牛磺酸(taurine)俗称牛胆碱、牛胆素,化学名为2-氨基乙磺酸(H2N-CH2-CH2-SO3H),为白色结晶状粉末,是一种半必需β-氨基酸,以游离形式广泛存在于动物细胞内[1-2]。研究表明,牛磺酸具有广泛的生物学功能,不仅是维持机体内环境稳态的重要因素,在抗氧化、促进动物生长以及调节神经、心血管、免疫和内分泌等系统的正常生理功能等方面也发挥重要作用[3-4]。由于动物体内合成牛磺酸的关键酶半胱亚磺酸脱羧酶活性较低,故牛磺酸除自身合成外通常还需要从日粮中摄入[5]。近年来,国内外有关牛磺酸作为饲料添加剂在畜禽中应用的研究日益增多。但报道的主要试验对象为肉仔鸡、仔猪和鱼[6],其他动物的应用和研究报道甚少;且试验周期常为3至4周,对长期使用效果的试验和研究较少。本试验就不同浓度的牛磺酸在不同时段对山羊体重和血清生化指标的影响进行研究,以期为牛磺酸作为羊的饲料添加剂提供参考。1材料与方法1.1试验日粮试验日粮为玉米、小麦、大豆、苜蓿等原料粉碎,加水搅拌均匀,呈干絮状,将不同浓度牛磺酸分别加入对应各组。对照组饲喂的基础日粮不添加牛磺酸(试验Ⅰ组),各试验组在基础日粮中分别添加0.05%(试验Ⅱ组)、0.10%(试验Ⅲ组)和0.20%(试验Ⅳ组)的牛磺酸。玉米、小麦、大豆、苜蓿等购自甘肃致富农林牧科技有限公司;牛磺酸(质量分数99%,上海笃玛生物科技有限公司)。基础日粮组成及营养水平见表1。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2022.07.005.T001表1基础日粮组成及营养水平Tab.1Composition and nutritional composition of basel diet原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米12.50代谢能/(MJ/kg)12.19小麦5.00粗蛋白/%21.10大豆7.50钙/%0.90苜蓿75.00有效磷/%0.47蛋氨酸/%1.03赖氨酸/%0.81注:1.每千克日粮提供:Fe 80 mg、Zn 80 mg、Mn 5 mg、Se 0.25 mg、VE 45 mg、VB1 3.2 mg、叶酸0.92 mg、VC 210 mg。2.营养水平均为计算值。1.2试验设计试验山羊购自本地区某养殖公司,选取16头健康、胎次和体重相近(约15 kg)的5~6月龄家山羊,随机分为4组,每组4个重复,每重复1只山羊。每日7:00和17:00饲喂,供试山羊试验期间自由饮水采食,按程序正常免疫和消毒,舍饲条件下饲养管理。试验采用单因素完全随机设计,试验期为81 d,分为两个阶段:第一阶段基础饲料上添加不同浓度牛磺酸连续饲喂21 d;第二阶段停止药物干预。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能指标试验第1和第21 d清晨空腹对山羊逐一称重,计算每组试验山羊的平均日增重;第二阶段停止药物干预,分别于第30、51和81 d时空腹称重。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)1.3.2血清生化指标试验第1、21、30、51和81 d的清晨对空腹试验山羊颈静脉采血,3 000 r/min离心10 min,取5 mL血清。采用日立型全自动血液生化分析仪测定血清中的白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)和铁蛋白(Ferritin);超氧化物歧化酶(SOD)、皮质醇(Cortisol)、血清骨钙素(BGP)、白细胞介素-2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)等指标,测定方法详见相应的试剂盒说明书。1.4数据统计与分析试验数据采用EXCEL 2020软件进行处理,SPSS 26.0软件进行单因素方差分析(One-way ANOVA)。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同浓度牛磺酸对试验山羊体重的影响(见表2)由表2可知,试验第一阶段(1~21 d),各组山羊的初重、末重及平均日增重差异不显著(P0.05)。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2022.07.005.T002表2不同浓度牛磺酸对试验山羊体重的影响Tab.2Effect of different concentrations of taurine on body weight of experimental goats项目1~21 d1~30 d1~51 d1~81 d31~51 d52~81 d初重/kg对照组(试验Ⅰ组)15.78±0.1815.78±0.1815.78±0.1815.78±0.1816.90±0.2817.15±0.50试验Ⅱ组15.45±0.2115.45±0.2115.45±0.2115.45±0.2118.37±0.1819.27±1.32试验Ⅲ组15.29±0.0115.29±0.0115.29±0.0115.29±0.0119.33±1.6719.74±1.42试验Ⅳ组15.73±0.9515.73±0.9515.73±0.9515.73±0.9519.13±0.6719.21±0.69末重/kg对照组(试验Ⅰ组)16.75±0.3516.90±0.2817.15±0.5018.75±0.3517.15±0.5018.75±0.35试验Ⅱ组16.95±0.3518.37±0.1819.27±1.3220.40±1.1319.27±1.3220.40±1.13试验Ⅲ组15.29±0.0115.29±0.0115.29±0.0115.29±0.0119.33±1.6719.74±1.42试验Ⅳ组16.95±1.2019.13±0.6719.21±0.6921.33±1.0819.21±0.6921.33±1.08平均日增重/[g/(只·d)]对照组(试验Ⅰ组)48.75±8.4137.50±29.46b27.50±5.58b37.18±2.20c12.50±7.0753.33±4.71ab试验Ⅱ组75.00±6.7397.33±23.57a76.40±26.79ab61.87±16.79bc45.00±37.7137.66±18.85b试验Ⅲ组84.25±46.13134.50±27.10a88.90±25.18a89.12±7.95a20.50±8.4889.50±9.89a试验Ⅳ组61.25±11.78113.33±5.89a69.70±4.58ab70.12±1.59ab4.24±0.7070.83±16.02ab注 :同列同项数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05)。试验第1~30 d,与对照组相比,试验Ⅱ组、试验Ⅲ组和试验Ⅳ组山羊的平均日增重均显著提高(P0.05),分别比对照组提高了159.55%、258.67%和202.21%;第1~51 d,与对照组相比,试验Ⅲ组山羊的平均日增重显著提高了223.27%(P0.05);第1~81 d,与对照组相比,试验Ⅲ组和试验Ⅳ组山羊的平均日增重均显著升高(P0.05),分别比对照组提高了139.70%和88.60%,且试验Ⅲ组山羊的平均日增重显著高于试验Ⅱ组(P0.05)。试验第31~51 d,各组山羊的平均日增重差异不显著(P0.05),且此时间段的平均日增重低于其他各时间段;第52~81 d,试验Ⅱ组山羊的平均日增重显著低于试验Ⅲ组(P0.05)。2.2不同牛磺酸水平对试验山羊血清生化指标的影响(见表3)由表3可知,试验第21 d,与对照组相比,试验Ⅲ组IFN-γ含量显著升高(P0.05);试验Ⅲ组、试验Ⅳ组SOD活性显著升高(P0.05)。试验Ⅲ组SOD活性显著高于试验Ⅱ组(P0.05)。对照组、试验Ⅱ组的TP含量显著低于试验Ⅲ组、试验Ⅳ组(P0.05)。对照组ALB含量显著低于试验Ⅲ组、试验Ⅳ组(P0.05),试验Ⅱ组显著低于试验Ⅲ组(P0.05)。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2022.07.005.T003表3不同浓度牛磺酸对山羊血清生化指标的影响Tab.3Effect of different concentrations of taurine on serum biochemical indexes of goats项目时间/d对照组(试验Ⅰ组)试验Ⅱ组试验Ⅲ组试验Ⅳ组γ-IFN/(ng/L)2137.49±7.96a46.84±2.96ab52.40±2.57b40.53±3.67ab3044.43±3.8047.85±3.9752.11±1.1845.38±6.375145.69±3.7246.33±7.2345.61±1.1441.10±11.358139.03±2.6140.96±0.8542.49±2.7842.90±6.86IL-2/(ng/L)216.65±0.236.15±0.797.00±1.066.76±0.64306.54±0.55b6.75±0.08b8.01±0.02a8.76±0.27a515.90±0.486.92±1.206.50±0.448.14±0.86815.26±0.255.86±1.685.41±0.286.65±0.10BGP/(ng/L)21302.24±42.07295.69±57.91278.91±42.19351.86±74.3230267.12±60.12250.50±64.37337.60±85.21393.62±71.9751288.05±8.61292.96±51.11310.84±113.42363.19±45.9681268.02±26.59327.73±24.02323.31±37.09300.91±21.92Cortisol/(μg/L)2133.15±16.9919.78±8.4316.33±0.2018.29±5.593018.35±9.1719.88±5.5322.29±7.8736.37±26.185123.41±3.3817.53±4.4633.98±21.2020.17±4.258134.10±24.9115.82±7.3221.19±5.1826.45±16.20SOD/(U/mL)218.32±0.44c9.59±0.73bc12.46±0.11a10.67±0.39b309.39±0.80b9.32±0.35b11.74±1.36a12.67±0.36a518.95±1.03b10.01±0.88b9.09±0.89b12.94±0.39a819.63±0.0110.20±1.729.07±0.2611.70±1.00Ferritin/(μg/L)21115.26±26.92103.30±11.82102.19±4.14104.78±4.2430102.76±29.4195.12±13.44122.75±18.08154.11±65.875192.33±9.17103.55±10.80148.75±40.21110.99±4.5681126.24±58.19104.78±27.88106.27±26.61142.48±39.08TP/(g/L)2167.76±0.57b68.76±0.07b71.72±0.28a71.40±1.61a3067.61±1.03b69.12±0.16b72.00±0.88a72.43±1.23a5168.13±0.28c69.67±0.09bc70.65±0.36ab71.79±1.06a8168.09±0.3167.63±0.6570.20±2.0870.08±0.79ALB/(g/L)2129.36±0.04c30.42±0.18bc32.48±0.54a31.36±0.60ab3029.26±0.21b30.14±1.34b32.67±0.28a32.05±1.23a5130.33±0.43b31.69±0.12ab32.48±0.52a31.91±0.71a8130.36±0.1630.58±0.0131.24±1.2031.45±0.37注 :同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05)。试验第30 d,对照组、试验Ⅱ组的IL-2含量和SOD活性显著低于试验Ⅲ组、试验Ⅳ组(P0.05);对照组、试验Ⅱ组的TP、ALB含量显著低于试验Ⅲ组、试验Ⅳ组(P0.05)。试验第51 d,试验Ⅳ组SOD活性显著高于其他3组(P0.05);对照组TP含量显著低于试验Ⅱ组、试验Ⅳ组(P0.05),试验Ⅱ组显著低于试验Ⅳ组(P0.05);对照组ALB含量显著低于试验Ⅲ组、试验Ⅳ组(P0.05)。其他血清生化指标在各时间段内差异均不显著(P0.05)。3讨论3.1添加不同浓度牛磺酸对山羊体重的影响本试验结果表明,日粮中添加不同含量牛磺酸可提高山羊的平均日增重,其中以0.10%牛磺酸在试验第30 d时的效果最佳,与大多数报道中试验周期为3~4周,牛磺酸添加量为0.10%、0.15%可提高试验动物的平均日增重的结果相近[7-8]。而Blair等[9]报道,日粮中添加0.05%和0.10%的牛磺酸对3、6、9周龄的肉仔鸡体重和饲料效率无显著影响。上述研究结果的差异可能与各试验中试验动物种类、饲喂日粮养分水平高低等的不同有关。目前有关试验动物停喂牛磺酸后的体重的研究报道甚少,本研究第31~51 d间,各组平均日增重差异不显著,且此时间段各组的平均日增重低于其他各时间段;但在第52~81 d时,0.10%、0.20%牛磺酸组与对照组差异显著,此试验结果仍待进一步研究。3.2不同浓度牛磺酸对山羊抗氧化的影响SOD是生物体内存在的一种抗氧化金属酶,广泛分布于微生物、植物和动物体内。本研究中0.10%、0.20%牛磺酸对山羊血清SOD的活性(试验第21、30 d)影响显著,且以试验第21 d时SOD活性最高,与前人相关研究结果相一致[10-11]。李丽娟等[7]研究发现,在爱拔益加肉雏鸡日粮中添加不同水平牛磺酸饲喂21 d,前期以添加量为0.10%~0.15%提高SOD活性的效果显著,后期则以添加量0.10%效果显著。本试验中,0.20%添加量的牛磺酸在试验第51 d时影响显著。本试验结果与前人结论的差异可能与试验动物种类、饲喂日粮养分水平高低等不同有关。由此可见,适宜的牛磺酸浓度会影响机体抗氧化功能。3.3不同浓度牛磺酸对山羊炎性因子的影响IL-2和IFN-γ主要由活化T细胞产生,是具有多向性作用的炎性细胞因子,主要促进淋巴细胞生长、增殖、分化,对机体的免疫应答和抗病毒感染等具有重要作用。四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化进程中,牛磺酸可提高活化T细胞产生的IL-2含量[12]。研究表明,日粮添加0.05%~0.20%牛磺酸饲喂6周可提高育成期蛋鸭血清中IL-2的含量,且添加0.15%组蛋鸭的含量最大[13]。也有研究表明,与顺铂化疗组相比,顺铂化疗+各剂量牛磺酸组小鼠血液中IL-2、IFN-γ的含量显著提高[14]。本研究中,试验第21 d,日粮添加0.10%牛磺酸显著提高了IFN-γ含量;试验第30 d时,0.10%、0.20%牛磺酸显著提高了山羊血清IL-2含量;试验第51和81 d时,各组山羊血清炎性因子含量差异均不显著。结果表明,日粮添加0.10%、0.20%牛磺酸含量对山羊血清IL-2、IFN-γ在试验前期影响明显,后期影响不明显。3.4不同浓度牛磺酸对山羊血清蛋白的影响机体血清中TP由ALB和GLB组成,其含量反映了机体代谢和营养状况。ALB是血清中含量最多且功能较为复杂的一种蛋白,能够平衡机体渗透压,对维持机体正常的生理功能具有重要意义。研究发现,添加0.20%牛磺酸可使产蛋后期蛋鸡(试验期4个月)血清TP和ALB的含量呈增加趋势,除0.5%牛磺酸添加组低于对照组外,其余各试验组均高于对照组;结果表明,血清总蛋白含量的提高可能与牛磺酸可以促进饲料蛋白质利用率有关[15]。李越[13]研究发现,日粮中添加0.15%牛磺酸组饲喂42 d,可显著提高育成期蛋鸭血清TP和ALB的含量。郭鹏飞[16]对肉鸭饲喂0.05%、0.10%、0.15%和0.20%的牛磺酸35 d,结果显示,0.10%、0.15%和0.20%的牛磺酸组肉鸭血清TP和ALB含量均显著高于对照组。马娅君等[17]在日粮中添加0.10%的牛磺酸,结果显示,牛磺酸组仔猪血清中ALB和TP显著高于对照组。牛磺酸作为饲料添加剂能够提高血清中ALB和TP的含量,原因可能是牛磺酸进入机体,对蛋白质合成路径中相关酶的合成具有促进作用。但不同动物作用效果存在差异,可能与动物种类、个体大小、饲料养分组成等因素有关。本试验结果显示,日粮添加0.10%、0.20%牛磺酸可使山羊血清TP和ALB(试验第21、30、51 d)含量显著升高,但在试验后期(试验第81 d)影响不显著;结果表明,连续饲喂21 d 0.10%、0.20%的牛磺酸在停药后30 d内对山羊TP和ALB浓度具有提升的作用。4结论本研究在日粮中添加不同浓度牛磺酸饲喂山羊21 d后停喂,试验第30 d时,以添加量为0.10%牛磺酸的效果最佳。结果表明,日粮中添加0.10%、0.20%牛磺酸可显著提高停药后前期的山羊血清蛋白含量及抗氧化能力、免疫能力,而对试验后期的影响不明显。XX.XXXX/j.issn.1672-9692.2022.07.005.F001
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