山楂为蔷薇科植物山里红或山楂的干燥成熟果实[1],作为中药具有降血压、血脂、健脾开胃和活血化瘀等多种功效[2-4]。山楂可以提高猪[6-7]、禽[8-9]、水产[10-11]等动物的生产性能、抗氧化性能、免疫性能及饲料消化利用率,在畜禽养殖中具有较高的推广应用价值。山楂在《饲料原料品种目录》中被收录于117种其他可饲用天然植物,可长期添加于动物商品饲料中。本试验研究肉牛日粮中添加山楂粉对肉牛生产性能、抗氧化性能、免疫性能及养殖经济效益的影响,为山楂粉在肉牛养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料山楂购自亳州市佰林堂药业有限公司,山楂粉碎,过40目筛。试安格斯牛与本地黄牛杂交F1代牛由湖南福和农场提供。试验地点为湖南省湘潭市湘乡市。1.2试验设计选取48头体重约365 kg的肉牛随机分为4组,每组3个重复数,每个重复4头牛。对照组(A组)肉牛饲喂基础日粮,B组、C组、D组肉牛饲喂分别在基础日粮中添加15、30、45 g/d山楂粉的日粮。1.3饲养管理试验牛均饲喂混合日粮(精粗比为4∶6),基础日粮组成及营养水平见表1。试验期肉牛自由采食、饮水。日常管理、保健、治疗及免疫等程序按照养殖场现有规章制度执行。试验中采用颈枷控制方式进行单槽饲喂,每日7:00对采食量进行统计。统计结束,在肉牛食槽中补充山楂粉。试验期60 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.004.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米秸秆60.0净能/(MJ/kg)5.36玉米18.0粗蛋白/%12.10麸皮5.2粗脂肪/%2.31豆粕6.7中性洗涤纤维/%48.83棉籽粕6.6酸性洗涤纤维/%32.18菜籽粕1.5钙/%0.54石粉0.4磷/%0.26磷酸氢钙0.6食盐0.5预混料0.5注:1.预混料购自北京科瑞大地生物技术有限公司。2.营养水平均为计算值。1.4测定指标及方法1.4.1生产性能试验开始和结束前1 d,各组牛禁食12 h称重。根据每日统计牛的采食量获得整个试验期肉牛总采食量,计算平均日增重、料重比。肉牛试验阶段增重=末重-初重(1)平均日均采食量=总采食量/试验天数(2)平均日增重=肉牛试验阶段增重/试验天数(3)料重比=平均日采食量/平均日增重(4)1.4.2血清生化指标饲喂试验结束后,所有试验牛颈静脉采血,每头牛约收集10 mL,室温静置12 h取上清,-80 ℃保存,用于检测血清抗氧化指标和血清免疫指标。1.4.3血清抗氧化指标使用ELISA定量试剂盒测定总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GHS-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性以及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA),试剂盒购自上海宝曼生物科技有限公司。1.4.4血清免疫指标使用ELISA定量试剂盒进行测定免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)含量,试剂盒购自上海康朗生物科技有限公司。1.4.5血清脂代谢相关指标使用酶比色法进行测定甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量,使用选择性沉淀法测定低密度脂蛋白(LDL-C)及高密度脂蛋白(HDL-C)含量。试剂盒购自南京建成生物工程研究所,具体操作按照试剂盒说明书进行。1.4.6经济效益指标养殖经济效益指标主要通过考察肉牛额外补充山楂,每千克增重所需饲料成本的差异。混合日粮的成本为2 389元/t,山楂采购价格为8.4元/kg。每千克增重饲料成本=(试验阶段饲料成本+山楂使用成本)/试验阶段增重(5)额外经济效益=试验组每千克增重饲料成本-对照组每千克增重饲料成本(6)1.5数据统计与分析试验数据采用SAS 9.2软件进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1补充山楂粉对水平肉牛生产性能的影响(见表2)由表2可知,D组肉牛末重显著高于其他组(P0.05);D组肉牛平均日采食量、平均日增重均极显著高于对照组(P0.01);D组肉牛的料重比极显著低于其他组(P0.01)。B组肉牛的各项指标与对照组相比差异均不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.004.T002表2补充山楂粉对水平肉牛生产性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日采食量/[kg/(头·d)]平均日增重/[kg/(头·d)]料重比A组(对照组)366.78±12.38424.98±13.87c5.58±0.05B0.97±0.03B5.75±0.13AB组365.43±13.01424.83±15.87c5.57±0.04B0.99±0.04B5.63±0.08AC组366.09±14.83438.69±16.87b5.84±0.06A1.21±0.07A4.83±0.37BD组365.49±13.91445.29±12.87a5.83±0.09A1.33±0.09A4.38±0.28C注:同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P0.05),不同大写字母表示差异极显著(P0.01),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2补充山楂粉对肉牛血清抗氧化指标的影响(见表3)由表3可知,随着山楂量的增加,各组肉牛血清MDA含量呈下降趋势,除CAT外的各项指标均呈递增趋势。D组肉牛血清SOD活性极显著高于其他组(P0.01),血清GSH含量显著高于对照组(P0.05),血清T-AOC极显著高于对照组(P0.01),血清GSH-Px活性显著高于A组(P0.05),血清MDA含量显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.004.T003表3补充山楂粉对肉牛血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)GSH-Px/(U/L)GSH/(mg/L)SOD/(U/mL)CAT/(U/mL)MDA/(μmol/L)A组(对照组)11.89±1.30B75.48±5.48b89.48±1.38b86.34±6.28C36.18±3.3311.86±0.34aB组12.37±0.97B83.27±7.28ab90.29±3.49ab99.39±7.10B37.20±3.7110.32±0.23bC组15.88±1.11A93.33±6.17a91.33±2.26ab106.48±8.33B35.99±3.749.98±0.13bD组17.49±1.01A89.49±5.52a94.50±5.81a118.19±4.98A35.87±4.2910.12±0.23b2.3补充山楂粉对肉牛血清免疫指标的影响(见表4)由表4可知,D组肉牛血清IgG浓度极显著高于其他组(P0.01),血清IgA浓度显著高于对照组(P0.05)。各组肉牛血清IgM浓度差异均不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.004.T004表4补充山楂粉对肉牛血清免疫指标的影响组别IgGIgAIgMA组(对照组)113.59±10.28B164.33±9.33b78.49±1.89B组114.36±11.34B178.29±10.08a79.32±3.36C组116.48±10.87B181.34±8.74a76.18±2.91D组135.48±13.49A180.42±10.30a77.38±2.38mg/L2.4补充山楂粉对肉牛血清脂代谢指标的影响(见表5)由表5可知,试验组肉牛血清TG含量显著低于对照组(P0.05)。肉牛血清TC浓度随山楂量的提高呈下降趋势,D组显著低于对照组(P0.05)。肉牛血清LDL-C含量随着山楂量的提高呈下降趋势,D组显著低于对照组(P0.05);D组血清HDL-C浓度显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.004.T005表5补充山楂粉对肉牛血清脂代谢指标的影响组别TGTCLDL-CHDL-CA组(对照组)0.32±0.05a4.89±0.38a3.23±0.42a1.59±0.07cB组0.24±0.04b4.67±0.52ab2.98±0.31a1.64±0.12cC组0.23±0.04b4.52±0.41ab2.40±0.29b1.76±0.09bD组0.23±0.01b4.01±0.53c2.33±0.21b2.12±0.10amol/L2.5补充山楂粉对肉牛养殖经济效益的影响(见表6)由表6可知,试验期对肉牛额外补充山楂会提高饲喂成本,但添加山楂粉可以有效提高肉牛的饲料转化效率,显著改善料重比。与对照组相比,B组、C组、D组分别降低增重成本0.18、2.01和3.00元/kg。结果表明,本试验条件下,日粮中添加山楂粉可以明显提高肉牛经济效益。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.004.T006表6补充山楂粉对肉牛养殖经济效益的影响组别平均增重/(kg/头)平均总采食量/(kg/头)平均饲料成本/(元/头)山楂使用量/kg山楂平均使用成本/(元/头)增重饲料成本/(元/kg)额外经济效益/元A组(对照组)58.20334.80799.840.000.0013.740.00B组59.40334.20798.400.907.2013.560.18C组72.60350.40837.111.8014.411.732.01D组79.80349.80835.672.7021.610.743.003讨论3.1补充山楂粉对水平肉牛生产性能的影响山楂含有多种氨基酸、维生素与微量元素等营养物质[12-14],可以满足动物生长发育的营养需求。山楂中富含枸橼酸、延胡索酸及富马酸等可有效改善动物胃肠道功能与健康[15]。研究表明,山楂可以增强胰腺外分泌功能,显著提升胰液分泌量,具有提高消化道中脂肪酶活性的趋势,还能够增强淀粉酶活性;但山楂对蛋白酶活性具有一定负面影响,可通过大量促进胰液分泌足以弥补负面效应[16]。山楂对消化道中的大肠杆菌等微生物具有较强的抑制作用[17-18]。山楂的营养特性及对微生物和消化酶的作用是提高饲料消化利用率和促进动物生产性能的重要原因。但目前尚无山楂单独添加于肉牛饲粮中的研究报道。仲伟光等[19]以山楂为主配合党参、黄芪等中药对肉牛进行饲喂试验,结果表明,试验组肉牛的干物质消化率提高3.97%,采食量至少提高16.84%,说明以山楂为主的中药复方制剂可提高肉牛采食量和饲料消化利用率。单独添加山楂在猪、禽、水产养殖中已有大量报道,在猪、禽、水产养殖中添加山楂可提高饲料消化利用率和提高动物生产性能[20-22],与本研究结论一致。3.2补充山楂粉对肉牛血清指标的影响山楂中的维生素C、山楂黄酮、山楂多糖、有机酸、苯丙素类与三萜类物质均具有较强的抗氧化活性[23]。Huang等[24]研究发现,山楂中具有抗氧化活性成分,主要通过Nrf2/ARE通路调节体内抗氧化能力,可以影响下游抗氧化酶相关基因的表达。华荧[25]研究发现,在猪饲粮中添加3%山楂粉可极显著提高SOD活性,且MDA含量极显著下降。但研究认为,山楂对猪体内抗氧化效果的影响与剂量有关,1%添加量的效果不及3%添加量。戴宏健等[26]认为,山楂黄酮可以降低蛋鸡壳腺部MDA含量,影响KEAP1、p-NFκB/NFκB和Bax/Bcl2等基因表达,通过激活Nrf2/HO-1信号通路增强壳腺的抗氧化能力,增强蛋鸡生产性能与健康程度。根据其他经济动物的研究结果,发现山楂提高肉牛抗氧化性能的作用机制与其他动物相同。刘国林等[27]使用山楂与黄芪混合物(1∶1)作为饲料添加剂以改善围产期奶牛生产性能,添加量分别为100和300 g/(头·d)。结果表明,试验组奶牛血清中IgG含量极显著提高,肿瘤坏死因子α含量显著提高,说明山楂可明显提高奶牛的免疫功能,与本研究结论基本一致。TG是动物机体重要的能量贮存物质,血液中含量过高会增加黏稠度,表现出脂肪沉积严重。血液中TC浓度过高,可能会造成酯化发生障碍,影响肝等代谢器官功能。LDL-C可以携带TC至全身各细胞,加速动物肥胖,进而影响动物健康。因此上述指标均不宜过高。HDL-C可以清理血管内膜所沉淀的TC至肝脏,增强心血管功能,在合理范围内越高越利于动物健康[28]。毛桂芸等[29]在奶牛全混合饲粮中添加100 g/t山楂,结果显示,奶牛在产后21 d血液中TC和TG含量显著低于对照组,说明山楂可有效降促进奶牛体内脂质代谢,与本研究结论基本一致。张曼[30]研究发现,在高脂血症小鼠中使用山楂可提高HDL-C含量,降低LDL-C含量,表明山楂可影响动物体内脂蛋白含量。3.3补充山楂粉对肉牛养殖经济效益的影响仲伟光等[19]研究显示,使用山楂复方的试验组肉牛毛利润比对照组高6.28元/d,该研究中养殖经济效益的提升远高于本研究,可能是经济指标的计算方法不同,且该研究使用山楂复方效果优于山楂粉。但仍可表明山楂在饲粮中添加可提升肉牛生产性能,提高肉牛养殖经济效益。4结论本试验条件下,45 g/d的山楂补充量可有效改善肉牛的生产性能,提高抗氧化、免疫能力,增强脂质代谢,能够提升肉牛养殖的经济效益。

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