芒果苷（MGF），又称知母宁、芒果素，分子式为C19H18O11，分子量为422，为四羟基吡酮的碳苷，属黄酮类化合物中的双苯吡酮类化合物[1]。MGF主要存在于漆树科植物芒果（Mangifera indica L.）、百合科植物知母（Anemarrhena asphodeloides Bge）、鸢尾科植物射干（Iris domestica）、龙胆科植物东北龙胆（Gentiana manshurica Kitaga）、水龙骨科植物光石韦（Pyrrosia clavata Ching）中[2]。MGF具有抗细胞凋亡、抗炎[3]、抗氧化、抑菌[4]、抗糖尿病[5]、抗肿瘤、保肝利胆[6-7]等活性。芒果及其副产品是提取MGF的重要原料，在动物生产中也具有重要应用。Farias等[8]研究发现，在饲粮中添加20%以下芒果果仁粉末不会对肉鸡生长性能、屠宰性能及脏器指数造成不良影响。Vieira等[9]在肉鸡饲粮中添加不同水平芒果果渣，饲喂42 d，结果发现，饲粮中添加5.0%、7.5%芒果果渣能够降低肉鸡低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）和甘油三酯（TG）的浓度，改善肉鸡脂质代谢。王恒月[10]在1~42日龄肉鸡日粮中添加芒果叶提取物，结果发现，添加300 g/kg芒果叶提取物可在一定程度上提高肉鸡的生长性能、改善血液脂肪代谢，显著影响肉鸡的屠宰性能。但目前尚无将MGF直接应用在动物生产中的研究报道。MGF属于黄酮类化合物。黄酮类化合物具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗炎等生物活性，在畜禽生产中应用能提高畜禽生长性能，改善畜禽畜产品品质，增强畜禽抗氧化能力及免疫功能[11]。本试验在肉鸡饲粮中添加不同水平的MGF，探究其对肉鸡的生长性能、免疫功能、抗氧化能力的影响，为芒果苷在畜禽生产中开发利用提供参考。1材料与方法1.1试验材料1日龄健康白羽肉鸡由玉林市北流大发养殖有限公司提供；MGF纯度大于98%，购自上海阿拉丁公司。1.2试验设计将180羽白羽肉鸡随机分为3组，每组3个重复，每个重复20羽。其中A组为对照组，肉鸡饲喂基础饲粮；B组肉鸡饲喂基础饲粮+100 mg/kg MGF；C组肉鸡饲喂基础饲粮+200 mg/kg MGF。试验期42 d。采用玉米-豆粕型作为基础饲粮，参考《鸡饲养标准》（NY/T 33—2004）进行配制。基础饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.13.013.T001表1基础饲粮组成及营养水平项目1~21 d22~42 d原料组成%玉米58.3060.40磷酸氢钙1.501.30豆粕32.0030.00鱼粉2.001.50豆油3.003.50石粉1.401.50食盐0.300.30预混料1.501.50合计100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)12.4212.71粗蛋白质%20.2720.46钙%1.000.97总磷%0.620.57赖氨酸%1.181.10蛋氨酸%0.280.27蛋氨酸+胱氨酸%0.590.55注：1.预混料为每千克饲粮提供：VE 500 IU、VA 9 000 IU、VD3 1 600 IU、VK3 12 mg、VB1 10 mg、VB6 10 mg、VB12 5 mg、VB2 15 mg、烟酸80 mg、叶酸8 mg、泛酸40 mg、生物素2 mg、锌60 mg、铁80 mg、铜6 mg、锰100 mg、碘0.2 mg、硒0.15 mg。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理肉鸡采用笼养，每笼5只。饲养前对鸡舍及采食工具进行清洁、消毒，试验期间每周进行清洁，确保达到健康饲养的卫生条件。整个饲养过程，肉鸡自由采食和饮水，试验第1 d，鸡舍温度35~37 ℃，24 h光照；试验第2、3 d，光照时间22 h以上；试验第4~7 d，鸡舍温度34~36 ℃；之后每周降温2 ℃左右，4周后将温度控制在26~28 ℃，自然通风，保证各处理组间的饲养条件无差异。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验分别在第1、21、42 d饲喂前，各组以重复为单位称重，记录肉鸡不同阶段的初重（IBW）和末重（FBW），记录肉鸡每天饲粮用量，计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）及料重比（F/G）。ADG=(FBW-IBW)/试验天数(1)ADFI=总耗料量/试验天数(2)F/G=ADFI/ADG(3)1.4.2免疫器官指数试验第42 d，每个重复组随机抽取4只健康肉鸡，禁食12 h，宰杀，剥离并摘取胸腺、脾脏、法氏囊等免疫器官，使用滤纸将擦干表面水分，称重，记录。分别计算肉鸡的胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数。法氏囊指数=法氏囊重/活体重×100%(4)胸腺指数=胸腺重/活体重×100%(5)脾脏指数=脾脏重/活体重×100%(6)1.4.3血清抗氧化及免疫指标肉鸡宰杀前，翅下静脉采血5 mL，5 ℃、3 000 r/min离心10 min，分离得到血清，采用试剂盒（南京建成生物工程研究所）分别测定总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）的含量。T-AOC采用比色法测定，以硫酸亚铁标准溶液的浓度表示，GSH-Px采用二硫代二硝基苯甲酸法测定，SOD采用黄嘌呤氧化酶法测定，MDA含量采用硫代巴比妥酸法测定。采用试剂盒（南京建成生物工程研究所）检测免疫指标。采用免疫比浊法测定免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）水平。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 26.0软件进行单因素方差分析（One-way ANOVA），Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1MGF对肉鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，C组肉鸡21、42 d的FBW以及1~21、1~42 d的ADG和22~42、1~42 d的ADFI均有所升高，但差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.13.013.T002表2MGF对肉鸡生长性能的影响日龄/d项目A组（对照组）B组C组P值1~21IBW/g43.54±3.0544.25±2.3843.63±2.560.670FBW/g828.38±10.75838.91±11.35841.27±14.320.090ADG/[g/(只·d)]37.37±0.6237.84±0.5237.98±0.590.090ADFI/[g/(只·d)]52.01±1.4453.10±2.6453.20±1.170.300F/G1.39±0.051.40±0.061.40±0.030.69022~42IBW/g828.38±10.75838.91±11.35841.27±14.320.090FBW/g2 228.68±11.462 240.03±13.902 241.48±5.540.060ADG/[g/(只·d)]66.68±0.2066.72±0.5366.68±0.620.880ADFI/[g/(只·d)]133.49±2.22134.86±1.43135.93±2.960.080F/G2.00±0.042.02±0.022.04±0.040.0901~42IBW/g43.54±3.0544.25±2.3843.63±2.560.670FBW/g2 228.68±11.462 240.03±13.902 241.48±5.540.060ADG/[g/(只·d)]52.03±0.3252.28±0.3152.32±0.130.080ADFI/[g/(只·d)]92.75±1.4593.98±1.8194.56±1.420.070F/G1.78±0.031.80±0.031.81±0.030.210注：同行数据肩标无字母表示差异不显著（P0.05）。2.2MGF对肉鸡免疫器官指数的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，B组和C组肉鸡的脾脏指数、胸腺指数均显著升高（P0.05），但B组、C组间差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.13.013.T003表3MGF对肉鸡免疫器官指数的影响项目脾脏指数胸腺指数法氏囊指数P值0.0300.0200.030A组（对照组）0.27±0.01b0.64±0.01b0.34±0.03bB组0.32±0.02a0.67±0.02a0.38±0.04bC组0.33±0.05a0.67±0.02a0.39±0.04a注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。%C组肉鸡的法氏囊指数显著高于对照组（P0.05），B组肉鸡的法氏囊指数虽高于对照组，但差异不显著（P0.05）。2.3MGF对肉鸡免疫球蛋白的影响（见表4）由表4可知，各组肉鸡血清IgA、IgM、IgG水平差异均不显著（P0.05）10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.13.013.T004表4MGF对肉鸡免疫球蛋白的影响项目IgAIgMIgGP值0.2400.0800.590A组（对照组）1.36±0.051.59±0.072.59±0.10B组1.33±0.041.66±0.062.63±0.15C组1.34±0.041.62±0.072.60±0.11g/L2.4MGF对肉鸡抗氧化能力的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，B组和C组肉鸡血清SOD活性显著升高（P0.05），T-AOC极显著升高（P0.01），MDA含量显著降低（P0.05）。但B组、C组SOD活性及MDA含量、T-AOC差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.13.013.T005表5MGF对肉鸡抗氧化能力的影响项目T-AOC/(mmol/L)GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)MDA/(μmol/L)P值0.0060.0110.0200.020A组（对照组）0.65±0.51Bb1 683.87±14.57b236.88±2.15b2.75±0.77aB组0.72±0.39Aa1 690.32±5.36ab239.83±1.23a2.63±0.89bC组0.73±0.32Aa1 704.98±15.15a240.05±2.13a2.64±0.50bC组肉鸡血清的GSH-Px活性显著高于对照组（P0.05），B组肉鸡血清的GSH-Px活性与对照组、C组相比差异不显著（P0.05）。3讨论3.1MGF对肉鸡生长性能的影响MGF为四羟基吡酮的碳苷，属黄酮类化合物中的双苯吡酮类，具有多种生物活性[12]。研究表明，黄酮类化合物对畜禽F/G的影响并不稳定，但能够显著提高畜禽ADG、ADFI，对畜禽的生长具有良好的促进作用，其机理可能与以下两点有关：MGF等黄酮类化合物对畜禽肠道健康具有促进作用，能够减少肠道中的有害微生物含量，调节肠道菌群的组成及比例，维持肠道微生物的多样性；保持肠道为酸性环境，抑制病原微生物的黏附和定植，保持菌群平衡，改善肠道微生态环境[13]；肉仔鸡由于自身体温调节机制、免疫系统、消化系统不完善，且处于较差生长环境时，会由于病原侵袭导致肉鸡食欲废绝、生长缓慢等应激现象发生[14]，黄酮类化合物可对畜禽的炎性细胞因子及其基因表达产生较为明显的影响，从而对畜禽发挥免疫调节作用，保证畜禽的正常生长状态[15]。本试验中，与对照组相比，日粮中分别添加100、200 mg/kg的MGF均未能显著提高白羽肉鸡的ADG、ADFI；但200 mg/kg MGF添加组对，1~21 d、1~42 d肉鸡的ADG和22~42 d、1~42 d肉鸡的ADFI均有所升高，表明在肉鸡日粮中添加200 mg/kg MGF能够在一定程度上促进1~42日龄白羽肉鸡的生长性能，作用机理与上述原因有关。3.2MGF对肉鸡免疫器官指数的影响法氏囊、脾脏及胸腺是畜禽中的免疫器官。胸腺是T淋巴细胞产生、发育和成熟的重要场所[16]；法氏囊是B淋巴细胞发育、成熟的重要场所，为禽类动物独有的免疫器官[17]；脾脏是机体最大的免疫器官，所含的免疫细胞主要为淋巴细胞和巨噬细胞，约占全身总量的25%[18]。免疫器官发育能够体现机体免疫力，免疫器官指数升高，表明机体免疫力增强，免疫器官指数降低则表明机体免疫力降低。本试验中，与对照组相比，饲料中分别添加100、200 mg/kg的MGF，脾脏指数、胸腺指数均有显著提升；日粮中添加200 mg/kg的MGF的法氏囊指数也有显著提升，表明日粮中添加200 mg/kg的MGF能够改善1~42日龄白羽肉鸡的免疫器官指数，增强肉鸡机体的免疫能力。梁英等[19]研究发现，在饲粮中添加黄芩黄酮能够促进肉鸡免疫器官指数提高，对免疫器官的发育具有积极作用。张锦玥等[20]研究发现，在饲粮中添加1.6 g/kg的竹叶黄酮或1.0 g/kg的槲皮素均可起到改善肉鸡免疫器官指数、增强机体免疫能力的作用，表明黄酮类化合物对畜禽免疫能力具有一定的改善作用，与本研究中MGF对肉鸡的免疫能力的影响具有相似结果。3.3MGF对肉鸡血清免疫球蛋白水平的影响免疫球蛋白是体液免疫的关键[15]。王小宁等[21]研究发现，以飞机草黄酮类提取物作为饲料添加剂饲喂肉鸡，能够显著提高肉鸡血清IgM、IgG水平。梁英等[19]研究发现，黄芩黄酮能够显著增加肉鸡血清IgA、IgG水平，进而影响机体免疫能力。MGF虽然属于黄酮类化合物，但在本研究中未发现其对肉鸡血清IgA、IgM、IgG水平产生显著影响，可能与MGF剂量、试验时间以及试验动物品种等因素有关。3.4MGF对肉鸡抗氧化能力的影响T-AOC是衡量抗氧化的综合指标，其数值可评估机体抗氧化酶系统及各种抗氧化分子对机体自由基代谢是否正常。酶促系统和非酶促系统构成机体完整的抗氧化体系，酶促系统主要包括SOD、GSH-Px和CAT等抗氧化酶。SOD特异性清除机体代谢产生的超氧阴离子自由基（·O2-），保护生物大分子不被氧化破坏，减少细胞的损伤；GSH-Px特异催化谷胱甘肽（GSH）对过氧化氢（H2O2）的还原反应，起保护细胞膜结构和功能完整的作用[22]。机体在代谢过程中产生的氧自由基会导致生物膜的过氧化，从而产生MDA，而MDA可反映组织的氧化损伤程度[23]。本试验中，与对照组相比，日粮中分别添加100、200 mg/kg的MGF可使肉鸡SOD活性、T-AOC均显著升高，MDA含量显著降低；饲料中添加200 mg/kg的MGF可使肉鸡GSH-Px活性显著升高。马妍丽等[24]研究发现，MGF对羟基自由基（OH·）、·O2-、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH·）均具有一定的清除作用，且清除效果随着MGF的浓度升高效果越好，表明MGF可能是通过提高肉鸡体内抗氧化酶的活性清除自由基，从而减少自由基、脂质过氧化产物对机体细胞膜完整性的破坏，对1~42日龄肉鸡发挥抗氧化的作用。Chen等[25]研究黄酮成分复方对鸭病毒性肝炎的治疗效果，结果发现，黄酮成分复方添加剂可提高染病的雏鸭血清SOD、CAT、GSH-Px的活性，表明黄酮类化合物可以提高畜禽的抗氧化能力。MGF作为黄酮类化合物，在本试验中也得到了相似的结果。4结论本试验条件下，饲料中添加200 mg/kg MGF能够在一定程度上促进1~42日龄白羽肉鸡的生长性能；显著提高肉鸡免疫器官指数，增强机体免疫功能；显著提高肉鸡血清SOD、GSH-Px的活性和T-AOC，降低MDA含量，增强肉鸡的抗氧化能力。