禁抗政策的实施，给畜禽养殖带来挑战[1-2]，给绿色、高效、健康、安全的抗生素替代品带来机遇。天然植物提取物具有安全、无毒副作用、无残留、能够提高饲料利用效率等优点[3-5]。目前允许使用的天然植物饲料原料达117种。蒲公英含有蛋白质、脂肪酸、维生素等常规物质，还含有黄酮类、酚酸类、多糖类等功能性物质[6]，能够提高动物生长性能[7-8]，清除机体内自由基，抑制酪氨酸酶活性，减少自身机体损伤，抑制巨噬细胞系中的肿瘤坏死因子和其他细胞炎症因子的分泌，起抗氧化、抗炎的作用[9]。甘草含有甘草三萜类、甘草黄酮类及甘草多糖类等化合物，具有抗炎、抗氧化、抗病毒等多种生物学作用[10-11]，能够显著改善动物的生产性能，维持动物肠道健康，提高抗应激和抗病能力[12-18]。甘草提取物中甘草酸作为一种应用较广的甜味剂，能够改善饲料的适口性，增加动物食欲[19]，具有促生长、抗氧化、抗炎等作用。肖传明等[20-21]研究发现，添加蒲公英和甘草植物提取物能够提高肉鸡和黄颡鱼的饲料消化率和生长效率。目前，尚无上述植物提取物在断奶仔猪方面的报道。本试验在仔猪日粮中添加蒲公英、甘草天然植物提取物，研究其对断奶仔猪生长性能、血清生化指标、抗氧化能力及免疫功能的影响，以期为天然植物提取物在养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验设计选取810头日龄胎次相近、体重约7 kg的健康“长白×大白”杂交的断奶仔猪，随机分成空白组、对照组和试验组，每组5个重复，每个重复54头猪。试验在北京二商大红门赤城生猪养殖基地进行，试验期35 d，预试期3 d，正式试验期32 d。空白组仔猪饲喂基础日粮，对照组在基础日粮的基础上添加吉他霉素53.2 mg/kg+杆菌肽锌39.2 mg/kg，试验组在基础日粮的基础上添加500 g/t天然植物提取物（蒲公英和甘草，含量为70%）。天然植物提取物购自北京康华远景科技股份有限公司。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.010.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成/%含量营养水平合计100.00玉米63.00粗蛋白质/%18.62麸皮4.00钙/%0.71豆粕（46%）21.50有效磷/%0.30鱼粉3.50赖氨酸/%0.98乳清粉4.00消化能/(MJ/kg)13.38预混料4.00注：1.每千克预混料为日粮提供：VA 220 000~400 000 IU、VD3 25 000~28 000 IU、VE 2 000~3 500 IU、VK3 60 mg、VB2 560 mg、VB6 240 mg、烟酰胺1 600 mg、泛酸钙1 200 mg、生物素10 mg、赖氨酸≥20.0 g、氯化钠≥45 g、铜0.2~3.0 g、铁1.5~10.5 g、锌1.0~2.7 g、锰0.3~1.0 g、磷12~62 g、钙20~125 g、碘12~20 mg、硒2.5~5.0 mg。2.营养水平粗蛋白为实测值，其余均为计算值。1.2饲养管理试验前对猪舍进行彻底清扫和消毒，仔猪自由采食与饮水，每日按时打扫舍内卫生，清理料槽，防疫按猪场防疫管理规程进行。每日记录观察猪的粪便、精神状态和采食量。试验开始和试验结束前空腹12 h称重。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验开始和结束时测定各组的体重，统计每栏试验猪的总投料量，计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。平均日增重=(末重-初重)/(试验天数×头数)(1)平均日采食量=总投料量/头数×试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)腹泻率=腹泻仔猪总次数/(试验仔猪总数量×试验天数)×100%(4)1.3.2血清生化指标、抗氧化能力及免疫功能试验结束空腹采血5~10 mL。静置2 h，3 000 r/min离心10 min，取上层血清，-20 ℃保存。使用试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL）、血清尿素氮（BUN）含量、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）活性。使用试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）含量以及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性。使用试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定白介素-4（IL-4）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-β（TNF-β）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）含量。测定方法均参照说明书步骤进行。1.4数据统计与分析试验数据采用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析（One-way ANOVA），Duncan's法进行多重检验。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1天然植物提取物对断奶仔猪生长性能的影响（见表2）由表2可知，各组仔猪的平均日增重、平均日采食量和料重比差异均不显著（P0.05）。但试验组和对照组均有提高断奶仔猪生长性能的趋势；与空白组相比，试验组断奶仔猪平均日增重提高5.9%，料重比降低3.9%（P0.05）；对照组断奶仔猪平均日增重提高3.0%，料重比降低2.7%（P0.05）。对照组和试验组仔猪的腹泻率显著低于空白组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.010.T002表2天然植物提取物对断奶仔猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/[kg/(头·d)]平均日采食量/[kg/(头·d)]料重比腹泻率/%空白组6.98±0.0517.16±0.470.32±0.020.59±0.051.87±0.133.41±0.17a对照组6.97±0.0417.58±0.270.33±0.010.60±0.031.82±0.072.46±0.25b试验组7.08±0.1318.07±0.820.34±0.030.62±0.041.80±0.102.07±0.30b注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2天然植物提取物对断奶仔猪血清生化指标的影响（见表3）由表3可知，试验组的仔猪的血清ALB和HDL含量均显著高于空白组（P0.05），TC含量显著低于空白组（P0.05）；对照组、试验组仔猪的BUN含量均显著低于空白组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.010.T003表3天然植物提取物对断奶仔猪血清生化指标的影响组别TP/(g/L)ALB/(g/L)TC/(mmol/L)TG/(mmol/L)BUN/(mmol/L)ALP/(U/L)AST/(U/L)ALT/(U/L)HDL/(mmol/L)LDL/(mmol/L)空白组74.08±3.2234.47±2.76b2.03±0.04a0.60±0.035.45±0.98a341.88±19.6267.87±4.2223.30±1.681.94±0.05b1.32±0.12对照组76.04±3.2036.38±1.88ab1.98±0.08ab0.59±0.024.01±0.45b366.28±27.1172.93±3.4123.82±1.891.96±0.03ab1.31±0.07试验组78.43±2.7138.79±1.67a1.92±0.03b0.59±0.023.38±0.31b330.15±21.9972.46±2.1023.76±1.911.99±0.03a1.28±0.06各组仔猪血清的TP、TG、LDL含量以及ALP、AST、ALT的活性差异不显著（P0.05）。2.3天然植物提取物对断奶仔猪抗氧化能力的影响（见表4）由表4可知，试验组仔猪的GSH-Px、T-SOD的活性以及T-AOC均显著高于空白组和对照组（P0.05），空白组和对照组间差异不显著（P0.05）。试验组仔猪的MDA含量显著低于空白组和对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.010.T004表4天然植物提取物对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)MDA/(μmol/L)GSH-Px/(U/mL)T-SOD/(U/mL)空白组7.30±0.37b5.13±0.18a824.18±6.27b126.98±5.40b对照组7.33±0.39b5.06±0.16a831.84±8.53b128.77±6.78b试验组8.63±0.18a4.23±0.16b867.23±11.08a149.10±5.25a2.4天然植物提取物对断奶仔猪血清免疫指标的影响（见表5）由表5可知，试验组和对照组仔猪血清中IL-4含量显著高于空白组（P0.05）。各组仔猪血清中IgG、IgM、IgA、IL-6和TNF-β含量差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.010.T005表5天然植物提取物对断奶仔猪血清免疫性能的影响组别IgG/(g/L)IgM/(g/L)IgA/(g/L)IL-4/(ng/L)IL-6/(ng/L)TNF-β/(ng/L)空白组18.30±0.941.78±0.071.00±0.0712.85±0.70b119.57±7.4538.30±2.16对照组18.20±0.681.79±0.050.99±0.0714.49±0.80a127 .40±5.2040.68±3.27试验组18.28±0.451.81±0.030.98±0.0514.27±10.94a129.09±10.8041.27±2.373讨论3.1天然植物提取物对断奶仔猪生长性能的影响仔猪在断奶时免疫功能和消化功能等方面均未发育完善，易产生应激反应，引起腹泻，甚至出现体重下降的现象。养殖过程中，通常会在断奶仔猪饲料中添加一定量的功能性饲料添加剂增强机体抵抗力，缓解断奶应激。近年来，随着我国饲料中禁止抗生素的使用，天然植物提取物在替代抗生素方面的研究已取得很好效果。本试验中，添加蒲公英和甘草的试验组和添加抗生素的对照组可显著降低仔猪的腹泻率，说明蒲公英和甘草提取物在降低仔猪腹泻方面具有和抗生素类似的效果，可能是由于蒲公英可以促进胃及十二指肠的收缩，提高胃肠动力，从而保护胃肠道[22]。在小鼠胃肠推进运动试验中发现，齐墩果酸和阿魏酸是蒲公英中提高胃肠道动力的有效成分[23]，能够保护动物体胃肠道，减少腹泻发生。王留等[24]和Zhao等[25]研究发现，分别在饮水中添加的蒲公英水提物和饲粮中添加蒲公英提取物均显著降低断奶仔猪腹泻率。Zhao等[25]研究发现，在饲料中添加蒲公英提取物对断奶仔猪生长性能无显著影响。张才等[26]研究发现，日粮中添加1.0%的甘草多糖能够提高哺乳仔猪的生长性能。本试验结果显示，空白组、对照组和试验组在生长性能方面无显著差异，但对照组和试验组均有提高生长性能的趋势，对照组和试验组的平均日增重分别比空白组提高3.0%、5.9%，料重比分别比空白组降低2.7%、3.9%，可能是由于在蒲公英降低腹泻的基础上，甘草提取物中甘草酸和甘草次酸等有益物质，改善饲料的适口性，调节食欲，提高营养物质消化率，提高生产性能[19,27-31]。3.2天然植物提取物对断奶仔猪血清生化指标的影响血清生化指标不仅反映了动物体对营养物质的消化吸收及代谢功能，还能够间接反映动物机体的健康状况。总蛋白、白蛋白、尿素氮含量与机体蛋白质的吸收和代谢状况高度相关，机体在蛋白质代谢良好的情况下，总蛋白、白蛋白含量会升高，血液中尿素氮含量会降低[32]。总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇与体内脂质代谢有关，高密度脂蛋白胆固醇可以将肝脏外的胆固醇转移到肝脏内代谢，降低血液中的胆固醇含量，维持机体健康，低密度脂蛋白胆固醇的作用与高密度脂蛋白胆固醇相反[33]。本试验结果表明，试验组仔猪血清中白蛋白和高密度脂蛋白胆固醇的含量均显著高于空白组，血清尿素氮和总胆固醇的含量均显著低于空白组，但与对照组无显著性差异，说明蒲公英、甘草天然植物提取物和抗生素均可以提高断奶仔猪对蛋白和脂肪的利用率，促进自身蛋白质合成，提高生长性能。3.3天然植物提取物对断奶仔猪血清抗氧化性能的影响当机体发生氧化应激时，体内自由基的含量增加，自由基与脂质发生过氧化反应，产生具有细胞毒性的MDA，SOD、GSH-Px等重要抗氧化酶，能够清除体内的自由基使机体恢复到正常的生理状态[34]。本试验中，试验组仔猪血清中T-AOC以及GSH-Px和T-SOD的活性均显著高于对照组和空白组，MDA哈量显著低于对照组和空白组，可能是由于蒲公英和甘草中黄酮类、多酚类物质的抗氧化作用。其作用机制是直接猝灭自由基阻断机体新自由基的产生、增加抗氧化活性物质的数量等[16,35-36]，与段明房等[37]对生长猪的研究和王晓玲[38]对母猪的研究结果均相似。3.4天然植物提取物对断奶仔猪免疫性能的影响细胞因子和免疫球蛋白在免疫调节中起到重要作用。白介素在白细胞或免疫细胞间起到信息传递的作用，能够调节免疫细胞产生免疫球蛋白[39-40]。免疫球蛋白是体内具有抗体活性的蛋白质，能够与抗原结合，降低机体的损伤，在炎症反应中起重要作用。本研究表明，与空白组相比，试验组和对照组血清中IL-4的含量显著提高；各组IL-6和IgG、IgA、IgM含量则无显著差异。段明房等[37]研究发现，日粮中添加蒲公英和鱼腥草复合物提高生长猪血清中白介素-4、白介素-6和IgM免疫球蛋白的含量，可能是由于天然植物种类不同或猪的生长阶段不同。4结论日粮中添加500 g/t蒲公英和甘草为主要成分的天然植物提取物（有效成分为70%）能够提高断奶仔猪免疫性能和抗氧化能力，改善血清生化指标，提高生长性能。