酸化剂能够有效降低饲料和胃肠道pH值，提高营养物质的消化吸收效率，抑制消化道内有害菌的生长繁殖，增强动物机体免疫功能，从而促进动物生长，是绿色、安全、高效的功能性饲料添加剂。在“饲料无抗，养殖减抗”的背景下，饲料酸化剂成为动物日粮替代抗生素常用的添加剂之一。复合酸化剂的应用效果受组成成分、使用方式、添加剂量等因素影响。本试验旨在研究复合酸化剂对肉鸡生长性能、血清生化指标、抗氧化指标、肠道形态结构等指标的影响，探讨复合酸化剂在肉鸡日粮中的使用效果，以期为复合酸化剂在肉鸡日粮中的推广应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料10%盐酸土霉素购自网上兽药店。复合酸化剂由湖北华扬科技发展有限公司提供，主要成分包括乳酸、富马酸、柠檬酸、苯甲酸等。1.2试验动物与试验设计选取1 200只同批孵化的AA白羽肉鸡，公、母各半，随机分为3组，每组8个重复，每个重复50只鸡，多层笼养。所有试验鸡在同一标准舍中养殖，按不同处理分栏饲喂。试验期42 d。试验设计见表1。基础日粮组成及营养水平见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.010.T001表1试验设计组别试验日粮对照组玉米-豆粕型基础日粮抗生素组基础日粮+200 g/t土霉素酸化剂组基础日粮+0.1%复合酸化剂10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.010.T002表2基础日粮组成及营养水平（干物质基础）项目0~21日龄22~42日龄原料组成/%玉米53.0054.00豆粕（43%）36.0034.25菜籽粕0.002.00进口鱼粉（68%）3.000.00豆油4.006.00石粉1.201.30磷酸氢钙1.401.30赖氨酸（98.5%）0.300.22蛋氨酸0.200.15食盐0.300.30氯化胆碱（50%）0.100.10米糠0.170.05肉鸡多维0.030.03肉鸡多矿0.300.30合计100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)12.6813.18粗蛋白/%22.0020.00总磷/%0.690.60有效磷/%0.450.35钙/%1.000.88赖氨酸/%1.451.20蛋氨酸/%0.550.45蛋氨酸+半胱氨酸/%0.880.78苏氨酸/%0.920.84色氨酸/%0.280.25精氨酸/%1.201.12注：1.多维购自上海富朗特动物保健股份有限公司，多矿购自购自长沙兴嘉生物工程股份有限公司。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理饲养试验在武汉新华扬生物股份有限公司黄湖基地进行。鸡舍内保持通风良好，舍温维持在18~23 ℃。养殖前做好设备及鸡舍的消毒清洗工作，待鸡舍彻底清洁和干燥，使用甲醛和高锰酸钾进行熏蒸。肉仔鸡采用多层笼养和自由采食、饮水方式饲养。按照鸡场正常免疫程序和驱虫程序进行。每天在固定时间饲喂3次，提供充足、干净的饮用水。养殖过程中随时记录鸡的采食和健康状况。1.4样品采集于试验第21、42 d晚上21：00停止饲喂，第22、43 d早上7：00停水1 h后，9：00以重复为单位称取体重；每个重复中随机取1只鸡称重，静脉采血，分离血清并于-20 ℃冰箱中保存，用于检测肉鸡血清生化指标和抗氧化指标。采血后屠宰，打开腹腔并分离空肠、回肠、盲肠，再取各肠段中段1~2 cm肠段置于装有甲醛固定液的10 mL离心管中，用于后期切片制作，观察肠道形态。1.5测定指标及方法1.5.1生长性能记录每日的饲料投喂量及剩余料量、试验鸡死亡淘汰情况，计算试验鸡的平均日采食量、平均日增重和料重比。平均日采食量=总采食量/(试验鸡数×试验天数)(1)平均日增重=(末重－初重)/(试验鸡数×试验天数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.5.2血清生化指标尿酸（UA）采用尿酸酶反应终点比色法测定；总蛋白（TP）采用双缩脲比色法测定；白蛋白（ALB）采用溴甲酚绿比色法测定；球蛋白（GLB）计算值即总蛋白-白蛋白；血糖（GLU）采用葡萄糖氧化酶法测定；总胆固醇（TC）采用氧化酶法测定；甘油三酯（TG）采用GPO-PAP法测定；尿素氮（BUN）采用脲酶法测定。1.5.3血清抗氧化指标利用试剂盒和酶标仪测定血清中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性。试剂盒由南京建成生物工程研究所生产。1.5.4免疫器官指数屠宰试验时，取胰腺、脾脏、法氏囊、胸腺，吸干血液，剔除脂肪，称取鲜重，计算免疫器官指数。免疫器官指数=免疫器官鲜重/活重×100%(4)1.5.5肠道组织切片检测取出甲醛溶液中固定的空肠、回肠、盲肠各肠段，使用石蜡包埋后采用伊红-美蓝对连续切片进行染色。在光镜下观察测量切片，从每张切片中随机选取15根肠绒毛，分别测定肠道绒毛高度和隐窝深度，计算肠绒毛高度与隐窝深度及比值，观测肠道形态结构。1.6数据统计与分析采用SPSS 16.0进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1复合酸化剂对肉鸡生长性能的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，酸化剂组1~21日龄、1~42日龄肉鸡平均日增重分别提高了6.59%（P0.05）和1.90%（P0.05），1~21日龄、22~42日龄、1~42日龄肉鸡料重比分别降低了4.08%（P0.05）、3.41%（P0.05）和4.30%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.010.T003表3复合酸化剂对肉鸡生长性能的影响项目对照组抗生素组酸化剂组1~21日龄1日龄体重/(g/只)45.11±0.1645.32±0.3945.33±0.2621日龄体重/(g/只)632.12±14.44a649.39±12.77a670.67±16.73b平均日采食量/[g/(只·d)]41.09±0.9740.95±1.0642.11±1.20平均日增重/[g/(只·d)]27.94±0.69b28.78±0.61a29.78±0.80a料重比1.47±0.041.42±0.041.41±0.0522~42日龄42日龄体重/(g/只)1 814.6±55.26b1 848.3±90.73ab1 918.9±35.33a平均日采食量/[g/(只·d)]115.68±5.95114.85±5.77111.06±2.73平均日增重/[g/(只·d)]56.31±2.75b60.45±3.76a56.08±1.25b料重比2.05±0.04a1.90±0.04c1.98±0.05b1~42日龄平均日采食量/[g/(只·d)]78.38±3.1977.90±3.3176.58±1.79平均日增重/[g/(只·d)]42.13±1.32b44.61±2.16a42.93±0.84ab料重比1.86±0.04a1.75±0.04b1.78±0.05b注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。与抗生素组相比，酸化剂组1~21日龄肉仔鸡的平均日采食量和平均日增重分别提高了2.83%和3.47%，料重比降低了0.70%（P0.05）；22~42日龄肉鸡平均日增重显著降低（P0.05），料重比显著提高（P0.05）；1~42日龄肉鸡的平均日采食量和平均日增重分别降低了1.69%、3.77%（P0.05），料重比提高了1.71%（P0.05）。2.2复合酸化剂对肉鸡血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，酸化剂组22日龄肉鸡血清BUN含量显著提高（P0.05），血清UA含量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.010.T004表4复合酸化剂对肉鸡血清生化指标的影响项目对照组抗生素组酸化剂组22日龄TP/(g/L)32.56±1.7733.86±2.0933.86±2.09ALB/(g/L)17.10±0.5118.19±1.0817.99±1.00GLB/(g/L)15.46±1.5015.67±1.0316.40±2.49TG/(mmol/L)1.51±0.631.35±0.570.83±0.17TC/(mmol/L)4.29±0.334.69±0.364.47±0.79GLU/(mmol/L)14.26±0.8014.84±0.7114.94±0.87BUN/(mg/L)9.30±2.00b10.50±2.00b13.60±2.30aUA/(μmol/L)274.75±61.54a190.67±34.96b191.55±11.68b42日龄TP/(g/L)36.34±1.3138.31±4.5137.78±4.81ALB/(g/L)17.36±1.00a16.06±0.97b16.62±0.52abGLB/(g/L)18.98±1.2922.25±3.9121.16±4.48TG/(mmol/L)1.69±0.64a0.99±0.38b1.20±0.12abTC/(mmol/L)4.33±0.733.87±0.553.84±0.42GLU/(mmol/L)14.31±1.1014.17±0.7315.04±0.16BUN/(mg/L)11.10±2.7015.10±4.5018.80±4.60UA/(μmol/L)216.67±32.77204.79±44.85174.15±25.27与抗生素组相比，酸化剂组22日龄肉鸡血清BUN含量显著提高（P0.05），血清TP、ALB、GLB含量差异不显著，42日龄尿酸含量降低（P0.05）。2.3复合酸化剂对肉鸡血清中抗氧化指标的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，酸化剂组22日龄、42日龄肉鸡血清SOD酶活性提高，MDA含量降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.010.T005表5复合酸化剂对肉鸡血清中抗氧化指标的影响项目对照组抗生素组酸化剂组22日龄SOD/(U/mL)610.86±64.38677.62±90.39674.09±89.48MDA/(μmol/L)3.06±0.223.51±0.943.03±0.6242日龄SOD/(U/mL)599.32±82.63ab522.24±63.82b681.03±82.11aMDA/(μmol/L)3.15±0.742.57±0.702.38±0.44与抗生素组相比，酸化剂组42日龄肉鸡血清SOD酶活性显著提高（P0.05）。2.4复合酸化剂对肉鸡免疫器官指数的影响（见表6）由表6可知，与对照组相比，酸化剂组22日龄肉鸡胸腺指数和胰腺指数显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.010.T006表6复合酸化剂对肉鸡免疫器官指数的影响项目对照组抗生素组酸化剂组22日龄胸腺指数0.47±0.12a0.41±0.14ab0.30±0.08b脾脏指数0.10±0.020.10±0.020.09±0.01胰腺指数0.35±0.04a0.33±0.03ab0.27±0.07b法氏囊指数0.34±0.030.29±0.050.30±0.0842日龄胸腺指数0.33±0.060.33±0.050.32±0.06脾脏指数0.13±0.030.12±0.030.16±0.04胰腺指数0.23±0.020.21±0.020.24±0.04%与抗生素组相比，酸化剂组对肉鸡各免疫器官指数均差异不显著（P0.05）。2.5复合酸化剂对肉鸡肠道结构的影响（见表7）由表7可知，与对照组相比，酸化剂组22日龄肉鸡空肠隐窝深度显著降低（P0.05），空肠绒毛高度与隐窝深度的比值显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.010.T007表7复合酸化剂对肉鸡肠道结构的影响日龄组织项目对照组抗生素组酸化剂组22日龄空肠绒毛高度/mm0.90±0.170.85±0.230.91±0.15隐窝深度/mm0.23±0.03a0.20±0.05ab0.16±0.04b绒毛高度/隐窝深度3.96±0.59b4.34±1.27ab5.63±1.32a回肠绒毛高度/mm0.62±0.120.69±0.060.64±0.06隐窝深度/mm0.17±0.020.15±0.040.16±0.03绒毛高度/隐窝深度3.62±0.46b4.71±0.91a3.97±0.68ab盲肠肠腺深度/mm0.32±0.05a0.25±0.02b0.28±0.02ab42日龄空肠绒毛高度/mm1.16±0.211.00±0.261.20±0.11隐窝深度/mm0.24±0.020.27±0.070.25±0.05绒毛高度/隐窝深度4.84±0.67a3.78±0.68b4.85±0.74a回肠绒毛高度/mm0.90±0.220.81±0.110.93±0.11隐窝深度/mm0.22±0.050.20±0.030.22±0.05绒毛高度/隐窝深度4.13±1.184.18±0.804.20±0.88盲肠肠腺深度/mm0.32±0.110.26±0.050.25±0.04与抗生素组相比，酸化剂组42日龄肉鸡空肠绒毛高度与隐窝深度的比值显著提高（P0.05）。3讨论3.1复合酸化剂对肉鸡生长性能的影响在饲粮中添加有机酸化剂能够提高饲料利用率，改善肉鸡生长性能[1-5]。复合酸化剂结合各单一酸化剂的优势，使各酸化剂协同互补，能够更好地改善动物生产性能[6]。何国飞等[7]研究表明，日粮中添加不同的复合酸化剂，可以显著提高黄羽肉鸡的平均日增重，显著降低料重比。吕明斌等[8]研究发现，在肉鸡日粮中添加不同组成的复合酸化剂，可以降低料重比，提高肉鸡成活率，改善肉鸡生产性能。刘佑明等[9]研究发现，肉鸡日粮中添加乳酸型复合酸化剂，能够显著提高肉鸡的平均日增重，显著降低料重比。饮水中添加乳酸型复合酸化剂也能取得相似的效果[10]。本研究结果显示，添加复合酸化剂可以显著提高肉鸡前期的平均日增重，降低肉鸡料重比，与上述研究结果相似。酸化剂改善肉鸡生长性能的原因一方面是酸化剂能够降低胃肠道pH值，激活胃蛋白酶、刺激其他内源酶的活性，提高营养物质的消化吸收[11-13]；另一方面是酸化剂能够抑制病原菌生长，改善肠道健康[14-15]。虽然肉鸡生长后期，抗生素对生长性能的改善效果显著优于复合酸化剂，但酸化剂在前期的应用效果要强于抗生素，整个生长期，复合酸化剂对肉鸡生长性能的改善效果略低于抗生素组。本研究结果表明，复合酸化剂能够起一定的替抗效果。3.2复合酸化剂对肉鸡血清生化指标的影响血清生化指标能够反映肉仔鸡机体代谢和健康状况。血清总蛋白主要包括白蛋白和球蛋白，能够反映机体蛋白质代谢水平变化。白蛋白在血浆中含量最为丰富，在运输代谢产物、维持渗透压等方面发挥重要功能。球蛋白又称为免疫血清球蛋白，与机体免疫功能密切相关。酸化剂能够激活胃蛋白酶原，提高蛋白酶活性，对蛋白质的消化代谢具有重要影响[16]。研究表明，酸化剂能够促进蛋白质代谢，提高肉鸡血清总蛋白和白蛋白含量[17-18]。本研究中，肉鸡日粮中添加复合酸化剂，提高了肉鸡血清总蛋白和球蛋白含量。尿素氮是血液中除蛋白质外的含氮化合物，是机体蛋白质代谢的主要产物之一，肾功能损伤、肠道出血、甲亢、蛋白质摄入过量等均会导致血液中尿素氮含量升高。刘佑明等[9]研究发现，日粮添加不同复合酸化剂，对肉鸡血清尿素氮含量未产生显著影响。本研究中，日粮添加新型酸化剂显著提高了22日龄肉鸡血清尿素氮含量，与上述研究结果存在差异，在肉鸡未出现明显病症的情况下，推测是蛋白质摄入过量引起的尿素氮含量的升高。尿酸是禽类嘌呤代谢的终末产物，血尿酸升高是痛风的主要病因。长期高血尿酸会引起急性、慢性关节炎。研究表明，肉鸡日粮中添加有机酸化剂能够降低肉鸡血清尿酸含量[9-10,19-20]。本研究中，复合酸化剂的添加降低了肉鸡血清尿酸含量，与上述研究结果相似，并且效果优于抗生素。3.3复合酸化剂对肉鸡血清抗氧化指标的影响抗氧化能力与机体抗病力和健康状况密切相关，血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量能够反映动物机体抗氧化能力。SOD是肉鸡体内重要的抗氧化酶，能够清除机体自由基，保护机体细胞免受损伤。蛋鸡日粮中添加复合酸化剂，能够提高蛋鸡血清SOD活性，提高抗氧化能力[21-22]。本研究结果显示，复合酸化剂提高了肉鸡血清SOD活性，原因可能是酸化剂能够与锌、铜等金属离子形成高效价的螯合物，而SOD是一种金属酶类，锌、铜是其活性中心，锌、铜含量的增加能够提高SOD活性[23]。MDA是肉鸡体内脂质过氧化的终产物，可以反映机体氧自由基介导的脂质过氧化水平。肉鸡体内脂质含量含有相对较高，易发生过氧化反应，产生过量自由基而导致氧化损伤。研究表明，饲料中添加酸化剂能够降低肉鸡血清中MDA含量，减少机体氧化损伤[9,24]。本研究结果显示，复合酸化剂降低了肉鸡血清中MDA含量，其效果优于抗生素，与上述研究结果相似。这是因为酸化剂能够通过调节酸碱平衡，缓解机体应激，减少脂质过氧化的发生[25]。有机酸化剂上的羧基能够清除体内过量的自由基，减少脂质过氧化，从而提高机体抗氧化能力[26]。3.4复合酸化剂对肉鸡肠道结构的影响小肠是动物机体消化、吸收营养物质的主要场所。小肠黏膜上的绒毛高度、隐窝深度以及绒毛高度与隐窝深度比值，是评价肠道消化吸收能力的重要参考指标。肠绒毛越长表明成熟的上皮细胞越多，吸收能力也就越强；隐窝越浅表明上皮细胞发育越成熟，分泌能力越强。绒毛高度与隐窝深度比值能够综合反映肠道的功能和结构发育，值越高表明黏膜结构越完善，消化吸收能力也就越强[27]。研究表明，酸化剂能够增加绒毛高度、改善肠道结构[28]。Mohammadagheri等[29]研究发现，柠檬酸能显著增加十二指肠的绒毛高度和绒毛高度与隐窝深度比值，显著降低十二指肠隐窝深度。徐青青等[10]研究表明，饮水中添加乳酸型复合酸化剂，能够显著提高小肠各肠段绒毛高度和绒隐比，显著降低隐窝深度。本研究结果显示，复合酸化剂的添加对肉鸡各肠段绒毛高度无显著影响，但显著降低22日龄空肠隐窝深度，显著提高22日龄空肠绒毛高度与隐窝深度的比值；与抗生素组相比，显著提高了空肠绒毛高度与隐窝深度的比值。结合抗氧化指标结果，分析原因可能是酸化剂提高了机体的抗氧化能力，减少了肠道氧化损伤。本研究中，复合酸化剂对肠道绒毛高度无显著影响，与上述研究结果略有差异，可能是由于酸化剂组成不同，应用效果也不一样。殷继勋[30]研究发现，复合酸化剂对肉鸡十二指肠、空肠、回肠绒毛高度、隐窝深度均没有显著影响，但显著增加了回肠绒隐比。孙浩[31]研究发现，复合酸化剂对黄羽肉鸡空肠绒毛结构无显著影响。本试验中，与抗生素相比，复合酸化剂对空肠绒毛结构具有显著改善效果，这也是酸化剂的优势之一。4结论本试验结果表明，肉鸡日粮中添加0.1%复合酸化剂，能够提高肉鸡平均日增重，降低料重比，改善了部分血清生化指标和抗氧化指标，改善了肠道结构；与抗生素相比，复合酸化剂能够提高肉鸡抗氧化能力，改善肠道绒毛形态。