化功能的影响项目T-AOC/(U/mL)SOD/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)对照组5.2180.30539.04b3.31复合益生菌组5.4085.19610.28a3.28APS组5.4884.82602.94a2.73复合益生菌+APS组5.6086.03659.37a3.02SEM0.483.9213.040.28P值复合益生菌组0.2710.0980.0190.103APS组0.3700.1200.0100.042复合益生菌×APS组0.2660.4310.0230.1832.4复合益生菌与APS对仔猪血清生化指标的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，添加复合益生菌，断奶仔猪血清中AST活性显著提高（P0.05）；断奶仔猪日粮中添加APS能够显著提高断奶仔猪血清中ALB含量（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.007.T005表5复合益生菌与APS对仔猪血清生化指标的影响项目TP/(g/L)ALB/(g/L)BUN/(mmol/L)AST/(U/L)ALT/(U/L)LDH/(U/L)ALP/(U/L)GLU/(mmol/L)对照组55.6333.045.2442.0360.42236.08176.395.32复合益生菌组56.0535.384.8746.7261.63244.96183.285.51APS组56.4937.404.6244.2062.05242.03181.475.40复合益生菌+APS组56.3036.314.5347.8662.18245.37184.055.47SEM3.412.500.394.043.8210.206.380.52P值复合益生菌组0.4190.0790.1830.0440.3070.4850.5250.204APS组0.3980.0420.1320.4210.4170.8870.3810.361复合益生菌×APS0.5270.3190.1640.1060.3860.7310.4840.2833讨论3.1复合益生菌与APS对断奶仔猪生长性能及腹泻率的影响仔猪断奶产生的断奶应激综合征会影响断奶仔猪的生长与发育，提高腹泻率。本研究中，在断奶仔猪日粮中添加复合益生菌与APS均能够显著改善断奶仔猪的试验末重、平均日增重，降低料重比和腹泻率。研究表明，在断奶仔猪日粮中添加复合益生菌可以提高肠道内的有益菌数量，降低有害菌含量，调节肠道菌群结构，改善肠道健康，进而降低腹泻率[10]。APS能够提高动物的生长性能可能是因为APS具有明显的免疫调节功能，增强动物机体在应激状态下的免疫功能，通过增强机体的免疫力，促进机体生长发育[11]。张阳等[8]研究表明，在生长育肥猪的日粮中添加复合益生菌和APS，对生长性能各项指标未产生显著的互作效应。但岑路等[12]研究发现，在断奶仔猪日粮中使用复合益生菌与APS对仔猪生长性能具有很好的促进作用。可能是因为各试验使用的复合益生菌和APS使用剂量及动物生理阶段不同而导致试验结果不同。3.2复合益生菌与APS对断奶仔猪免疫指标的影响动物血液中的免疫球蛋白、抗炎因子、补体的含量能够机体的免疫功能。本研究中，断奶仔猪日粮中添加APS后，断奶仔猪血清中IgG、IL-2含量显著提高；TNF-α含量显著降低；添加复合益生菌后，断奶仔猪血清中的TNF-α含量极显著降低；且复合益生菌与APS对TNF-α具有显著的交互作用，说明复合益生菌与APS均能够调节断奶仔猪机体的免疫功能，提高机体抗病力。研究发现，在断奶仔猪日粮中添加复合益生菌可以增加肠道微生物的丰度及有益菌数量，下调TLR/MyD88/NF-κB信号通路的转录，降低肠道炎症的发生概率[13]。复合益生菌可以显著提高断奶仔猪血清中免疫球蛋白、抗炎因子及补体含量，提高断奶仔猪机体的免疫功能[14]。研究发现，黄芪多糖能够有效提高断奶仔猪体内淋巴细胞的转化率，增强细胞免疫功能，提高免疫力，促进生长发育[15]。张阳等[9]研究发现，在生长育肥猪日粮中联合添加复合益生菌与APS均能够显著提高机体的免疫功能，且二者对其细胞免疫、细胞因子调节具有显著的互作效应。因此，饲粮添加复合益生菌和APS可以提高抗炎因子与免疫球蛋白的含量，降低促炎因子含量，调节机体的免疫功能。3.3复合益生菌与APS对断奶仔猪抗氧化功能的影响仔猪断奶后，因日粮、环境等条件的改变，机体会产生严重的应激。当机体产生氧化应激时，机体会产生过多的自由基，不能及时清除，会破坏细胞膜的完整性，增加炎症反应，脂质过氧化物MDA含量增加，影响断奶仔猪的生长发育。本试验中，APS可以显著降低断奶仔猪血清中MDA含量；复合益生菌与APS联合可以显著提高GSH-Px活性。张阳等[9]研究表明，复合益生菌与APS对生长育肥猪血液中GSH-Px产生显著的互作效应。郭贝贝[16]研究发现，在舍饲山羊日粮中分别添加复合益生菌与APS均可以显著增强机体的抗氧化功能，但二者联合使用未产生显著的互作效果。益生菌主要通过提高动物机体内的抗氧化酶活性，降低活性氧自由基代谢物产量而提高机体的抗氧化功能[17]。3.4复合益生菌与APS对断奶仔猪血清生化指标的影响动物机体的血清生化指标可以反映机体的健康情况。血清中TP、ALB、BUN含量能够反映机体内蛋白质的合成与代谢的状态；AST和谷ALT活性可以反映肝功能状态。本试验中，APS能够显著提高断奶仔猪血清中ALB含量；复合益生菌能够显著提高AST活性。APS能够提高仔猪血清中ALB含量可能与免疫功能有关。曾秀玲等[18]研究发现，在断奶仔猪日粮中添加2.0‰和3.0‰的复合益生菌能够提高仔猪血清AST活性。王杰等[19]研究表明，在断奶仔猪日粮中添加0.3%的复合益生菌对血液总蛋白、白蛋白、球蛋白含量未产生显著的影响。甄玉国等[20]研究发现，在断奶仔猪日粮中添加200 mg/kg的APS可以显著提高血清中TP、ALB含量，增强AST、ALT和ALP的活性，降低血清BUN和GLU的含量。因此，复合益生菌与APS可以改善部分血清生化指标。4结论本试验中，复合益生菌和APS可以提高断奶仔猪生长性能，降低腹泻率，增强机体免疫力和抗氧化功能，改善血清AST活性和ALB含量；联合添加复合益生菌与APS可以对其血清TNF-α含量及GSH-Px活性产生显著的互作效果。