微量元素具有改善畜禽的生长性能、健康和抗氧化性能等作用[1-2],在畜禽日粮中添加微量元素可有效促进畜禽的生长性能,并起到抑菌和抗腹泻的功能[3]。然而,随着高剂量微量元素饲料的应用,动物粪便中的重金属残留已成为土壤重金属污染的重要原因[4]。因此,研发节能环保、吸收利用率高的微量元素产品成为热点。应用包被技术可减弱微量元素之间的拮抗作用[5],也能够使微量元素缓释于消化道内,更利于消化道较短的家禽消化、吸收[6],还可降低饲料中微量元素的添加含量,缓解粪便中的重金属微量元素造成的环境污染[7]。植物精油包括植物单宁。植物单宁又称鞣酸,属于天然的有机酚类化合物,具有较强的抗菌、抗病毒和抗腹泻的作用,在日粮中添加少量植物单宁益于动物生长[8]。有研究表明,饲料中添加植物单宁可减弱畜禽肠道蠕动,降低肠道内容物通过小肠的速度,提高饲料的消化率[9]。邓文等[10]研究发现,在日粮中添加栗子单宁可提高断奶仔猪的生长性能。目前关于植物单宁在肉鸡养殖中的应用研究较少,本试验研究了包被微量元素和植物精油对肉鸡生长性能以及抗氧化能力的影响,以减少饲料中过量的金属微量元素的使用,探讨植物精油与包被微量元素混合添加的作用,为其实际生产应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验中包被微量元素主要成分为富马酸亚铁、硫酸亚铁、硫酸铜、甘氨酸锌、硫酸锌、硫酸锰、碘酸钙、硒代蛋氨酸、亚硒酸钠、吡啶甲酸铬、缓释材料(羧甲基纤维素),其中铁含量为100.0 g/kg、铜12.0 g/kg、锌104.0 g/kg、锰120.0 g/kg、碘1.1 g/kg、硒0.3 g/kg,由广州正百生物科技有限公司提供。植物精油的主要成分为植物单宁,含量为48%,由广州正百生物科技有限公司提供。对照组普通粉状硫酸盐,主要成分为硫酸亚铁、硫酸铜、硫酸锌、硫酸锰、碘酸钙、亚硒酸钠,其中铁含量为36.00 g/kg、铜5.00 g/kg、锌40.00 g/kg、锰42.00 g/kg、碘0.40 g/kg、硒0.15 g/kg,由扬州大学饲料厂提供。1.2试验设计540只体重相近的1日龄健康AA雄性肉鸡随机分为6组,每组6个重复,每个重复15只鸡。对照组(基础日粮+1 g/kg普通粉状硫酸盐);试验1组、试验2组、试验3组分别为基础日粮+0.25、0.30、0.35 g/kg包被微量元素;试验4组、试验5组分别为基础日粮+0.30 g/kg包被微量元素+0.15、0.20 g/kg植物精油。试验期42 d。根据NRC(1994)肉鸡营养要求制备日粮。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.008.T001表1基础日粮组成和营养水平(风干基础)项目1~21日龄22~42日龄原料组成/%玉米55.1259.25大豆油3.505.00豆粕(43%)36.9231.90赖氨酸盐酸盐(98%)0.220.11DL-蛋氨酸(98.5%)0.300.29碳酸钙1.121.23磷酸氢钙2.101.50食盐0.300.30氯化胆碱(60%)0.090.09复合多维0.030.03稻壳粉0.300.30合计100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)12.5413.09粗蛋白质/%21.0020.00D-赖氨酸(98%)/%1.201.14D-蛋氨酸+半胱氨酸(98%)/%0.850.80苏氨酸(99%)/%0.660.63色氨酸(99%)/%0.220.21钙/%1.001.00总磷/%0.670.66有效磷/%0.450.45注:1.复合多维为每千克日粮提供:VA 8 000 IU、VD3 1 000 IU、VE 20 IU、VK3 0.50 mg、VB1 2.00 mg、VB2 8.00 mg、VB6 3.50 mg、VB12 10.00 µg、烟酸35.00 mg、泛酸钙10.00 mg、叶酸0.55 mg、生物素0.18 mg。2.营养水平中代谢能和有效磷含量为计算值,其他均为实测值。1.3饲养管理试验在扬州大学教学试验基地进行,饲养管理按常规方案执行,一周进行一次全面消毒。采用网上平养,肉鸡自由进食饮水,试验初始温度为35 ℃,之后每周降低2~3 ℃,直至降至26 ℃。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验期间观察并记录鸡的健康情况,记录鸡的采食和死亡情况,计算死淘率。1、21和42日龄晨饲前称重,计算各组在1~21、22~42和1~42 d时的平均日增重。记录各组鸡的饲养情况,根据各阶段计算各组的平均日采食量,计算料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=日粮消耗总量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2肉品质试验结束时,每个重复随机抽取2只鸡屠宰,取左胸浅肌测定胸肌的肉品质。pH值采用pH-Star 胴体肌肉pH直测仪测定。肉色采用Opto-Star肉色测定仪直接测定。剪切力采用(C-LM2型)肌肉嫩度仪测定剪切力值,每个样品测定3次,取平均值。取约1 g肉样(无筋膜、无脂肪),以布包住,上、下各垫16层滤纸,滤纸外垫硬塑料板,缓慢以恒定速度加压至35 kg并保持5 min,撤去压力后称重,计算失水率。失水率=(加压前肉样重-加压后肉样重)/加压前肉样重×100%(4)1.4.3免疫器官指数42日龄时,解剖取脾脏和法氏囊,称取去除脂肪后的鲜重,计算脾脏指数和法氏囊指数。免疫器官指数=免疫器官重/活体重(5)1.4.4抗氧化功能分别在21、42日龄时每组随机选取18只空腹12 h的鸡,采用采血针和真空采血管在翼静脉处采取2 mL鸡血,促凝管保存,静置30 min,3 000 r/min离心15 min,吸取血清储存于离心管,-20 ℃保存。按照试剂盒(南京建成生物工程研究所)说明书测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)等指标。1.5数据统计与分析数据采用Excel 2013软件进行整理,SPSS 20.0软件进行单因素方差分析。Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1包被微量元素与植物精油对肉鸡生长性能的影响(见表2)由表2可知,22~42日龄时,对照组肉鸡死淘率高于试验组;试验1组与试验3组、试验4组肉鸡平均日增重显著高于对照组(P0.05)。试验2组与试验3组、试验4组肉鸡的料重比显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.008.T002表2包被微量元素与植物精油对肉鸡生长性能的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组试验4组试验5组P值1~21日龄末重/g1 079.14±12.951 051.82±13.771 074.69±12.651 059.64±11.371 080.00±17.951 062.76±6.860.085平均日增重/[g/(只·d)]49.18±0.6047.98±0.6749.06±0.6248.34±0.5749.36±0.8548.58±0.330.591平均日采食量/[g/(只·d)]61.67±3.7056.18±2.6357.73±3.5456.61±1.1560.99±3.2557.88±2.100.244料重比1.25±0.021.17±0.011.18±0.021.17±0.031.24±0.021.19 ±0.010.148死淘率/%1.112.222.221.111.112.22—22~42日龄末重/g2 615.28±69.41b2 778.58±63.41ab2 725.77±66.35ab2 778.21±38.32ab2 823.07±28.83a2 691.92±33.59ab0.035平均日增重/[g/(只·d)]73.41±3.10b82.23±3.32a78.62±3.04ab81.84±1.81a83.00±1.81a77.58±1.76ab0.020平均日采食量/[g/(只·d)]145.73±8.50146.03 ±7.65133.86±8.10140.59±7.50142.54±6.58142.51±9.800.285料重比1.94±0.04a1.78±0.21ab1.70±0.13b1.72±0.12b1.72±0.04b1.84±0.11ab0.039死淘率/%8.546.743.377.785.616.59—1~42日龄平均日增重/[g/(只·d)]61.16±1.62b65.10±1.51ab63.84±1.58ab65.09±0.92ab66.18±0.69a63.08±0.80a0.045平均日采食量/[g/(只·d)]113.82±5.65105.91±8.8797.53±4.21103.85±7.82105.20±6.51104.28±5.210.139料重比1.83±0.13a1.63±0.08ab1.53±0.17ab1.64±0.12ab1.59±0.08b1.65±0.09ab0.047死淘率/%8.957.784.447.785.496.67—注:同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);表4与此同。1~42日龄时,对照组肉鸡死淘率高于试验组;试验4组肉鸡平均日增重显著高于对照组与试验5组(P0.05),试验4组的料重比显著低于对照组(P0.05)。2.2包被微量元素与植物精油对肉鸡免疫器官指数的影响(见表3)由表3可知,各组之间的脾脏数与法氏囊指数并无显著差异(P0.05)10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.008.T003表3包被微量元素与植物精油对肉鸡免疫器官指数的影响项目脾脏指数法氏囊指数P值0.3200.395对照组1.23±0.090.46±0.03试验1组1.28±0.970.38±0.24试验2组1.53±0.230.41±0.02试验3组1.39±0.120.45±0.36试验4组1.18±0.630.45±0.03试验5组1.14±0.900.46±0.04mg/g2.3包被微量元素与植物精油对肉鸡抗氧化能力的影响(见表4)由表4可知,21日龄时,试验1组血清SOD活性显著高于对照组(P0.05);试验3组血清MDA含量显著高于对照组(P0.05);试验2组、试验4组的GSH-Px活性显著高于对照组(P0.05);试验3组、试验4组血清中CAT活性显著高于对照组(P0.05);试验1组、试验3组、试验5组的T-AOC显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.008.T004表4包被微量元素与植物精油对肉鸡抗氧化能力的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组试验4组试验5组P值21日龄SOD/(U/mL)539.02±0.80b624.75±0.82a572.80±1.08ab521.70±1.25b563.78±0.73ab533.88±0.96b0.025MDA/(μmol/L)1.61±0.24b1.46±0.23b1.83±0.21b2.08±0.13a2.03±0.24ab2.04±0.2ab0.041GSH-Px/(U/mL)1 482.93±93.91c1 753.66±175.14abc2 168.78±280.37a1 646.34±71.67bc2 146.34±139.63ab1 897.56±231.59abc0.033CAT/(U/mL)0.47±0.02c0.51±0.07c0.54±0.04c0.7±0.03a0.68±0.04ab0.58±0.04bc0.001T-AOC/(μmol/L)0.87±0.03a0.7±0.06bc0.79±0.06ab0.64±0.03c0.74±0.06abc0.72±0.05bc0.01242 日龄SOD/(U/mL)576.58±11.81b652.47±18.42a629.53±28.32ab649.38±14.65a637.76±18.05a661.88±21.2a0.034MDA/(μmol/L)2.47±0.14a2.02±0.17b2.58±0.06a2.02±0.2b1.61±0.09b1.98±0.17b0.040GSH-Px/(U/mL)1 963.41±246.98bc2 568.29±220.80ab1 934.15±145.97c2 009.76±80.57bc2 182.93±82.30bc2 778.05±293.40a0.018CAT/(U/mL)0.66±0.04a0.6±0.04a0.56±0.02ab0.55±0.08ab0.58±0.02a0.43±0.05b0.001T-AOC/(μmol/L)0.83±0.02b0.86±0.07ab0.94±0.03ab0.99±0.05a1.00±0.03a0.97±0.05a0.02742日龄时,与对照组相比,试验1组、试验3组、试验4组、试验5组的SOD活性显著增高(P0.05),MDA含量显著降低(P0.05);试验5组的GSH-Px活性显著增高(P0.05),CAT活性显著下降(P0.05);试验3组、试验4组、试验5组T-AOC显著升高(P0.05)。2.4包被微量元素与植物精油对肉鸡肉品质的影响(见表5)由表5可知,各组pH值、亮度、红度、黄度差异均不显著(P0.05);试验3组、试验4组、试验5组的失水率均显著低于对照组、试验1组和试验2组(P0.05);对照组的剪切力显著高于各试验组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.008.T005表5包被微量元素与植物精油对肉鸡肉品质的影响项目失水率/%pH值亮度红度值黄度值剪切力/NP值0.0420.3740.3020.0650.0860.002对照组21.13±3.10a7.09±0.1338.59±1.201.52±0.246.13±0.2735.49±3.17a试验1组25.78±1.99a7.14±0.2536.69±0.761.43±0.155.90±0.3226.22±2.07b试验2组23.30±3.06a7.04±0.2339.78±0.541.28±0.135.81±0.2022.72±1.68b试验3组12.28±1.17b7.03±0.1839.62±0.431.48±0.156.77±1.4825.95±1.95b试验4组10.86±1.23b7.06±0.2140.27±0.761.03±0.146.09±0.2220.62±1.32b试验5组11.94±1.23b6.98±0.2737.74±0.701.00±0.105.65±0.2923.98±2.27b注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05)。3讨论3.1包被微量元素和植物精油对肉鸡生长性能的影响本试验显示,1~21日龄时,各组肉鸡死淘率、日增重、料重比差异不显著,表明包被微量元素可在养殖前期不影响肉鸡生长性能的情况下有效降低日粮中微量元素的使用量。21~42日龄时,包被微量元素组对肉鸡的日增重效果和饲料转化率的改善作用显著优于未包被微量元素,肉鸡死淘率和料重比下降,与胡世忠[11]的研究结果一致。微量元素可参与营养物质的代谢,促进肉鸡的生长发育[12]。Fe、Mn、Cu、Zn、Se等微量元素的主要在小肠被吸收[13],并且包被微量元素可在有效部位缓慢释放以减少其在消化道前部的损失,增加了小肠对微量元素的吸收[14],提高了肉鸡的生产性能。包被微量元素还可以清除常规微量元素中金属元素对饲料中脂肪、维生素、氨基酸和酶类等敏感物质的催化氧化作用,提高了营养素的利用率,促进肉鸡的生长[15]。在试验早期,试验组和对照组间的平均日采食量无显著变化,可能是因为微量元素的添加量较少,饲喂时间较短,微量元素的硫酸盐形式的苦涩味道并未对采食量产生显著的影响,包被微量元素与未包被微量元素相比未能明显体现出包被技术对苦涩味道的掩盖作用,导致采食量并未出现显著的差异[16],与M'Sadeq等[17]的研究结果一致。植物精油可显著增加肉鸡的日增重,降低耗料增重比[18]。Bampidis等[19]发现,在肉鸡日粮中添加干牛至叶(主要成分是牛至精油和香芹酚)能够提高雌性火鸡的饲料转化效率。闻爱友等[20]研究发现,添加复合精油可有效提高肉鸡的生长性能。本试验中试验4组肉鸡死淘率、平均日增重和平均日采食量均显著高于其他各组,与上述结论一致。表明植物精油可促进包被的微量元素的吸收,提高肉鸡生长性能。植物精油可以刺激肉鸡腺胃表皮细胞产生更多的中性黏多糖和唾液蛋白,提高饲料转化率[21]。3.2包被微量元素和植物精油对肉鸡免疫器官指数的影响器官指数能够在一定程度上反映动物机体的发育状况。法氏囊和脾脏是家禽机体内最关键的免疫器官,负责细胞免疫和体液免疫的过程[22]。苏振刚[23]研究发现,在日粮中添加微量元素对肉鸡的脾脏和法氏囊指数有提高的趋势。饲料中添加微量元素螯合物对肉鸡器官指数无显著影响[24]。Brenes等[25]研究表明,在肉鸡日粮中添加单宁对其器官指数无显著影响。童玉鑫等[26]研究发现,在日粮中添加五倍子单宁酸对肉鸡的脾脏和法氏囊指数无显著影响。本试验中,各组肉鸡的脾脏指数和法氏囊指数差异均不显著,与上述结果一致。这可能是因为包被微量元素组中微量元素较少,不足以引起器官指数显著变化。且植物精油对肉鸡器官指数的影响与精油来源、提取方法等有关,有待进一步研究。3.3包被微量元素和植物精油对肉鸡抗氧化能力的影响正常情况下,体内自由基处于动态平衡的状态,出现外界刺激或者机体内部平衡被打破,体内自由基不断沉积,造成氧化损伤[27]。GSH-Px、CAT和SOD通过清除活性氧参与破坏损伤过程[28],而T-AOC是反映动物抗氧化系统的综合指数。MDA在多不饱和脂肪酸过氧化后产生,是脂质过氧化的良好标志物[29]。微量元素可明显增强肉仔鸡的SOD活性,降低MDA含量[30]。辛文玉[31]和佟铁金[32]发现,日粮中添加包被微量元素可提高肉鸡血清中的GSH-Px和SOD的活性以及T-AOC,降低MDA含量。Yang等[33]发现,日粮添加7.5和15.0 mg/kg葡萄缩合单宁可提高肉鸡血清中SOD活性,降低MDA含量。从光雷等[34]发现,日粮添加橡椀单宁可提高肉鸡血清中CAT和T-AOC活性。本试验中,包被微量元素组SOD、GSH-Px、CAT的活性和T-AOC显著提高,MDA含量降低,与上述结果一致,原因可能是Se、Zn、Cu和Mn是GSH-Px和SOD的辅助因子。有机锌和铜可促进Zn/Cu-SOD的合成[35-36],有机硒可提高GSH-Px活性,加强抗氧化状态[37-38]。添加包被微量元素可降低各种微量元素互作效应,利于消化吸收,提高抗氧化能力。3.4包被微量元素和植物精油对肉鸡肉品质的影响肉品质主要通过失水率、剪切力、pH值和嫩度等相关指标评测。目前多采用失水率、滴水损失和蒸煮损失等3种方法评定肌肉的系水力[39],失水率与肌肉的系水力越和嫩度成反比[19];pH值波动直接影响肉色、剪切力、失水率等指标[20];肉色亮度表示肌肉中氧合肌红蛋白含量,红度表示脱氧肌红蛋白含量,黄度表示高铁肌红蛋白含量[21]。剪切力与肌肉嫩度成反比[40]。黄义强等[41]发现,日粮中添加包被微量元素可改善黄羽肉鸡的肌肉品质。柯芙容[14]研究发现,在日粮中添加包被微量元素可改善肉鸡的肉品质。张杏莉[42]研究表明,在黄羽肉鸡日粮中添加精油+有机酸包被制剂能够有效调节胸肌失水率和剪切力。Buyse等[43]研究表明,日粮添加单宁可改善肉鸡的肉品质。本试验中包被微量元素组和包被微量元素+植物精油组失水率低于对照组,改善了AA肉鸡的肉品质,并显著降低了剪切力,与上述研究结果一致。这可能是因为包被微量元素可提高对金属离子的吸收和利用能力,提高肌肉中脂肪的含量,降低肌肉剪切力[44]。本试验结果显示,包被微量元素和植物单宁混合添加组失水率显著低于包被微量元素组表明植物精油能够在微量元素的基础上进一步提高肌肉对水分的束缚能力。4结论在日粮中添加包被微量元素和植物精油可显著改善AA肉鸡的生长性能和肉质,提高抗氧化能力。建议日粮中添加0.30 g/kg包被微量元素+0.15 g/kg植物精油。
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