抗生素作为饲料添加剂能够抑制动物肠道中的致病菌定植生长,增强动物饲料转化率和生长速度,降低动物死淘率[1]。随着禁止抗生素饲用政策的实施,植物活性物质对动物的抗病、促生长等饲用功效得到了广泛的重视和深入研究。枸杞及沙棘的种植管理、采收、清选、加工过程中产生大量的枝条、叶片、果屑等副产品,富含多种活性物质[2]。枸杞副产物中多糖、黄酮类活性物质含量相对较高;沙棘副产物中有机酸、皂苷、生物碱类活性物质相对丰富[3]。枸杞果、叶具有补益、生血、增强免疫力等作用;沙棘果、叶则具有杀菌、消炎、抗氧化等功效[4-5]。关于枸杞、沙棘及其提取物在猪、鸡、反刍动物上的应用已有报道。研究显示,饲粮中添加沙棘提取物可极显著提高猪的体重,改善肉品质[6-7]。饲粮中添加枸杞渣可显著提高育肥猪日增重,降低病死率和料重比[8]。研究发现,白羽肉鸡饲粮中添加225 mg/kg沙棘与枸杞复合提取物可显著提高肉鸡生长性能、抗氧化能力和免疫能力。本试验研究沙棘和枸杞复合提取物对育肥猪生产性能、血清抗氧化指标及免疫指标的影响,为沙棘和枸杞复合提取物在育肥猪实际生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验地点本试验于2021年3月8日至4月18日在湖南省浏阳市浏安农业科技综合开发有限公司进行。预试期10 d,正式试验期30 d。1.2试验材料沙棘与枸杞复合提取物由湖南水滴生物科技有限公司提供,主要原料为沙棘和枸杞的枝叶、果屑,主要活性成分为:复合多糖≥25 g/kg、类黄酮≥4 g/kg、皂苷≥2 g/kg。博落回散购自湖南美可达生物资源有限公司,规格为100∶0.375。基础饲粮参照GB/T 39235—2020制备,基础饲粮组成与营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.10.006.T001表1基础饲粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米40.00消化能/(MJ/kg)15.88豆粕8.20干物质/%89.37稻谷28.40粗蛋白/%11.85米糠粕21.00粗灰分/%6.67预混料2.40粗纤维/%16.18酸性洗涤纤维/%16.08中性洗涤纤维/%42.97粗脂肪/%18.99磷/%6.00钙/%0.10注:1.预混料购自湖南粒峰生物科技有限公司。2.营养水平均为计算值。1.3试验设计试验采用单因素完全随机设计,选取54头健康状况良好、体重(38.75±0.87)kg的宁乡花猪,随机分为3组,每组6个重复,每个重复3头猪。对照组在基础饲粮中添加500 mg/kg博落回散;试验1组、试验2组分别在基础饲粮中添加250、300 mg/kg复合提取物。1.4饲养管理预试期前对猪舍严格灭菌杀毒,采取自由饮水与自由采食方式。定期清洗料槽、清理粪便,每日人工喂料并记录采食量,保证每日24 h食槽中有料。1.5测定指标及方法1.5.1生产性能试验开始和结束,每栏猪空腹称重,记为育肥猪的初重和末重,计算平均日增重(ADG);每日准确记录投料量,至正式试验期第30日0点断料计算,计算平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。ADG=(末重-初重)/试验天数(1)ADFI=总采食量/试验天数(2)F/G=ADFI/ADG(3)1.5.2血清指标试验第30 d,提前12 h空腹处理,每个重复中随机抓取1头猪,通过前腔静脉采血10 mL,3 000 r/min离心15 min,取上清液,-20 ℃保存。血清指标委托湖南农业大学贝斯特动物医院测定,包含超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG);免疫指标包括免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、白细胞-介素1(IL-1)、白细胞介素-10(IL-10)、核转录因子κB(NF-κB)。1.6数据统计与分析试验数据采用Excel 2016软件进行整理,SPSS 22.0软件进行单因素方差分析(One-way ANOVA),Duncan's法进行组间多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1沙棘和枸杞复合提取物对育肥猪生产性能的影响(见表2)由表2可知,试验组育肥猪的ADFI和ADG均高于对照组,但差异不显著(P0.05);试验组育肥猪的F/G均低于对照组,差异不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.10.006.T002表2沙棘和枸杞复合提取物对育肥猪生产性能的影响项目初重末重ADFI/[kg/(头·d)]ADG/[kg/(头·d)]F/GP值0.9070.4120.8170.0810.131对照组38.02±1.7160.31±0.742.82±0.780.74±0.023.81±0.23试验1组38.60±5.4863.20±8.472.75±0.260.82±0.063.34±0.11试验2组39.62±5.1466.95±4.932.92±0.170.91±0.043.21±0.202.2沙棘和枸杞复合提取物对育肥猪血清抗氧化指标的影响(见表3)由表3可知,各组间育肥猪血清GSH-Px、SOD的活性和T-AOC差异均不显著(P0.05)。与对照组相比,试验1组、试验2组育肥猪血清MDA含量显著降低(P0.05),试验1组MDA含量显著高于试验2组(P0.05);试验1组CAT活性显著升高(P0.05);试验2组血清8-OHDG含量显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.10.006.T003表3沙棘和枸杞复合提取物对育肥猪血清抗氧化指标的影响项目T-AOC/(U/mL)SOD/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)CAT/(U/mL)8-OHDG/(μg/L)P值0.6050.2630.2330.0000.0090.040对照组18.76±1.90356.75±47.54307.15±25.556.68±1.17a13.21±1.11b45.10±5.80a试验1组20.10±3.08398.68±86.81274.61±39.875.01±1.34b15.56±1.23a42.44±5.04ab试验2组20.31±3.27434.17±73.02290.96±26.882.96±0.13c13.66±1.11b36.85±4.50b注:同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P0.05),不同小写字母表示差异显著(P0.05);下表同。2.3沙棘和枸杞复合提取物对育肥猪血清免疫指标的影响(见表4)由表4可知,各组间育肥猪血清IL-1和NF-κB含量差异不显著(P0.05)。与对照组相比,试验2组育肥猪血清IL-10含量显著升高(P0.05);试验1组、试验2组IgA含量均显著升高(P0.05);试验2组育肥猪血清IgM、IgG含量均显著升高(P0.05)。试验2组育肥猪血清IgA含量显著高于试验1组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.10.006.T004表4沙棘和枸杞复合提取物对育肥猪血清免疫指标的影响项目IL-1/(ng/L)IL-10/(ng/L)NF-κB/(μg/L)IgA/(mg/L)IgM/(g/L)IgG/(g/L)P值0.2130.0190.5200.0000.0100.001对照组80.70±26.6567.31±6.67b69.07±12.70495.82±69.35c14.71±2.66b8.05±2.77b试验1组80.20±24.7880.28±13.89ab68.97±12.53642.68±84.86b17.67±3.05ab10.26±2.28b试验2组104.37±25.9292.44±17.42a61.89±11.32779.82±77.49a19.99±1.85a16.27±3.49a3讨论3.1沙棘和枸杞复合提取物对育肥猪生产性能的影响生猪养殖生产中,提高生产性能是养户收入提高的关键。研究发现,饲粮中添加枸杞渣能够增强育肥猪的生产性能和抵抗疾病能力[9]。刘祝英等[10]研究发现,在基础饲粮中添加复合多糖能够显著提高育肥猪日增重,降低料重比。Chen等[11]研究发现,添加枸杞多糖可改善断奶仔猪的生长性能,增强免疫和抗氧化力,能够改善断奶仔猪肠道微生物种群。本试验结果显示,在基础饲粮中添加250 mg/kg和300 mg/kg复合提取物可显著降低育肥猪的料重比。多糖能够促进肠道绒毛生长,隐窝深度降低,机体的营养物质消化吸收能力加强,因而提高生产性能[12]。多糖、类黄酮、皂苷等活性成分可以抑制病原微生物,保障肠道形态结构完整,且该复合提取物中的有机酸可以改变肠道菌群和结构[13],有利于猪吸收利用饲料中的营养物质。3.2复合提取物对育肥猪血清抗氧化指标的影响动物机体在自身新陈代谢过程中,自由基的产生速率超过机体清除速率时,动物体内堆积的自由基过多使机体发生氧化应激,严重破坏机体内环境的动态平衡[14]。本试验研究发现,在饲料中添加沙棘和枸杞复合提取物显著提高育肥猪血清CAT活性,提高育肥猪血清T-AOC、SOD和GSH-Px活性;显著降低育肥猪血清MDA含量和8-OHDG活性,且试验2组低于其他组。该复合提取物中的多糖、类黄酮、皂苷等可调节动物机体内抗氧化活性物质,提高清除自由基能力和抗氧化酶系活性;枸杞红素通过上调CAT和SOD等抗氧化酶的表达,降低MDA的活性[15],提高抗氧化能力。多糖可以抑制NF-κB-p50的表达活性以及NLRP3/6炎症小体通路被激活,调节应激原和抗应激物质含量提高抗氧化指标[16]。复合提取物能够显著抑制氧化应激引起的血清ALT和AST水平升高,提高GSH-Px、SOD和CAT等抗氧化的表达水平,抑制脂质过氧化产物MDA产生[17],从而减轻肝损伤。8-OHDG是翔基自由基攻击导致DNA氧化损伤的生物标记物[18],DNA损伤越严重其含量越高。本试验中,8-OHDG与对照组相比含量少,沙棘和枸杞提取物对活性氧攻击DNA等大分子物质具有保护作用,表明抗氧化能力比博落回强。王鹏祖等[19]在基础饲粮中添加0.1%沙棘叶总黄酮,肉鸡血清SOD活性和T-AOC能够显著提高,MDA含量显著降低,从而增强肉鸡的血清抗氧化能力。王亚妮等[20]在滩羊饲粮中添加枸杞渣,结果发现,滩羊血清GSH-Px和SOD活性增强,MDA含量降低,试验前期滩羊血清抗氧化力提高,后期抗氧化能力下降。本试验结果与上述研究一致。因本研究试验期仅为30 d,延长试验期是否会降低育肥猪血清抗氧化能力还需进一步研究。3.3复合提取物对育肥猪血清免疫指标的影响动物机体一般通过免疫活性物质、免疫细胞及免疫器官发挥免疫调节功能,脾脏是猪体内最大的免疫应答器官,是抗体的主要生产基地。本试验研究发现,在饲料中添加沙棘和枸杞复合提取物能够显著提高育肥猪血清免疫球蛋白IgA、IgG和IgM含量。高剂量的枸杞多糖能促进脾脏等免疫器官的生长发育,增加派氏结数目,刺激IgA的分泌,促进淋巴细胞增殖分化[21]。试验组抗炎因子IL-10含量显著增加,NF-κB含量下降;试验1组IL-1含量比对照组更低,可能是250 mg/kg提取物里面的活性营养物质浓度过低,导致吞噬细胞分泌的IL-1被抗原性异物消耗,导致比对照组含量更低。NF-κB对早期炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达具有调控作用[22],减轻脂多糖诱导的细胞炎症,本试验中含量下降可能是复合提取中的活性物质调节炎症因子,抑制NF-κB活性。一定浓度的枸杞提取物还可促进IL-1和IL-10受体的表达,IL-1、IL-10可促进T细胞、NK细胞和B细胞的增殖,枸杞多糖通过调节TLR2-NF-κB/p38[23]信号通路,调控树突状免疫细胞的成熟和增加吞噬速率,减缓脾脏等免疫细胞衰老,免疫能力增强。王亚妮等[20]在基础饲粮中添加5%枸杞渣时,滩羊免疫性能最佳,且颗粒料比粉状料血清免疫球蛋白含量高。本试验只做粉状料试验,育肥猪采食颗粒料的血清免疫指标未知。陈垚[23]发现,饲粮中添加高剂量枸杞提取物能够提高小鼠细胞免疫、体液免疫、巨噬细胞吞噬功能指标及NK细胞活性,从而免疫力增强。植物提取物的饲喂温度、粉碎状况、浓度等因素也影响动物机体的免疫能力,仍有待进一步探索研究。4结论饲粮中添加300 mg/kg沙棘与枸杞复合提取物,能够改善育肥猪的生产性能,降低料重比,显著增强育肥猪血清的抗氧化指标和免疫指标。因条件所限,本试验复合提取物的添加量只设两个梯度,结果显示,300 mg/kg效果比250 mg/kg更佳,大于300 mg/kg的添加剂量效果是否更好,尚需进一步试验。

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