中草药具有抑菌、抗病毒、调节免疫、促生长、抗氧化及改善畜禽产品质量的功能，毒副作用小，已经逐渐作为新型饲料添加剂在畜禽养殖中应用[1]。金银花是种药用价值极高的植物，也是开发替代抗生素饲料添加剂的重要药食同源中草药之一[2]。研究发现，绿原酸具有抗炎抗菌[3]、抗氧化[4]、减少肝脏脂肪沉积[5]、促进动物生长等功能[6]。唐志文[7]研究表明，日粮中添加1~2 g/kg含有10％绿原酸的金银花提取物显著提高了奶牛血液中T-AOC和SOD活性。Ma等[8]研究表明，添加28 g/d的金银花提取物可以提高奶牛血清中GSH-Px活性和T-AOC，显著降低丙二醛（MDA）含量。符运斌等[9]、宋小珍等[10]、李玉琴等[11]研究发现，在精料中添加0.2%的金银花提取物可以提高肉牛血清中T-AOC以及GSH-Px和SOD活性，降低血清中MDA含量。金银花全株皆可药用，特别是茎和叶被用于清热解毒和祛风凉血。本课题组前期研究发现，金银花枝条中含有少量绿原酸和木樨草苷活性成分[12]。金银花的茎叶、枝条等副产物利用率较低。本试验在日粮中添加金银花枝条粉，分析其对西门塔尔肉牛生长性能、血清生化、抗氧化及免疫指标的影响，旨在为金银花枝条粉在肉牛养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料金银花枝条为宁夏当地种植的金银花收获后的枝条，经晾晒、粉碎后利用。金银花的干物质含量为88.94%，粗蛋白含量为8.83%，粗纤维含量为36.20%，中性洗涤纤维含量为49.7%，酸性洗涤纤维含量为56.3%，相对饲用价值为82.92。金银花枝条中绿原酸含量为0.73%，木樨草苷含量为0.112 7%。1.2试验设计试验在宁夏西夏区三鑫绿源肉羊养殖合作社进行，选择健康、体况良好、体重相近的西门塔尔杂交公牛24头，随机分为4组，每组6个重复。组间初重无显著差异。试验日粮参照NY/T 815—2004标准配制，对照组不添加金银花枝条粉，试验1组、2组、3组分别在基础日粮中添加100、200、300 g/(头·d)的金银花枝条粉，基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.002.T001表1基础日粮组成及营养水平（干物质基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米28.00粗纤维%17.71胡麻饼2.40粗蛋白质/%7.90麸皮3.20钙/%0.25精补料4.00磷/%0.25枸杞残次果1.20综合净能/(MJ/kg)3.90小苏打0.40食盐0.40预混料0.40玉米青贮30.00玉米芯18.00芦苇草4.20麦草秸秆4.20稻草3.60注：1.每千克预混料为饲粮提供：VA 40 000~330 000 IU、VD3 10 000~100 000 IU、VE≥300 IU、Fe 60~1 600 mg、Zn 60~400 mg、Cu 10~500 mg、Mg 40~500 mg。2.营养水平中综合净能为计算值，其余均为实测值。1.3饲养管理试验牛采取拴系饲喂方式，试验期105 d，预试期15 d，正式试验期90 d。预试期开始每日18：00投喂金银花枝条粉1次，由专人每日称量后与饲草料混匀饲喂，投喂量由少量过渡到正常饲喂量，试验牛自由饮水。牛舍环境条件及饲养管理均保持一致。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能每日准确记录投料量，每月定期抽测采食量；正式试验期开始和结束当天早晨空腹称量试验牛体重，计算试验期平均日增重（ADG）、料重比（F/G）。平均日增重＝(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量＝(饲喂量－剩料量)/(每组牛头数×试验天数)(2)料重比＝平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2血清指标分别于试验正式开始、30 d、试验结束当天早晨，对试验牛全部进行颈静脉采血10 mL，室温静置，待血样在采血管中凝固析出血清后，2 200 r/min离心10 min，使用移液枪分装上层透明血清，于-20 ℃冷冻保存，所有样品委托北京华英生物技术研究所进行检测。试验牛血清中总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、葡萄糖（GLU）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）含量以及肌酸激酶（CK）活性均使用北京中生北控生物科技股份有限公司生产的试剂盒测定；血清胆碱酯酶活性（CHE）使用长春汇力生物技术有限公司生产的试剂盒测定。免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、丙二醛（MDA）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、总抗氧化能力（T-AOC）以及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-Px）活性均使用迈瑞BS-420型全自动生化分析仪及华卫朗德DR-200BS测定，由北京华英生物技术研究所测定。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 20.0软件单因素方差分析，Duncan's法多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1金银花枝条粉对肉牛生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，试验开始、结束时，试验各组肉牛的体重、平均日增重、料重比均差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.002.T002表2金银花枝条粉对肉牛生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/[kg/(头·d)]平均日采食量/[kg/(头·d)]料重比对照组346.60±31.45420.00±31.680.82±0.118.53±1.2211.73±4.28试验1组332.40±50.61408.60±69.620.85±0.249.16±2.0512.72±5.68试验2组346.00±38.14422.20±46.740.78±0.219.77±2.3310.82±1.37试验3组353.31±47.40422.60±59.450.77±0.267.62±0.7610.65±3.772.2金银花枝条粉对肉牛血清生化指标的影响（见表3）由表3可知，30 d时，试验组肉牛血清中TP、GLB含量显著高于对照组（P0.05）；90 d时，试验1组肉牛血清中GLB含量显著高于对照组（P0.05），2组血清中GLU显著高于对照组（P0.05）。试验30 d时，试验3组肉牛血清中GLU、CREA含量及CK活性显著高于对照组（P0.05）。90 d时，试验组肉牛血清中CHE活性与对照组呈下降趋势，试验2组肉牛血清中CHE活性显著低于试验1组和对照组（P0.05）。试验第1、30、90 d时试验3组GH含量显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.002.T003表3金银花枝条粉对肉牛血清生化指标的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组TP/(g/L)第1 d49.50±11.2459.09±1.9757.15±7.0359.10±9.60第30 d46.36±12.32b62.85±10.86a62.82±8.17a68.07±6.34a第90 d48.66±10.9261.49±16.4661.84±7.8952.23±3.23ALB/(g/L)第1 d19.34±3.7922.74±2.7121.42±3.1123.64±4.23第30 d19.30±5.11a21.74±4.34ab23.17±2.96ab25.30±1.90b第90 d19.91±5.3520.38±4.5223.90±1.3220.93±2.57GLB/(g/L)第1 d30.16±9.7236.35±3.5135.73±4.3535.46±5.58第30 d27.07±7.56b41.11±8.08a39.65±6.50a42.77±5.39a第90 d28.76±5.65b41.11±14.32a37.94±6.66ab31.30±2.86abGLU/(mmol/L)第1 d1.78±1.071.54±0.691.37±0.601.74±1.23第30 d2.05±0.71b2.57±0.71ab3.00±0.27a2.97±0.42a第90 d1.66±0.40b1.71±0.68ab2.40±0.41a1.78±0.57abBUN/(mmol/L)第1 d0.19±0.160.61±0.850.39±0.330.40±0.34第30 d0.49±0.170.34±0.230.76±0.540.56±0.48第90 d1.04±0.400.59±0.271.15±0.900.66±0.37CREA/(μmol/L)第1 d103.07±20.53108.96±7.2895.39±14.54113.13±21.74第30 d101.42±18.07b109.76±15.69ab112.97±17.97ab122.46±16.91a第90 d123.51±18.21115.15±13.74130.96±18.76121.88±16.79CK/(U/L)第1 d222.98±93.68254.91±188.76193.05±169.00271.55±269.01第30 d184.45±75.01b214.60±67.07ab248.84±14.00ab314.81±132.90a第90 d465.36±332.36530.35±368.19482.39±45.97532.23±74.26CHE/(U/L)第1 d941.09±67.87969.75±117.76943.49±68.88931.54±80.60第30 d949.56±169.481 050.06±177.96990.22±74.541 112.45±73.64第90 d1 092.77±85.05a1 084.23±111.22a975.94±46.33b1 025.61±59.76abGH/(μg/L)第1 d3.56±0.62b4.23±1.37b6.44±1.70a6.09±1.94a第30 d6.35±1.88b7.11±2.00ab7.17±1.00ab8.38±0.40a第90 d6.58±0.94b7.39±0.26ab7.88±1.47ab8.92±1.82a注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.3金银花枝条粉对肉牛血清抗氧化指标的影响（见表4）由表4可知，对照组肉牛血清中T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT活性均高于试验组，MDA、GH含量低于试验组。第1、30、90 d时，试验1组、2组和3组肉牛血清中SOD活性显著低于对照组（P0.05）。第1、30、90 d时，试验3组肉牛血清中GSH-Px活性显著低于对照组（P0.05）。第1、90 d时，试验3组肉牛血清中T-AOC、CAT活性显著低于对照组（P0.05）。第1、30、90 d时，对照组MDA含量显著低于试验3组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.002.T004表4金银花枝条粉对肉牛血清抗氧化指标的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组SOD/(U/mL)第1 d95.73±7.17a79.29±4.12b78.25±13.10b69.97±12.17b第30 d79.19±17.48a75.50±5.34b71.70±2.50b61.27±13.62b第90 d72.48±7.64a67.71±11.03ab60.21±19.13b52.66±10.00bGSH-Px/(U/mL)第1 d451.68±24.82a450.73±38.86ab405.24±34.84b376.29±34.71b第30 d380.13±30.68a377.80±31.12a363.13±44.14a312.24±24.40b第90 d306.07±17.66a301.35±9.82a252.39±13.29a230.24±23.32bT-AOC/(U/mL)第1 d11.96±0.71a10.66±1.87ab10.23±1.71ab9.03±2.03b第30 d9.29±0.55a8.86±0.25ab8.40±0.90ab7.68±1.76b第90 d7.52±0.31a7.53±1.37ab6.85±1.42ab5.76±0.83bCAT/(U/mL)第1 d15.25±1.09a13.22±1.29b11.01±1.06b10.87±1.13b第30 d13.01±1.8012.00±0.7311.30±0.5610.50±3.39第90 d12.58±1.04a11.45±2.04ab9.54±2.32b8.51±2.06bMDA/(μmol/L)第1 d4.27±0.22b4.52±0.41ab4.85±0.44a5.20±0.85a第30 d4.39±0.16b5.29±0.60a5.45±0.06a5.92±1.03a第90 d5.39±0.60b5.97±0.70ab6.38±0.93ab6.82±1.05a2.4金银花枝条粉对肉牛血清免疫指标的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，肉牛血清中IgA、IgG、IgM含量呈下降趋势，但均在正常参考范围内；试验1组、2组、3组肉牛血清中IL-2、IL-6含量均有升高趋势；30 d、90 d时，试验3组肉牛血清中IL-10含量显著低于对照组（P0.05）。试验1 d时，试验2组、试验3组肉牛血清TNF-α显著高于对照组（P0.05）；30 d时，试验3组肉牛血清TNF-α显著低于对照组（P0.05）；90 d时，试验3组肉牛血清TNF-α显著高于对照组、1组和2组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.002.T005表5金银花枝条粉对肉牛血清免疫指标的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组IgA/(g/L)第1 d2.34±0.182.29±0.202.38±0.342.23±0.91第30 d2.31±0.232.14±0.102.25±0.372.13±0.34第90 d2.06±0.292.01±0.611.79±0.251.70±0.31IgG/(g/L)第1 d12.68±0.4712.47±1.5112.54±1.0411.81±1.28第30 d11.95±0.64a11.54±1.14ab11.86±1.93cb10.81±1.88c第90 d11.62±0.94a11.16±1.62ab10.10±0.64bc9.69±0.59c续表5　金银花枝条粉对肉牛血清免疫指标的影响10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.09.002.T006项目对照组试验1组试验2组试验3组IgM/(g/L)第1 d1.81±0.07a1.66±0.08ab1.51±0.14b1.53±0.18b第30 d1.61±0.14a1.61±0.23a1.31±0.27b1.27±0.08b第90 d1.47±0.261.36±0.151.31±0.161.15±0.45IL-2/(ng/L)第1 d200.04±20.63b233.87±24.58ab260.35±39.17a253.64±28.69ab第30 d197.36±11.79b211.27±14.09ab292.76±11.92a358.19±37.92a第90 d249.30±18.96b296.12±21.48a299.63±14.78a299.57±20.10aIL-6/(ng/L)第1 d124.20±10.08b133.44±5.41ab137.93±14.93ab151.07±30.61a第30 d136.88±3.70b141.76±16.83ab148.40±15.26a155.82±0.91a第90 d132.42±8.97c180.67±14.20b183.62±22.32b266.51±21.44aIL-10/(ng/L)第1 d24.98±6.6423.67±11.0924.65±2.5219.47±7.83第30 d24.19±6.91a20.58±7.64ab17.83±13.61b9.57±2.94c第90 d14.20±2.50a13.17±1.62ab11.99±1.42ab10.33±0.94bTNF-α/(ng/L)第1 d34.06±2.12b40.25±6.06ab45.86±10.01a53.15±1.97a第30 d44.08±5.49a41.37±4.70ab40.66±5.24ab37.55±4.64b第90 d50.90±16.68c73.13±10.81b76.99±8.79b104.09±3.56a3讨论3.1金银花枝条粉对肉牛生长性能的影响金银花的花、茎和叶具有相似的生物活性成分，具有抗菌、抗炎和抗氧化等多种生理功能[10]。绿原酸作为饲料添加剂可以改善断奶仔猪生长性能[13]。研究表明多种中草药中富含氨基酸、蛋白质、多糖、维生素等多种营养物质，能够补充动物生长所需的能量，提高生长性能[14-15]。本试验结果表明，日粮中添加金银花枝条粉饲喂西杂肉牛，试验各组肉牛体重、平均日增重、料重比均未达到显著性水平，添加100 g/(头·d)金银花枝条粉后肉牛料重比呈下降趋势。这与王曼鸿[16]研究表明在犊牛日粮中添加一定量中草药添加剂可以提高生长性能结果一致。3.2金银花枝条粉对肉牛血清生化指标的影响血清生化指标的变化通常与机体营养水平或疾病相关[17]。本试验中，血清葡萄糖、脂类、蛋白代谢等相关血清指标均在正常范围内，说明各组动物机体代谢水平正常。本试验结果表明，试验期内饲喂金银花枝条粉的试验牛血清中TP、ALB、GLB均呈上升趋势，30 d时试验1组、2组、3组TP、ALB、GLB含量显著高于对照组，90 d时试验1组肉牛血清中GLB显著高于对照组，2组肉牛血清GLU含量显著高于对照组；30 d时饲喂金银花组CREA、CK含量由上升趋势，试验3组GLU、CREA、CK含量显著高于对照组，这与鲁利萍等[18]研究表明在断奶犊牛日粮中添加2.0%女贞子、益母草复方中草药添加剂血清中葡萄糖含量显著提高结果一致。3.3金银花枝条粉对肉牛血清抗氧化指标的影响T-AOC常用于衡量机体抗氧化的综合能力。SOD和GSH-Px是体内主要的抗氧化酶，可以清理氧自由基，MDA是体内脂类物质被氧化后得到的最终产物[19]，是反映动物机体抗氧化能力的重要指标[20]。本试验结果表明，日粮中添加金银花枝条粉肉牛血清中SOD、GSH-PX、CAT活性以及T-AOC没有提高，GH含量显著升高，与王芳芳等[21]在哺乳母猪日粮中添加葛根异黄酮改善哺乳母猪泌乳性能，血清中生长激素含量和抗氧化能力提高有不同之处。3.4金银花枝条粉对西杂肉牛血清免疫指标的影响金银花通过增强白细胞的吞噬功能，促进淋巴细胞转化，起免疫调节作用[2]。动物饲料中添加适量的金银花提取物可增强抗病能力。IgG、IgA、IgM是肉牛体内重要的免疫球蛋白，其含量上升说明体液免疫启动[2]。本试验研究结果表明，日粮中添加适量金银花枝条粉，试验组牛血清中IgG、IgA、IgM含量显著低于对照组，与刘英等[22]研究绿原酸对仔猪的免疫球蛋白水平无显著影响结果相似。IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α是在众多炎症细胞因子中起主要作用的因子，参与炎症和免疫抑制的细胞因子，当其表达过高时能够诱发某些疾病。本研究表明添加200~300 g/(头·d)的金银花枝条粉可降低IL-10的含量，增加TNF-α的含量，能否表明饲喂适量金银花枝条粉30 d可降低机体炎性反应，提高机体免疫力，需要进一步深入探究和探讨。这与王建东等[23]研究表明饲喂枸杞枝条颗粒饲料显著增加围产期肉牛细胞因子其中IL-4、IL-8、IL-13、TNF-α水平，可以有效提高细胞免疫水平有不同之处。其可能的原因在于免疫球蛋白的形成和分泌过程受许多因素的影响，除自由基的影响外，还受B细胞、环境、营养水平等多种因素的影响。4结论本研究中，日粮中添加适量金银花枝条粉，可提高西杂肉牛平均日增重和平均日采食量，促进机体对蛋白质的合成代谢，对机体健康无负面影响，建议添加量300 g/(头·d)为宜。