日粮中添加肽制品可以提高氨基酸利用率，减少疾病发生，有利于充分发挥动物生产性能，提高经济效益[1]。与游离氨基酸相比，动物机体对肽的吸收具有速度快、耗能低、吸收率高等优势。发酵虫草菌粉具有营养价值和药用价值，可以为机体提供营养物质，具有增强机体抵抗力、提高动物生产性能和产品品质等作用[2]，是生物发酵类绿色饲料添加剂，也是替代抗生素的研究方向之一。多酚枣粉作为一种绿色饲料添加剂，具有纯天然和多功能等特点。多酚枣粉除含有具有抗菌、抗氧化和抗毒素作用的多酚类物质外，还富含单宁酸和黄酮类物质。水解单宁酸具有抗腹泻、抗菌、抗氧化和抗毒素作用，作为替代抗生素的饲料添加剂在动物饲料中广泛应用。本试验利用功能肽、发酵虫草菌粉和多酚枣粉替代常规替抗组分，研究其对断奶仔猪生长性能、抗氧化和免疫功能的影响，为其作为饲料替抗产品的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料功能肽、发酵虫草菌粉和多酚枣粉由大北农饲料研究院提供。功能肽中的粗蛋白质含量为2.90%，4 530 Da活性肽含量为115 mg/kg。发酵虫草菌粉是一种虫草无性型真菌——地顶孢霉（Acremonium terricola），经过液体深层发酵工艺加工而成的一种虫草源真菌饲料添加剂。多酚枣粉是经过复合菌发酵处理和烘干粉碎后获得。1.2试验设计选取672头断奶日龄和断奶体重相近的“杜×长×大”三元杂交仔猪，随机分为4组，每组6个重复，每个重复28头仔猪。对照组仔猪饲喂基础日粮为玉米豆粕型日粮，参照美国NRC（1998）营养需要配制的颗粒状乳猪配合饲料。基础日粮组成及营养水平见表1。对照组和试验组仔猪每吨日粮中均含3 kg替抗组分。对照组为1 kg原替抗组分（植物精油、酸化剂和微生态制剂的复合替抗组合）和2 kg载体（玉米），功能肽组添加1 kg功能肽和2 kg载体，虫草菌粉组添加3 kg发酵虫草菌粉，多酚枣粉组添加2 kg多酚枣粉和1 kg载体。试验分组及添加剂用量见表2。仔猪定时饲喂，自由采食和饮水。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.007.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100玉米53消化能/(MJ/kg)14.21面粉13代谢能/(MJ/kg)13.54豆粕8净能/(MJ/kg)10.07发酵豆粕6粗蛋白质/%18.79膨化大豆6赖氨酸/%1.23乳清粉5可消化赖氨酸/%1.09鱼粉3蛋氨酸/%0.36预混料5蛋氨酸+半胱氨酸/%0.61苏氨酸/%0.69色氨酸/%0.18缬氨酸/%0.64注：1.预混料购自漳州大北农农牧科技有限公司。2.营养水平均为计算值。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.007.T002表2试验分组及添加剂用量组别原替抗组分功能肽虫草菌粉多酚枣粉玉米（载体）对照组10002功能肽组01002虫草菌粉组00300多酚枣粉组00021kg/t1.3饲养管理试验采用全封闭式猪舍，试验前对猪舍进行彻底清洗消毒。试验期间舍内温度保持在20~24 ℃，湿度控制在60%~70%。试验仔猪分栏饲养，塑料漏缝地板，不锈钢料槽，鸭嘴式饮水器，喂料少量多次。试验期间保持猪舍通风和清洁，按常规管理程序进行驱虫和免疫。1.4测定指标及方法1.4.1样品采集试验分为前期（1~15）d和后期（15~30）d两个阶段。每日下午补填料，称取每栏新增料袋的重量，标记。试验第14 d和29 d时每栏随机挑选1头仔猪前腔静脉采血5 mL，静置，3 000 r/min离心15 min，取上层血清，-20 ºC保存。1.4.2生长性能试验过程中每天统计每栏腹泻仔猪头数、死亡数和淘汰头数。在试验开始、第15和30 d时，以栏为单位称取仔猪重量，计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比。腹泻率=仔猪腹泻头次总和/(仔猪头数×试验天数)×100%(1)平均日增重=(末重-初重)/试验天数(2)平均日采食量=总采食量/试验天数(3)料重比=平均日采食量/平均日增重(4)1.4.3血清生化指标使用试剂盒（南京建成生物工程研究所）检测血清样品中免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、尿素（Urea）、丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性、总抗氧化能力（T-AOC），检测方法依据试剂盒的说明书进行。1.5数据统计与分析试验数据采用SAS 9.2统计软件GLM模型以ANOVA方法进行分析，Duncan's法进行多重比较。结果以平均值和标准误表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同添加剂对断奶仔猪生长性能的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，试验组仔猪的末重呈现提升趋势（P0.05）。多酚枣粉组仔猪的平均日增重优于其他三组的趋势（P0.05）。第0~15 d和16~30 d，多酚枣粉组仔猪的平均日采食量优于其他组。虫草菌粉组仔猪的料重比显著低于功能肽组（P0.05）。功能肽组仔猪的死亡数在各试验组中相对最少。与其他组相比，功能肽组仔猪的淘汰数和死淘率最低。第30 d，功能肽组仔猪的腹泻率低于其他组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.007.T003表3不同添加剂对断奶仔猪生长性能的影响项目对照组功能肽组虫草菌粉组多酚枣粉组SEM初重/kg9.009.038.998.980.28第15 d体重/kg13.2013.3113.1713.480.42第30 d 体重/kg22.1622.7422.6823.060.57第0~15 d平均日增重/[g/(头·d)]300.00306.00299.00322.0016.61平均日采食量/[g/(头·d)]417.00419.00420.00423.0026.85料重比1.391.371.411.310.07第16~30 d平均日增重/[g/(头·d)]560.00589.00594.00598.0018.16平均日采食量/[g/(头·d)]951.00923.00984.00977.0040.94料重比1.701.571.661.630.06第0~30 d平均日增重/[g/(头·d)]438.00457.00456.00469.0011.68平均日采食量/[g/(头·d)]705.00692.00729.00722.0027.72料重比1.61b1.51a1.60b1.54ab0.04试验仔猪/头167.00168.00168.00168.00—死亡仔猪/头0.000.001.002.00—淘汰仔猪/头5.003.007.0011.00—死淘率/%3.001.804.807.70—腹泻率/%—第1 w3.853.915.446.63—第30 d1.341.281.882.20—注：同行数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2不同添加剂对断奶仔猪抗氧化指标的影响（见表4）由表4可知，虫草菌粉组和多酚枣粉组仔猪血清的SOD活性显著高于功能肽组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.007.T004表4不同添加剂对断奶仔猪抗氧化指标的影响项目对照组功能肽组虫草菌粉组多酚枣粉组SEMSOD/(U/mL)78.85ab74.40b83.08a82.20a4.79MDA/(μmol/L)3.533.953.823.760.15T-AOC/(U/mL)9.819.6010.069.410.242.3不同添加剂对断奶仔猪免疫功能的影响（见表5）由表5可知，各组间仔猪血清的IgA和IgM含量差异不显著（P0.05）；虫草菌粉组仔猪血清的IgG含量显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.007.T005表5不同添加剂对断奶仔猪免疫功能的影响项目对照组功能肽组虫草菌粉组多酚枣粉组SEMUrea/(mmol/L)1.922.632.532.080.30IgA/(g/L)1.271.281.461.310.08IgG/(g/L)9.35b9.72ab10.62a9.93ab0.46IgM/(g/L)0.860.840.870.840.013讨论3.1不同添加剂对断奶仔猪生长性能的影响仔猪因肠道内尚未建立稳定的微生态系统，对外界刺激敏感，易受到各种应激因素的影响[3]。日粮抗原诱导肠道的过敏和损伤，临床表现为吸收不良、下痢和生长受阻。周学光等[4]研究表明，使用小肽能够提高断奶仔猪的平均日增重、平均日采食量，改善料重比。本试验中，饲喂0.1%功能肽的断奶仔猪在试验期间的腹泻率为1.28%，死淘率1.8%，与常规替抗组分相比，活性小肽具有低过敏原性、保护消化道、降低腹泻率的效果。与武艳军等[5]使用0.5%珠蛋白肽饲喂断奶仔猪，腹泻率降低52.1%的试验结果一致。说明0.1%功能肽替代常规替抗组分能够提高早期断奶仔猪生长性能，增强仔猪健康度。张美英等[6]提出，日粮中添加山楂多酚提取物能够显著降低肠道大肠杆菌的数量，促进乳酸杆菌等有益菌增殖，与本试验多酚枣粉组在仔猪腹泻率的试验结论有所差异。本试验中，功能肽组仔猪的料重比为1.51，低于对照组（常规替抗组分）、虫草菌粉组和多酚枣粉组，可能是由于动物机体对小肽吸收率要远高于游离氨基酸。小肽在动物营养代谢中占据着重要地位，蛋白质在消化道中的消化终产物往往大部分是小肽而非游离氨基酸，小肽能够完整地被吸收，并以二、三肽形式进入血液循环[7]。小肽通过有效刺激和诱导小肠绒毛刷状缘酶的活性上升，提高酶水解蛋白的能力，使机体对小肽的吸收加强，促进小肠消化功能，改善仔猪健康，提高生长性能[7-8]。因此，小肽对消化道发育未成熟，消化酶活性低的仔猪更具有应用价值。日粮中添加小肽可以使小肠绒毛高度增加，隐窝变浅，从而提高仔猪对营养物质的消化吸收，减轻仔猪腹泻[9]。3.2不同添加剂对断奶仔猪抗氧化指标的影响生物机体代谢过程中能够产生大量的超氧阴离子自由基，超氧阴离子自由基是一种强氧化剂，在体内不断产生，不断被清除，浓度在正常生理条件下处于动态平衡状态。一旦体内产生过多自由基或是机体清除自由基的能力下降，会引起体内自由基浓度增加，造成组织损伤而发生疾病[10]。SOD在清除自由基、修复氧化损伤和维持细胞结构方面起着重要作用。李新国等[11]研究表明，日粮中添加大米活性肽能够显著或极显著提高断奶仔猪血清中SOD和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。本试验中，添加0.1%功能肽对SOD活性并未产生显著影响，与上述研究出现差异的原因有待进一步探究。发酵虫草菌粉与天然虫草的化学成分和药理作用相似，活性成分虫草多糖、虫草素和虫草酸对免疫和抗氧化等具有促进作用。本试验中，添加虫草菌粉能够提高断奶仔猪血液中SOD活性。与孟兆丽等[12]研究蛹虫草多糖能够显著增强肝脏SOD和GSH-Px的活性，具有明显的抗氧化作用，效果优于维生素E的结论一致。植物多酚广泛存在于多种植物的不同部位，是一类具有抗氧化、抗癌、抗动脉硬化功能的物质[13]。植物单宁酸则是一组非常复杂的多酚类复合物，存在于多种植物中，根据其化学结构和性质可以分为缩合单宁酸、水解单宁酸和复杂单宁酸。多酚枣粉除含有具有抗菌、抗氧化合抗毒素作用的多酚类物质外，还富含单宁酸和黄酮类物质。水解单宁酸具有抗腹泻、抗菌、抗氧化和抗毒素作用。本试验中，添加多酚枣粉也能够提高断奶仔猪血清中SOD活性，说明日粮中添加虫草菌粉和多酚枣粉能够有效提高断奶仔猪中血清SOD活性，修复体内氧化损伤，在维持机体稳态方面具有一定效果。3.3不同添加剂对断奶仔猪免疫功能的影响免疫球蛋白G（IgG）是一类由浆细胞产生的具有抗体活性的球蛋白，在动物机体的体液免疫反应中发挥独特作用。IgG含量在动物机体抗感染过程中发挥决定性作用。本试验中，饲喂添加0.3%虫草菌粉的日粮能够显著提高血清中IgG含量，表明虫草菌粉能够提高断奶仔猪的抗感染力和机体免疫力。虫草多糖是免疫调节剂，能够促进淋巴细胞转化，激活吞噬细胞，增加血清IgG含量，提高免疫力，能够调节内分泌，增强机体对各种病原菌的抵抗力[14]。添加0.2%多酚枣粉能够显著增加IgG含量，主要是由于枣粉中除含有糖、蛋白质、氨基酸、膳食纤维等营养成分外，还含有大量的活性成分，如黄酮、多酚、皂苷等。研究表明，植物多酚提取物及多酚单体化合物具有免疫调节、抑菌、抗氧化、调节肠道菌群等多种功能活性，可以有效改善畜禽肠道微环境[15]。黄酮具有促进动物生长、提高动物免疫力、改善动物繁殖机能等作用。4结论饲粮中添加功能肽、虫草菌粉和多酚枣粉具有改善断奶仔猪生长性能的趋势；虫草菌粉能够提高机体的免疫球蛋白含量，增强仔猪机体免疫力。