薰衣草不仅具有观赏价值，其精油还具有抗氧化、镇静、驱虫等作用。薰衣草精油对多种真菌、细菌具有抑制作用，在实际应用中酌情使用可在一定程度上替代抗生素[1]。有研究发现，薰衣草精油能够有效降低回肠内容物中内毒素的含量[2-3]。宋晓琳等[4]研究显示，薰衣草乙醇提取物能够显著提高胸腺指数、白细胞数和体重，抑瘤率达42.67%。研究表明，薰衣草秸秆与野干草压窖制作青贮，较全株玉米青贮具有更好的育肥效果，饲喂褐牛后对生长性能以及肉品质等方面无显著差别，甚至优于全株玉米秸秆青贮[5-6]。薰衣草纯露是在蒸馏萃取薰衣草精油过程中残留的一种副产品——芳香蒸馏水，浓度较低，但具有杀菌、抗氧化等作用[7]。新疆伊犁地区的薰衣草，萃取精油过程中产生大量薰衣草纯露，通常作为废液排放。为充分利用薰衣草纯露，实现资源的可持续发展，本试验在新疆褐牛全混合日粮中添加不同剂量的薰衣草纯露，研究探讨薰衣草纯露对新疆褐牛免疫功能的影响，为新疆褐牛的绿色养殖以及薰衣草纯露在畜牧养殖中的推广应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1薰衣草纯露薰衣草纯露由新疆伊帕尔汗香料股份有限公司提供。1.1.2试验动物体重（552.50±28.82）kg育肥褐牛，由可克达拉市创锦牧业有限公司提供。1.1.3试验日粮基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.003.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米秸秆4.2干物质/%94.25全株玉米青贮40.0粗蛋白/%17.15麦草10.9中性洗涤纤维/%60.12混合牧草4.8酸性洗涤纤维/%40.34油菜秆2.0粗灰分/%9.25糖渣12.6钙/%1.98压片玉米1.7磷/%0.44糖蜜2.0综合净能/(MJ/kg)6.10甜菜颗粒粕1.7混合精料20.1注：1.混合精料购自创锦牧业饲料厂。2.营养水平均为计算值。1.1.4主要试剂与仪器检测试剂盒：IgA、IgG、IgM、IL-2、IL-4、IL-10、IFN-盒、补体C3、补体C4、可溶性CD4（sCD4）、可溶性CD8（sCD8）试剂盒，均购自上海纪宁生物科技有限公司。Biotek SynergeyTM2多功能酶标仪购自美国伯腾仪器有限公司。1.2试验设计同一圈内，选取健康、体重500~600 kg的育肥褐牛48头，随机分为4组，每组12个重复，每个重复1头，根据全混日粮的总量添加不同浓度的薰衣草纯露。对照组为全混日粮+1.5%水，0.5%组为全混日粮+0.5%纯露+1.0%水，1.0%组为全混日粮+1.0%纯露+0.5%水，1.5%组为全混日粮+1.5%薰衣草纯露。预试期7 d，正式试验期40 d。每日饲喂2次，纯露按各组比例喷洒于全混日粮上，搅拌混匀，自由饮水。1.3测定指标及方法1.3.1样品采集正式试验第40 d对褐牛进行尾静脉采血，血液静置2 h，3 000 r/min离心20 min，取血清分装于Ep管，-20 ℃保存。1.3.2免疫指标检测使用ELISA试剂盒检测IgA、IgG、IgM、IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ、补体C3、补体C4、可溶性CD4（sCD4）、可溶性CD8（sCD8）的含量。1.4数据统计与分析试验数据采用SPSS 20.0软件进行单因素方差分析，Duncan's法多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1薰衣草纯露对新疆褐牛血清中免疫球蛋白的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，0.5%薰衣草纯露组褐牛血清中IgA含量显著升高17.5%（P0.05），1.0%组和1.5%组均极显著升高32.8%和27.4%（P0.01）；1.0%组和1.5%组的IgG含量均显著升高11.3%和6.7%（P0.05）；1.0%组的IgM含量显著升高14.0%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.003.T002表2薰衣草纯露对新疆褐牛血清中免疫球蛋白的影响组别IgA/(mg/L)IgG/(g/L)IgM/(mg/L)对照组74.39±3.242.84±0.2372.69±3.480.5%组87.39±3.98*2.85±0.3573.46±2.691.0%组98.77±3.98**3.16±0.27*82.90±2.00*1.5%组94.74±4.12**3.03±0.36*74.17±4.00注：与对照组相比，*表示差异显著（P0.05），**表示差异极显著（P0.01）；下表同。结果表明，在全混日粮中添加1.0%的薰衣草纯露可以同时提高新疆褐牛血清中的IgA、IgG和IgM含量，其效果优于另外2个试验组。2.2薰衣草纯露对新疆褐牛血清中细胞因子的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，1.0%组褐牛血清中的IL-10含量极显著升高17.7%（P0.01），IL-2和IL-4含量分别显著升高6.4%和9.5%（P0.05）；1.5%组的IL-2和IFN-γ含量显著升高7.4%和16.6%（P0.05）；0.5%组新疆褐牛血清中各细胞因子的含量差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.003.T003表3薰衣草纯露对新疆褐牛血清中细胞因子的影响组别IL-2/(ng/L)IL-4/(ng/L)IL-10/(ng/L)IFN-γ/(μg/L)对照组423.75±5.86167.12±7.4051.74±1.571.51±0.240.5%组438.59±19.56168.93±2.1452.50±1.241.61±0.261.0%组450.67±6.40*183.05±4.57*60.90±0.95**1.63±0.161.5%组455.24±8.50*176.91±1.8153.34±2.751.76±0.15*2.3薰衣草纯露对新疆褐牛血清中补体和免疫T细胞亚群的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，3个浓度的薰衣草纯露均可极显著提高新疆褐牛血清中的sCD4含量和sCD4/sCD8比值（P0.01），sCD8含量差异不显著（P0.05）；0.5%组褐牛血清的补体C3含量显著升高了10.4%（P0.05）；1.0%组褐牛血清的补体C3含量极显著升高了14.6%（P0.01），补体C4含量显著提高16.3%（P0.05）；1.5%组褐牛血清的补体C4含量显著升高21.6%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.11.003.T004表4薰衣草纯露对新疆褐牛血清中补体和免疫T细胞亚群的影响组别C3/(mg/L)C4/(mg/L)sCD4/(μg/L)sCD8/(μg/L)sCD4/sCD8对照组545.23±29.75543.57±35.8634.75±1.3223.49±3.121.48±0.140.5%组601.82±45.88*573.57±43.9342.06±2.77**25.95±3.331.62±0.15**1.0%组625.00±37.81**632.26±55.02*46.33±3.11**27.25±5.081.70±0.29**1.5%组558.48±30.79661.19±47.14*43.63±2.98**25.84±4.141.69±0.23**3讨论3.1薰衣草纯露对新疆褐牛血清中免疫球蛋白的影响IgA、IgG、IgM具有较强的抗感染免疫作用，是构成体液免疫的基础[8]，是评价体液免疫的指标。叶建良[9]将500、1 000 g/t薰衣草提取物添加在仔猪日粮中，结果显示，仔猪血清中IgA、IgG、IgM浓度均有显著或极显著的提高；添加量为1 000 g/t时，提高仔猪免疫效果最好。刘猛[10]将0.01%的植物精油预混剂（15%的麝香草酚和5%的肉桂醛）添加在仔猪日粮中，仔猪血清中IgA、IgG及IgM的含量显著升高，提高了仔猪自身免疫功能。朱晓磊等[11]将百里香精油添加在麻花鸡基础饲粮中，发现0.20~0.30 mg/kg百里香精油可极显著提高麻花鸡血清Ig水平。Wistuba等[12]对补充鱼油对犊牛生长性能和免疫系统特征影响进行了研究，发现饲喂以玉米为基础的补充剂和鱼油的犊牛的分离淋巴细胞对刀豆球蛋白刺激的反应比单独饲喂玉米反应更大；同时，补充鱼油的犊牛与对照相比降低了ADG、ADFI和G/F；对于在放牧阶段的犊牛，补充鱼油可调节免疫系统，提高血清IgA、IgG和IgM含量；这两项试验中的生长性能下降可能会限制其作为免疫刺激剂的实际应用。本试验结果显示，1.0%组新疆褐牛血清中IgA、IgG、IgM含量显著提高，提示1.0%薰衣草纯露能够显著地引新疆褐牛机体的体液免疫反应，激活机体的免疫系统。原因可能是薰衣草纯露中所含活性物质具有免疫调节作用，在肠道被吸收后，调节肠道的免疫通路，促进T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖，刺激机体的抗体分泌合成，提高血清中IgA、IgG、IgM含量，提高新疆褐牛的免疫功能。3.2薰衣草纯露对新疆褐牛血清中细胞因子的影响细胞免疫由多种细胞因子介导，IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ是常见的细胞因子。IL-2能够刺激T淋巴细胞增殖和调节B淋巴细胞活性，促进动物体内抗体产生[13]。IL-4主要由活化T细胞产生，能够促进B细胞MHCⅡ类抗原的表达，增强B细胞提呈抗原能力，促进体液免疫反应[14]。IL-10是重要的负向调节细胞因子，对免疫炎性反应过程中的多个环节具有阻断作用，具有广泛的免疫抑制活性[15]。IFN-γ通过调节细胞表面受体而发挥抗病毒、抗肿瘤活性。上述4种细胞因子均在调控免疫应答反应发挥重要的作用，其含量直接反映机体细胞免疫功能[16]。Morteza等[17]研究发现，在鲤鱼饲料中添加150、200 mL/kg薰衣草提取物可显著增加鲤鱼IFN-γ含量，抑制鲤鱼应激、炎症和氧化，增强免疫。李伟娟等[13]在白羽肉鸡饲料中添加0.5%丹参提取物，能够提高肉鸡的生长性能、免疫机能及抗氧化能力，增加血清中IL-2、IL-6含量。Li等[18]通过在肉牛日粮中添加水平0、500和1 000 mg/kg壳聚糖，结果发现改善了IgA和IL-1的水平，并降低CD4的水平；随饲料中CHI的增加，血清IgM和IgA浓度增加；添加500 mg/kg壳聚糖，提高了血清总超氧化物歧化酶活性；表明添加一定浓度壳聚糖对体液和细胞免疫反应具有改善作用，并改善肉牛的抗氧化功能。本试验结果表明，0.5%、1.0%和1.5%薰衣草纯露均可以提高新疆褐牛血清中IL-2、IL-10和IFN-γ含量，不同程度地促进免疫细胞对白细胞介素的合成和分泌，有效增强新疆褐牛的免疫力，且1.0%薰衣草纯露能显著提高新疆褐牛血清中IL-2和IL-10含量。3.3薰衣草纯露对新疆褐牛血清中补体和免疫T细胞亚群的影响补体是一组经活化才具有酶活性的蛋白质，补体C3和补体C4在参与机体免疫的过程中具有激活作用。复方中药不仅能够显著增强断奶仔猪血清C3和C4含量，还可提高肉牛血清C3和C4含量[19-20]。本试验结果显示，1.0%薰衣草纯露能够显著提高新疆褐牛血清中补体C3和补体C4含量，提示1.0%薰衣草纯露可参与抗原抗体反应，促进免疫细胞的增殖与分化，增强杀伤细胞对靶细胞的抗赖性细胞介导的细胞毒作用，增强新疆褐牛体内免疫和炎症反应介导的各种生物效应。T细胞分为CD4 T细胞和CD8 T细胞，当外源性病原微生物入侵时，CD4 T细胞可以迅速启动免疫反应，抵抗病原体，增强身体的免疫功能。CD8 T细胞的主要作用是清除被病毒感染的细胞，其含量越低则能识别感染的细胞越少，机体免疫力则增强[21-22]。CD4、CD8与动物体免疫防御功能密切相关，CD4/CD8比值越高则自身的免疫力越强，低则相反。CD4和CD8可在外周血中分泌出sCD4和sCD8，具有可溶性。淋巴细胞可以在健康状态下自然释放一定量的 sCD4和sCD8，但当机体遭受感染时，其分泌量会发生显著变化。因此，sCD4和sCD8可以反映机体免疫状态。刘晓静[23]发现，肉鸡饲料中添加沙蒿籽粉对其免疫功能有一定的影响，显著提高血清中sCD4的含量，降低sCD8的含量。本试验中，添加0.5%、1.0%、1.5%薰衣草纯露均可显著增加褐牛血清中sCD4含量，升高sCD4/sCD8比值，对sCD8含量影响不大，使褐牛的免疫功能增强；其中1.0%组sCD4/sCD8比值最大，提示薰衣草纯露添加量为1.0%时褐牛的免疫功能增强最显著。4结论在新疆褐牛的全混日粮中添加1.0%的薰衣草纯露，连续饲喂40 d，可有效改善新疆褐牛的免疫功能。