蓝狐是我国养殖的主要毛皮经济动物之一,主要在山东、河北、辽宁等地养殖[1]。随着禁抗政策的实施,毛皮动物生产中替代抗生素产品的研究还不够完善。枯草芽孢杆菌对提升畜禽生长性能、改善饲料的消化吸收率、增强动物机体的免疫力等方面具有一定效果[2]。牛至香酚是一种广谱抗菌的中药饲料添加剂,具有绿色、环保、低毒、无抗药性、无残留等特点[3]。牛至香酚和枯草芽孢杆菌是较好的抗生素替代物。陶春卫等[4]研究发现,在肉仔鸡日粮中添加牛至香酚和恩拉霉素可以提高肉鸡的成活率、日增重和出栏重。邢帅兵等[5]研究发现,在断奶仔猪日粮添加枯草芽孢杆菌和吉他霉素,与金霉素组合相比,平均日增重和平均日采食量均无显著差异,可以达到部分替代抗生素的效果。徐丹等[6]在断奶仔猪日粮中添加枯草芽孢杆菌与中药提取物,结果发现,芽孢杆菌提取物控制断奶仔猪腹泻方面效果显著优于金霉素,芽孢杆菌能够改善断奶仔猪的生长性能,降低腹泻率。本试验在育成期蓝狐日粮中添加不同比例的牛至香酚和枯草芽孢杆菌组合,探讨其对育成期蓝狐生长性能和泪痕的影响,以期为育成期蓝狐日粮中替代抗生素的使用提供参考。1材料和方法1.1试验材料枯草芽孢杆菌活菌数≥2×1010 CFU/kg;牛至香酚含量为10%,喹烯酮有效成分含量为50%;金霉素有效成分含量为10%,均为市售产品。1.2试验日粮试验基础日粮配方根据水貂和狐狸营养需要NRC(1982)[7]以及生产实践经验设计。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.014.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0膨化玉米38.5代谢能/(MJ/kg)14.71豆粕10.0粗蛋白/%30.36膨化大豆7.0粗纤维/%1.64蒸汽鱼粉13.0粗灰分/%4.83肉骨粉7.0钙/%1.41玉米蛋白粉12.0总磷/%0.98鸡油7.5赖氨酸/%1.60预混料5.0水分/%9.73注:1.预混料为每千克日粮提供:VA 95 00 IU、VD 1 650 IU、VE 220 IU、VB1 15 mg、VB2 20 mg、VB6 4.5 mg、VK3 1.8 mg、VC 250 mg、烟酸28 mg、泛酸3.5 mg、胆碱1 000 mg、Fe 80 mg、Mn 40 mg、Zn 60 mg、I 0.5 mg、Se 0.3 mg、Co 0.25 mg。2.营养水平中代谢能为计算值,其他均为实测值。1.3试验设计采用双因素3×3试验设计,选取90日龄体重相近、精神状态良好、无泪痕、健康的育成期蓝狐250只,随机分成10组,每组5个重复,每个重复5只,公、母比例为3∶2。对照组在基础日粮中添加喹烯酮和金霉素,试验组在基础日粮中添加枯草芽孢杆菌和牛至香酚,见表2。饲养试验于2021年8月26日开始,预试期5 d,正式试验期30 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.014.T002表2试验设计名称对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组试验Ⅳ组试验Ⅴ组试验Ⅵ组试验Ⅶ组试验Ⅷ组试验Ⅸ组喹烯酮100000000000金霉素500000000000牛至香酚0125125125250250250375375375枯草芽孢杆菌0150300450150300450150300450mg/kg1.4饲养管理饲喂前,使用约4倍的温水浸泡蓝狐干粉状配合饲料10~15 min,搅拌均匀饲喂。6:00饲喂日采食量的40%,16:30饲喂日采食量的60%,供给蓝狐充足的饮水。饲养管理按照养殖场的日常管理程序进行,每天对食盒进行清洗和消毒1次,对发病的蓝狐及时治疗。1.5测定指标及方法1.5.1生长性能正式试验期开始和结束,使用手提电子秤对每只蓝狐空腹称重,记录初重和末重。每天准确记录每个重复中育成期蓝狐的采食量及腹泻只数,计算各重复中蓝狐的平均日采食量、平均日增重、料重比和腹泻率。平均日采食量=总采食量/(试验天数×试验蓝狐数)(1)平均日增重=(末重-初重)/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)腹泻率=试验期内腹泻蓝狐只次数/(试验天数×试验蓝狐数)×100%(4)1.5.2泪痕情况试验称重结束,观察每只蓝狐的眼角泪痕情况,使用软尺测量蓝狐泪痕长度。泪痕情况判断见表3[8]。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.014.T003表3泪痕情况判断泪痕状态描述无泪痕内眼角附近的被毛干净,呈银黑色正常,干燥无潮湿痕迹轻度泪痕自内眼角起向嘴角方向的被毛,呈宽度小于0.5 cm,长度小于1 cm的类似“月牙”状变色,被毛被乳白色分泌物覆盖,潮湿痕迹明显重度泪痕自内眼角起向嘴角处的被毛,变色范围进一步扩大,类似“大水滴状”变色,宽度大于0.5 cm,变色长度大于1 cm,颜色加深呈土黄色或铁锈色,潮湿痕迹减轻1.6数据统计与分析试验数据采用Excel 2016初步整理,SPSS 26.0单因素方差分析,LSD法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示,P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1牛至香酚和枯草芽孢杆菌对育成期蓝狐生长性能的影响(见表4)由表4可知,蓝狐各组间的初重差异不显著(P0.05);试验Ⅰ组蓝狐的末重比对照组显著降低3.64%(P0.05);试验Ⅰ组蓝狐的平均日增重比对照组显著降低5.67%,试验Ⅲ组、Ⅴ组、Ⅶ组蓝狐的平均日增重分别比对照组显著升高5.52%、6.10%、4.91%(P0.05);试验Ⅲ组、Ⅴ组、Ⅶ组蓝狐的料重比分别比对照组显著降低3.90%、4.13%、3.62%(P0.05),试验Ⅰ组、Ⅸ组分别比对照组极显著升高7.60%、5.15%(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.014.T004表4牛至香酚和枯草芽孢杆菌对育成期蓝狐生长性能的影响项目初重/kg末重/kg平均日增重/[g/(只·d)]平均日采食量/[g/(只·d)]料重比腹泻率/%对照组4.34±0.327.14±0.37ABCabc93.64±4.25ABCDbcd348.89±5.843.73±0.08CDb10.37±0.91试验Ⅰ组4.23±0.336.88±0.59Cd88.31±11.64Df354.03±10.174.01±0.11Aa11.40±1.69试验Ⅱ组4.28±0.247.13±0.27ABCabc95.05±6.91ABCabc356.04±6.213.75±0.14BCDb9.79±1.58试验Ⅲ组4.25±0.197.21±0.19ABabc98.81±7.23ABa353.80±14.963.58±0.07Dc9.67±1.56试验Ⅳ组4.29±0.277.07±0.33ABCbcd92.88±9.75BCDcd347.79±7.763.74±0.11BCDb10.29±1.60续表4 牛至香酚和枯草芽孢杆菌对育成期蓝狐生长性能的影响10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.014.T005项目初重/kg末重/kg平均日增重/[g/(只·d)]平均日采食量/[g/(只·d)]料重比腹泻率/%P值0.8940.0050.0030.4140.0010.624试验Ⅴ组4.36±0.437.34±0.50Aa99.35±6.37Aa354.91±9.073.57±0.07Dc9.78±1.96试验Ⅵ组4.22±0.297.16±0.41ABCabc97.75±8.91ABab355.85±8.003.76±0.08BCb9.16±1.48试验Ⅶ组4.32±0.367.26±0.3ABab98.24±5.76ABa352.78±16.193.59±0.10CDc10.35±1.44试验Ⅷ组4.27±0.397.07±0.51ABCbcd93.31±5.40BCDbcd349.16±6.843.74±0.11BCDb9.71±1.68试验Ⅸ组4.31±0.427.00±0.42BCcd89.75±11.14CDdf351.64±4.783.92±0.14ABa9.55±1.542.2牛至香酚和枯草芽孢杆菌对育成期蓝狐泪痕的影响(见表5)由表5可知,试验Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅶ组、Ⅷ组、Ⅸ组蓝狐无泪痕情况极显著高于对照组(P0.01);试验Ⅰ组、Ⅵ组、Ⅶ组、Ⅷ组、Ⅸ组蓝狐的轻度泪痕情况极显著高于对照组(P0.01);试验Ⅱ组蓝狐的重度泪痕情况显著低于对照组(P0.05),试验Ⅰ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组、Ⅶ组、Ⅷ组、Ⅸ组蓝狐的重度泪痕情况极显著低于对照组(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.08.014.T006表5牛至香酚和枯草芽孢杆菌对育成期蓝狐泪痕情况的影响项目无泪痕轻度泪痕重度泪痕P值0.0020.0060.001对照组8.00±4.90Cc8.00±4.90Cd84.00±7.48Aa试验Ⅰ组24.00±4.00bABCc32.00±4.90ABabc44.00±7.48BCc试验Ⅱ组16.00±4.00BCc20.00±0.00ABCbcd64.00±4.00ABb试验Ⅲ组8.00±4.90Cc16.00±4.00BCcd76.00±4.00Aab试验Ⅳ组44.00±11.66Aa24.00±7.48ABCabcd32.00±8.00CDFcd试验Ⅴ组48.00±10.20Aa20.00±6.32ABCbcd32.00±4.90CDFcd试验Ⅵ组24.00±10.21ABCbc36.00±7.48ABab40.00±6.32CDc试验Ⅶ组36.00±4.00ABab36.00±7.48ABab28.00±4.90CDFcd试验Ⅷ组40.00±6.33ABab40.00±6.32Aa20.00±0.00DFd试验Ⅸ组48.00±8.00Aa36.00±7.48ABab16.00±4.00Fd%3讨论3.1牛至香酚和枯草芽孢杆菌对育成期蓝狐生长性能的影响牛至(Origanum vulgare L.)是唇形科,多年生半灌木或草本植物,具有解表、理气、清暑、利湿的功效。全草入药,可预防和治疗多种疾病[9]。牛至全草可提取芳香油,鲜茎叶含油0.07%~0.20%,干茎叶含油0.15%~4.00%。牛至香酚是从天然牛至提取出来的一种混合物,含有多种有芳香味的化合物,主要成分为百里香酚和香芹酚,具有明显的抗菌、杀菌和抗氧化作用,能够增强动物免疫功能[10]。刘元元等[11]研究发现,在肉鸡育雏期、生长期和育肥期添加天然牛至香酚预混剂可以显著提高肉鸡的平均日增重和体重,明显降低料重比。余勋信等[12]研究发现,在日粮中添加牛至香酚和维生素E、维生素B族替代金霉素可以提高育肥土黑猪的生长性能。益生菌在动物生产中可有效调节肠道菌群平衡,提高动物生产性能,强机体免疫力等[13]。益生菌主要包括芽孢杆菌类、乳酸菌类、酵母菌类等。枯草芽孢杆菌属于芽孢杆菌类,是一种好氧或兼性厌氧的革兰氏阳性杆状菌[14]。齐博等[15]研究发现,枯草芽孢杆菌可增加肉仔鸡十二指肠绒毛高度和十二指肠绒毛高度/隐窝深度值,显著提高肉仔鸡42日龄时盲肠乳酸杆菌数量,改善肉仔鸡肠道形态,增加肠道中乳酸杆菌数量,促进肉仔鸡生长,改善饲料效率,枯草芽孢杆菌效果优于硫酸黏杆菌素。贡筱等[16]研究发现,在育成期蓝狐饲粮中添加1×1010 CFU/kg枯草芽孢杆菌或1×108 CFU/kg粪肠球菌,可以提高蓝狐营养物质消化率,获得较好的生长性能。杨福剑等[17]在肉种鸡日粮中添加枯草芽孢杆菌800 g/t、植物精油200 g/t,结果发现,肉鸡的产蛋率显著提高,合格蛋率提高,但差异不显著,死淘率显著降低,受精率提高,试验组蛋鸡孵化率显著提高,在饲料中添加枯草芽孢杆菌与植物精油的组合可以显著改善种鸡的生产性能,提高产蛋率和孵化率,降低死淘率。蒲俊宁[18]研究发现,在断奶仔猪日粮添加苯甲酸+凝结芽孢杆菌+牛至油可以提高仔猪对营养物质的利用率,改善仔猪免疫功能、抗氧化能力和肠道屏障功能,进而保护仔猪免受ETEC攻毒损伤,显著改善仔猪生长性能,抑制腹泻,作用效果优于硫酸粘杆菌素和杆菌肽锌组。本试验中,在育成期蓝狐日粮中添加牛至香酚和枯草芽孢杆菌,各组育成期蓝狐的平均末重差异不显著;试验Ⅲ组、Ⅴ组、Ⅶ组蓝狐的平均日增重均显著高于对照组;试验Ⅲ组、Ⅴ组、Ⅶ组蓝狐的料重比显著低于对照组;各组育成期蓝狐的腹泻率无显著差异。说明牛至香酚和枯草芽孢杆菌组合与喹烯酮和硫酸黏杆菌素组合相比,可以提高育成期蓝狐的生长性能,也获得较好的效果。各组育成期蓝狐的平均日采食量无显著差异可能与人为控制采食量有关。3.2牛至香酚和枯草芽孢杆菌对育成期蓝狐泪痕的影响泪痕是泪液产生太多或发生排出障碍,不能正常从鼻泪管进入鼻腔排出,而是从眼角流出,并在动物被毛上留下茶色或者铁锈色的痕迹[19]。蓝狐出现泪痕是机体内部不适的外部表现,不会直接造成蓝狐的死亡,但泪痕的发生一般预示着蓝狐群健康状况出现问题,能够引起蓝狐皮肤溃烂和羞明等。先天发育和后天营养管理等诸多因素均可对泪液分泌产生影响。过度流出的泪液与动物眼睛周围毛发附着的微生物发生作用,形成棕色、褐色或粉色泪痕,严重的可能伴有不良气味[20]。唐超等[21]研究发现,万寿菊提取物、枸杞子提取物、决明子提取物的复合物能够有效缓解宠物犬的泪痕形成。本试验中,试验Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅶ组、Ⅷ组、Ⅸ组蓝狐无泪痕情况极显著高于对照组;试验Ⅰ组、Ⅵ组、Ⅶ组、Ⅷ组、Ⅸ组蓝狐的轻度泪痕情况极显著高于对照组;试验Ⅰ组、Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组、Ⅶ组、Ⅷ组、Ⅸ组蓝狐的重度泪痕情况极显著低于对照组。说明添加牛至香酚和枯草芽孢杆菌组合能够减轻育成期蓝狐的泪痕情况。4结论在本试验条件下,育成期蓝狐日粮添加牛至香酚250和300 mg/kg草芽孢杆菌组合,蓝狐的生长性能提高,泪痕降低,效果优于喹烯酮和金霉素组合,表明牛至香酚和枯草芽孢杆菌组合可以替代喹烯酮和金霉素组合在育成期蓝狐中应用。

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