中草药中含有蛋白质、油脂、糖类、生物碱、无机盐、甙类、蜡、酶、色素、维生素、有机酸、鞣质等成分,具有药用、营养双重功能。中草药复方中的有效物质能够相互协调,达到治疗预防疾病和补充营养作用[1]。中草药添加剂是以天然的药性、药味及物质间阴阳关系的传统理论为核心,以动物营养为指导,研制的单一或复合型纯天然饲料添加剂[2]。根据国家药典记载四君子散由白术、党参、茯苓、甘草等4味药组成,具有健脾益气、提高机体免疫的功能;强壮散由黄芪、党参、白术、茯苓、六神曲、炒麦芽、山楂、草豆蔻等8味药组成,具有健胃增食、增强免疫的作用[3]。刘志英等[4]在云岭黑山羊饲料中添加复方中草药,发现试验组羊的总增重和平均日增重分别比对照组提高了17.97%和6.18%。周文仙等[5]使用黄芪、刺五加、当归、柴胡、陈皮、山楂、神曲、甘草、贯众等多味中药添加剂育肥肉牛,发现试验组肉牛饲草利用率、表观消化率明显提高,牛肉品质得到改善。王曼鸿[6]在哺乳期犊牛的基础日粮中添加益母草、女贞子、蒲公英、麦芽,发现犊牛血清IgG和IgM含量明显提高,犊牛免疫细胞活性增强。因此,本试验自拟由当归、黄芪、白术、山楂、炒麦芽等9味中药组成中草药添加剂,研究其对湖羊羔羊生长性能的影响,为中草药添加剂在湖羊羔羊生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验时间与地点试验于2021年7月15日至9月14日在甘肃环县毛井镇某肉羊养殖专业合作社进行。1.2中草药添加剂配方根据文献[7]和预试期羔羊采食情况,确定中草药添加剂由当归(10%)、黄芪(12.5%)、白术(12.5%)、山楂(10%)、炒麦芽(12.5%)、神曲(12.5%)、草豆蔻(7.5%)、蒲公英(12.5%)、甘草(10%)等9味药组成,中草药添加剂量为精料的1.0%。中草药均购自当地医药超市,粉碎,过40目筛,搅拌,混匀,封装冷藏。1.3试验设计及饲养管理试验采用单因素试验设计,在规模育肥群中随机挑选30只80日龄、平均体重27.4 kg的湖羊公羔,打耳标号,随机分为2组,每组3个重复,每个重复5只羔羊,分栏饲养。对照组羔羊饲喂羊场自配饲粮,即精料+玉米秸秆+苜蓿粉;试验组羔羊饲喂精料+1.0%配方中草药+玉米秸秆+苜蓿粉的饲粮。羔羊提前进行传染病筛查,防疫。圈舍定期消毒,每天清扫。羔羊采用全舍饲,自由运动,养殖密度为每只羊2.5 m2。每天7:30和16:30各饲喂1次,试验羊先采食精料,再添加粗饲料,自由采食,饲喂量根据采食情况调整,每次饲喂前保证食槽有少量剩余粗饲料,清扫料槽,称重,每天计算粗饲料采食量。预试期10 d,正式试验期49 d。预试期羔羊自由采食,确定粗饲料最低采食量。1.4试验饲粮基础饲粮由粗饲料和精饲料组成,精粗比为4∶6。粗饲料为干苜蓿和玉米秸秆草粉碎至1.5~3 cm。精料组成及营养水平见表1。试验组羔羊在每次饲喂前称取精料,使用小型喷雾器将饲料表层喷湿,将1%中草药添加剂与精料混匀。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.003.T001表1精料组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米65.0粗蛋白质/%15.80小麦麸8.0中性洗涤纤维/%16.00胡麻饼粕22.2钙/%0.81预混料1.5磷/%0.52小苏打0.5消化能/(MJ/kg)13.40细石粉1.8碳酸氢钙0.2食盐0.8注:1.预混料为每千克饲粮提供:Cu 19 mg、Zn 50 mg、Se 0.30 mg、Fe 80 mg、I 0.8 mg、Mn 40 mg、VA 10 000 IU、VD 400 IU、VE 200 IU、VB1 10.8 mg。2.营养水平中消化能为计算值,其余均为实测值。1.5测定指标及方法1.5.1生长性能正式试验期第0和49 d早晨饲喂前对每组羊空腹称重,每天测定试验羊的平均日采食量(ADFI),计算平均日增重(ADG)、料重比(A/D)。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.5.2血清生化指标在试验结束当天早晨,颈静脉采集试验羊血液5 mL,低温环境下,自然析出血清,3 000 r/min离心5 min,吸取上清液,-20 ℃保存。采用CL-8000型全自动生化分析仪测定血清中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和尿素氮(BUN)含量以及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性。试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.5.3血清抗氧化、免疫指标使用RNE90002全自动酶标仪,采用比色法测定血清中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPH-Px)活性;采用竞争法检测血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)含量。试剂盒均购自江苏雨桐生物科技有限公司,按照试剂盒说明书进行测定。1.5.4瘤胃发酵参数在采血结束后,使用瘤胃管采集瘤胃液,瘤胃液经过四层无菌纱布过滤,收集在100 mL无菌烧杯中,利用便携式pH酸度计(希玛PH828+便携式pH计)测定瘤胃液pH值,分装在冻存管中,液氮(-196 ℃)保存。按照冯宗慈等[8]方法,采用酚-次氯酸钠比色法测定瘤胃液NH3-N浓度;按照顾小卫等[9]方法测定瘤胃液微生物蛋白(MCP)浓度;按照秦为琳[10]方法,采用Agilent7890A/5975C气-质联用仪进行质谱测定VFA浓度。1.6数据统计与分析采用Excel 2010汇总整理所测数据,SPSS 22.0软件进行独立样本t检验分析。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1中草药添加剂对湖羊羔羊生长性能的影响(见表2)由表2可知,与对照组相比,试验组羔羊平均日增重提高23.12%(P0.05),平均日采食量提高5.03%(P0.01),料重比降低10.96%(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.003.T002表2中草药添加剂对湖羊羔羊生长性能的影响项目初重/kg末重/kg平均日增重/[g/(只·d)]平均日采食量/[g/(只·d)])料重比P值0.1860.3800.0280.0030.283试验组26.88±0.5936.19±0.58189.79±13.19a1 233.29±10.82A6.50±0.62对照组27.91±0.4635.46±0.56154.15±7.96b1 174.15±14.33B7.62±0.46注:同列数据肩标不同大写字母表示差异极显著(P0.01),不同小写字母表示差异显著(P0.05),无字母表示差异不显著(P0.05);表3~表5与此同。2.2中草药添加剂对湖羊羔羊血清生化指标的影响(见表3)由表3可知,试验组湖羊羔羊血清中总蛋白、白蛋白含量及谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性均高于对照组,但差异不显著(P0.05);试验组羔羊血清球蛋白含量比对照组高9.35%(P0.01),碱性磷酸酶活性比对照组高25.59%(P0.05),尿素氮含量显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.003.T003表3中草药添加剂对湖羊羔羊血清生化指标的影响项目总蛋白/(g/L)白蛋白/(g/L)球蛋白/(g/L)白球比谷丙转氨酶/(U/L)谷草转氨酶/(U/L)碱性磷酸酶/(U/L)尿素氮/(mmol/L)P值0.2700.5460.0080.0580.2920.7880.0270.038试验组66.98±0.7232.01±0.5134.97±0.32A0.91±0.0120.84±1.0585.10±4.33261.06±13.43a3.96±0.21a对照组63.46±1.0931.48±0.6531.98±0.79B0.98±0.3019.36±0.7883.52±3.67207.86±14.45b4.74±0.30b2.3中草药添加剂对湖羊羔羊血清抗氧化指标的影响(见表4)由表4可知,试验组羔羊血清中超氧化物歧化酶活性比对照组高11.06%(P0.05),谷胱甘肽过氧化物酶活性比对照组高14.07%(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.003.T004表4中草药添加剂对湖羊羔羊血清抗氧化指标的影响项目超氧化物歧化酶/(U/mL)谷胱甘肽过氧化物酶/(U/mL)丙二醛/(μmol/L)P值0.0300.0060.055试验组120.01±4.28a365.09±10.07A4.93±0.05对照组108.06±2.71b320.06±8.11B5.27±0.132.4中草药添加剂对湖羊羔羊血清免疫指标的影响(见表5)由表5可知,试验组羔羊血清IgG含量比对照组高10.59%(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.003.T005表5中草药添加剂对湖羊羔羊血清免疫指标的影响项目IgGIgAIgMP值0.0270.1800.886试验组10.86±0.39a0.61±0.031.09±0.06对照组9.82±0.08b0.57±0.011.06±0.03g/L2.5中草药添加剂对湖羊羔羊瘤胃发酵参数的影响(见表6)由表6可知,试验组羔羊瘤胃pH值显著高于对照组(P0.05),微生物蛋白浓度比对照组高40.77%(P0.05),丙酸浓度比对照组高7.95%(P0.05),丁酸浓度比对照组高32.86%(P0.01),总挥发性脂肪酸浓度比对照组高19.21%(P0.05),乙酸/丙酸显著低于对照组(P0.05),乙酸+丙酸+丁酸/总挥发性脂肪酸极显著高于对照组(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.003.T006表6中草药添加剂对湖羊羔羊瘤胃发酵参数的影响项目试验组对照组P值pH值6.52±0.04a6.33±0.06b0.032氨态氮/(mg/L)58.70±2.5050.70±4.900.177微生物蛋白/(g/L)4.35±0.37a3.09±0.27b0.021乙酸/(mmol/L)31.25±1.9427.45±0.780.112丙酸/(mmol/L)10.73±1.09a7.78±0.45b0.031异丁酸/(mmol/L)1.87±0.062.26±0.190.077丁酸(mmol/L)20.01±1.25A15.06±0.80B0.001异戊酸/(mmol/L)1.60±0.051.93±0.190.134戊酸/(mmol/L)1.54±0.111.59±0.070.725总挥发性脂肪酸/(mmol/L)66.84±3.89a56.07±1.34b0.026乙酸/丙酸2.96±0.21a3.58±0.21b0.039乙酸+丙酸+丁酸/总挥发性脂肪酸0.93±0.01A0.89±0.02B0.001注:同行数据肩标不同大写字母表示差异极显著(P0.01),不同小写字母表示差异显著(P0.05),无字母表示差异不显著(P0.05)。3讨论3.1中草药添加剂对湖羊羔羊生长性能的影响安胜英等[11]研究发现,添加中草药可以提高小尾寒羊的日增重。杜丽英等[12]研究发现,在基础日粮中添加3.5%黄芪时,能够有效提高太行黑山羊的生产性能。马元等[13]在“杜×湖”杂交肉羊精料中分别添加黄芪、神曲、麦芽、山楂、苍术、陈皮等中草药制剂,发现肉羊的平均日增重提高,料重比降低。鲁利萍等[14]研究发现,在犊牛日粮中添加女贞子、当归、益母草等中草药,肉牛的日增重提高,料重比降低。王宪举[15]研究发现,在舍饲藏羊日粮中添加黄芪粉可以显著提高藏羊的平均日增重、胴体重和屠宰率。山楂、炒麦芽和神曲具有芳香味,能够提高羊的食欲。当归、黄芪和甘草常用补血益气,白术和黄芪可治疗脾肺气虚,甘草具有清热解毒、调和诸药的作用。本试验中,在精料中添加1%中草药添制剂饲喂羔羊49 d后,试验组羔羊采食量、平均日增重提高,料重比降低,与上述研究结果一致。3.2中草药添加剂对湖羊羔羊血清生化指标的影响血清生化指标是动物生理活动、饲料营养水平以及自然环境等相互作用的结果,能够反映机体健康状况和新陈代谢能力[16]。正常情况下,血液中总蛋白含量能够反映机体蛋白质吸收效率[17]。本试验中,湖羊羔羊血清中总蛋白含量为63.46~66.98 g/L,与卢宗藩[18]试验结果类似。刘瑞生等[7]在精料中添加1.5%的黄芪、川芎、白术、益母草、山楂等中草药添加剂,发现育肥羊血清中总蛋白和免疫球蛋白G含量均不同程度提高。张善芝等[19]在山羊日粮中添加由黄芪、当归、山楂、陈皮、贯众等中草药,发现山羊血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白含量显著提高。本研究中,试验组湖羊羔羊血清中总蛋白、白蛋白和球蛋白含量均高于对照组,表明中草药添加剂能够促进湖羊羔羊血清中白蛋白和球蛋白生成,增强机体免疫机能,提高抗病力。碱性磷酸酶主要分布在肝脏、骨骼、小肠、肾脏及胎盘中,其活性可反映动物生长速度。冯善祥[20]在饲粮中添加2.0%中草药组方“羊宝”饲喂小尾寒羊,发现血清碱性磷酸酶活性比对照组提高14.49%。本研究中,试验组育肥羊血清碱性磷酸酶活性比对照组提高25.59%,与试验组肉羊日增重高于对照组相一致。羊血清中尿素氮是反映粗蛋白质利用的指标,也是蛋白质和氨基酸之间平衡的重要标志,尿素氮含量越高则氮的利用效率越低[21-22]。本试验中,对照组羔羊血清中尿素氮含量显著低于对照组16.46%,表明中草药添加剂促进了羔羊瘤胃微生物蛋白质合成强度,提高氮的利用效率,促进肌肉蛋白质合成。3.3中草药添加剂对湖羊羔羊血清抗氧化指标的影响SOD可加快自由基的歧化反应,GSH-Px可清除过氧化物,保护细胞膜结构和功能的完整性,SOD和GSH-Px也是细胞内的抗氧化酶,防止氧化应激,也是动物机体新陈代谢重要保障[23]。本试验中,试验组中的SOD和GSH-Px活性均显著提高,表明该中草药配方能够提高育湖羊羔羊机体的抗氧化能力,可能与黄芪中的黄酮的抗氧化活性有关[24]。3.4中草药添加剂对湖羊羔羊血清免疫指标的影响血清中免疫球蛋白G含量约占动物机体免疫球蛋白总数的80%左右,具有抗病毒、抑菌等免疫活性,能够有效保护机体的健康。本试验中,试验组羔羊血清IgG含量显著高于对照组,与高辉等[25]采用黄芪、党参、益母草、当归、肉桂、神曲、麦芽等7味药配制的添加剂对犊牛生长性能和血液免疫指标的试验结论一致。3.5中草药添加剂对湖羊羔羊瘤胃发酵参数的影响反刍动物瘤胃液pH值主导瘤胃内环境稳定性,受日粮组成、挥发性脂肪酸的合成与吸收速度、口腔唾液分泌量以及瘤胃液采样时间影响[26]。研究表明,反刍动物瘤胃液pH值在6.0~6.8范围内,比较适合瘤胃微生物生长和酶活性作用,pH值低于6.2时,纤维分解菌生长会受到抑制[27~31]。本试验中,羔羊瘤胃液pH值均在正常的范围内,但试验组羊的pH值高于对照组,可能是中草药添加剂加速了食糜的排空速度,促进了挥发性脂肪酸的吸收和口腔唾液的分泌,使瘤胃液pH值升高。瘤胃内NH3-N主要源于饲料蛋白质、其次是内源性蛋白质及非蛋白氮降解,是微生物合成菌体蛋白质的主要氮源[32],NH3-N浓度能够反映氮的降解与合成的平衡[33]。瘤胃NH3-N浓度过高或过低均不利于微生物生长繁殖。Murphy等[34]研究发现,微生物发酵的最佳NH3-N浓度为6.3~27.5 mg/dL。本试验中,试验组NH3-N浓度高于对照组,可能是中草药制剂促进了饲草料中蛋白质的降解,从而提高了瘤胃液中NH3-N浓度。MCP合成效率是由瘤胃氮含量(NH3-N)和饲料中非纤维性碳水化(NFC)发酵产生的能量共同决定[35]。如果碳氮不能协同释放,将降低MCP合成效率,而碳水化合物是MCP合成的第一限制性因素[36]。本试验中,由于基础日粮能量较高,而蛋白含量较低,对照组MCP含量不高。Jouany[37]研究发现,饲料氮水平低时,纤毛原虫会大量吞噬细菌,导致MCP产量降低相一致。本试验中,试验组比对照组瘤胃内MCP含量显著升高,可能是复方中药一些成分能够促进了瘤胃菌体蛋白的合成。VFA是饲料中的大部分碳水化合物,在瘤胃微生物的降解下产生的乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸和戊酸,是反映饲料在瘤胃发酵水平的重要指标[38]。李文[39]研究发现,乙酸、丙酸和丁酸占挥发性脂肪酸的95%。本试验中,湖羊羔羊胃液中乙酸、丙酸及丁酸总量占TVFA的89%~92%。原因可能与饲料中高能量低蛋白有关[40]。本试验中,试验组和对照组羔羊瘤胃中乙酸+丙酸+丁酸/总挥发性脂肪酸存在极显著差异,主要是中草药促进了能量饲料的降解。瘤胃中乙酸和丁酸是乳腺内脂肪酸从头合成的前体物,其次作为信号分子调节乳腺内脂肪酸代谢。Deng等[41]在肉牛饲料玉米压片中添加黄芪中的皂苷类物质,能够抑制瘤胃原虫和细菌的活性,降低了乙酸/丙酸值。王国泽[42]研究发现,中草药添加剂能够影响羊的瘤胃发酵,与本研究结果一致。4结论本试验所用的中草药添加剂可以提高湖羊羔羊饲料利用率,促进羔羊生长发育,改善瘤胃发酵环境。

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