禁抗公告的实施使开发高效、安全、绿色的动物促生长剂和免疫调节剂成为畜牧业发展的必然趋势[1]。中链脂肪酸（MCFA）可水解为游离脂肪酸和甘油，具有独特的转运方式，能够改善动物肠道形态，促进动物机体代谢，抑制有害细菌繁殖，调节机体免疫力，促进动物生长发育[2-3]。MCT是一种酯类化合物，具有高度亲脂性，能够破坏细菌细胞膜，在肠内的高pH值（pKa=4.9）环境下仍具有抗菌作用。益生菌在家禽生产中能够起替代抗生素的作用[4-6]。益生菌能够增强动物机体免疫力，保障肠壁的完整性，抵抗致病菌，提高或修复肠道免疫屏障等功能[7-8]。本试验采取联合应用复合益生菌和中链脂肪酸甘油三酯的方式，探究在不同浓度梯度下二者联合应用对麻鸭生产性能、肠道菌群和肠道健康的影响，为复合益生菌和中链脂肪酸甘油三酯在麻鸭日粮中联合应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料中链脂肪酸甘油三酯和复合益生菌均由英杰（长沙）生物科技有限公司提供。中链脂肪酸甘油三酯主要有效成分为：C650%、C850%、小部分C10。复合益生菌主要有效成分为：嗜酸乳杆菌1×109 CFU/g、屎肠球菌1×109 CFU/g、枯草芽孢杆菌1×109 CFU/g、地衣芽孢杆菌1×109 CFU/g。试验动物绍兴麻鸭由广西桂柳牧业集团提供。1.2试验设计试验采用单因素完全随机设计，选取52周左右统一饲养环境下体重相近、产蛋率相近的产蛋后期绍兴麻鸭900只，随机分为3组，每组5个重复，每个重复60只。A组（对照组）为基础日粮，B组、C组分别添加900 g MCT+100 g复合益生菌、1 800 g MCT+200 g复合益生菌的基础日粮。预试期3 d，正式试验期60 d。基础日粮为玉米-豆粕型日粮，参考《无公害农产品 蛋鸭饲养管理操作规程》[9]，结合试验鸭场企业标准设计。日粮由广西桂柳牧业集团日粮厂生产，北京市国家粮食和物资储备局科学研究院进行营养水平检测。试验全期饲喂颗粒料。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.009.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米22.50代谢能/(MJ/kg)11.30玉米粉2.30粗蛋白质/%19.00糙米10.00钙/%3.60小麦15.00总磷/%0.55面粉5.00赖氨酸/%1.20磷酸氢钙1.00蛋氨酸/%0.48豆粕25.50发酵小麦麸3.00生物饲粮3.00鱼粉0.50石粉8.50猪油2.0070%赖氨酸0.4598%蛋氨酸0.20苏氨酸0.05氯化钠0.25碳酸氢钠0.1060%氯化胆碱0.10蒙脱石0.25预混料0.30注：1.预混料为每千克日粮提供：Fe 100 mg、Cu 8 mg、Mn 80 mg、Zn 16 mg、I 0.5 mg、Se 0.1 mg、VA 4 000 IU、VB1 0.8 mg、VB2 5 mg、VB6 1.5 mg、VB12 0.05 mg、VD3 800 IU、VE 30 IU、VK3 0.5 mg、D-泛酸10 mg、叶酸1.5 mg、烟酸20 mg、生物素0.4 mg。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。1.3饲养管理试验于广西桂林桂柳牧业集团旗下桂林桂英雁种鸭有限公司进行。试验鸭采取网上平养方式，自由采食、饮水。每日15：00打扫鸭舍，观察精神状态、死亡情况及粪便情况。统计麻鸭生产情况，作详细记录。常规免疫按照鸭场现有免疫程序进行。1.4测定指标及方法1.4.1生产性能试验期每日记录麻鸭的投料量、剩料量，统计试验期间各组的平均日采食量（ADFI）、平均蛋重、产蛋率、平均破蛋数和料蛋比。每日记录总蛋重和总蛋数，按每15 d统计平均蛋重，统计5次平均蛋重计算总蛋重。平均日采食量=总采食量/(鸭数量×试验天数)(1)产蛋率=产蛋总数/(鸭数量×试验天数)(2)料蛋比=总耗料重/总蛋重(3)1.4.2肠道及蛋壳沙门菌、大肠杆菌数量试验结束时，各重复随机选取1只麻鸭屠宰，无菌条件下取小肠各个肠段及盲肠内容物置于2 mL EP管，4 ℃保存。平板计数方法计算细菌数量[10-12]。1.4.3肠道形态麻鸭屠宰后，取十二指肠、空肠、回肠中部肠段，各肠段剪取1~2 cm左右，置于4%多聚甲醛固定液的EP管保存。固定状态良好后，严格按照病理实验检查SOP程序进行修剪，脱水，包埋，切片，染色，封片。使用Eclipse Ci-L拍照显微镜选取组织的目的区域进行40倍成像，成像时尽量使组织充满整个视野，保证每张照片的背景光一致。成像完成后使用Image-Pro Plus 6.0分析软件，统一以mL作为标准单位。分别测量每张切片中5根完整肠绒毛高度、5处隐窝深度、黏膜层厚度和肠壁厚度，求平均值，计算肠绒毛绒与隐窝比值。1.5数据统计与分析数据采用Excel 2016软件进行初步整理，SPSS 23软件进行单因素方差分析和LSD多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1MCT+复合益生菌对产蛋后期绍兴麻鸭生产性能的影响（见表2）由表2可知，与A组相比，B组、C组鸭平均日采食量虽有增加趋势，但差异不显著（P0.05）。与A组相比，B组、C组鸭的产蛋率均极显著升高（P0.01），料蛋比极显著降低（P0.01）。B组鸭的产蛋率均极显著高于C组（P0.01），料蛋比极显著低于C组（P0.01）。各组平均蛋重、平均破蛋数差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.009.T002表2MCT+复合益生菌对产蛋后期绍兴麻鸭生产性能的影响项目平均日采食量/[g/(只·d)]平均蛋重/g产蛋率/%平均破蛋数/个料蛋比P值0.1920.3930.0010.4140.008A组156.17±2.0484.91±0.6656.17±0.58C3.00±0.253.28±0.20AB组158.00±2.2384.67±0.4372.76±0.66A3.38±0.292.59±0.21CC组161.50±2.0184.75±0.1266.54±0.62B3.65±0.312.89±0.02B注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表3、表4与此同。2.2MCT+复合益生菌对产蛋后期绍兴麻鸭肠道及蛋壳沙门菌数量的影响（见表3）由表3可知，与A组相比，B组、C组鸭十二指肠、空肠内容物中沙门菌数量均极显著降低（P0.01），C组盲肠内容物中沙门菌数量显著低于A组（P0.01）。C组十二指肠内容物中沙门菌数量极显著低于B组（P0.01），空肠内容物中沙门菌数量极显著低于B组（P0.01），回肠、盲肠内容物中沙门菌数量均略低于B组，但差异不显著（P0.05）。A组、B组和C组鸭蛋壳均未检出沙门菌。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.009.T003表3MCT+复合益生菌对产蛋后期绍兴麻鸭肠道及蛋壳沙门菌数量的影响项目十二指肠空肠回肠盲肠蛋壳P值0.0060.0070.3020.239—A组6.31±1.07A6.16±1.09A6.20±1.13a3.55±1.79a0B组3.95±1.15B2.82±1.20C5.24±0.61ab3.22±0.65ab0C组2.95±1.31C3.94±1.30B4.98±0.49b2.94±1.66b0lgCFU/mL2.3MCT+复合益生菌对产蛋后期绍兴麻鸭肠道及蛋壳大肠杆菌数量的影响（见表4）由表4可知，与A组相比，B组、C组鸭的回肠内容物中大肠杆菌数量均显著降低（P0.05），C组鸭十二指肠、空肠内容物大肠杆菌数量显著降低（P0.05）。C组回肠内容物中大肠杆菌数量显著低于B组（P0.05），十二指肠、空肠内容物中大肠杆菌数量有所降低，但差异不显著（P0.05）。各组鸭盲肠内容物中大肠杆菌数量差异不显著（P0.05）。A组、B组、C组鸭蛋壳均未检出大肠杆菌。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.009.T004表4MCT+复合益生菌对产蛋后期绍兴麻鸭肠道及蛋壳大肠杆菌数量的影响项目十二指肠空肠回肠盲肠蛋壳P值0.0450.0480.2830.566—A组6.95±1.19a6.88±1.21a6.97±1.19a4.05±0.700B组5.80±0.59ab5.51±1.01ab6.16±0.51b3.76±0.310C组4.01±1.17b4.65±1.28b5.67±0.32c4.02±0.340lgCFU/mL2.4MCT+复合益生菌对产蛋后期绍兴麻鸭小肠形态的影响（见表5）由表5可知，与A组相比，B组、C组鸭十二指肠、空肠以及回肠的绒毛高度均有增加趋势，但差异不显著（P0.05）；B组、C组鸭十二指肠绒隐比均显著升高（P0.05）；B组鸭空肠肠壁厚度显著升高（P0.05），C组鸭空肠肠壁厚度虽有所升高，但差异不显著（P0.05）。B组十二指肠绒隐比显著低于C组（P0.05）。各组其他指标差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.009.T005表5MCT+复合益生菌对产蛋后期绍兴麻鸭小肠形态的影响项目A组B组C组P值十二指肠绒毛高度/mm0.79±0.060.82±0.130.98±0.100.093隐窝深度/mm0.15±0.010.12±0.020.13±0.010.412绒隐比5.70±0.55c6.11±0.91b7.93±0.86a0.027黏膜层厚度/mm1.11±0.061.13±0.151.15±0.070.335肠壁厚度/mm1.45±0.081.45±0.191.68±0.080.339空肠绒毛高度/mm0.77±0.060.91±0.090.86±0.120.159隐窝深度/mm0.13±0.010.16±0.010.13±0.020.257绒隐比6.09±0.726.10±0.716.17±1.040.967黏膜层厚度/mm1.02±0.061.22±0.091.12±0.160.443肠壁厚度/mm1.29±0.07b1.52±0.10a1.36±0.18b0.047回肠绒毛高度/mm0.53±0.050.65±0.040.67±0.030.062隐窝深度/mm0.11±0.010.10±0.010.13±0.010.093绒隐比5.78±0.626.33±0.435.98±0.440.391黏膜层厚度/mm0.90±0.070.85±0.060.93±0.050.110肠壁厚度/mm1.23±0.101.13±0.081.27±0.080.125注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。3讨论3.1MCT+复合益生菌对产蛋后期绍兴麻鸭生产性能的影响MCFA是一种碳链长为6~12个碳原子饱和脂肪酸，具有肥皂气味，能够影响日粮的适口性。MCFA酯化的产物MCT易消化，可促进动物生长，改善肠道健康[13]。Hong等[14]研究发现，MCT在仔猪断奶后两周内具有提高平均日采食量的能力。本试验与上述研究结论存在差异，原因可能是试验对象不同，肠道差异导致对MCT的吸收程度不同。益生菌是一种非致病性且无毒的微生物（如细菌和酵母）。在家禽营养中起作用的益生菌微生物主要是乳酸菌、肠球菌、双歧杆菌和芽孢杆菌等[15-16]。研究表明，添加益生菌对蛋鸡生产性能无任何影响[17-19]。本研究结果显示，与对照组相比，试验组鸭产蛋率显著提高，料蛋比显著降低，表明添加MCT和复合益生菌对产蛋后期绍兴麻鸭的生产性能具有积极影响。3.2MCT+复合益生菌对产蛋后期绍兴麻鸭肠道及蛋壳沙门菌、大肠杆菌数量的影响MCFA能够提高生物安全性，促进动物肠道健康，酯化后的产物MCT进入肠道后，可抑制肠道中的病原体生长繁殖。Pluske等[20]研究表明，家禽肠道健康问题与细菌有关。张佩华等[21]研究表明，食品级单辛酸甘油酯微乳液对大肠杆菌的最低抑菌浓度均为135 mL/L，具有良好的抑菌效果。汤佳宁等[22]研究表明，单辛酸甘油酯对肠炎沙门菌具有极显著的抑制效果，对鸡白痢沙门菌具有较强的抑制效果，辛葵酸甘油酯对大肠杆菌、肠炎沙门菌和鸡白痢沙门菌具有较弱的抑制效果。本研究表明，添加MCT和复合益生菌对沙门氏菌和大肠杆菌均有抑制作用，与上述研究结果一致。益生菌能够抑制有害细菌繁殖，促进有益菌的定植[23]。王琨等[24]研究表明，日粮中添加活性酵母或酵母培养物，能够改善肉鸭肠道微生态平衡。周泉勇等[25]研究表明，日粮中添加益生菌可显著降低樱桃谷鸭粪便中大肠杆菌数量。本研究结果表明，添加MCT和复合益生菌可显著降低产蛋后期绍兴麻鸭十二指肠和空肠中沙门菌和大肠杆菌的数量，且以添加剂量1 800 g MCT+200 g复合益生菌的配合效果比较明显，原因可能是添加剂量较高，在麻鸭体内存留时间较长，对细菌抑制作用强，与前人研究结果一致。3.3MCT+复合益生菌对产蛋后期绍兴麻鸭肠道形态的影响MCFA及其衍生物可减少病原菌，调节动物肠道微生物区系。Yeh等[26]研究表明，MCT可提高肠绒毛高度，并降低肠壁的通透性，促进营养物质吸收。本研究结果表明，添加MCT的日粮能够提高家禽肠道肠绒毛高度，保证肠道健康。Chichlowski等[27]研究表明，绒毛高度增加可促进肠道更好地吸收营养物质。刘芳丹[28]研究发现，在日粮中添加植物乳杆菌能够显著提高肉鸭回肠、盲肠的绒毛高度和肠壁厚度。马治敏[29]研究发现，在肠道菌群失调的肉鸭日粮中添加高剂量（2×109 CFU/只）布拉氏酵母菌可显著提高空肠绒毛高度和十二指肠绒隐比，显著降低空肠隐窝深度和黏膜厚度；中剂量组肉鸭（2×108 CFU/只）的回肠绒隐比显著提高。本研究结果表明，添加MTC和复合益生菌对产蛋后期绍兴麻鸭小肠绒毛高度具有提高的趋势，空肠的肠壁厚度显著提高，与前人研究结果类似。上述结论存在差异可能由于研究对象不同和年龄阶段具有差异，或所用添加剂种类及剂量不同导致。4结论日粮中添加MCT和复合益生菌可以提高产蛋后期绍兴麻鸭的生产性能，降低十二指肠和空肠中沙门菌和大肠杆菌的数量，但对肠道形态的影响不显著，且添加量为900 g MCT + 100 g复合益生菌效果较好。