皇竹草具有抗逆性强、产量高、蛋白质含量高等特点,可以在牛、羊等草食性动物以及禽类、鱼类养殖中应用[1]。皇竹草适宜热带与亚热带气候栽培[2],寒冷条件下生长受限。皇竹草水分含量高、不利贮存[3],整体利用率偏低,容易造成资源浪费。赵晓登等[4]发现,皇竹草青贮可以最大程度保持营养成分,延长保存时间,在新鲜草料短缺季节能够为食草动物提供充足的饲草[5]。酒糟是白酒生产过程中产生的固体残渣,由各种粮食谷物组成[6],含有大量其他未能发酵完全的营养物质,如蛋白质、氨基酸、维生素等[7]。随我国酿酒业的发展,酒糟产量不断增加。将酒糟与干物质含量较高的牧草采用适当比例混合青贮,可以促进酒糟及相应牧草的物质转化,能够解决酒糟长期保存问题,提高青贮饲料营养价值,增强青贮饲料品质及适口性[8-9]。孙安琪[10]研究发现,将酒糟与菊芋渣混合青贮有利于营养成分保存及结构性碳水化合物的降解。陈冬梅等[11]发现,巨菌草与无糠壳白酒糟混合青贮可以增加水溶性碳水化合物和乳酸含量,减少青贮原料中蛋白质的降解。目前,关于皇竹草与酒糟混合青贮的研究报道相对较少。本试验采用不同比例酒糟和皇竹草混合青贮,以期寻找混合青贮适宜的比例,为开发利用酒糟与皇竹草混合青贮饲料提供参考。1材料与方法1.1试验材料酒糟购自四川宜宾李庄古镇,皇竹草采自四川宜宾屏山县锦屏镇栗子村。1.2试验设计试验分为7组,皇竹草组不添加酒糟,添加100%皇竹草青贮,酒糟组不添加皇竹草,添加100%酒糟青贮,其他各组酒糟和皇竹草混合比例分别为1∶9(10%组)、2∶8(20%组)、3∶7(30%组)、4∶6(40%组)、5∶5(50%组),每组3个重复。1.3混合青贮的制作皇竹草预处理:新鲜的皇竹草置于阴凉处摊晾,待水分降低至约80%,切割为3~5 cm长叶段。酒糟预处理:酒糟置于在阴凉处摊晾,至水分降至约60%。将预处理的皇竹草和酒糟按比例混匀,装入青贮瓶,压实,排除空气,遮光处理。混合青贮60 d。1.4测定指标及方法1.4.1感官评定参照我国农业农村部颁发的《青贮饲料质量评定标准》[12],混合青贮开封时根据不同混合比例青贮饲料的质地、气味、霉变和色泽等感官指标[13]现场评定。1.4.2常规营养成分分析青贮后的样品干制,干样粉碎置于密封袋。参照《饲料分析及饲料质量检测技术》[14]测定样品中的粗灰分(Ash)、木质素(ADL)和纤维素(CL)含量;使用蒽酮-硫酸比色法[15]测定水溶性碳水化合物(WSC)含量。参照GB/T 20806—2006[16]和NY/T 1459—2007[17]测定样品中的酸性洗涤纤维(ADF)、中性洗涤纤维(NDF)和半纤维素(HC)含量;参照GB 5009.6—2016[18]测定,样品中的粗纤维(CF)含量参照GB/T 5009.10—2003[19]测定样品中脂肪含量。1.4.3发酵品质分析参照DB15T 1458-2018[20]测定样品中的pH值和氨态氮(NH3-N)含量。参照GB 5009.5—2016[21]测定样品中的总氮(TN)含量。参照GB 5009.157—2016[22]测定样品中乳酸(LA)、乙酸(AA)、丙酸(PA)和丁酸(BA)含量。1.4.4青贮饲料发酵品质的评分参照《粗饲料品质评价手册》(2001)[23]制定的青贮饲料发酵品质V-Score评分标准,以NH3-N/TN和AA、PA及BA含量作为评定指标,对青贮后的样品进行发酵品质分析。V-score分配计算式见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.023.T001表1V-score分配计算式项目指标变化范围NH3-N/TN(XN)≤55~1010~20≥20计算式YN=50YN=60-XNYN=80-4XNYN=0AA+PA(XAP)≤0.20.2~1.5≥1.5计算式YAP=10YAP=(150-100XAP)÷13YAP=0BA(XB)0~0.5≥0.5计算式YB=40-80XBYB=0V-scoreY=YN+YAP+YB1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 20软件进行统计处理与分析,LSD法多重比较。结果以“平均值±标准误”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1酒糟与皇竹草不同混合比例青贮饲料的感官品质评定(见表2)由表2可知,感官评定随酒糟添加比例增加而提升。40%组、50%组青贮料均产生酸香味,颜色为黄绿色,松散不粘手,无霉变,感官评定等级均达到优等;30%组青贮料产生淡酸味,松散不粘手,无霉变,颜色为黄绿色,感官评定等级为良好。20%组青贮料产生淡酸味,松散稍微粘手,颜色为黄色,感官评定等级为良好;10%组青贮料产生淡淡的腐臭味,轻微霉变,颜色呈现为黄色,感官评定等级为一般。酒糟组青贮料产生刺鼻酒酸味,轻微粘手,无霉变,颜色呈褐色,感官评定等级为一般;皇竹草组青贮料产生刺鼻的腐臭味,部分腐烂发黏,产生霉变,变色比较严重,颜色呈暗褐色,感官评定等级为劣等。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.023.T002表2酒糟与皇竹草不同混合比例青贮料感官品质评定组别气味质地色泽等级皇竹草组腐臭味腐烂发黏、有霉变暗褐色劣等酒糟组刺鼻酒酸味轻微粘手、无霉变褐色一般10%组淡腐臭味轻微腐烂、霉变黄色一般20%组淡酸味松散稍黏、无霉变黄色良好30%组淡酸味松散不粘手、无霉变黄绿色良好40%组酸香味松散不粘手、无霉变黄绿色优等50%组酸香味松散不粘手、无霉变黄绿色优等2.2酒糟与皇竹草不同混合比例对青贮饲料常规营养成分的影响(见表3)由表3可知,与皇竹草组相比,酒糟组混贮的粗灰分含量显著降低(P0.05),50%组青贮料的粗灰分含量显著降低。与皇竹草组相比,各组青贮料的WSC、脂肪、ADL含量均随酒糟添加比例的增加而显著增加(P0.05)。与皇竹草组相比,酒糟组和10%组青贮料的ADF含量显著升高(P0.05),其他各组差异均不显著(P0.05)。与皇竹草组相比,各组NDF、CF、CL、HC、MC含量随酒糟添加比例的增加而显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.023.T003表3酒糟与皇竹草不同混合比例对青贮饲料常规营养成分的影响组别AshWSCEEADFNDFADLCFCLHCMC皇竹草组11.93±0.34a2.30±0.40g1.64±0.03g40.33±0.15b58.97±0.25a3.57±0.06g37.23±0.06a31.67±0.21a19.07±0.06a78.33±0.58a酒糟组7.70±0.54d45.60±0.48a8.01±0.05a38.53±0.38c49.13±0.15g8.53±0.06a9.13±0.06g24.10±0.10f11.27±0.06f55.70±0.20g10%组11.17±0.43b4.45±0.38f2.54±0.02f41.20±0.56a57.37±0.06b5.90±0.10f36.40±0.00b29.17±0.21b16.50±0.20b77.63±0.15b20%组10.54±0.39bc8.94±0.65e3.34±0.04e40.23±0.06b55.47±0.12c6.10±0.00e35.83±0.06c28.23±0.15c15.07±0.06c74.40±0.10c30%组10.76±0.35bc10.48±0.30d4.19±0.05d40.03±0.06b53.40±0.26d6.27±0.06d34.17±0.06d26.97±0.15d13.57±0.06d72.33±0.68d40%组10.13±0.17c12.75±0.29c4.89±0.02c39.93±0.15b51.93±0.15e6.57±0.12c32.13±0.06e26.83±0.06d11.73±0.06e69.47±0.15e50%组10.08±0.38c14.12±0.48b5.56±0.08b39.97±0.31b49.87±0.15f7.43±0.06b30.70±0.10f26.40±0.10e9.59±0.02g66.43±0.45f注:1.同列数据肩标不同字母表示显著差异(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05)。2.WSC和MC是以鲜样计算,其余指标以干样计算。%2.3酒糟与皇竹草不同混合比例对青贮饲料发酵品质的影响(见表4)由表4可知,各混贮组青贮料的pH值、BA含量均显著低于未添加酒糟的皇竹草组(P0.05);总氮含量显著高于皇竹草组(P0.05)。30%组、40%组、50%组青贮料的LA含量显著高于皇竹草组(P0.05)。与皇竹草组相比,酒糟组和10%组的PA含量显著降低(P0.05),20%组、30%组、40%组和50组青贮料的PA含量显著升高(P0.05)。与皇竹草组相比,各混贮组青贮料的BA含量均显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.023.T004表4酒糟与皇竹草不同混合比例对青贮饲料发酵品质的影响项目皇竹草组酒糟组10%组20%组30%组40%组50%组pH值5.07±0.02a3.47±0.02g4.83±0.02b4.57±0.02c4.50±0.02d4.31±0.02e3.96±0.03fNH3-N/(g/kg)0.51±0.02b0.00±0.00g0.58±0.01a0.44±0.01c0.36±0.01d0.22±0.01f0.25±0.01eTN/(g/100 g)2.12±0.00g3.67±0.00a2.28±0.02f2.32±0.01e2.45±0.02d2.54±0.01c2.61±0.02bLA/(g/kg)6.60±0.00d0.00±0.00g3.07±0.06f4.10±0.10e9.90±0.00a9.17±0.06b8.70±0.00cAA/(g/kg)1.30±0.00c0.03±0.00g2.17±0.06a1.67±0.06b0.70±0.02f0.81±0.01e0.91±0.00dPA/(g/kg)0.31±0.01e0.00±0.00g0.23±0.00f0.57±0.00d0.87±0.01c0.95±0.01b1.12±0.01aBA/(g/kg)0.18±0.01a0.01±0.00e0.13±0.01b0.06±0.00c0.04±0.00d0.02±0.00e0.06±0.00c注:1.同行数据肩标不同字母表示显著差异(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05)。2.表中指标均以鲜样计算。2.4酒糟与皇竹草不同混合比例对青贮饲料发酵品质评分的影响(见表5)V-score评分系统以氨态氮、乙酸、丙酸和丁酸等挥发性脂肪酸为评定指标进行青贮品质评价,各指标不同则含量分配的分数不同。由表5可知,与皇竹草组相比,添加酒糟的混贮组的青贮发酵品质V-score评分明显提高,V-score评分随着酒糟添加比例的呈先增后降的趋势,其中以40%组评分最高,得分为81.08。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.023.T005表5酒糟与皇竹草不同混合比例对青贮料发酵品质评分的影响组别NH3-N/TNAA+PABAV-Score皇竹草组0025.625.60酒糟组01039.249.2010%组0029.629.6020%组4.14035.239.3430%组21.24036.858.0440%组42.68038.481.0850%组40.86035.276.063讨论3.1酒糟与皇竹草不同混合比例对青贮料青贮感官评分的影响本试验中,未添加酒糟单独青贮的皇竹草呈暗褐色,霉变发黏,伴有腐臭味,皇竹草单独青贮的感官评价结果为劣等,表明皇竹草单一青贮饲料的气味、质地、色泽效果较差,不适合后续饲用。詹湉湉等[24]研究表明,香蕉茎直接单一青贮无法获得发酵品质优良的青贮饲料。优质青贮的原料色泽应接近新鲜原料的色泽或呈黄绿色,茎叶结构清晰可见,质地松散不粘手且有适宜的酸香味[25]。本试验中,添加酒糟的混贮组,随酒糟添加比例的增加色泽由黄变成黄绿,质地由轻微腐烂粘手变为松散不粘手,气味由淡腐臭味变为酸香味,表明添加酒糟混贮可以提高皇竹草青贮的感官品质。3.2酒糟与皇竹草不同混合比例对青贮饲料青贮品质的影响皇竹草的含水量约为80%,但水溶性碳水化合物(WSC)的含量不高[26]。周瑞等[27]研究发现,青贮原料含水量过高且缺少发酵底物不利于乳酸发酵,可能导致青贮原料中的营养物质随汁液流失。本试验中,皇竹草组青贮料的pH值较高,可以为好氧微生菌提供适宜的环境,对有害微生物的抑制作用较差,乳酸(LA)含量相对较低,丙酸(PA)、丁酸(BA)含量相对较高。可能由于BA发酵,不利于乳酸菌繁殖[28]。粗纤维(CF)、纤维素(CL)、半纤维素(HC)、BA含量及NH3-N/TN值较高,会影响皇竹草的适口性,也不利于动物消化吸收。本试验中,与皇竹草组相比,混贮组青贮料的Ash、MC、NDF、CF、CL和HC含量显著降低,WSC、EE、ADL含量显著增加,说明皇竹草和酒糟混合青贮能够提高饲料的适口性,形成养分互补,有助于提升发酵品质,均衡青贮饲料整体营养,与贾春旺等[29]、原现军等[30]在酒糟与牧草混合青贮研究结果类似。本试验中,30%组、40%组、50%组青贮料的PA、LA含量比皇竹草组显著提高,可能是因为混贮组中青贮料WSC含量显著上升,弥补皇竹草单一青贮中WSC不足,添加酒糟能够较好地排除青贮体系中的氧气,平衡青贮环境中的水分分布,降低水分含量,发酵底物的增加和青贮条件的优化能够抑制腐败微生物的活动,提升青贮发酵品质。青贮过程中,PA及LA含量的增加可以降低青贮原料的pH值,从而进一步抑制腐败微生物的生长,提升青贮发酵品质。辛鹏程等[31]研究发现,添加4%PA可以明显改善青稞和多年黑麦草混合青贮发酵品质。BA含量及NH3-N/TN值较高能够影响青贮原料的适口性[32],NH3-N/TN含量能够反映发酵过程中的蛋白质和氨基酸分解程度,NH3-N含量越高,说明氨基酸和蛋白质分解越多,造成更多的不良发酵,使发酵品质变差[33-34]。酪酸菌和腐败菌分解青贮原料中的营养物质会产生BA,BA含量越高则青贮品质越差[35]。Chiou等[36]和Zhang等[37]研究发现,象草青贮中添加高粱酒糟或者乙醇,在一定程度上会抑制梭菌活性,显著降低NH3-N/TN和BA含量。本试验中,除50%组外,其他混合青贮组的BA含量及NH3-N/TN均显著低于皇竹草组,且随酒糟添加比例的增加而显著降低。可能由于酒糟中的残留乙醇较好的抑制好氧微生物的活性[37],避免与乳酸菌争夺发酵底物,促进乳酸菌发酵。Ohba等[38]关于大黍青贮的研究发现,添加乙醇能够提高青贮过程中乳酸菌对WSC的有效利用,显著降低pH值。本试验中,混贮组青贮料的pH值显著降低,且随酒糟添加比例的增加逐渐降低,但酒糟中残留乙醇提升乳酸菌对WSC的利用效率还需进一步研究。本研究中,按照V-score评分系统评判,其最佳混合比例的青贮样品为酒糟和皇竹草混合比例为4∶6,该青贮样品pH值为4.31。一般优良的青贮饲料pH值应低于4.2[39]。但有研究表明,青贮原料干物质含量较高时,pH值不必降至4.2以下,也可以达到良好的青贮效果[40]。4结论皇竹草单独青贮品质难以保证,但添加酒糟混贮可以促进乳酸发酵,抑制BA及NH3-N的产生,提高WSC、LA含量,降低pH值及NH3-N/TN,与酒糟混合青贮,青贮饲料的营养成分得到很好的保存,保证青贮饲料的发酵质量,结合感官综合评价、常规营养成分分析及发酵品质分析结果,得出40%组混合青贮品质最优,即酒糟与皇竹草混合比例为4∶6。
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