红翅白马王子属于硬骨鱼纲，鲈形目，慈鲷科，是原产于非洲马拉维湖经人工培育变异的品种，其外表色彩艳丽，是经典的观赏鱼品种[1]。观赏鱼生活环境相对狭小、封闭，所以对饵料的营养要求更高。目前，观赏鱼养殖的鲜活饵料来源不稳定、不易长时间保存，一般使用人工配合饵料。但有研究发现，仔鱼不能完全利用配合饲料，配合饲料会使仔鱼自身消化酶和蛋白酶过低，死亡率较高[2-3]。目前，对观赏鱼体色的研究一般停留在成鱼阶段，关于从幼鱼期开始改良体型体色的研究较少，而通过饵料强化在食用鱼方面的研究较多，在观赏鱼上的研究还比较少。本试验旨在研究不同饵料强化剂对红翅白马王子幼鱼体色、生长和生化指标的影响，为红翅白马王子等观赏鱼幼鱼培育、养殖、体型体色改良等方面提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验鱼由天津市静海区慈鲷养殖场提供，初始体重为(0.12±0.01) g，体长为(2.00±0.12) cm。初始亮度（L*）为70.54，红绿度（a*）为3.82，蓝黄度（b*）为1.31。螺旋藻粉购自滨州美越饲料科技有限公司；鱼肝油购自郑州优渥生物科技有限公司。1.2试验方法1.2.1试验设计及饲养管理试验分为投喂饵料组（A组）、未强化卤幼组（B组）、螺旋藻粉强化卤幼组（C组）、酵母强化卤幼组（D组）、鱼肝油强化卤幼组（E组）和藻粉鱼肝油强化卤幼组（F组），其中A组为对照组，每组每缸放入50尾试验鱼，每组3个重复，共900尾。正常投喂饵料养殖1 w，待稳定后，按照试验计划投喂。每天投喂2次，每次以半小时内吃光为止，有剩余饵料及时吸出，定期换水吸污。试验期4 w。基础饵料购自泉州峻源生物科技有限公司。1.2.2卤虫强化方法在5个容量为20 L的塑料桶中分别加入15 L配制海水和250 ind/mL的卤虫无节幼体，其中4桶每天2次分别加入20 mg/L螺旋藻粉（C组），安琪酵母20 mg/L（D组），20 mg/L鱼肝油（E组），10 mg/L藻粉+10 mg/L鱼肝油（F组），强化24 h，同未强化无节幼体（B组）分别收集冷冻。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验开始和结束，使用电子游标卡尺测量试验鱼的体长，使用电子天平测量试验鱼的体重。计算体长特定生长率（SGRL）与体重特定生长率（SGRW）和肥满度（CF）。SGRL=100%×(lnL2-lnL1)/t (1)SGRW=100%×(lnW2-lnW1)/t(2)式中：L1、W1分别为试验开始时鱼的体长和体重；L2、W2分别为试验结束时鱼的体长和体重；t为试验时间[4]。CF=W/L3[5] (3)1.3.2体色指标使用色度色差仪（KonicaMinoltaCM-700d）测定鱼体背鳍附近的L*值、a*值（+a*红，-a*绿）、b*值（+b*黄，-b*蓝）[6]。1.3.3肠道、肝胰脏生化指标1.3.3.1样品采集每组选取30尾鱼麻醉，按不同组别解剖取其肠道和肝胰脏，加入定量pH值7.4的磷酸缓冲盐溶液（PBS），将标本匀浆充分，2 500 r/min离心20 min，收集上清液。1.3.3.2检测方法采用上海纪宁实业有限公司的酶联免疫分析试剂盒检测胃蛋白酶、胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、过氧化氢酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶活性，按照试剂盒操作步骤进行操作，使用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中相关酶活性。1.4数据统计与分析试验数据采用Excel 2020软件处理，采用SPSS 21进行单因素方差分析。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同饵料强化方法对红翅白马王子幼鱼生长性能的影响（见表1）由表1可知，试验组幼鱼的终末体长、末重、体长增长率、体重增长率均显著高于对照组（P0.05），其中D组幼鱼数据均为最高，具有明显优势。D组幼鱼的肥满度显著高于除对照组外的其他各组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.12.010.T001表1不同饵料强化方法对红翅白马王子幼鱼生长性能的影响组别初始体长/cm初重/g终末体长/cm末重/g体长增长率/%体重增长率/%肥满度/(g/cm3)A组（对照组）1.90±0.110.11±0.011.95±0.28c0.22±0.08d0.09±0.01c2.16±0.37d0.030±0.006acB组2.04±0.080.11±0.012.68±0.27b0.56±0.17c1.05±0.12b5.50±0.57c0.028±0.004bcC组2.11±0.130.12±0.022.87±0.33a0.69±0.25b1.29±0.15a6.25±0.45b0.028±0.004bcD组2.05±0.150.13±0.012.93±0.39a0.83±0.31a1.36±0.22a6.91±0.66a0.032±0.004aE组1.95±0.140.12±0.012.62±0.36b0.50±0.20c0.96±0.18b5.10±0.50c0.027±0.003bF组2.04±0.130.13±0.012.76±0.31b0.61±0.23bc1.15±0.13b5.81±0.53bc0.028±0.002bc注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2不同饵料强化强化方法对红翅白马王子幼鱼体色的影响（见表2）由表2可知，试验组幼鱼的L*值均低于对照组，C组、D组、F组幼鱼的L*值显著低于对照组（P0.05）；B组、C组和F组幼鱼的a*值显著高于对照组（P0.05）；B组、C组、D组、F组幼鱼的b*值均显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.12.010.T002表2不同饵料强化强化方法对红翅白马王子幼鱼体色的影响组别L*值a*值b*值A组（对照组）71.45±7.82a3.92±3.00c2.65±6.32cB组68.65±6.57ab4.42±3.74c6.11±5.16bC组64.13±5.93c6.12±3.12ab7.33±4.74abD组66.30±5.29bc4.08±2.95c5.64±5.20bE组69.16±6.41ab4.70±2.80bc5.31±5.61bcF组64.49±6.57c6.68±2.97a9.16±6.27a红翅白马王子幼鱼期体色主要为红色，所以代表红绿色值的a*值参考意义最大。a*值越大，说明红质越多，鱼体色越红，品质越高。研究表明，投喂生物饵料可以改善红翅白马王子幼鱼体色，提高品质。2.3不同饵料强化方法对红翅白马王子幼鱼肠道生化指标的影响（见表3）由表3可知，C组、E组幼鱼的肠道胃蛋白酶和胰蛋白酶活性均显著高于对照组，B组显著低于对照组（P0.05）；C组幼鱼肠道的脂肪酶活性显著高于对照组（P0.05）；B组幼鱼肠道的过氧化氢酶活性显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.12.010.T003表3不同饵料强化方法对红翅白马王子幼鱼肠道生化指标的影响组别胃蛋白酶/(U/mL)胰蛋白酶/(U/mL)脂肪酶/(U/L)淀粉酶/(IU/L)过氧化氢酶/(U/mL)酸性磷酸酶/(U/L)碱性磷酸酶/(U/L)A组（对照组）224.25±1.31b3 349.00±377.91bc672.91±118.59bc529.42±71.0458.31±6.26a5.49±1.3784.14±9.40B组158.48±4.26c2 414.98±247.10d616.47±92.28c500.02±27.0044.61±5.19b4.70±0.3172.01±4.43C组267.60±6.36a3 873.98±87.88a877.52±89.69a584.87±57.9462.72±0.57a6.69±0.8681.64±16.54D组207.63±1.31b3 154.29±114.28c705.39±54.21abc515.54±36.5255.49±8.87ab5.01±1.7283.09±10.78E组275.91±8.05a3 790.65±194.21a794.99±153.49ab586.20±78.2361.14±8.90a5.43±1.4990.44±16.35F组223.04±2.56b3 602.82±92.31ab694.44±31.87bc505.22±29.7357.75±7.42a6.41±1.6986.66±9.662.4不同饵料强化方法对红翅白马王子幼鱼肝胰脏生化指标的影响（见表4）由表4可知，D组幼鱼肝脏中胃蛋白酶活性显著低于对照组（P0.05）；C组幼鱼肝脏胰蛋白酶活性显著高于对照组（P0.05）；除F组外，其他各组幼鱼肝脏的淀粉酶活性均显著降低（P0.05）；B组、D组幼鱼肝脏的过氧化氢酶活性显著低于对照组（P0.05）。各组幼鱼肝脏的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶活性差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.12.010.T004表4不同饵料强化方法对红翅白马王子幼鱼肝胰脏生化指标的影响组别胃蛋白酶/(U/mL)胰蛋白酶/(U/mL)脂肪酶/(U/L)淀粉酶/(IU/L)过氧化氢酶/(U/mL)酸性磷酸酶/(U/L)碱性磷酸酶/(U/L)A组（对照组）143.63±27.43a1 749.56±175.97b477.43±68.10ab387.24±17.31a59.87±1.61ab6.01±2.41105.78±15.25B组127.45±19.60ab1 635.65±183.82b290.10±50.74c308.05±7.63b42.23±5.75c6.35±0.9794.07±16.33C组153.34±26.41a2 301.06±138.31a535.77±58.83a337.44±35.25b58.46±1.56ab6.62±0.97106.29±8.19D组113.47±13.89b1 752.37±275.78b424.49±31.63b303.20±42.31b48.01±3.15c5.77±0.94101.69±1.90E组152.55±28.37ab1 905.02±192.05ab474.09±30.79ab335.24±26.71b63.43±3.41a6.25±1.62104.79±18.48F组135.81±10.58ab1 883.87±384.95ab413.31±77.71b384.88±1.43a56.16±4.20b7.51±0.8799.61±15.013讨论3.1不同饵料强化方法对红翅白马王子幼鱼的生长性能的影响饵料对水产动物的生长发育和繁殖至关重要，尤其是幼龄动物生长快、营养需求大，更易受食物营养结构的影响。任梦格等[7]研究表明，红螯螯虾小规格组投喂肉食性饵料的生长速率较快。陈斌等[8]对似鮈仔鱼早期的生长研究表明，动物性生物饵料能够显著提高似鮈仔鱼的生长速率和存活率。李艳华等[9]研究表明，鲟鱼苗使用活体生物饵料的生长效率和成活率均要高于人工配合饲料。本研究结果显示，投喂卤虫组的幼鱼体长、体重均高于投喂配合饲料组。养殖过程中常用营养强化的方式提高生物饵料的营养价值。李军涛等[10]研究表明，酒糟酵母部分替换饵料可以显著提高草鱼的增重率。本研究中，酵母强化组幼鱼的增重率也明显高于饵料组。刘忠优等[11]研究表明，龙虎斑仔稚鱼投喂经过强化的生物饵料体长和体质量均高于对照组。本研究中，除用鱼肝油强化组幼鱼的体长和体质量低于未强化组，其余各强化组均高于未强化组。因此，选用适当的强化剂强化生物饵料对红翅白马王子幼鱼的生长具有促进作用。3.2不同饵料强化方法对红翅白马王子幼鱼体色的影响研究表明，饵料中添加类红萝卜素、维生素、激素等均对观赏鱼的体色有影响[12]。葛玲瑞等[6]研究表明，投喂酵母菌可以改善草金鱼体表的亮度和红度。郝晓波等[13]研究表明，不同的饵料组合对马来沙水母体色具有显著影响。孙金辉等[14]研究表明，添加不同藻源饵料投喂血艳红慈鲷的体色具有明显差异。王磊等[15]研究表明，添加雨生红球藻可以显著改善七彩神仙鱼的体色。刘翠等[16]研究表明，在饵料中添加螺旋藻可以有效改善体色异常后的黄颡鱼体色。本研究结果表明，投喂生物饵料能够显著改善红翅白马王子幼鱼的体色，其中以添加藻粉的两组改善效果最明显。3.3不同饵料强化方法对红翅白马王子幼鱼肠道、肝胰脏生化指标的影响消化酶对营养物质的消化吸收具有关键作用，消化酶活性直接影响动物对营养物质的吸收利用程度，影响动物的生长发育[17-18]。本研究表明，经过强化的各组肠道和肝胰脏的消化酶活力均高于未强化组，高于或等于饵料组。因此，饵料强化可以提高红翅白马王子幼鱼的消化和免疫能力。刘忠优等[11]对龙虎斑仔稚鱼的研究表明，以小球藻作为饵料强化剂，试验鱼胃肠蛋白酶活性最高，王亚玲等[2]研究表明，投喂野生鲫鱼的哲罗鲑胃肠蛋白酶活力高于人工配合饲料组。全峰等[19]研究表明，在半滑舌鳎人工配合饲料中添加适量的复合微藻可以改善其消化能力。本研究表明，以螺旋藻作为强化剂的试验组蛋白酶活性也较高，但是本研究结果显示，以螺旋藻粉和鱼肝油共同作为强化剂的试验组，蛋白酶含量低于只以藻粉作为强化剂的试验组，可能与藻粉添加的剂量有关。杨代勤等[20]研究表明，投喂配合饲料组的黄鳝淀粉酶活性显著高于鲜活饵料组。本研究结果也证明配合饵料组淀粉酶活性高于生物饵料组，但经过藻粉和鱼肝油强化组淀粉酶活性显著高于未强化组。因此，适当的饵料强化剂可以提高生物饵料的淀粉酶活性。4结论饵料强化对红翅白马王子幼鱼的生长、体色和消化酶指标影响较明显，强化组在生长和体色方面均优于饵料组和未强化卤虫组，未强化卤虫组在消化酶指标和非特异性免疫指标方面均低于其他组，添加藻粉组在改善体色和提高消化酶活力指标具有明显优势。所以在养殖红翅白马幼鱼时可以优先考虑投喂经过藻粉强化的生物饵料。