规模化、集约化养殖已成为生猪生产的主流，养殖过程中存在过量使用抗生素的现象[1-2]。长期大量使用抗生素导致动物肠道菌群失调、免疫力下降，进而影响动物的生产性能，还会在动物胴体中残留，对人体健康和公共卫生安全造成危害[3-5]。中草药添加剂具有提高生猪生长性能和免疫功能、调节肠道菌群、提升猪肉品质等作用[6-8]。本研究对经典验方补中益气汤和四君子汤进行加减化裁，经益生菌发酵进行饲喂试验，旨在探讨发酵中草药对育肥猪生产性能的影响，为健康生态养殖提供参考。1材料与方法1.1试验材料中草药补中益气汤（黄芪、白术、陈皮、升麻、柴胡、人参、甘草、当归）加山楂、蒲公英[9-10]，使用比例为5∶3∶2∶2∶2∶3∶5∶2∶2∶2，以枯草芽孢杆菌和酵母菌为菌种进行液体发酵，菌种添加量均为108 CFU/g，发酵2 d低温烘干制成发酵中草药1号。四君子汤（人参、白术、茯苓、甘草）加黄芪、山楂、蒲公英[11-12]，使用比例为3∶3∶3∶2∶3∶2∶2，制备方法同上，为发酵中草药2号。发酵中草药由某兽药企业生产。1.2试验设计及饲养管理采用单因素随机试验设计，选择130日龄胎次一致、品种相同、体况相近、公母各半的“杜×长×大”三元杂交猪72头，随机分为3组，每组4个重复，每个重复6头。对照组育肥猪饲喂基础日粮，试验1组为基础日粮+0.5%发酵中草药1号，试验2组为基础日粮+0.5%发酵中草药2号。发酵中草药添加剂量根据兽药生产企业建议和参考文献文献[13]至文献[14]确定。基础日粮为玉米-豆粕型，参照农业行业标准《猪饲养标准》（NY/T 65—2004）并结合本地实际配制，基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.006.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米67.20代谢能/(MJ/kg)13.32豆粕15.00粗蛋白质/%14.50麦麸6.45钙/%0.77棉粕4.00总磷/%0.63次粉3.50有效磷/%0.24石粉0.80赖氨酸/%0.90磷酸氢钙0.60蛋氨酸+半胱氨酸/%0.52食盐0.45苏氨酸/%0.55预混料2.00注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 7 500 IU、VB1 1.5 mg、VB2 6 mg、VB3 30 mg、VB5 12 mg、VB6 2.1 mg、VB7 0.1 mg、VB12 10 μg、VD3 1 000 IU、VE 30 IU、VK 5 mg、氯化胆碱 1 mg、Cu 100 mg、Fe 150 mg、Zn 160 mg、Mn 50 mg。2.营养水平均为计算值。试验期55 d，其中预试期5 d，正式试验期50 d。所有试验猪均置于同一栋圈舍，每重复一栏。每日7：00和14：00饲喂，保证料槽始终有余料，试验猪自由采食和饮水。试验期间，实行严格的生物安全防护。试验结束当天，每组中随机取3个重复，每重复随机取3头，共27头试验猪进行屠宰取样。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能于试验第1 d和最后1 d早上，所有试验猪空腹称重，记录初重和末重，每日记录投料量和余料量。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=(投料量-余料量)/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.3.2屠宰性能屠宰性能的测定按照NY/T 825—2004《瘦肉型猪胴体性状测定技术规范》。去头蹄内脏、保留板油和肾脏称重为胴体重。背膘厚度：测量六七胸椎结合部、胸腰椎结合部和腰间椎结合部脂肪厚度，取平均值计算背膘厚度。屠宰率=胴体重/活重×100%(4)眼肌面积=眼肌宽度×眼肌厚度×0.7(5)1.3.3器官指数试验猪屠宰后，取出心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和胰脏，除去表面血液进行称重。器官指数=器官重量/猪活体重(6)1.3.4营养成分采用直接干燥法测定水分含量，按照《食品安全国家标准 食品中水分的测定》（GB 5009.3—2016）；采用索氏提取法测定肌间脂肪，按照《食品安全国家标准 食品中脂肪的测定》（GB 5009.6—2016）；采用凯氏定氮法测定总蛋白含量，按照《食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》（GB 5009.5—2016）。1.3.5血清生化指标总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）的含量及碱性磷酸酶（ALP）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活性的检测使用罗氏c701生化分析仪（罗氏试剂），严格按照说明书进行操作。1.3.6血清免疫指标使用罗氏c701生化分析仪（罗氏试剂）测定免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）、补体C3、补体C4含量；使用罗氏e602电化学发光分析仪（罗氏试剂）测定游离三碘甲腺原氨酸（FT3）和游离四碘甲腺原氨酸（FT4）含量，严格按照说明书进行操作。1.4数据统计与分析采用Excel初步分析试验数据，SPSS 18.0软件进行单因素方差分析，Duncan's法多重比较。若为非齐性方差，采用Dunnetfs（T3）法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1发酵中草药对育肥猪生长性能的影响（见表2）由表2可知，试验1组育肥猪的初重、末重、平均日采食量和料重比与对照组差异均不显著（P0.05)；但与对照组相比，试验1组育肥猪的平均日增重升高7.50%（P0.05)，且末重增加2.53%，料重比降低5.31%。试验2组各指标与对照组相比较差异均不显著（P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.006.T002表2发酵中草药对育肥猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/[kg/(头·d)]平均日采食量/[kg/(头·d)]料重比对照组75.80±6.14116.04±8.600.80±0.13b2.56±0.323.20±0.58试验1组75.72±7.02118.98±8.050.86±0.08a2.61±0.283.03±0.72试验2组75.83±6.48116.17±8.910.81±0.11b2.53±0.303.12±0.49注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2发酵中草药对育肥猪屠宰性能的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，试验1组和试验2组育肥猪的胴体重、屠宰率、背膘厚度和眼肌面积等指标差异均不显著（P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.006.T003表3发酵中草药对育肥猪屠宰性能的影响组别胴体重/kg屠宰率/%背膘厚度/mm眼肌面积/cm2对照组87.83±2.9875.80±1.1025.36±4.2555.33±4.69试验1组90.97±6.1176.50±2.2027.51±4.2155.74±3.97试验2组91.56±5.8275.50±1.6031.46±3.8555.82±2.952.3发酵中草药对育肥猪器官指数的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，试验1组和试验2组育肥猪的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰脏指数差异均不显著（P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.006.T004表4发酵中草药对育肥猪器官指数的影响组别心脏肝脏脾脏肺脏肾脏胰脏对照组3.54±0.2113.85±0.971.69±0.185.99±0.533.15±0.181.44±0.37试验1组3.69±0.1614.01±0.881.64±0.076.04±0.503.21±0.141.38±0.31试验2组3.56±0.1914.14±1.201.68±0.145.76±0.343.19±0.171.56±0.18g/kg2.4发酵中草药对育肥猪肌肉营养成分的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比较，试验1组和试验2组育肥猪肌肉水分、总蛋白和肌间脂肪含量差异均不显著（P0.05)。但试验1组和试验2组育肥猪肌肉的总蛋白含量分别比对照组提高了2.17%和2.85%，试验1组育肥猪的肌间脂肪含量比对照组提高了4.65%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.006.T005表5发酵中草药对育肥猪肌肉营养成分的影响组别水分总蛋白肌间脂肪对照组71.55±0.8223.50±0.362.15±0.17试验1组71.39±0.6224.01±0.202.25±0.20试验2组72.14±0.3424.17±0.151.86±0.07%2.5发酵中草药对育肥猪血清生化指标的影响（见表6）由表6可知，与对照组相比，试验1组和试验2组育肥猪血清ALB含量分别升高了10.26%和7.05%（P0.05)；试验1组和试验2组血清BUN含量分别降低了29.07%和40.53%（P0.05)；试验1组和试验2组血清AKP活性分别升高了44.30%和28.68%（P0.05)；试验1组和试验2组TP、TC、TG、FT3、FT4含量及ALT、AST活性均差异不显著（P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.006.T006表6发酵中草药对育肥猪血清生化指标的影响组别TP/(g/L)ALB/(g/L)BUN/(mmol/L)TC/(mmol/L)TG/(mmol/L)AKP/(U/L)ALT/(U/L)AST/(U/L)FT3/(pmol/L)FT4/(pmol/L)对照组92.03±17.9046.80±2.90b6.02±1.44a2.61±0.120.52±0.0883.68±5.29b33.32±10.0779.37±17.920.69±0.1171.58±3.15试验1组97.90±9.2051.60±4.00a4.27±0.50b2.47±0.230.53±0.10120.75±6.85a36.20±14.4377.24±18.520.72±0.0876.45±2.80试验2组98.10±8.4050.10±3.00a3.58±0.54b2.29±0.410.48±0.02107.68±4.67a28.12±9.2474.59±17.630.77±0.1076.13±3.262.6发酵中草药对育肥猪血清免疫指标的影响（见表7）由表7可知，与对照组相比，试验1组育肥猪血清IgA含量增加了18%（P0.05)；试验1组和试验2组育肥猪血清IgM含量分别增加了22.34%和16.75%（P0.05)；试验1组和试验2组育肥猪血清补体C4含量分别增加了90%和30%（P0.05)；试验1组和试验2组IgG、补体C3的含量与对照组均差异不显著（P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.006.T007表7发酵中草药对育肥猪血清免疫指标的影响组别IgAIgMIgG补体C3补体C4对照组1.50±0.12b1.97±0.16b18.87±2.860.47±0.020.10±0.01b试验1组1.77±0.26a2.41±0.20a17.95±3.110.45±0.050.19±0.05a试验2组1.52±0.24b2.30±0.22a18.94±3.950.47±0.050.13±0.03ag/L3讨论农业农村部第194号公告规定，自2020年起，除中药外停止生产和进口促生长类药物饲料添加剂，除中药类外停止生产含有促生长类药物饲料添加剂的商品饲料[15]，因此，需要寻找安全、有效的新型饲料添加剂。与抗生素及其他替代抗生素的添加剂相比，发酵中草药具有祛邪扶正、平衡阴阳的特点，通过药材配伍可以达到补气壮阳、消食健脾、清热解毒等效果，益生菌还可以调节肠道内环境，促进消化吸收，增强免疫功能[16-17]。3.1发酵中草药对育肥猪生长性能的影响生长性能是生猪生产最重要的指标之一，直接决定饲喂价值和经济效益。本试验采用优化后的补中益气汤和四君子汤进行发酵处理，发酵后的中草药具有补中益气、升阳举陷、温阳健脾及促进生长、营养保健等功效。任强等[18]报道，日粮中添加黄芪、山楂、麦芽等制成的益生菌发酵中药，可以显著提高育肥猪平均日增重20.5%、日采食量8.1%和饲料转化率10.3%，腹泻率降低71.4%。曲浩杰[19]研究表明，日粮中添加黄柏、黄芪、黄连、大黄制成中药复方发酵粉，断奶仔猪的平均日增重显著提高了9.18%。本试验中，试验1组的平均日增重显著高于对照组，末重提高2.53%，料重比降低5.31%，与上述研究基本一致，表明发酵中草药1可以加快育肥猪的生长速度，提高日粮中营养成分的利用率。原因可能是补中益气汤和四君子汤可以从整体上提升机体健康水平，与陈皮、当归、山楂等中药的促进胃肠运动、刺激消化腺分泌等功能以及益生菌的改善肠道菌群功能有关。3.2发酵中草药对育肥猪屠宰性能和猪肉营养成分的影响屠宰性能和猪肉营养成分指标可以代表育肥效果，反映蛋白质、脂肪等营养成分的吸收代谢情况。童建国等[20]、王宏军等[21]研究发现，复方中草药添加剂能显著提高育肥猪眼肌面积，降低背膘厚度。杨双[22]研究发现，日粮中添加复方中药添加剂可以极显著降低猪肉中水分含量，脂肪、蛋白质含量差异不显著。本试验中，2个试验组育肥猪的胴体重、屠宰率、背膘厚、眼肌面积与对照组差异均不显著，水分、总蛋白和肌间脂肪含量均与对照组差异均不显著，数值未发现明显的变化趋势，与上述研究不完全一致，可能与试验猪品种或中草药配方不同有关，有待进一步研究。3.3发酵中草药对育肥猪器官指数的影响内脏器官是机体的重要组成部分，在维持生命、生长发育、消化吸收、免疫调节等方面发挥作用。各器官的发育状况对促进动物生长、增强对外界环境变化和病原微生物的抵抗力十分重要，器官指数可以在一定程度上反映动物的健康和机能情况。陶剑[23]、曾圣宏[24]分别在日粮中添加3种、2种复方中草药，试验猪的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠的器官指数与对照组差异不显著。张茂伦[25]在日粮中添加川陈皮素，发现试验猪的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏器官指数与差异不显著。本试验中，2个试验组育肥猪的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和胰脏器官指数均与对照组差异均不显著，仅肝脏指数在数值上高出1.16%、2.09%，其余未见明显的变化趋势，与上述研究一致，表明发酵中草药对内脏器官指数并无直接和明显的作用，深层次的作用机理还有待于进一步研究。3.4发酵中草药对育肥猪血清生化指标的影响白蛋白主要由肝脏合成，具有运输营养成分、维持血浆渗透压、作为蛋白质来源等重要作用；血清尿素氮水平可以反映蛋白质代谢情况，间接反映饲料蛋白吸收利用情况；总胆固醇和甘油三酯是重要的脂代谢指标能够反映肝功和代谢水平；碱性磷酸酶参与脂代谢和骨骼发育，可以反映生长速度和生产性能[26]。甲状腺激素广泛参与营养代谢，与生长激素具有协同作用，是调节机体代谢和发育的主要激素，通过提高食欲、增加采食量和促进蛋白质合成等途径发挥作用。本试验中，2个试验组与对照组的白蛋白、血清尿素氮和碱性磷酸酶差异显著，表明所用发酵中草药可以促进机体内蛋白质合成，具有促进机体综合代谢和提高整体健康状况的作用，与上述研究对生长性能影响的结论相同，也与杨濛等[27]、何正义[28]的研究结果一致。2个试验组总胆固醇、甘油三酯含量与对照组相比虽然数值上略有降低，但差异不显著，推测与丹参等中药所含多种丹参酮类、原儿茶酚醛的还原性有关。2个试验组谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性与对照组差异不显著，表明所用发酵中草药对肝脏及其功能没有明显损伤，具有安全、无毒副作用的特点。2个试验组甲状腺激素水平与对照组差异均不显著，但FT3数值升高了4.35%、11.59%，FT4数值升高了6.80%、6.36%，提示发酵中草药可以在一定程度上促进FT3和FT4分泌，提升机体基础代谢水平，并通过促进骨骼发育、蛋白质合成和糖代谢等方式促进育肥猪生长发育，与程远芳等[29]研究结论一致。3.5发酵中草药对育肥猪血清免疫指标的影响IgA、IgM、IgG是血清中主要的免疫球蛋白，对免疫功能具有重要作用。补体参与保护性免疫应答以维持机体稳定，C3和C4在补体系统中发挥关键作用[30]。王立斌等[31]、王玺年等[32]等研究表明，日粮中添加中草药制剂可以显著改善育肥猪IgA、IgM、IgG等免疫功能指标。姜露等[33]使用黄芪、枸杞、山楂、橘皮等组成的中草药饲料添加剂，可以显著提高育肥猪总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶等抗氧化酶活性。本试验中，试验1组育肥猪血清的IgA、IgM、补体C4含量分别显著升高了18%、22.34%和90.00%；试验2组育肥猪血清的IgM、补体含量分别显著升高了16.75%和30.00%，表明发酵中草药可以改善育肥猪体液免疫水平，并通过提高C4水平间接作用于C3转化酶和C5转化酶，影响膜攻击复合物，从而提升免疫应答水平和机体免疫力，这可能与黄芪、升麻、人参、柴胡等中药的补气固表、清热解毒、疏肝升阳等功能有关。4结论日粮中添加以补中益气汤和四君子汤为基础的发酵中草药，可以提高育肥猪生长性能，改善健康状况，提高免疫功能，减少抗生素使用，且无明显肝脏损害，可以在生猪生产中推广应用。关于最适添加量的确定，下一步将设置不同添加水平，进行进一步探索研究。