生产安全、优质、鲜美的畜产品是当前养猪产业的主要方向[1]。饲料添加剂中的中药既符合绿色无抗养殖的要求，还能够提升仔猪免疫机能，保障肠黏膜完整以快速适应饲料转变，进而减少腹泻的发生[2]。电气石具有永久自发极化效应，能将水分子电解为OH－和H＋，H＋与电气石中的电子结合形成H2，OH－与H2O等其他大分子结合并扩散形成空气负离子，负离子能起到促进血液循环、抑制菌类感染、提高自愈力[3]、提高血液中高密度脂蛋白及免疫球蛋白含量的作用[4]。硫黄矿粉能够维持肠道微生物平衡、提高机体抗氧化能力、改善畜产品品质[5]。中草药的主要生物活性物质能够起到抑菌杀菌、调节机体免疫及抗应激等作用[6]。本试验将电气石粉和硫黄矿粉采用纳米技术处理后与红曲、百部等中草药按比例混合，作为断奶仔猪饲料添加剂，研究其对仔猪免疫功能及抗氧化功能的作用，为其在仔猪养殖生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验动物及日粮试验选取体重为（8.45±0.27）kg、健康无疫病、体况相近、出生及断奶日龄相近的“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪，公、母各半，共计40头。基础日粮组成及营养水平（风干基础）见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.01.004.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）项目1~14 d15~42 d原料组成/%玉米7.0038.00膨化玉米37.0013.79小麦麸3.004.05次粉3.003.00大豆22.0012.00粗制豆油1.001.10鱼粉5.702.00豆粕9.0816.00玉米蛋白粉3.002.00蔗糖1.001.00苏打0.450.40食盐0.200.30乳清粉4.003.0065%赖氨酸0.350.3598%蛋氨酸0.050.0565%苏氨酸0.180.06磷酸氢钙1.420.85石粉0.601.20预混料0.800.75氯化胆碱0.170.10合计100.00100.00营养水平消化能/(MJ/kg)14.7914.19粗蛋白质/%21.6619.16钙/%0.960.84磷/%0.760.61赖氨酸/%1.451.15苏氨酸/%0.980.79蛋氨酸/%0.510.43胱氨酸/%0.380.32色氨酸/%0.290.21注：预混料为每千克日粮提供：VA 1 900 IU、VB1 0.75 mg、VB2 2.8 mg、VB5 13 mg、烟酸18 mg、VB6 2.5 mg、VB12 25 μg、VD3 190 IU、VE 10 IU、VK3 0.6 mg、生物素0.05 mg、叶酸0.4 mg、Cu 4 mg、Fe 95 mg、Mn 2 mg、Zn 95mg、Se 0.15 mg、植酸酶0.5 g。1.2试验设计与饲养管理依据试验要求将40头仔猪完全随机分为试验组和对照组，每组20头，每个重复4头猪。对照组饲喂基础日粮，试验组饲喂添加0.5%中药负离子制剂的基础日粮。依照所在养殖场的饲养管理办法，在试验开始后的第15 d换料。试验期为42 d。1.3样品采集采血前12 h清理料槽，试验第42 d早晨，每个重复内随机抽取1头于前腔静脉采集血液10 mL，注入至普通采血管内放置30 min后，3 000 r/min离心25 min。收集分离出的血清置于-20 ℃保存（用于血清指标检测）。1.4测定指标及方法仔猪血常规、血清酶、血清免疫指标及抗氧化指标由北京华英生物技术研究所检测。1.5数据统计与分析试验数据采用WPS Office处理后，运用SPSS 21.0软件进行单因素方差分析，Dunnett法进行多重比较，结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1中药负离子制剂对断奶仔猪血常规的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，试验组仔猪血液中白细胞、血小板、淋巴细胞数及淋巴细胞百分比水平均显著升高（P0.05）；红细胞、血细胞比容及血红蛋白有小幅度的上升，但无显著变化（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.01.004.T002表2中药负离子制剂对断奶仔猪血常规的影响项目对照组试验组白细胞/(109/L)18.74±1.33b20.66±1.64a红细胞/(1012/L)4.37±0.224.46±0.17血细胞比容/%27.93±1.5428.96±1.28血红蛋白/(g/L)98.62±3.86101.12±3.21血小板/(109/L)329.12±17.58b360.14±16.67a淋巴细胞数/(109/L)10.87±1.61b14.02±0.15a淋巴细胞百分比/%59.63±4.43b69.08±2.31a注：同行数据肩标无字母表示差异不显著（P0.05）；不同小写字母表示差异显著（P0.05）；不同大写字母表示差异极显著（P0.01）；下表同。2.2中药负离子制剂对断奶仔猪血清酶含量的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，试验组仔猪谷丙转氨酶水平显著降低（P0.05）；肌酸激酶含量极显著降低（P0.01）；谷草转氨酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶含量有上升趋势，但差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.01.004.T003表3中药负离子制剂对断奶仔猪血清酶含量的影响 单位：U/L项目对照组试验组谷草转氨酶41.03±0.9542.61±0.55谷丙转氨酶29.02±2.32a26.68±1.13b碱性磷酸酶112.67±5.46120.84±4.28酸性磷酸酶4.34±0.644.47±0.52肌酸激酶1 391.33±184.98A833.41±196.35B2.3中药负离子制剂对断奶仔猪血清免疫球蛋白的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，试验组仔猪血清中免疫球蛋白A、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M极显著提高（P0.01）；试验组C3、C4含量有小幅增长，但差异并不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.01.004.T004表4负离子中药无抗制剂对断奶仔猪血清中免疫球蛋白的影响项目对照组试验组免疫球蛋白A0.92±0.09B1.32±0.15A免疫球蛋白G17.63±0.19B21.56±0.22A免疫球蛋白M2.02±0.24B2.21±0.26A补体C31.14±0.101.18±0.11补体C40.24±0.030.28±0.03g/L2.4中药负离子制剂对断奶仔猪血清抗氧化性能的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，试验组仔猪血清总抗氧化能力极显著上升（P0.01）；超氧化物歧化酶及过氧化氢酶水平显著升高（P0.05）；谷胱甘肽过氧化物酶及丙二醛水平无明显变化（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.01.004.T005表5中药负离子制剂对断奶仔猪血清抗氧化性能的影响项目对照组试验组总抗氧化能力/(U/mL)1.49±0.02B1.81±0.31A超氧化物歧化酶/(U/mL)138.68±8.78b160.24±2.12a过氧化氢酶/(U/mL)60.73±2.37b67.61±4.67a谷胱甘肽过氧化物酶/(U/mL)289.98±10.51299.54±10.29丙二醛/(nmol/mL)5.31±0.574.87±1.563讨论3.1中药负离子制剂对断奶仔猪血常规的影响动物发生生理或病理变化时会引起机体血液参数波动，因此血常规指标的变化情况能够反映机体的健康状况，同时血常规指标在一定程度上反映器官功能[7]。血常规检测指标分为3类，分别为白细胞、红细胞和血小板[8]。白细胞是重要免疫细胞，能够进入组织吞噬病菌进而起到保护防御的功能，其数量明显增多时说明机体出现炎症[9]。本研究中，虽然试验组仔猪血常规中白细胞数量较对照组显著上升，但仍在正常范围内。红细胞在免疫功能中同样起着重要作用，主要是协助血液运氧[10]。血细胞比容能够反映血液稀释程度[11]。血细胞比容在动物机体有病理反应时会异常升高，贫血时降低。本研究中，试验组仔猪血常规中红血细胞、血细胞比容数值虽有上升趋势，且在正常范围内，表明本试验所用中药负离子添加剂未对动物体产生不良影响。3.2中药负离子制剂对断奶仔猪血清酶含量的影响碱性磷酸酶、谷草转氨酶及谷丙转氨酶主要存在于肝细胞、心肌细胞及骨骼肌内，当肝胆系统发生炎症、病变时，会使周围的肝细胞过度释放或胆道梗阻导致其无法排入肠道而流入血液[12]，从而导致血清中碱性磷酸酶、谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性升高[13]，可以间接表明动物代谢强度和生产性能[14]。酸性磷酸酶参与各种营养物质的消化吸收及运输，在蛋白酶的去磷酸化过程担任重要使命[15]。本试验中，试验组仔猪血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性有小幅上升，但无显著差异，与葛洪伟等[16]的试验结果相似；碱性磷酸酶含量虽然显著降低，但在正常范围内，酸性磷酸酶水平有上升趋势，说明在日粮中添加中药负离子制剂不影响仔猪的健康生长。肌酸激酶能够反向催化肌酸与ATP的转磷酰基反应，且在细胞代谢中扮演着重要角色。肌酸激酶水平与机体组织细胞受损程度呈正相关[17]。在本试验中，试验组仔猪血清中肌酸激酶的水平极显著降低，说明在日粮中添加中药负离子制剂能够缓解仔猪氧化应激。3.3中药负离子制剂对断奶仔猪血清免疫球蛋白的影响免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M在机体内有着重要作用，其含量与机体免疫能力呈正相关[18]。免疫球蛋白G含量约占血清免疫球蛋白总含量的75％[19]，对细菌和病毒方面有良好的抵御作用；免疫球蛋白A主要起吞噬作用；免疫球蛋白M则是初次免疫抗体[20]。本试验中，试验组免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M含量极显著上升，说明添加中药负离子制剂能提高仔猪免疫性能，与何正义[21]的试验结果相似。补体是具有类酶活性的蛋白质，协助抗体和吞噬细胞杀灭病原细菌、增强细胞的免疫能力等功能[22]。C3和C4是补体中的重要组成部分[23]。C3是补体系统中的重要组成部分并且其含量最多，所以C3补体的水平能够反映血清总补体水平[24]。C4参与补体的激活，同时也是参与组成凝集素途径[25]。本试验中，与对照组相比，试验组仔猪血清中补体C3、C4含量无显著性差异，但有上升趋势，说明在仔猪日粮中添加中药负离子制剂会可能会提高机体内补体含量，具体作用机制需要进一步探究。3.4中药负离子制剂对断奶仔猪血清抗氧化性能的影响总抗氧化能力水平能够直接反映机体的抗氧化能力是衡量抗氧化能力的综合指标[26]。超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化酶是生物体抗氧化酶系的主要成分，能够高效清除体内自由基[27]。机体自身维持自由基动态平衡的物质主要是超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化酶等酶类[28]。过氧化氢酶可催化细胞内过氧化氢分解，降低氧化应激[27]。丙二醛是脂质过氧化的主要终产物之一，其水平是衡量机体脂质过氧化水平的重要指标，MDA含量能够间接反映细胞受损伤程度[29]。本试验中，试验组仔猪血清总抗氧化能力水平极显著高于对照组，超氧化物歧化酶及过氧化氢酶水平显著高于对照组，与李健等[30]的试验结果相似，说明在日粮中添加中药负离子制剂能够提高仔猪抗氧化性能，缓解氧化应激对机体的损伤。本试验中，试验组仔猪血清谷胱甘肽过氧化酶含量较对照组有小幅升高，丙二醛水平有下降趋势，与丁浩轩等[31]的试验结果类似。4结论本试验条件下，在仔猪日粮中添加0.5%中药负离子制剂能够在不影响仔猪健康的同时可有效缓解氧化应激对机体的损伤，提高仔猪免疫力和抗氧化功能。