济宁青山羊是肉裘兼用的小型山羊品种，济宁青山羊具有性成熟早、繁殖率高和耐粗饲等特点[1]。牡丹籽饼粕是油用牡丹籽提取油后的副产品，含有比较丰富的不饱和脂肪酸[2]。研究显示，饲粮中添加5%的牡丹籽饼可以改善生长育肥猪消化性能、血液生化指标[3-4]，提高生长性能[4]。添加牡丹籽饼能提高獭兔的生产性能、营养物质的表观消化率、毛皮品质、降低腹泻率[5]。孔令明等[6]研究认为，牡丹籽饼能够改善生长獭兔的血清生化指标、提高免疫器官指数和屠宰性能。为了提高牡丹籽饼的利用率，本试验探究牡丹籽饼对青山羊的饲用价值，以期为饲料资源的开发提供参考。1材料与方法1.1试验材料牡丹籽饼由瑞璞牡丹产业有限公司提供，外观呈红褐色，呈现不规则片状层叠。1.2试验饲粮本试验采用单因素随机区组试验设计，将32只体况良好、体重（16.00±0.80）kg的济宁青山羊随机分成对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组，每组8头。对照组山羊饲喂基础饲粮，试验Ⅰ（4%）、Ⅱ（8%）、Ⅲ（12%）组山羊饲粮中添加牡丹籽饼替代部分豆粕和花生秧。试验期45 d，其中预试期5 d，正式试验期40 d。试验饲粮参照中国肉羊饲养标准（中华人民共和国农业行业标准NY/T 816—2004）设计，饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.01.001.T001表1饲粮组成及营养水平（风干基础）原料组成/%对照组Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组营养水平对照组Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组合计100.00100.00100.00100.00大豆秸20.0020.0020.0020.00消化能/（MJ/kg）10.4810.4810.4810.48花生秧20.0018.4816.9215.36干物质/%86.7086.6386.5686.49玉米30.0030.0030.0030.00粗蛋白质/%13.0713.0713.0713.07豆粕10.007.525.082.64粗脂肪/%2.442.462.472.48牡丹籽饼04.008.0012.00中性洗涤纤维/%38.0937.8237.5337.24苜蓿18.0018.0018.0018.00酸性洗涤纤维/%27.6126.9126.1925.47食盐0.600.600.600.60钙/%0.820.810.790.78磷酸二氢钙0.400.400.400.40磷/%0.410.400.390.38预混料1.001.001.001.00注：1.每千克预混料包含：VA 1 400 IU、VD 300 IU、Mn 60 mg、Zn 45 mg、Fe 50 mg、Mg 0.5 mg、Cu 20 mg、Co 2 mg。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理在预试期对试验动物进行驱虫处理，对试验区域和消化试验笼进行消毒处理。将饲料原料粉碎并混合均匀，每天饲喂2次（7：00和17：00），保证料槽内有剩料。饲养过程中试验动物可自由活动、自由饮水，进行消化试验动物除外。1.4样品和数据的采集1.4.1饲料样品采集调配试验饲粮时，利用四分法收集四组饲粮样本各400 g，进行粉碎后过40目筛，置于-20 ℃冰箱中待测。1.4.2数据记录及样品采集正式试验期第1 d空腹测定青山羊体重，记为初重。试验最后1 d空腹测重，记为末重。试验期间记录青山羊每天的采食量和健康状况。计算平均净增重、平均日增重和料重比。正式试验期最后3 d，每组随机选择4只青山羊进行消化试验。粪样采集方法为肛门收粪法，每天采样3次，为避免粪中氨氮的损失，采样后立即用10%硫酸溶液进行固氮处理。消化试验结束后将样品进行混合，将粪样和饲料样品置于65 ℃鼓风干燥箱中干燥48 h，置于室内回潮24 h，粉碎并过40目筛，-20 ℃保存待测。在正式试验期最后3 d，晨饲后3 h进行颈静脉采血，采血量为5 mL/只，采集完将血样在常温下静置15 min，3 000 r/min离心15 min，分离血清在-20 ℃保存待测。1.5计算公式与测定方法1.5.1生长性能计算公式平均净增重(kg)=末重-初重 (1)平均日增重(g/d)=平均净增重/试验天数×1 000 (2)料重比=平均日采食量/平均日增重 (3)1.5.2营养物质表观消化率测定方法鼓风干燥箱干燥法测定水分，凯氏定氮法测定粗蛋白（CP）；索氏提取法测定粗脂肪（EE）；中性洗涤剂法和酸性洗涤剂法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）；高锰酸钾滴定法测定钙（Ca）；钼黄比色法测定磷（P）。各营养成分表观消化率用酸不溶灰分(AIA)内源指示剂法进行计算，公式为：某营养成分的表观消化率=100-(饲粮中AIA含量粪中AIA含量×粪中养分含量饲粮中养分含量)×100%[7] (4)1.5.3血清抗氧化性能测定方法采用UV-5100B紫外可见分光光度计测定超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）活性和总抗氧化能力（T-AOC）。1.6数据统计与分析试验数据用SPSS 25.0软件进行单因素ANOVA检验，用邓肯氏法进行显著性检验和多重比较，结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1牡丹籽饼对济宁青山羊生长性能的影响（见表2）由表2可知，试验Ⅱ组济宁青山羊平均净增重和平均日增重显著高于对照组（P0.05），料重比显著低于对照组（P0.05）；试验Ⅰ组济宁青山羊平均日增重显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.01.001.T002表2牡丹籽饼对济宁青山羊生长性能的影响项目对照组（0）Ⅰ组（4%）Ⅱ组（8%）Ⅲ组（12%）始重/kg16.20±0.8715.95±0.7916.35±0.9415.97±0.88末重/kg19.41±1.1219.34±0.8919.79±1.0519.24±0.92平均净增重/kg3.21±0.18b3.39±0.19ab3.44±0.22a3.27±0.20ab平均日增重/(g/d)80.25±4.28b84.88±4.12a86.00±4.83a81.75±4.36ab平均日采食量/g647.62±28.77656.12±30.48653.60±33.65638.47±35.63料重比8.07±0.46b7.73±0.49ab7.60±0.36a7.81±0.58 ab注：同行数据肩标字母不同表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2牡丹籽饼对济宁青山羊营养物质表观消化率的影响（见表3）由表3可知，试验Ⅱ组济宁青山羊的干物质、酸性及中性洗涤纤维表观消化率显著高于对照组（P0.05）；试验Ⅰ组济宁青山羊的中性洗涤纤维表观消化率显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.01.001.T003表3牡丹籽饼对济宁青山羊营养物质表观消化率的影响项目对照组（0）Ⅰ组（4%）Ⅱ组（8%）Ⅲ组（12%）干物质60.28±3.58b64.42±3.99ab65.22±4.05a64.18±4.23ab粗蛋白71.39±3.6873.13±3.0273.54±3.4372.88±3.02粗脂肪70.11±5.2172.43±4.5773.05±3.5472.79±4.19酸性洗涤纤维45.98±3.98b47.87±2.75ab51.07±3.76a46.66±4.99ab中性洗涤纤维54.69±5.22b59.85±4.13a60.41±3.68a57.64±4.59ab钙49.58±4.5650.09±3.2350.33±3.5549.37±4.09总磷51.26±3.6651.89±4.3952.18±4.8751.30±5.26%2.3牡丹籽饼对济宁青山羊血清抗氧化性能的影响（见表4）由表4可知，试验Ⅰ、Ⅱ组济宁青山羊血清超氧化物歧化酶活性、总抗氧化能力显著高于对照组（P0.05）；试验Ⅱ组济宁青山羊血清谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.01.001.T004表4牡丹籽饼对济宁青山羊血清抗氧化性能的影响项目对照组（0）Ⅰ组（4%）Ⅱ组（8%）Ⅲ组（12%）超氧化物歧化酶91.75±4.47b96.85±4.44a97.52±5.79a94.83±5.04ab谷胱甘肽过氧化物酶54.65±3.59b55.95±4.37ab58.41±3.20a56.02±4.07ab过氧化氢酶2.87±0.392.95±0.333.14±0.423.03±0.25总抗氧化能力3.67±0.36b4.05±0.28a4.17±0.42a3.87±0.41abU/mL3讨论3.1牡丹籽饼对济宁青山羊生长性能的影响羊采食饲料后，被羊体消化利用的营养成分可分为维持和生产两部分，用于生产部分的营养成分将直接影响羊的生长性能。有研究显示，牡丹籽饼添加量在5%和8%时均可显著提高试验猪的平均日增重，而5%添加量可以降低料重比，提高试验猪的饲料报酬[4]。另有研究证明，添加8%的牡丹籽饼能提高试验獭兔的日增重，降低料重比[5]。本研究中，在青山羊日粮中添加牡丹籽饼，各试验组干物质采食量均有提高，当牡丹籽饼添加量为8%时，青山羊生长性能有显著提高。有研究证实，牡丹籽粕存在适口性问题，基本表现为添加量越高采食量越低，且随日龄增长肉鸡对牡丹籽粕的适应性增加，消化能力提高[8]。在本试验中，当牡丹籽饼的添加量高于8%时，青山羊的平均日采食量有所下降，但未出现显著性差异，证实牡丹籽饼存在适口性差的因素。牡丹籽粕蛋白质中氨基酸含量达89.69%，种类和组分较为平衡，且牡丹籽粕中铜、铁、锌、锰等必需微量元素远高于豆粕[9-10]。牡丹籽饼丰富的营养能促进瘤胃微生物的生长繁殖，提高饲粮利用率，进而提高平均净增重和平均日增重，降低料重比。3.2牡丹籽饼对济宁青山羊营养物质表观消化率的影响消化率能够反映动物对饲料中营养物质利用的能力，是用来衡量饲料可消化性和动物消化力的统一指标，在实际测定过程中因粪中所含养分包括动物内源性产物，因此常用表观消化率代替。挥发性脂肪酸是瘤胃微生物发酵碳水化合物的主要产物，也是瘤胃微生物增殖的主要碳架来源，挥发性脂肪酸的组成比例可显著影响反刍动物对营养物质的吸收、利用和生产能力的发挥[11]。瘤胃内微生物能够分解粗纤维，有促进反刍和胃肠蠕动的作用，饲粮中一定比例的粗纤维有提高纤维和淀粉分解菌活性的作用。同时粗纤维含量过高时会阻碍饲粮蛋白质的消化和吸收，表现为粗纤维含量在20%以内时，粗蛋白的消化率会随着粗纤维含量的提高而降低，本试验中，随着牡丹籽饼添加量的提高，粗蛋白的表观消化率有降低趋势，原因可能是纤维水平的提高使蛋白质排空速度增加，减少了粗蛋白与酶作用的时间。有研究报道，饲粮中添加5%的牡丹籽饼有助于生长育肥猪对饲粮干物质和粗纤维消化率的提高[4]。本试验中，与对照组相比，试验组青山羊对饲粮干物质、酸性和中性洗涤纤维的消化率均有提高，在试验Ⅱ组（8%）中，上述指标均有显著提高。这与孔令明等[5]在獭兔饲粮中添加牡丹籽饼的研究结果基本相符。另外，饲粮中粗蛋白质、粗脂肪、钙和总磷的表观消化率也有不同程度的提高，但均未出现显著性变化。3.3牡丹籽饼对济宁青山羊血清抗氧化性能的影响伴随机体的正常代谢会产生大量自由基，引起机体蛋白质和遗传物质发生变性，破坏机体内还原性成分及细胞膜，对机体产生损伤[12]。机体含有的抗氧化酶可以降低自由基的活性，起到保护细胞和机体的作用。超氧化物歧化酶对阴离子自由基有极强的清除作用，可以有效阻碍自由基引起的连锁反应。GSH-Px是体内重要的抗氧化物酶，能有效清除H2O2，并将过氧化物ROOH还原成相应的醇，降低脂类物质氧化概率，减轻由自由基引起的损害[13]。总抗氧化能力是体内氧化还原状态的累积量度，用于表征氧化剂需要量。有研究表明，饲粮中添加牡丹籽饼能显著增加生长育肥猪血清中SOD、GSH-Px和T-AOC的活性[3]。本试验结果显示，在青山羊饲粮中添加8%的牡丹籽饼能显著提高羊血清中SOD、GSH-Px活性和T-AOC等抗氧化指标，减少自由基对机体的损伤。压榨法提取油后的牡丹籽饼残油率约为6%，而牡丹籽油中含有不饱和脂肪酸、植物甾醇、多酚类等多种营养成分，各类物质都具有良好的功能作用[14]。朱献标等[15]发现，维生素E和角鲨烯是重要的天然抗氧化剂，能提高动物机体内的SOD活性、免疫能力和抗氧化能力。维生素E俗称生育酚，植物甾醇属于植物固醇，多酚归于酚类衍生物，三者均在清除自由基、抗氧化、降低机体胆固醇含量方面有重要作用。本试验中，青山羊血清抗氧化酶活性的提高可能与牡丹籽饼中残留的α-亚麻酸、维生素E和角鲨烯等有益成分有关。4结论综合本试验结果认为，饲粮中添加牡丹籽饼能显著改善青山羊的生长性能、营养物质表观消化率和血清抗氧化性能。考虑到牡丹籽饼适口性略差，建议在青山羊饲粮中添加8%的牡丹籽饼为宜。