构树叶的粗蛋白含量高，含有清热凉血、利湿、杀虫[1]、抑菌抗炎和抗氧化功能的黄酮类化合物、多酚类化合物、木脂素和辅酶Q10等活性物质[2]，是一种不含抗生素、农药的绿色饲料，可为解决当前蛋白质饲料短缺、饲料抗生素残留、畜禽生产环境污染等问题提供思路。但构树叶因不易机械化采收、整株采收营养价值低和产量低而没有在饲料中广泛应用。国内培育的杂交构树具有生长快、耐刈割、产量高、营养价值高、抗病性强的特点[3]。杂交构树青贮可以长期保存，提高蛋白质利用率[4-5]。杂交构树单独青贮发酵品质较差[6]，与燕麦[7]、稻草[8-9]、多年生黑麦草[10]、紫花苜蓿[5]以一定比例混合青贮能够改善其青贮品质。玉米秸秆粗蛋白质含量低、氨基酸不平衡，适口性比构树青贮差[11]。本试验研究玉米秸秆和杂交构树混合青贮对青贮品质的影响，为杂交构树与玉米秸秆的混合青贮利用提供参考。1材料与方法1.1试验设计以玉米秸秆和杂交构树为原料，按照不同鲜重质量比例混合青贮，分别为不添加杂交构树（C组）、9∶1（C9P1组）、8∶2（C8P2组）、7∶3（C7P3组）、5∶5（C5P5组）、3∶7（C3P7组）、不添加玉米秸秆（P组），分为7组，每组4个重复，每个重复200 g。1.2青贮饲料的调制与样品处理杂交构树于2020年9月17日采自甘肃省庆阳市农业科学研究院和盛基地，刈割第1茬，平均株高120 cm，留茬高度35 cm。青绿玉米秸秆（下部有2~3片干枯叶片）于2020年9月18日采自甘肃省陇南市成县，-20 ℃保存，用于测定干物质（DM）、粗蛋白质（CP）、中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）、pH值、缓冲能值（BC）和水溶性碳水化合物（WSC）含量。样品切短至1~2 cm，按照设计混匀，逐层压实装入400 mL聚乙烯青贮袋，真空密封，室温避光保存。青贮第45 d，打开青贮袋，弃去袋口少量青贮料，剩余全部倒出混匀。“四分法”取样100 g由10人小组感官评分，测量DM和CP含量。剩余料以“四分法”取样50 g测量WSC含量，以“四分法”取样20 g加100 mL去离子水，组织匀浆机捣碎，加80 mL去离子水冲洗组织匀浆机内壁，全部转移至烧杯测定pH值[12]，200目尼龙纱布过滤，得到浸提液。加1滴50%硫酸溶液混匀，-20 ℃保存，待测氨态氮（NH3-N）、乳酸（LA）、乙酸（AA）和丁酸（BA）含量。1.3测定指标及方法DM含量采用60 ℃烘干48 h测定[5]；CP含量采用凯氏定氮法[13]测定；NDF和ADF的含量采用Van Soest等[14]方法测定。青贮前原料pH值参照文献[15]方法；BC采用滴定法[15]测定；WSC含量采用蒽酮-硫酸法[16]测定；pH值采用ST 3100 pH计测定；感官评分按照青贮饲料质量评定标准[17]方法。NH3-N采用苯酚-次氯酸钠比色法[18]测定；LA含量采用对羟基联苯比色法[19]测定；AA和BA含量使用气相色谱仪测定。计算发酵系数（FC）[20]、费氏评分（FS）[21]，将青贮品质分为5个等级，分别为优（81~100分）、良（61~80分）、中（41~60分）、差（21~40分）和极差（≤20分）。半纤维素含量=NDF－ADF(1)FC=DM(%)＋8×WSC(%)/BC(2)FS=220＋[2×DM(%)－15]－(40×pH值)(3)1.4数据统计与分析试验数据采用Excel软件进行整理，SPSS 26.0软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1青贮原料的化学成分与青贮特性（见表1）由表1可知，杂交构树的DM、CP、NDF、ADF、半纤维素、WSC含量以及pH值、BC和FC均高于玉米秸秆。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.023.T001表1青贮原料的化学成分与青贮特性项目玉米秸秆杂交构树DM/(g/kg FM)279.60297.90CP/(g/kg DM)55.80153.50NDF/(g/kg DM)463.60613.80ADF/(g/kg DM)276.90359.40半纤维素/(g/kg DM)186.70254.40pH值7.477.69WSC/(g/kg DM)59.6695.83BC/(mEq/kg DM)230.47424.95FC30.0331.742.2混合比例对原料青贮特性的影响（见表2）由表2可知，与玉米秸秆相比，随着杂交构树比例的提高，混合青贮原料的DM、WSC含量、BC和FC均呈现递增趋势。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.023.T002表2混合比例对原料青贮特性的影响组别DM/(g/kg FM)WSC/(g/kg DM)BC/(mEq/kg DM)FCC组279.6059.66230.4730.03C9P1组281.4063.28249.9230.20C8P2组283.2066.89269.3730.37C7P3组285.0070.51288.8230.54C5P5组288.6077.75327.7130.88C3P7组292.2084.98366.6031.22P组297.6095.83424.9531.742.3玉米秸秆和杂交构树混合比例青贮对青贮感官评分的影响（见表3）由表3可知，玉米秸秆单独青贮的感官总评分最高，与杂交构树混合青贮感官总评分显著降低（P0.05）。C组、C9P1组的感官评分等级为优等。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.023.T003表3玉米秸秆和杂交构树混合比例对青贮感官评分的影响组别气味色泽质地水分pH值总评分P值0.0010.0010.0010.0480.0010.001C组21.31±1.14a16.56±2.13a8.56±0.24a16.75±2.99b18.75±1.50a82.63±4.88aC9P1组18.88±0.66b15.81±0.13a8.38±0.14ab17.75±1.71ab15.50±1.73b76.31±3.07bC8P2组15.81±0.75c14.06±0.99b8.25±0.20ab18.50±1.29ab8.25±1.26c64.88±3.55cC7P3组13.44±0.85d11.31±0.43c7.75±0.20b19.00±2.00ab6.00±0.82d57.50±2.23dC5P5组9.94±0.24e8.81±0.69d6.75±0.54c20.00±0.00a0.00±0.00e45.50±0.54eC3P7组9.56±0.47e6.00±0.58e5.69±0.38d20.00±0.00a0.00±0.00e41.25±1.34efP组7.50±1.06f5.44±0.80e4.31±0.80e20.00±0.00a0.00±0.00e37.25±2.39f注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。结果表明，C8P2组、C7P3组的感官评分等级为良好，C5P5组、C3P7组和P组的感官评分等级为一般。2.4玉米秸秆和杂交构树混合比例青贮对青贮发酵品质和养分含量的影响（见表4、图1）由表4和图1可知，与C组相比，C9P1组、C8P2组、C7P3组、C5P5组、C3P7组和P组的pH值、AA和BA、DM和CP含量显著增加（P0.05），LA含量和LA/AA显著降低（P0.05）。C组、C9P1组和C8P2组的FS均为优等，且显著高于C7P3组、C5P5组、C3P7组和P组（P0.05）。各组均未检测出BA含量。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.023.T004表4玉米秸秆和杂交构树混合比例对青贮发酵品质和养分含量的影响项目pH值NH3-N/TN/(g/kg)LA/(g/kg)AA/(g/kg)BA/(g/kg)LA/AADM/(g/kg)CP/(g/kg)P值0.0010.0010.0010.0010.0010.0010.0010.001C组3.98±0.10g39.54±8.38d67.57±0.76a18.76±2.66c—3.65±0.56a274.55±26.62d64.25±6.80fC9P1组4.15±0.05f42.18±15.01d63.22±1.15b25.23±1.55b—2.51±0.11b279.00±20.31cd80.83±3.30eC8P2组4.38±0.05e45.15±12.06cd56.40±1.35c27.70±2.50b—2.05±0.24c284.25±12.42cd92.40±2.80dC7P3组4.59±0.08d57.58±5.76bc51.16±1.07d29.60±1.60b4.35±0.54c1.73±0.13cd290.30±25.18cd96.25±3.36cdC5P5组5.09±0.13c62.87±8.03b47.77±2.06de36.11±2.00a5.75±0.39c1.32±0.08de313.47±9.87bc100.48±1.76cC3P7组5.30±0.04b79.60±80.5a44.07±1.68e37.37±2.15a8.40±0.18b1.18±0.11e337.50±16.06ab107.53±3.70bP组5.62±0.25a90.43±5.33a37.37±4.71f37.27±3.90a10.26±0.39a1.00±0.02e363.97±23.57a132.70±7.37a注：“—”表示未检测该物质。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.023.F001图1玉米秸秆和杂交构树混合比例青贮的费氏评分3讨论3.1玉米秸秆和杂交构树混合比例青贮对青贮特性的影响作物的青贮特性决定青贮发酵品质。调制优质青贮饲料的原料应具备干物质含量介于250~400 g/kg[22]、干物质水溶性碳水化合物含量高于50 g/kg[23]和缓冲能值低于350 mEq/kg[24]的青贮特性。本试验中，构树的干物质、水溶性碳水化合物含量与付锦涛等[8]结果相近，但缓冲能值低于其结果。郝阳毅等[25]测得的构树干物质含量高于本试验结果，但水溶性碳水化合物含量和缓冲能值低于本试验结果。王芬等[9]和Li等[5]构树干物质含量和水溶性碳水化合物含量均低于本试验结果，原因可能与刈割茬次、留茬高度、植株高度等有关。郝阳毅等[25]研究表明，构树青贮的最佳留茬高度为35 cm。Hao等[26]研究表明，构树青贮发酵品质随生长高度增加而下降。玉米秸秆与构树混合青贮可以提高玉米秸秆的干物质含量，减少青贮饲料汁液流失而造成的干物质损失[27]，为乳酸菌提供更多的水溶性碳水化合物，改善发酵品质。构树的缓冲能值随构树比例提高而增加，当构树比例达到70%，混合青贮料的缓冲能值超过350 mEq/kg，是构树单独青贮发酵品质差的原因之一。本试验中，C3P7组和P组的发酵系数高于其他组，但缓冲能值超出适宜范围使青贮特性无法满足调制优良青贮的条件。使用发酵系数评价青贮特性的前提是保证原料的干物质、水溶性碳水化合物、缓冲能值各自条件的满足。3.2玉米秸秆和杂交构树混合比例青贮对青贮发酵品质的影响本试验中，构树单独青贮的感官评分、LA含量、LA/AA、费氏评分为最低，pH值为5.62，NH3-N/TN、AA和BA含量均较高，可能与构树的缓冲能值较高的特性有关，与王芬等[9]、Dong等[10]和付锦涛等[8]研究结果一致。本试验中，随着玉米秸秆比例提高，C组、C9P1组、C8P2组和C7P3组的感官评分等级达到良好以上，pH值显著下降，LA含量和LA/AA显著提高，C组和C9P1组的pH值降至4.2以下，LA/AA超过2。表明玉米秸秆得到充分的发酵，具有较好的有氧稳定性和较长的保存期[28]。随着玉米秸秆混合比例提高，NH3-N/TN显著降低，C组、C9P1组和C8P2组的NH3-N/TN均小于50 g/kg，说明较高的粗蛋白质含量提高混合青贮料的营养价值，表示蛋白质分解产生的氨态氮影响发酵品质[5]。本试验结果与Dong等[10]和Li等[5]研究结果一致，与王芬等[9]、付锦涛等[8]的研究结果不一致，原因可能是所添加的稻草营养价值过低，影响发酵品质。本试验中，C组、C9P1组、C8P2组和C7P3组的AA含量均低于30 g/kg，表明较高的玉米秸秆比例能够抑制有氧腐败[29]。梭菌能够发酵乳酸、水溶性碳水化合物、氨基酸，产生BA、胺、氨，导致青贮饲料pH值升高和产生腐烂味[30]。本试验中，C组、C9P1组和C8P2组未检测到丁酸含量，这与3者NH3-N/TN、费氏评分的结果一致。4结论混合比例对玉米秸秆和杂交构树青贮发酵品质、营养成分具有显著影响。随着构树比例的上升，干物质含量和粗蛋白质含量显著提高。当构树比例超过30%时，青贮发酵品质显著下降。因此，从发酵品质和营养价值考虑，玉米秸秆和杂交构树适宜的混合青贮比例为8∶2。