肉牛养殖过程中，氧化应激能够影响肉牛的生产性能。高热环境直接导致的热应激较为普遍，直接危害动物机体健康[1]。长期使用抗生素，容易破坏动物机体的微生态平衡，降低动物的免疫力，药物残留危害人体健康[2]。黄芪多糖（APS）是从黄芪中提取的一种呈棕褐色的粉末状多糖，含葡聚糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖等[3]。APS具有提高动物机体的免疫力、增强抗氧化能力、抵御肿瘤等多种生物学功能。与抗生素相比，APS具有低毒性、不易产生抗药性、低残留以及无污染等优点。APS是改善反刍动物的免疫力和抗病力的有效手段[4]。目前，关于APS在单胃动物、哺乳和断奶期犊牛及泌乳奶牛中的研究较多，少有APS对高温季节育成期荷斯坦公牛影响的研究。因此，本试验探究不同水平的APS对处于高温季节育成期荷斯坦公牛的养分表观消化率和相关免疫指标的影响，以期为APS在荷斯坦公牛养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验时间与地点试验在沧州中特牧业有限公司进行。试验时间从2021年7月到2021年9月，预试期7 d，正式试验期60 d。1.2试验材料APS为黄芪粗提物，购自江西嘉博生物工程有限公司，含量≥50%。1.3试验设计选择48头体重相近、健康无病的荷斯坦公牛，随机分为4组，每组12个重复，每个重复1头牛。对照组公牛饲喂基础日粮，试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组中APS的添加量分别为8、16、24 g/(头·d)。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.001.T001表1基础日粮组成及营养水平（干物质基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00全株玉米青贮22.34综合净能/(MJ/kg)5.68麦秸28.35粗蛋白质/%14.05苜蓿6.52中性洗涤纤维/%42.19玉米15.35酸性洗涤纤维/%24.59大豆皮9.44钙/%0.67棉粕4.32磷/%0.35豆粕8.32玉米胚芽粕3.86石粉0.10磷酸氢钙0.20食盐0.50小苏打0.20预混料0.50注：1.预混料为每千克日粮提供：铁45 mg、铜27 mg、锰128 mg、锌118 mg、碘化钾33 mg、亚硒酸钠20 mg、VA 19.8 mg、VD 4.8 mg、烟酸60 mg、VE 99 mg。2.营养水平中综合净能为计算值，其余均为实测值。1.4饲养管理试验牛饲养管理条件一致，分群舍饲，散栏饲养，全混合日粮（TMR）每天饲喂２次，保证饮水量充足。1.5样品采集1.5.1日粮、粪样采集试验结束前3 d，每组随机选取5头牛，收集连续3 d的TMR样品（五点取样）和粪样，每组每天采集1 kg的TMR样品，用四分法分装；每头牛每天采集300 g的粪样，100 g加入10%硫酸20 mL固氮，另外200 g直接装于自封袋。TMR样品和均粪样均置于-20 ℃冰箱保存。1.5.2血样的采集试验第1、30、60 d晨饲前，从每组选择与采粪一致的5头牛，通过尾根静脉真空管采血，采集的血液放于促凝管中，3 500 r/min离心15 min，分装血清，待检。1.6测定指标及方法1.6.1温湿指数（THI）利用空气温度湿度表记录每天8：00、14：00、18：00的温度、湿度，计算每天的平均THI。THI=(1.8×T+32)－(0.55－0.55×R)×(1.8×T－26)(1)式中：T为牛舍环境温度（℃）；R为相对湿度(%)。1.6.2养分表观消化率饲料样品和粪便样品中的所有养分（ADF和NDF除外）参照国标法测定[5-7]，NDF和ADF参照Van等[8]方法测定。参考国标GB/T 23742—2009酸不溶灰分法测定TMR日粮中养分表观消化率。表观消化率=(A/C－B/D)/(A/C)×100%(2)式中：A为饲料中某种营养成分含量（%）；B为粪中某种营养成分含量（%）；C为饲料中指示剂含量（%）；D为粪中指示剂含量（%）。1.6.3血清免疫指标免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）、含量由酶标法测定。试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。1.7数据统计与分析试验数据采用SAS 9.2软件Mixed模型，采用最小二乘均值法进行显著性比较。P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1试验期间牛舍THI变化（见图1）由图1可知，从7月11日到8月10日THI指数一直处于75之上，说明荷斯坦公牛一直处于热应激环境。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.001.F001图1牛舍温湿度变化动态图2.2黄芪多糖对荷斯坦公牛养分表观消化率的影响（见表2）由表2可知，不同水平的APS和试验时间对DM、CP、NDF、ADF、P表观消化率具有显著性影响（P0.05），且两者间存在交互作用（P0.05）。试验第30 d时，除EE表观消化率，试验组公牛DM、CP、NDF、ADF、Ca、P表观消化率均显著高于对照组（P0.05）；Ⅱ组公牛的CP表观消化率显著高于Ⅰ组和Ⅲ组（P0.05）；Ⅰ组和Ⅱ组公牛的NDF表观消化率显著高于Ⅲ组（P0.05）；Ⅱ组公牛的Ca表观消化率显著高于Ⅰ组和Ⅲ组（P0.05）。试验第60 d时，Ⅰ组公牛的DM、CP、ADF和P表观消化率显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.001.T002表2黄芪多糖对荷斯坦公牛养分表观消化率的影响项目对照组Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组SEMP值tP值APSP值t×APS干物质（DM）第1 d65.5164.0566.5465.460.720.010.010.01第30 d64.97b68.62a69.73a68.24a第60 d67.88b70.86a68.26b69.40ab粗蛋白（CP）第1 d72.09a69.17bc70.77ab68.19c0.720.010.010.01第30 d70.14c73.91b76.00a72.84b第60 d73.51b76.12a75.28ab75.37ab中性洗涤纤维（NDF）第1 d63.3461.5862.4061.490.710.010.010.01第30 d60.10c67.30a67.60a65.01b第60 d65.9867.7366.0667.47酸性洗涤纤维（ADF）第1 d57.0055.5458.0455.951.250.010.010.01第30 d52.41c61.67a60.63ab57.86b第60 d58.73b62.54a59.64ab60.18ab粗脂肪（EE）第1 d91.2189.9990.0992.600.770.960.240.16第30 d90.4390.9891.0291.99第60 d91.7692.0090.1490.52钙（Ca）第1 d45.8444.8846.0645.791.340.010.010.11第30 d46.63c50.18b54.95a50.78b第60 d50.50b51.44b56.21a51.34b磷（P）第1 d65.8563.5965.3664.570.570.010.010.01第30 d63.27c69.12a68.35ab67.34b第60 d68.12b69.90a68.30ab69.57ab注：同行数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。%2.3黄芪多糖对荷斯坦公牛血清免疫指标的影响（见表3）由表3可知，试验第60 d时，Ⅱ组公牛血清的IgG含量比对照组提高49.69%（P0.05），比Ⅰ组血清IgG含量提高43.48%（P0.05）；Ⅲ组血清IgG含量比对照组提高47.18%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.001.T003表3黄芪多糖对荷斯坦公牛血清免疫指标的影响项目对照组Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组SEMP值tP值APSP值t×APSIgA第1 d93.2390.77103.4390.266.730.160.660.55第30 d71.7385.5699.5592.37第60 d96.69112.59104.3194.02IgM第1 d206.69178.15214.28192.5725.760.860.300.80第30 d194.63177.62244.33206.68第60 d166.67209.53214.22196.64IgG第1 d30.0529.0725.6125.992.990.220.660.18第30 d24.4124.8426.9324.93第60 d19.18c20.01bc28.71a28.23abmg/L3讨论3.1黄芪多糖对荷斯坦公牛养分表观消化率的影响高温环境条件下可以造成公牛机体氧化损伤，降低采食量[9]，减少养分吸收率[10]；破坏瘤胃内温度，造成瘤胃内微生物结构发生变化。冯士彬等[11]研究表明，APS可以提高羔羊肠道有益菌的丰度，改善直肠微生态平衡。魏海燕等[12]研究表明，添加黄芪超细粉可以提高人工瘤胃液微生物的相对丰度和多样性。Deng等[13]研究发现，添加黄芪可以改变瘤胃的发酵模式，原因可能是黄芪可以抑制或杀死瘤胃细菌以改善瘤胃发酵性能。本试验中，日粮中添加APS可以显著提高荷斯坦公牛DM、CP、NDF、ADF、Ca、P的表观消化率。可能因为APS缓解高温对荷斯坦公牛胃肠道的损伤，提高有益菌的丰度，改善直肠微生态平衡，进而提高养分表观消化率。3.2黄芪多糖对荷斯坦公牛血清免疫指标的影响动物机体免疫性能增强往往伴随着血清中免疫球蛋白含量升高[14]。Wang等[15]研究发现，APS可以提高感染李斯特菌小鼠血清中免疫球蛋白含量。鲍玉林等[16]研究表明，APS提高了藏羊的脾脏指数以及血清中IL-2、IgG、IgA、IgM和IFN-γ含量，添加0.1%的APS效果最佳，与万玛吉[17]的研究结果一致。本试验中，APS可以提高血清IgA、IgG、IgM的含量，添加16 g/(头·d)组效果较优。4结论本试验条件下，日粮添加APS可以提高荷斯坦公牛营养物质的表观消化率、提高机体免疫性能；建议APS添加量为8~16 g/(头·d)。