噬菌体和抗菌肽是常见的抗生素替代品，具有杀菌作用。噬菌体是一种细菌病毒，由蛋白外壳和内部核酸构成，须寄生于活菌内才可完成复制增殖[1]。目前，噬菌体的有效性和安全性已得到证明[2]。抗菌肽是生物机体经外界诱导产生的一类具有免疫活性的小分子多肽，存在于生物体中，被称为宿主防御肽[3]。抗菌肽抑菌谱较宽，除病原菌，对寄生虫、包膜病毒等有一定的抑制作用，是畜牧领域较为广泛的替抗品[4-7]。广西麻鸡的肉质鲜美、营养价值高，具有耐粗饲、觅食能力强等优点[8-9]。文章通过给广西麻鸡饲喂不同水平的噬菌体、抗菌肽以及两者的复合制剂，测定麻鸡的生长性能、盲肠菌群和血清免疫等指标，以期为噬菌体和抗菌肽在广西麻鸡中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验所使用的噬菌体产品购自青岛诺安百特生物技术有限公司，有效成分为禽大肠杆菌噬菌体、禽沙门氏菌噬菌体和禽魏氏梭菌噬菌体复合制剂，产品中噬菌体总效价为：10亿PFU/g，简称NAYK。抗菌肽产品购自林州中农颖肽生物肽有限公司，简称AMP。广西麻鸡购自购自广西富凤农牧集团有限公司。1.2试验设计试验选取1 050只35日龄健康、体重接近的广西麻鸡，随机分为7组，每组5个重复，每个重复30只鸡，试验周为35 d。试验时间为2021年11月2日至2021年12月6日。试验采用单因素完全随机设计，试验设计见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.07.024.T001表1试验设计组别日粮对照组基础日粮试验组1基础日粮+300 mg/kg噬菌体试验组2基础日粮+300 mg/kg抗菌肽试验组3基础日粮+300 mg/kg噬菌体+300 mg/kg抗菌肽试验组4基础日粮+150 mg/kg噬菌体+150 mg/kg抗菌肽试验组5基础日粮+100 mg/kg噬菌体+100 mg/kg抗菌肽试验组6基础日粮+50 mg/kg噬菌体+50 mg/kg抗菌肽试验麻鸡在独立鸡舍饲养，阳光充足，通风良好，环境安静。试验期间所有麻鸡均自由饮水和采食，免疫等按正常饲养管理程序进行。各组麻鸡均饲喂基础日粮，基础日粮组成及营养水平见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.07.024.T002表2基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米66.5代谢能/(MJ/kg)13.65豆粕18.5粗蛋白/%16.15菜粕3.0钙/%0.72油5.0有效磷/%0.39石粉1.2蛋氨酸/%0.81磷酸氢钙1.3赖氨酸/%0.33麸皮2.2食盐0.3预混料2.0注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 15 000 IU、VD3 3 000 IU、VE 50 mg、VK 10 mg、VB1 5 mg、VB2 8 mg、VB6 5 mg、VB12 120 mg、泛酸 30 mg、烟酸55 mg、叶酸2 mg、胆碱5 000 mg、钙160 mg、铁80 mg、铜8 mg、碘0.5 mg、锰60 mg、硒0.15 mg。2.营养水平中粗蛋白、钙、磷为实测值，其余均为计算值。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能及腹泻率、死淘率测定和计算各组的平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）、料重比（F/G）、腹泻率和死淘率等数据，计算方法和公式按苗旭等[10]方法进行。1.3.2肠道菌群试验结束取盲肠内容物测定微生物（乳酸杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌）的数量，参考刘风美等[11]方法进行。1.3.3免疫指标试验结束，按照刘凤美等[11]方法测定免疫器官的胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）含量。1.4数据统计与分析试验数据采用Excel 2016初步整理，SPSS 17.0软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1NAYK与AMP对广西麻鸡生长性能、腹泻率和死淘率的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，试验组1、试验组3、试验组4和试验组5麻鸡的平均日增重分别显著提高5.06%、5.36%、5.31%和4.91%（P0.05）；试验组1~试验组5麻鸡的料重比分别显著降低4.20%、3.43%、4.96%、4.20%和3.82%（P0.05）；各试验组麻鸡的腹泻率与死淘率均显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.07.024.T003表3NAYK与AMP对广西麻鸡生长性能、腹泻率和死淘率的影响组别初重/g末重/g平均日采食量/[g/(只·d)]平均日增重/[g/(只·d)]料重比腹泻率/%死淘率/%对照组440.25±22.171 145.85±50.56c52.81±12.1320.16±3.33b2.62a23.33a8.67a试验组1439.51±17.661 180.81±45.53ab53.06±10.2821.18±3.15a2.51b4.00c5.33bc试验组2435.37±21.261 167.26±55.13bc52.90±10.3520.91±3.18ab2.53b4.67c6.00b试验组3441.69±23.781 185.15±39.19a52.89±11.5221.24±1.56a2.49b3.33c4.00c试验组4437.19±20.211 180.29±61.14a53.29±13.1821.23±2.79a2.51b4.00c4.67c试验组5433.96±15.201 174.37±51.77ab53.30±13.0121.15±3.87a2.52b4.67c4.67c试验组6437.22±17.681 165.75±65.28bc53.32±12.6720.83±2.96ab2.56ab9.33b6.67b注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示无显著差异（P0.05）；下表同。2.2NAYK与AMP对广西麻鸡肠道菌群的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，试验组麻鸡的乳酸菌数量均显著提高（P0.05），试验组1、试验组3、试验组4和试验组5活菌数提高近10倍；试验组麻鸡的肠道大肠杆菌数和沙门氏菌数量均显著下降（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.07.024.T004表4NAYK与AMP对麻鸡肠道菌群的影响组别乳酸杆菌大肠杆菌沙门氏菌对照组6.75±0.22e7.87±0.22a4.79±0.22a试验组17.88±0.17b6.56±0.17d3.58±0.17d试验组27.06±0.13d6.95±0.21c3.77±0.15c试验组38.13±0.15a6.28±0.13e3.50±0.16d试验组47.92±0.18ab6.47±0.15e3.59±0.09d试验组57.67±0.21c6.73±0.18d3.91±0.18c试验组67.19±0.19d7.51±0.17b4.57±0.15blgCFU/g2.3NAYK与AMP对广西麻鸡免疫功能的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，试验组1~试验组5麻鸡的胸腺指数分别显著提高23.53%、17.65%、27.45%、21.57%和13.73%（P0.05）；试验组1~试验组5麻鸡的脾脏指数分别显著提高22.22%、11.11%、38.89%、16.67%、11.11%（P0.05）；各试验组麻鸡的法氏囊指数分别显著提高43.75%、31.25%、56.25%、43.75%、31.25%和12.5%（P0.05）；各试验组麻鸡血清的IgG含量分别显著提高33.81%、30.59%、49.86%、40.67%、25.71%和8.10%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.07.024.T005表5NAYK与AMP对广西麻鸡免疫功能的影响组别胸腺指数脾脏指数法氏囊指数IgA/(g/L)IgG/(g/L)IgM/(g/L)对照组0.51±0.06d0.18±0.03d0.16±0.03f0.437±0.0222.112±0.213f0.495±0.012试验组10.63±0.03ab0.22±0.03b0.23±0.01b0.451±0.0172.826±0.165bc0.506±0.017试验组20.60±0.08bc0.20±0.01c0.21±0.03c0.443±0.0252.758±0.279cd0.508±0.015试验组30.65±0.04a0.25±0.02a0.25±0.02a0.450±0.0283.165±0.185a0.517±0.018试验组40.62±0.05b0.21±0.02bc0.23±0.01b0.447±0.0152.971±0.206b0.513±0.020试验组50.58±0.06c0.20±0.02c0.21±0.03c0.443±0.0162.655±0.237d0.505±0.023试验组60.53±0.03d0.19±0.01d0.18±0.02e0.441±0.0232.283±0.188e0.501±0.0193讨论3.1NAYK与AMP对麻鸡生长性能的影响本试验表明，添加噬菌体、抗菌肽以及噬菌体和抗菌肽的复合制剂，均对料重比、腹泻率和死淘率具有明显的改善作用，与宋琼莉等[12]和张凯瑛[13]研究结果相似。噬菌体可以有效裂解对应的宿主菌[14-15]，对肠道有益菌的生长有益。抗菌肽具有改善肠道菌群结构的作用[16-17]，从而提高动物的饲料转化率[18]。本试验中，同等剂量噬菌体（试验组1）和抗菌肽（试验组2）相比，噬菌体改善对动物生长性能效果更明显，但两者差异性不显著。噬菌体与抗菌肽组合的效果更好。所有两者组合配方（试验组3、试验组4、试验组5和试验组6）中，试验组5的改善效果较好、性价比较高；试验组6成本更低，但效果表现相对较差。3.2NAYK与AMP对麻鸡肠道菌群的影响肠道是动物的主要消化吸收场所，也是机体最大的免疫器官。肠道中含有丰富的微生物群，当肠道中微生物菌群处于动态平衡时，对动物健康非常有意义[19]。但是一旦平衡打破，常伴随疾病的发生，严重者甚至导致死亡[20]。动物肠道中的菌群根据对宿主的作用可以分为有益菌、有害菌和条件致病菌。菌群多黏附于肠道后段，特别是盲肠和直肠内[21]。本试验选用的噬菌体，包含大肠杆菌噬菌体、沙门氏菌噬菌体和魏氏梭菌噬菌体，对大肠杆菌和沙门氏菌有直接的裂解作用；使用的抗菌肽是一类抗革兰氏阴性菌的抗菌肽，对大肠杆菌和沙门氏菌有杀菌作用。本试验中，使用噬菌体、抗菌肽或噬菌体与抗菌肽的复合制剂后，试验鸡的大肠杆菌和沙门氏菌数量显著降低，乳酸杆菌显著提高，与张灿等[14]、卢国民等[15]、丁修良等[22]研究结果相似。研究表明，本试验使用的噬菌体和抗菌肽均能够耐受胃酸和胆盐、耐受酶类裂解，顺利到达动物肠道，发挥功效。3.3NAYK与AMP对麻鸡免疫功能的影响噬菌体和抗菌肽均对提高机体免疫力有积极作用[23-24]。胸腺、脾脏和法氏囊分别是家禽的重要免疫器官，能够反映机体的免疫水平，免疫器官指数提高，在一定程度上说明机体免疫功能增强[25]。本试验中，试验组的胸腺指数和脾脏指数比对照组均有所提高，试验组法氏囊指数均显著高于对照组，与丁修良等[22]的研究结果相似，与林盛裕等[26]和陆海英等[27]在植物提取物上的研究结果相近。IgA、IgG和IgM是动物体液免疫的主要指标，IgA、IgG和IgM含量在合理范围内提高，则动物体内抗体水平高、免疫力强[28]。本试验中，试验组麻鸡血清的IgA和IgM含量比对照组均有所提高；IgG含量显著高于对照组。结合免疫器官指数的数据分析，加入一定水平的噬菌体或抗菌肽后，麻鸡的免疫功能提高，与葛洪伟等[29]在中草药的研究结果相近。噬菌体和抗菌肽均能够改变动物肠道菌群，在机体内引起免疫应答，可能是提高免疫器官指数和IgG含量的原因。4结论在广西麻鸡的日粮中添加噬菌体、抗菌肽或噬菌体与抗菌肽的复合制剂可提高机体消化吸收率，降低料重比，降低肉鸡的腹泻率和死淘率；降低肠道中的大肠杆菌和沙门氏菌数量，提高乳酸杆菌含量；对免疫器官的发育及改善体液免疫水平均具有较好的效果。推荐使用100 g/t的噬菌体+100 g/t的抗菌肽组合。