植物提取物富含生物活性物质(激素样物质和维生素样物质),可以补充、完善日粮的营养成分,改善动物体重[1-2]。大多生物活性物质具有抗菌性和刺激性,能够调动畜禽消化系统的活跃性,有效杀灭肠道微生物,提升机体的消化吸收能力,确保微生态环境稳定,从而提高畜禽的生产性能[3]。郭丹丹等[4]研究发现,在断奶仔猪基础日粮添加黄芩、黄芪、金银花提取物,能够显著提高断奶仔猪日增重,有效降低料重比和腹泻率,提高生产性能,增加经济效益。植物提取物能够促进畜禽肠道有益菌的活力,抑制有害菌的繁殖。原因是植物提取物中含有多糖类、生物碱、黄酮类、酚类等物质,能够帮助畜禽维持肠道微生物平衡[5]。周艳[6]研究发现,杜仲提取物(含多糖、有机酸、黄酮等成分)能够显著增加仔猪肠道中有益菌数量、降低大肠杆菌扩散速率、减少发病率。孙波等[7]研究发现,黄芪多糖能够增加免疫抑制肉鸡肠道中乳酸杆菌、双歧杆菌的数量,降低大肠杆菌、沙门氏菌的数量,调节肉鸡肠道的微生态平衡。纪丽丽等[8]研究发现,0.1%金花菊、大蒜素、百里香提取物能够显著降低肉鸡回肠内容物中大肠杆菌和乳酸杆菌的含量。目前,探寻健康、安全、绿色的替抗产品已成为研究重点。植物提取物在促进畜禽生长发育、改善肉品质、盲肠细菌等方面均具有一定功效。但关于以丁香、槐角为主要成分的提取物在畜禽生产应用的报道较少。本试验以丁香和槐角提取物为材料,研究不同植物提取物对广西三黄鸡生产性能、屠宰性能、肉品质和盲肠菌群的影响,为植物提取在畜禽养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料丁香和槐角提取物由北京康华远景科技股份有限公司提供,活性成分:总黄酮2.0%,总多糖3.5%。1.2试验动物及基础日粮试验动物由广西玉林和丰禽业有限公司提供。基础日粮为玉米-豆粕型日粮,参考三黄鸡的饲养标准并结合生产实践的营养需要进行配置。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.011.T001表1基础日粮组成及营养水平(风干基础)原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米70.00代谢能/(MJ/kg)13.16豆粕18.00粗蛋白质/%14.77豆油2.00钙/%0.93膨化大豆5.00总磷/%0.53磷酸氢钙0.90有效磷/%0.33石粉1.80赖氨酸/%0.95食盐0.30蛋氨酸/%0.35预混料2.00注:1.预混料为每千克日粮提供:VA 11 500 IU、VB1 3.5 mg、VB2 8.25 mg、VB6 6.75 mg、VB12 0.040 mg、VD3 3 200 IU、VK3 2.5 mg,泛酸21 mg、烟酸35 mg、生物素0.30 mg、胆碱650 mg、叶酸1.25 mg、Mn 90 mg、Zn 80 mg、Fe 95 mg、Cu 10.8 mg、I 0.38 mg、Se 0.28 mg、Co 0.1 mg。2.营养水平中粗蛋白质、总磷、钙均为实测值,其他均为计算值。1.3试验设计与饲养管理采用单因素完全随机分组设计,选取45日龄三黄鸡(母)256只,随机分4组,每组4个重复,每个重复16只。对照组(Ⅰ组)三黄鸡饲喂基础日粮,Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组分别在基础日粮中0、150、200、300 mg/kg丁香和槐角提取物。预试期5 d,正式试验期70 d。试验期间采用笼养方式,每日08:00和15:00饲喂,三黄鸡自由采食、饮水,鸡舍管理与免疫程序按鸡场常规方法进行,定期消毒。每日观察鸡群健康状况,记录死淘数。1.4测定指标及方法1.4.1生产性能试验第1 d和最后 1 d试验鸡停饲12 h,以重复为单位对试验鸡进行空腹称重。试验期间准确记录试验鸡的喂料量、剩料量和死淘数,计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、料重比(F/G)。ADFI=总耗料量/(试验天数×试验鸡数)(1)ADG=(末重-初重)/试验天数(2)F/G=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2肉品质屠宰30 min内,剖离胸肌和腿肌至冰上,用于测定pH45 min值、pH24 h值、滴水损失率、肉色、系水力、剪切力及肌内脂肪含量。将肉样沿肌纤维方向剪成3.0 cm×1.5 cm×1.0 cm的肉块,测3次,取平均值;取一部分胸肌、胸肌,分别称重(W1),肉样4 ℃密封24 h,擦去肉样表面水分,称重(W2)。滴水损失率=(W1-W2)/W1×100%(4)采用乙醚浸提法测定肌内脂肪含量,滤纸袋放入烘箱中烘至恒重,冷却,称重(W0)。取部分肉样105 ℃烘箱中烘2 h,冷却30 min,研碎,称取1.0 g(W1)装入滤袋,放入抽提管中,70 ℃水浴,石油醚充分回流,脂肪滤干取出,晾干,干燥箱烘2 h,冷却,称重(W2)。肌内脂肪含量=(W0+W1-W2)/W1×100%(5)1.4.3盲肠菌群120日龄每组屠宰40只三黄鸡,取盲肠内容物,使用生理盐水冲洗装2 mL冻存管,液氮保存,用于测定盲肠细菌16 sRNA,送至美吉生物科技公司进行测序,数据分组、物种注释与评估及信息挖掘均在美吉云平台完成。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel软件进行初步处理,SPSS 20.0进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1丁香和槐角提取物对三黄鸡生长性能的影响(见表2)由表2可知,Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组三黄鸡ADFI分别比Ⅰ组显著增加2.15%、3.06%、1.39%(P0.05),ADG分别比Ⅰ组显著增加9.60%、16.29%、7.11%(P0.05),F/G分别比Ⅰ组显著降低6.78%、11.40%、5.29%(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.011.T002表2丁香和槐角提取物对三黄鸡生长性能的影响组别初重/kg末重/kgADFI/[g/(只·d)]ADG/[g/(只·d)]F/GⅠ组0.56±0.011.55±0.03c85.04±1.46b14.06±0.27c6.05±0.07aⅡ组0.56±0.011.64±0.03b86.87±0.85a15.41±0.28b5.64±0.11bⅢ组0.56±0.011.71±0.05a87.64±0.38a16.35±0.30a5.36±0.09cⅣ组0.56±0.011.62±0.03b86.22±1.10ab15.06±0.28b5.73±0.15b注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2丁香和槐角提取物对三黄鸡屠宰性能的影响(见表3)由表3可知,Ⅲ组三黄鸡胸肌率比Ⅰ组、Ⅳ组分别显著增加13.69%、12.39%(P0.05);腿肌率比Ⅰ组显著增加12.78%(P0.05);瘦肉率比Ⅰ组、Ⅳ组分别显著增加12.70%、11.39%(P0.05);腹脂率比Ⅰ组显著降低30.20%(P0.05)。各组屠宰率、半净膛率、全净膛率差异均不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.011.T003表3丁香和槐角提取物对三黄鸡屠宰性能的影响组别屠宰率胸肌率腿肌率瘦肉率腹脂率半净膛率全净膛率Ⅰ组87.95±1.3614.68±1.34b19.33±2.21b34.10±2.36b5.86±0.64a76.91±2.1462.17±1.91Ⅱ组88.30±1.5015.98±1.59ab20.18±1.84ab36.17±2.48ab4.78±0.63ab77.53±1.4663.16±1.98Ⅲ组88.67±1.7416.69±1.24a21.80±0.88a38.43±1.71a4.09±1.16b78.82±0.8364.05±1.26Ⅳ组87.98±1.4014.85±1.43b19.80±1.55ab34.50±2.45b5.16±1.17ab77.19±2.1763.46±1.88%2.3丁香和槐角提取物对三黄鸡肉品质的影响(见表4)由表4可知,Ⅲ组三黄鸡胸肌肉色OD值比Ⅰ组、Ⅱ组分别显著增加13.10%、11.30%(P0.05),Ⅱ组三黄鸡胸肌滴水损失比Ⅰ组显著降低47.57%(P0.05)。Ⅲ组三黄鸡的胸肌滴水损失比Ⅰ组、Ⅳ组分别显著降低60.18%、48.99%(P0.05);Ⅲ组三黄鸡胸肌pH45 min值显著高于Ⅰ组(P0.05),pH24 h值显著高于Ⅰ组和Ⅳ组。各组三黄鸡的胸肌系水力、剪切力差异均不显著(P0.05)。Ⅲ组三黄鸡的腿肌滴水损失较Ⅰ组显著降低50.20%(P0.05),Ⅱ组、Ⅲ组三黄鸡的腿肌pH45 min值、pH24 h值均显著高于Ⅰ组、Ⅳ组(P0.05)。各组三黄鸡的腿肌肉色OD值、系水力、剪切力及肌内脂肪含量差异均不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.011.T004表4丁香和槐角提取物对三黄鸡肉品质的影响项目OD值系水力滴水损失/%pH45 min值pH24 h值剪切力/N肌内脂肪含量/%胸肌Ⅰ组70.10±5.32b2.09±1.347.61±3.46a5.80±0.12b5.05±0.11b37.93±1.236.90±1.28Ⅱ组71.23±6.38b2.68±1.403.99±1.27bc5.87±0.12ab5.18±0.04ab34.40±0.867.19±0.61Ⅲ组79.28±6.74a2.86±2.013.03±0.80c5.97±0.17a5.30±0.16a31.16±0.927.68±1.46Ⅳ组72.47±4.74ab2.17±1.515.94±1.97ab5.83±0.07ab5.06±0.12b32.63±1.277.20±0.93腿肌Ⅰ组79.87±5.371.11±0.262.53±1.11a5.86±0.06c5.56±0.06c38.12±1.2310.13±1.86Ⅱ组81.12±5.481.44±0.581.90±0.87ab5.97±0.07ab5.67±0.07ab34.79±1.1012.65±3.99Ⅲ组83.24±4.271.78±0.711.26±0.54b6.04±0.09a5.74±0.09a32.54±0.3013.61±4.57Ⅳ组80.44±5.551.43±0.732.12±0.87ab5.91±0.07bc5.61±0.07bc34.99±0.8911.10±2.342.4丁香和槐角提取物对三黄鸡盲肠菌群的影响2.4.1丁香和槐角提取物对三黄鸡盲肠细菌中α多样性的影响(见表5)由表5可知,日粮添加不同水平丁香和槐角提取物对三黄鸡盲肠细菌丰富度Ace指数、Chao1指数、Sobs指数以及群落多样性Shannon指数、Simpson指数影响均不显著(P0.05)。Ⅲ组盲肠细菌丰富度Ace指数、Chao1指数、Sobs指数值最高,多样性Shannon指数和Simpson指数最低。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.011.T005表5丁香和槐角提取物对三黄鸡盲肠细菌中α多样性的影响组别Ace指数Chao1指数Sobs指数Shannon指数Simpson指数Ⅰ组606.86±141.11610.34±139.15535.00±133.074.26±0.710.06±0.05Ⅱ组545.14±92.76550.63±92.49472.00±93.214.12±0.520.04±0.02Ⅲ组611.69±86.87623.88±96.95536.33±93.553.78±0.860.11±0.11Ⅳ组576.61±102.45581.61±103.81510.67±84.724.23±0.360.04±0.022.4.2盲肠细菌在细菌门水平上的群落组成分析(见图1、表6)由图1可知,盲肠细菌在细菌门水平上的优势细菌群序列包括拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、互养菌门(Synergistetes)、放线菌门(Actinobacteria)、螺旋菌门(Spirochaetes)等,绝大多数序列是拟杆菌门和厚壁菌门。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.011.F001图1三黄鸡盲肠细菌在细菌门水平上的相对丰度由表6可知,Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组肠道细菌拟杆菌门的相对丰度比Ⅰ组均有升高,但差异均不显著(P0.05);Ⅱ组、Ⅳ组厚壁菌门相对丰度比Ⅰ组有所升高,且Ⅲ组中的相对丰度最低,但差异均不显著(P0.05);Ⅲ组中变形菌门和放线菌门的相对丰度低于其他试验组,Ⅲ组中互养菌门的相对丰度显著低于Ⅳ组(P0.05);Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组螺旋菌门的相对丰度比Ⅰ组均有降低,但差异均不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.011.T006表6三黄鸡盲肠细菌在细菌门水平上的相对丰度组别BacteroidetesFirmicutesProteobacteriaSynergistetesSpirochaetesActinobacteriaⅠ组43.81±4.7042.61±3.533.04±0.602.19±1.04ab1.39±2.142.44±3.43Ⅱ组45.78±5.5047.12±5.182.39±1.801.76±1.48ab0.97±0.870.85±0.25Ⅲ组57.68±12.5737.03±9.881.22±0.391.05±0.68b0.78±1.320.28±0.15Ⅳ组44.32±6.5845.18±3.633.31±1.333.55±1.39a0.48±0.280.56±0.18%2.4.3盲肠细菌在细菌属水平上的群落组成分析(见图2、表7)由图2可知,细菌属水平物种组成成分中4组获得48个属,而盲肠肠道细菌群序列的优势细菌群,主要包括拟杆菌属(Bacteroides)、杆状菌属(Phascolarctobacterium)、粪便杆菌属(Faecalibacterium)、漆草菌科未分类(unclassified-f-Lachnospiraceae)等。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.011.F002图2三黄鸡盲肠菌群在细菌属水平上的相对丰度由表7可知,Ⅲ组肠道细菌拟杆菌属的相对丰度比Ⅰ组高,Ⅱ组、Ⅳ组中的相对丰度则相对于Ⅰ组降低,差异不显著(P0.05);Ⅲ组杆状菌属的相对丰度比Ⅰ组降低,在Ⅱ组、Ⅳ组中的相对丰度升高(P0.05);Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组粪便杆菌属的相对丰度比Ⅰ组均有升高趋势(P0.05);Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组漆草菌科未分类的相对丰度比Ⅰ组有降低趋势(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.011.T007表7三黄鸡盲肠菌群在细菌属水平上的相对丰度项目BacteroidesPhascolarctobacteriumFaecalibacteriumunclassified-f-LachnospiraceaeⅠ组29.38±14.537.48±4.822.79±1.413.65±1.32Ⅱ组25.64±5.8510.43±5.594.29±2.383.44±0.63Ⅲ组41.91±19.331.93±1.767.47±5.653.42±1.76Ⅳ组25.85±4.3613.20±8.305.66±5.593.33±0.10%3讨论3.1丁香和槐角提取物对三黄鸡生产性能的影响生产性能是评定养殖收益的标准之一。赵艳飞[9]研究发现,日粮添加0.01%、0.02%、0.04%复合植物提取物均能够显著增加三黄鸡的平均日增重,降低料重比。肖传明等[10]研究发现,白羽肉鸡日粮中添加200 g/t富含黄酮、生物碱等有效成分的中草药提取物饲料添加剂能够增加白羽肉鸡的平均日增重,降低料重比,与本试验研究结果一致。本试验中,Ⅲ组三黄鸡的平均日采食量及日增重显著增加,料重比显著降低。原因是丁香和槐角提取物所含的有效成分具有杀菌抑菌作用,能够改善三黄鸡肠道健康状况,提高机体对疾病的抵抗能力,从而提高生产性能。3.2丁香和槐角提取物对三黄鸡屠宰性能的影响屠宰性能是衡量畜禽胴体品质的重要指标之一,是体现肉产品营养价值的指标[11]。屠宰率、全净膛率是衡量畜禽产肉性能的标准。韦金成等[12]研究发现,日粮中添加300 mg/kg中草药提取物可改善广西麻鸡的屠宰性能。李漠等[13]研究发现,日粮添加500 g/t山花黄芩提取物可增加42 d肉鸡的胸肌率及腿肌率。魏建东[14]研究发现,在肉鸡日粮中添加100 mg/kg天然植物提取物(百里香酚、香芹酚、丁香酚)可增加肉鸡的全净膛率。胡忠泽等[15]在日粮中添加250 mg/kg姜黄素提取物可降低肉鸡的腹脂率,与本试验结果一致。本试验中,Ⅲ组三黄鸡的胸肌率、腿肌率及瘦肉率显著增加。原因可能是丁香和槐角提取物能够促进肉鸡内脏器官发育,增强免疫性能。3.3丁香和槐角提取物对三黄鸡肉品质的影响肉色是评价肉品质的直观指标[16]。王建华等[17]研究表明,在育肥猪日粮添加0.1%茶多酚复合饲料可明显改善肌肉肉色。本试验中,Ⅲ组三黄鸡胸肌肉色OD值显著升高;Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组的胸肌、腿肌滴水损失率显著低于Ⅰ组,与刘彦慈等[18]结果一致。本试验中,Ⅲ组胸肌pH45 min值和pH24 h值显著高于Ⅰ组,Ⅱ组、Ⅳ组pH45 min值、pH24 h值均在正常范围内,与赵艳飞[19]和颜陶等[20]结果一致。本试验中,Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组中肌肉嫩度和IMF含量与Ⅰ组差异不显著,与张文火等[21]结果一致。原因可能是丁香和槐角提取物中黄酮类化合物调控机体脂质代谢。3.4丁香和槐角提取物对三黄鸡盲肠菌群的影响肠道菌群能够定植大量微生物,由厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门和放线菌门组成[22]。肠道微生物在宿主能量代谢、生理功能、营养吸收、能量消耗、免疫和机体防御等过程起重要作用。盲肠菌群通常处于长期稳定状态,但随宿主的饮食、年龄和抗生素不同等干预会影响宿主微生物群体的结构稳态[23]。本试验中,丁香和槐角提取物对三黄鸡盲肠食糜细菌群落丰富度和多样性均无明显影响;各组肠道细菌在细菌水平门和细菌属水平均有改善趋势。可能与丁香和槐角提取物含有生物碱类、黄酮类、有机酸等活性成分能够抑菌、杀菌有关。关于丁香和槐角提取物添加量对肠道细菌的群落丰度和多样性的影响仍需进一步研究。4结论丁香和槐角提取物能够促进三黄鸡生长发育,降低腹脂率,对胸肌和腿肌组织均有不同程度的改善作用,对有益菌和有害菌的调节具有积极作用,以Ⅲ组效果较好。
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