发酵饲料是以植物性原料副产物为底物，利用有益菌发酵生产含有益生菌及其代谢产物的饲料[1]。发酵作用能够将部分多糖、蛋白等复杂大分子物质降解成单糖、小肽等小分子物质，增加氨基酸含量能够产生大量有机酸、寡糖以及其他未知生长因子[2-3]。发酵作用产生的益生菌可以通过肠道占位保护、代谢产物抑菌等途径抑制病菌繁殖，调节肠道菌群结构；也可以刺激内源性消化酶的分泌、提高消化酶的活性，促进营养成分的吸收利用[4]。饲料经过有益菌的发酵，可以产生多种不饱和脂肪酸，明显改善饲料风味，提高动物采食量。研究表明，日粮中添加适量的发酵饲料能够改善蛋鸡的生产性能和蛋品质，提高养殖效益[5-6]。发酵饲料作为一种生态环保型饲料，对提高动物生产性能、降低养殖成本、保护生态环境等方面具有广阔的前景。因此，本试验以海兰褐蛋鸡为研究对象，分析日粮中添加发酵饲料对蛋鸡的生产性能、消化代谢、蛋品质、血清生化指标以及氮排泄的影响，为发酵饲料在蛋鸡生产上的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验所用“优肽”生物发酵饲料购自寿光百聚隆生物科技有限公司。粗蛋白（CP）含量为26.37%，水分含量为10.93%。发酵原料组成成分：糖渣、玉米粉、麸皮、糖蜜、豆粕。发酵菌种：乳酸乳杆菌、酿酒酵母，活菌数为10×108 CFU/g。发酵工艺：先液态酶解发酵，再固态发酵。1.2试验设计与饲养管理选取59周龄、健康状况、体重无显著差异的海兰褐商品蛋鸡810只，随机分为3组，每组6个重复，每个重复45只鸡。对照组蛋鸡饲喂基础日粮，试验组在基础日粮中分别添加40、60 g/kg的发酵饲料。试验期6 w。饲养温度控制在25 ℃左右，试验鸡自由采食和饮水。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.010.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100玉米63代谢能/(MJ/kg)11.28豆粕23粗蛋白质/%15.75豆油1粗脂肪/%3.17石粉8钙/%3.75预混料5总磷/%0.56非植酸磷/%0.25赖氨酸/%0.75蛋氨酸/%0.34注：1.预混料为每千克日粮提供：蛋氨酸1.8 g、食盐3 g、VA 8 100 IU、VD 2 700 IU、VE 24 mg、VK3 3 mg、VB1 2.4 mg、VB2 6 mg、D-泛酸钙7.8 mg、烟酰胺30 mg、VB6 3 mg、叶酸1.2 mg、VB12 0.003 mg、生物素0.12 mg、Cu 10.5 mg、Fe 56 mg、Zn 78 mg、Mn 81 mg、Se 0.42 mg、Co 0.42 mg、I 0.72 mg。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能以重复为单位，每天记录产蛋数、蛋重、软破蛋数、耗料量，计算平均日产蛋率、平均日采食量、料蛋比、破畸蛋率、平均蛋重。平均产蛋率=(产蛋总数/蛋鸡总数)×100%(1)平均蛋重=(产蛋蛋总重/产蛋总数)×100%(2)平均日采食量=总耗料量/(总蛋鸡数×试验天数)×100%(3)料蛋比=(耗料总重/产蛋总重)×100%(4)破畸蛋率=(每个重复的破蛋数/每个重复的产蛋数)×100%(5)1.3.2蛋品质试验结束，每组随机收集30枚鸡蛋，采用日立Robotmation EMT-5 200多功能蛋品质测试分析仪测定哈夫单位、蛋白高度、蛋黄颜色。使用游标卡尺测定并计算蛋壳厚度和蛋形指数。1.3.3养分表观消化率试验第40 d，每个重复随机选择3只蛋鸡，进行3 d全收粪法代谢试验。将排泄物中掉落的饲料、羽毛和皮屑清理干净，称重，混匀，向每千克鲜粪中加入10%稀硫酸100 mL固氮，混匀，-20 °C冷冻保存。65 ℃烘干至恒重，室内回潮24 h称重，粉碎过40目筛，测定粪样品中的干物质、粗蛋白、粗脂肪含量。1.3.4血清生化指标试验结束，各重复取2只接近平均体重的健康蛋鸡，空腹静脉采血，分离血清，采用日立7 600全自动生化分析仪测定血清中总蛋白、白蛋白、胆固醇含量和谷丙转氨酶活性。1.3.5鸡蛋成分试验结束，每个处理随机收集30枚正常鸡蛋。将鸡蛋打碎，放入培养皿，置于65 ℃烘箱烘干，粉碎为风干样品，测定干物质、粗蛋白、粗脂肪的含量。1.3.6氮排泄试验第40 d，每个重复单独随机收取10 g鲜粪，连续收集3 d。将掉落的饲料、羽毛和皮屑清理干净，滴加10%硫酸100 mL固氮，-20 ℃冷冻保存，测定含氮量。1.4数据统计与分析数据采用SAS 9.2软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1日粮中添加发酵饲料对蛋鸡生产性能的影响（见表2）由表2可知，蛋鸡日粮中添加发酵饲料后，试验蛋鸡的平均日采食量、平均蛋重、料蛋比、平均产蛋率均无显著差异（P0.05）。但与对照组相比，40和60 g/kg发酵饲料组有降低蛋鸡鸡蛋破畸形蛋率的趋势（P=0.064）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.010.T002表2日粮添加发酵饲料对蛋鸡生产性能的影响项目平均日采食量/[g/(只·d)]平均蛋重/(g/只)料蛋比破畸蛋率/%平均产蛋率/%P值0.2230.4570.9520.0640.978对照组126.75±1.9263.61±0.672.33±0.060.29±0.1685.64±2.7440 g/kg组126.14±2.2763.91±0.922.32±0.180.18±0.0585.20±2.8360 g/kg组126.68±2.8664.01±0.632.32±0.040.07±0.0985.40±2.95注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），无字母或相同字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2日粮中添加发酵饲料对蛋鸡的蛋品质影响（见表3）由表3可知，蛋鸡日粮中添加发酵饲料能够提高蛋黄颜色等级。与对照组相比，60 g/kg发酵饲料组鸡蛋的蛋黄颜色显著提高（P0.05）。各组鸡蛋蛋白高度、哈夫单位、蛋形指数、蛋壳强度、蛋黄比、蛋壳比、蛋壳厚度均无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.010.T003表3日粮添加发酵饲料对蛋鸡的蛋品质影响项目蛋白高度/mm蛋黄颜色哈夫单位蛋形指数蛋壳强度/N蛋黄比/%蛋壳比/%蛋壳厚度/mmP值0.2060.0330.3210.2040.2980.2610.1280.177对照组5.73±1.126.73±0.84b73.29±8.251.27±0.0239.07±8.0427.19±2.6511.02±0.940.38±0.0340 g/kg组5.75±0.777.14±0.39ab73.61±6.001.29±0.0235.75±8.5528.26±1.9010.54±0.540.39±0.0360 g/kg组6.26±1.187.29±0.75a76.61±8.311.28±0.0339.28±7.6427.22±2.3510.69±0.720.39±0.022.3日粮中添加发酵饲料对蛋鸡消化代谢的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，蛋鸡日粮中添加发酵饲料蛋鸡的干物质、粗脂肪、粗蛋白、钙、总磷的表观消化率均无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.010.T004表4日粮添加发酵饲料对蛋鸡消化代谢的影响项目干物质粗脂肪粗蛋白钙总磷P值0.1390.4320.9300.1140.371对照组78.76±0.3177.96±3.5652.54±3.3152.29±0.7049.11±1.9440 g/kg组77.98±0.1081.04±2.9351.35±2.4850.88±0.8949.40±1.2360 g/kg组74.32±4.2375.72±6.7253.08±8.8952.96±1.3750.73±0.70%2.4日粮中添加发酵料对产蛋鸡血清生化的影响（见表5）由表5可知，蛋鸡日粮中添加发酵饲料能够显著降低蛋鸡血清胆固醇含量（P0.05）。各组蛋鸡血清白蛋白、谷丙转氨酶水平以及血清钙、磷含量、碱性磷酸酶活性均无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.010.T005表5日粮添加发酵料对产蛋鸡血清生化的影响组别白蛋白/(g/L)总蛋白/(g/L)谷丙转氨酶/(U/L)胆固醇/(mmol/L)钙/(mmol/L)磷/(mmol/L)碱性磷酸酶/(U/L)P值0.2960.1160.2780.0010.8840.6550.513对照组5.50±1.3775.10±15.5015.10±1.084.70±1.29a4.46±0.421.54±0.09410.67±14.9840 g/kg组4.50±0.5476.72±7.8914.77±2.832.32±0.64b4.55±0.211.59±0.09392.33±46.0660 g/kg组5.00±1.0973.98±11.4512.58±3.852.58±0.48b4.40±0.391.60±0.07378.67±27.542.5日粮中添加发酵饲料对蛋鸡氮排泄的影响（见表6）由表6可知，蛋鸡日粮中添加发酵饲料能够降低鲜粪氮含量，60 g/kg组蛋鸡的鲜粪含氮量显著低于对照组（P0.05）。与对照组相比，40和60 g/kg组蛋鸡的鲜粪氮绝对排泄量显著低于对照组（P0.05），分别比对照组降低24.65%和36.11%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.010.T006表6日粮添加发酵饲料对蛋鸡氮排泄的影响项目鲜粪含氮量/%鲜粪氮绝对排泄量/(g/只)P值0.0120.000对照组1.46±0.47a2.88±0.01a40 g/kg组1.11±0.12a2.17±0.02b60 g/kg组0.62±0.20b1.84±0.04c2.6日粮中添加发酵饲料对鸡蛋营养成分的影响（见表7）由表7可知，蛋鸡日粮中添加60 g/kg发酵饲料，鸡蛋中干物质和粗蛋白含量显著高于对照组（P0.05）。各组鸡蛋粗灰分和粗脂肪含量无显著差异（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.06.010.T007表7日粮添加发酵饲料对鸡蛋营养成分的影响项目干物质粗灰分粗脂肪粗蛋白P值0.0280.5640.3750.009对照组90.18±0.55b2.89±0.3931.51±0.4145.50±0.97b40 g/kg组89.26±1.57b2.70±0.2533.20±0.5645.76±1.34b60 g/kg组93.84±2.21a2.98±0.4132.42±2.2547.99±2.28a%3讨论3.1日粮中添加发酵饲料对蛋鸡生产性能和消化代谢的影响饲料原料经过发酵，大量抗营养因子被消除，对调节肠道菌群平衡、维护肠道健康、提高肠绒毛的吸收功能具有积极作用[7]。发酵产生的活性代谢酶能够修复并增强肠道消化功能，有效促进营养利用率。发酵过程产生大量微生物菌体蛋白、氨基酸、活性小肽、有机酸、寡糖等活性成分，能够提高饲料的营养价值[8]。舒刚等[9]研究发现，肉鸡日粮添加发酵饲料具有增加肉鸡平均日增重的趋势。冯焱等[10]研究表明，海兰褐蛋鸡日粮中添加15% B. cereus发酵麦麸未对蛋鸡生产性能产生影响。邹永新等[11]在蛋鸡日粮中添加发酵饲料，结果发现，蛋鸡的平均蛋重显著提高，破蛋率明显降低。杨世红[12]研究发现，添加2.5%发酵麸皮和豆粕能够提高蛋鸡日产蛋量，降低料蛋比。夏圣奎等[13]研究发现，额外添加2.5%发酵饲料能够降低次蛋率以及死淘率。本试验发现，蛋鸡日粮分别添加40和60 g/kg的发酵饲料，蛋鸡的平均产蛋率、平均蛋重、料蛋比间无明显差异，说明日粮添加发酵饲料对蛋鸡生产性能无影响。饲喂蛋鸡发酵饲料有降低破蛋率的趋势，原因可能是发酵产生的有机酸和寡糖促进肠道对钙、磷等矿物元素的吸收以及在蛋壳中的沉积。发酵作用能够将饲料原料中的大分子蛋白质降解为小肽等易于被消化吸收的物质，提高微生物活性，产生乳酸、乙酸等大量有机酸从而提高水解酶活性，进而提高发酵饲料中营养成分的利用率。Chang等[14]研究表明，饲喂蛋鸡发酵饲料后，可提高粗蛋白和粗脂肪的表观消化率。柯祥军等[15]研究发现，饲喂肉仔鸡10%发酵豆粕，粗蛋白的消化率显著提高12.20%。研究表明，日粮中添加发酵饲料对营养物质的消化率无显著影响[16]，与本研究结果一致。本试验中，不同处理组间的粗蛋白、粗脂肪、干物质、钙、总磷的表观消化率无显著差异。原因可能是发酵并不能将饲料原料中的抗营养因子、大分子蛋白质完全降解，也可能与试验动物的日龄、环境和饲养管理有关。3.2日粮中添加发酵饲料对蛋品质和鸡蛋成分的影响蛋品质的优劣直接影响蛋鸡养殖的利润，影响蛋品质的因素较多，除遗传、环境温度外，还受日粮的影响。蛋黄颜色是衡量蛋品质的重要指标，蛋黄颜色鲜艳更易受到消费者青睐。蛋黄色泽主要取决于类胡萝卜素在蛋黄中的沉积量。吴俊锋等[17]通过研究饲喂蛋鸡发酵饲料，结果发现，哈夫单位提高1.07%，蛋黄颜色提高37.2%。本试验结果表明，发酵饲料对蛋黄颜色具有显著改善作用，与上述研究结果一致。日粮中添加60 g/kg发酵饲料，能够显著提高鸡蛋的干物质和粗蛋白含量，原因是发酵过程产生大量有益微生物菌群及活性酶，可以增强肠腺分泌功能和肠绒毛的吸收功能，从而使蛋鸡对类胡萝卜素、维生素、蛋白质的吸收作用增强，进而提高蛋黄颜色和营养成分含量。蛋形指数、蛋黄比例和蛋壳比例无显著差异，可能是这些指标主要受遗传因素影响。3.3日粮中添加发酵饲料对蛋鸡血清生化指标的影响血清生化指标能够直接反映动物的生理健康水平和营养代谢状况。血清总蛋白包括白蛋白和球蛋白，血清总蛋白的浓度能够反映机体蛋白质代谢状态。谷丙转氨酶是检测肝功能的重要指标，当肝脏受损时谷丙转氨酶含量会升高。血清钙、磷含量以及碱性磷酸酶活性能够直接反映钙、磷代谢的状态。本试验中，血清白蛋白、总蛋白、钙、磷含量以及谷丙转氨酶、碱性磷酸酶活性均无显著差异，表明饲喂发酵饲料对蛋鸡的蛋白质分解代谢、钙与磷代谢以及肝脏健康不会造成负面作用。与李明艳[18]研究结果一致。血清TG含量直接关系到动物机体的脂肪沉积与分解能力，TG含量越高则脂肪的分解能力越弱[19]。彭箫等[20]研究发现，饲喂蛋鸡30 g/kg发酵饲料能够显著降低蛋鸡血清胆固醇含量。陈冬[19]饲喂蛋鸡10%红曲霉发酵饲料也得到相同结论。本试验结果表明，在蛋鸡日粮中添加40和60 g/kg的发酵饲料，血清胆固醇含量分别降低50.64%和45.11%，与上述研究结果一致。原因是发酵过程中，微生物产生脂肪酶，促进脂肪分解代谢，从而降低血清中胆固醇含量。3.4日粮中添加发酵饲料对蛋鸡氮排泄的影响近年来，畜禽粪便污染是造成环境污染问题的主要来源。发酵饲料属于环境友好型饲料，饲料中的益生菌能够产生多种消化酶对饲料进行预消化，提高饲料的消化吸收率，改善肠道菌群，维护肠道健康，降低粪尿中氮、磷和有害物质的排放量，进而达到减少环境污染的作用。吕月琴等[21]研究表明，微生物发酵饲料能够改善42周龄海兰褐蛋鸡的肠道微生态平衡，有效减少粪便氮磷排泄。赵玉娥[22]在常规饲料中添加微生物发酵饲料，结果显示，微生物发酵饲料能够明显改善蛋鸡的肠道微生态平衡，降低氮磷排泄率。本次研究结果发现，60 g/kg发酵组的鲜粪含氮量比对照组显著降低57.53%，日粮分别添加40和60 g/kg的发酵饲料，鲜粪氮绝对排泄量分别比对照组降低24.65%和36.11%，表明发酵饲料在降氮方面具有应用前景。4结论在蛋鸡日粮中添加发酵饲料能够提高蛋黄颜色等级，促进鸡蛋营养物质沉积，并且具有降氮的潜力，以60 g/kg的添加量比较适宜。