磷是动物必需的矿物元素,参与动物的生长发育和代谢,但也是环境污染的主要来源[1]。磷作为饲料原料中不可或缺的成分,主要以植酸磷的形式存在,由于猪、鸡等单胃动物消化液中无法产生足够的植酸酶,植酸磷在消化道内无法水解成无机磷酸盐。因此,大多数植酸磷无法得到有效利用[2-3]。为减少营养源的损失并保护环境,植酸酶广泛应用于畜禽饲料生产中[4]。植酸酶属于磷酸单脂水解酶,能够水解植酸中的磷酸基团[2]。研究表明,饲粮中添加植酸酶可水解植酸,提高磷的利用率[5-7],减少饲粮中无机矿物磷的添加量。近年来,有研究指出,应用植酸酶可通过提高蛋白质、氨基酸以及其他矿物质的利用率进而改善猪的生产性能。王若绮等[8]研究表明,日粮中补充植酸酶能够显著提高育肥猪的饲料转化率。王晶等[9]发现,玉米-豆粕型低磷饲粮中添加植酸酶,能够显著改善生长猪的生长性能、提高养分表观消化率、减少粪便中矿物元素的排泄量。植酸酶的应用前景广阔,在动物生产中表现出的经济性和环保性已得到广泛认可[10]。本试验以二元杂哺乳母猪为研究动物,探究在日粮中添加不同浓度的植酸酶对哺乳母猪养分表观消化率、血清生化指标及生产性能的影响,为植酸酶在母猪生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料植酸酶(5 000 U/g,广东溢多利生物科技股份有限公司)。1.2试验设计选择生产胎次相近、预产期接近的“长×大”二元妊娠母猪72头,随机分成4组,每组3个重复,每个重复6头猪。在基础日粮中添加植酸酶的水平分别为0、500、750、1 000 U/kg,根据添加浓度从低到高分别设置A、B、C、D共4组,其中A组为对照组。试验共28 d,其中预试期7d(母猪分娩前7 d)、正式试验期21 d(自母猪分娩起至泌乳结束)。试验基础日粮依据妊娠母猪所需营养水平,参考NRC(2012)饲养水平配制玉米-豆粕型日粮,在保证其他成分相同的前提下添加不同水平的植酸酶,充分混合。日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.13.008.T001表1日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米61.0消化能/(MJ/kg)18.36麸皮12.0粗蛋白质/%16.80豆粕15.2赖氨酸/%0.70膨化大豆4.0蛋氨酸/%0.19鱼粉0.8蛋氨酸+半胱氨酸/%0.40石粉0.8钙/%0.88磷酸氢钙1.0总磷/%0.65氯化钙0.3苏氨酸/%0.59豆油0.9预混料4.0注:1.预混料为每千克日粮提供:VA 2 000 IU、VD 200 IU、VE 45 IU、VK 0.5 mg、VB1 1 mg、VB6 3.85 mg、VB12 0.05 mg、泛酸12 mg、烟酸10.15 mg、叶酸1.45 mg、生物素0.22 mg、Mn 20 mg、Fe 100 mg、Cu 20 mg、Ⅰ 0.15 mg、Se 0.14 mg。2.营养水平中消化能和赖氨酸为计算值,其余均为实测值。1.3饲养管理试验在河南省宁陵县忠奇生猪养殖场进行。试验猪在同一圈舍内统一饲养管理。试验开始前圈舍打扫干净,环境按饲养标准,采光良好,通风充足,舍内温度18~20 ℃。试验猪自由饮水,定时定点加料,合理调整妊娠期和哺乳期饲料喂量。母猪临产前对产房进行彻底灭菌消毒,保证环境干燥卫生。整个试验期间,不投喂抗生素等药物,免疫程序依据猪场标准实施,每日观察猪的精神状态,发现问题及时治疗。1.4测定指标及方法1.4.1养分表观消化率在试验结束前3 d连续采集母猪早、晚粪便,试验结束后将所有粪样充分混合。取约600 g混合粪样放入120 ℃恒温干燥箱中,烘18 min,灭酶活,再65 ℃烘干24 h,样品粉碎后放-20 ℃冰箱中保存。分别测定饲料中营养物质的含量及粪样中盐酸不溶灰分含量,采用指示剂法计算养分表观消化率。养分表观消化率=100%-[100×(a×b)/(c×d)](1)式中:a、c分别为饲料、粪样中营养物质含量(%);b、d分别为饲料、粪样中盐酸不溶灰分含量(%)。1.4.2血清生化指标分娩和断奶当日,每头母猪采血,分离血清,采用酶联免疫吸附试验法测定血清中尿素氮、甘油三酯、葡萄糖、肌酸酐及总胆固醇的含量。所有指标测定均按照试剂盒说明进行(ApexBIO,美国)。1.4.3生产性能分娩和断奶当日,测定每头猪的体重;在母猪分娩后12 h内及哺乳期记录每窝仔猪头数及窝重,计算哺乳仔猪饲养期的平均个体重、全期的平均日增重、仔猪初生窝重、断奶窝重、初生活仔数、断奶活仔数等,计算母猪泌乳期(21 d)的总泌乳量。总泌乳量=4×仔猪平均日增重×每窝仔猪头数×泌乳天数(2)式中:4为仔猪增重1 g约消耗4 g奶。1.5数据统计与分析试验数据采用SAS 9.2软件中单因素方差分析模型进行分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1植酸酶对哺乳母猪养分表观消化率的影响(见表2)由表2可知,随着植酸酶添加水平的升高,粗蛋白质的表观消化率呈上升趋势。与对照组相比,C组和D组哺乳母猪粗蛋白质的表观消化率显著升高(P0.05),B组粗蛋白质表观消化率有升高的趋势,但差异不显著(P0.05);B组和D组的粗脂肪表观消化率显著高于对照组(P0.05);各组干物质和粗灰分的表观消化率差异不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.13.008.T002表2不同植酸酶水平对哺乳母猪养分表观消化率的影响项目A组B组C组D组P值干物质74.91±3.4073.09±1.9173.11±0.9173.01±1.350.58粗灰分33.48±6.3432.80±9.4135.15±6.3032.57±4.090.71粗蛋白质89.41±2.41b91.89±0.99ab92.28±1.01a93.19±0.62a0.02粗脂肪83.53±0.77b87.54±0.42a83.92±0.54ab90.88±0.31a0.02注:同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。%2.2植酸酶对哺乳母猪血清生化指标的影响(见表3)由表3可知,分娩当日,各组母猪血清尿素氮、葡萄糖、肌酸酐、总胆固醇、甘油三酯的含量差异均不显著(P0.05)。断奶当日,C组母猪血清尿素氮含量显著低于其他3组(P0.05);B组、C组、D组母猪血清甘油三酯、肌酸酐含量显著高于A组(P0.05);B组和D组母猪血清中总胆固醇含量显著低于A组和C组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.13.008.T003表3不同植酸酶水平对哺乳母猪血清生化指标的影响时间项目A组B组C组D组P值分娩当日尿素氮7.32±1.807.35±2.107.67±3.337.41±2.360.73甘油三酯2.27±0.342.31±0.472.24±0.292.33±0.270.67葡萄糖3.27±1.402.86±1.703.22±1.382.94±1.200.64肌酸酐2.93±0.802.87±0.832.99±0.962.89±1.010.41总胆固醇5.32±2.805.14±1.905.60±1.105.53±0.980.62断奶当日尿素氮5.89±0.14a5.77±0.40a4.72±0.31b5.78±0.61a0.03甘油三酯1.08±0.21b1.73±0.32a1.78±0.41a1.69±0.29a0.04葡萄糖2.87±0.832.95±0.913.03±0.512.96±0.430.86肌酸酐1.21±0.23b1.71±0.20a1.67±0.11a1.70±0.32a0.02总胆固醇5.22±0.60a3.30±0.41b5.15±0.60a3.27±0.47b0.04mmol/L2.3植酸酶对哺乳母猪生产性能的影响(见表4)由表4可知,各组母猪分娩当日的体重、产活仔数和仔猪窝重差异均不显著(P0.05);C组的断奶窝重显著高于B组(P0.05);D组母猪总泌乳量最高且显著高于对照组(P0.05),B组和C组总泌乳量虽高于对照组,但差异不显著(P0.05);与对照组相比,D组断奶仔猪的平均日增重和哺乳母猪断奶体重显著提高(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.13.008.T004表4添加不同剂量植酸酶对哺乳母猪生产性能的影响项目时间A组B组C组D组P值母猪体重/kg分娩当日262.15±11.32261.96±9.88262.33±18.52262.11±16.020.15断奶当日243.43±13.41b243.86±8.93b247.48±7.66ab249.68±22.05a0.04仔猪窝重/kg分娩当日10.84±0.7510.17±0.8410.53±1.5110.21±1.080.18断奶当日20.83±0.90ab19.65±3.11b22.16±2.12a21.10±1.59b0.03活仔数/头分娩当日10.84±0.4511.00±0.5811.33±1.0711.67±0.960.68断奶当日9.50±0.3210.33±1.5810.50±0.4410.83±0.690.36仔猪平均日增重/[g/(只·d)]236.19±32.50b239.43±15.47b269.05±28.47ab315.14±33.16a0.03总泌乳量/kg177.21±20.34b204.23±18.42ab199.78±13.58ab225.69±25.62a0.023讨论3.1植酸酶对哺乳母猪血清生化指标的影响血清生化指标的变化反映了动物机体生理机能及代谢状况的改变[11]。本试验结果表明,当日粮中植酸酶的浓度为750 U/kg时,血清中尿素氮的含量显著低于其他组,表明促进了母猪对蛋白质的吸收与利用[12]。李元凤等[13]研究发现,降低日粮粗蛋白质水平后添加植酸酶对猪血清中尿素氮含量无显著影响,可能与各组饲粮的处理水平不同或饲养管理不同有关。魏向阳[14]研究表明,在基础日粮中添加转植酸酶基因包埋乳酸菌能够显著提高猪血清中甘油三酯的含量。本试验结果与上述研究结论一致,与对照组相比,在哺乳母猪日粮中添加植酸酶可显著提高血清中甘油三酯的含量。侯爽等[15]研究表明,日粮中添加植酸酶能够提高肉鸡血清抗氧化酶活性。董其国[16]、吴东等[17]研究发现,日粮中添加植酸酶可提高血清总蛋白的含量。血清中肌酐酸含量升高,表明肌肉分解代谢增强[18]。本试验中,当植酸酶添加水平为1 000 U/kg时,可显著提高血清中肌酸酐含量,血清中总胆固醇的含量显著降低。3.2植酸酶对哺乳母猪生产性能的影响母猪的生长性能不仅可通过育种方式得到改善,合理的营养调控也是提高其生长性能的重要途径。已有大量的研究表明,在单胃动物的日粮中添加植酸酶能够显著提高动物的采食量及饲料转化率[2,9,13,19]。梁陈冲等[20]通过在断奶仔猪日粮中添加不同来源的植酸酶,发现试验组仔猪的平均日增重有提高的趋势。张克英等[21]在日粮中添加微生物植酸酶,发现仔猪的日增重、采食量和饲料利用率分别显著提高了10.8%、6.5%和3.5%。张保平等[19]、王若绮等[8]研究发现,日粮中添加植酸酶显著改善了猪的饲料转化率。此外,也有研究发现,在饲日粮中添加植酸酶还可提升肉种鸭的生产性能以及蛋鸡的蛋壳品质[22-23]。本试验条件下,与对照组相比,基础日粮中添加1 000 U/kg的植酸酶,可使断奶仔猪的平均日增重显著提高,母猪的断奶体重也显著高于另外两个试验组,与前人研究结果相似。3.3植酸酶对哺乳母猪养分表观消化率的影响植酸酶不仅可提高磷的利用率,还能够释放被螯合的蛋白质、矿物元素及一些消化酶等,提高养分的消化率[24]。研究表明,饲粮中添加植酸酶能够提高养分表观消化率,且在低磷日粮中的效果更为明显[8,25-27]。张保平等[18]研究发现,不同蛋白质水平日粮补充植酸酶,能够显著提高磷的表观消化率,降低有害气体的排放。本试验条件下,在日粮中添加1 000 U/kg的植酸酶,可显著提高粗蛋白质和粗脂肪的表观消化率,改善母猪生长性能,但对干物质和粗灰分的表观消化率无显著影响。任善茂等[28]研究发现,猪日粮中植酸酶的添加剂量为1000 U/kg时,可显著改善营养物质的表观消化率,与本研究结果相似。4结论本研究结果表明,添加高剂量植酸酶(1 000 U/kg)能够显著提高断奶仔猪的日增重、哺乳母猪的泌乳量以及血清中肌酸酐的含量;同时也可明显提高哺乳母猪粗蛋白质和粗脂肪的表观消化率,但血清中总胆固醇的含量有所下降。日粮添加750 U/kg植酸酶时,哺乳母猪血清中尿素氮的含量显著降低,但有提高母猪粗灰分表观消化率的趋势。

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