新疆是我国西北地区较为干旱的区域,苜蓿的种植面积较少,产量较低,价格较贵,长期使用饲养成本很高。新疆小麦秸秆产量高,小麦秸秆中的粗纤维可刺激反刍动物反刍和唾液分泌,进而维持瘤胃正常pH值和功能。新疆芦苇资源丰富但饲料化利用率低,适时收获具有较好的营养价值,其粗蛋白含量为12.2%,代谢能为9.025×103 kJ/kg,钙含量为0.4%,磷含量0.3%,粗纤维含量为26.8%[1]。粗饲料的不同组合效应可以起相互促进的作用,发挥优质和低质粗饲料的正组合效应[2]。将小麦秸秆、芦苇与苜蓿干草进行组合饲喂,能够缓解苜蓿干草的缺乏问题,也为新疆地区低质粗饲料的开发利用提供参考。研究表明,在和田羊的日粮中添加20%芦苇草,羊的干物质采食量、平均日增重及干物质、粗蛋白质、粗脂肪的表观消化率均较好[3]。瘤胃体外试验研究表明,在精料一致的条件下,苜蓿干草与棉花秸秆比例为1∶3时,瘤胃产气量呈正组合效应[4]。在育肥公羊的全价颗粒饲料中,苜蓿∶玉米秸秆∶棉花秸秆比例为1∶2∶1时,育肥公羊的平均日增重和料重比接近纯苜蓿组[5]。使用50%小麦秸秆与50%苜蓿干草组合可提高呼伦贝尔断奶羔羊生长性能,促进肝脏糖、脂代谢和瘤胃乳头的发育,改善动物的生产效益[6]。本试验利用芦苇和麦草组合替代部分苜蓿,研究其对育肥羊生长性能和血清生化指标的影响,为育肥羊生产中高效使用粗饲料提供参考。1材料与方法1.1试验设计选取体重相近的4月龄阿勒泰公羊45只,随机分为5组,每组9个重复,每个重复1只羊。对照组(A组)为仅添加苜蓿(AH)组;B组使用芦苇(RH)替代75%苜蓿;C组使用小麦秸秆(WS)替代75%苜蓿;D组、E组使用芦苇和小麦秸秆分别以2∶1和1∶2替代75%苜蓿;其他日粮分别由精料和玉米青贮组成,含量一致。试验期60 d,其中预试期15 d,正式试验期45 d。1.2日粮组成与饲养管理试验日粮中精料一致,精粗比保持在51∶49左右。苜蓿干草、芦苇、小麦秸秆经3 cm筛粉碎,与玉米青贮、精料按比例混合均匀,制成TMR日粮,加水使TMR日粮水分控制在45%。试验日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.002.T001表1试验日粮组成及营养水平(干物质基础)项目A组B组C组D组E组原料组成/%苜蓿27.456.746.856.786.81芦苇022.00014.747.41小麦秸秆0020.756.8413.76玉米青贮21.0020.6320.9620.7420.85玉米24.8224.3824.7724.5124.64麸皮7.637.507.627.547.58豆粕3.813.753.813.773.79赖氨酸渣14.3214.0714.2914.1414.22石粉0.480.470.480.470.48预混料0.490.460.470.470.47合计100.00100.00100.00100.00100.00营养水平干物质/%88.7390.0489.6789.9289.79粗脂肪/%2.402.542.332.472.40中性洗涤纤维/%27.9532.2933.2732.6232.94酸性洗涤纤维/%15.6217.5815.9517.0416.50粗蛋白质/%18.0716.2215.2315.8915.56钙/%0.660.580.550.570.56磷/%0.290.270.260.260.26粗灰分/%5.195.375.425.385.40代谢能/(MJ/kg)9.919.389.249.339.29注:1.预混料为每千克日粮提供:VA 5 000 IU、VD 600 IU、VE 16 IU、Cu(CuSO4·5H2O)21.5 mg、Zn(ZnSO4·H2O)90 mg、Co(CoCl2·6H2O)1.1 mg、Mn(MnSO4·5H2O)80 mg、Fe(FeSO4·7H2O) 12 mg、I(KI)1.2 mg。2.营养水平均为计算值。试验羊均处于相同饲养环境,自由采食和饮水,每天饲喂2次(9:00和19:30),控制剩料量为15%。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能每日定时饲喂,定时收集剩料。每日测定1次采食量,每天记录各组羊的饲喂量和剩料量。试验羊于0、45 d各空腹称重1次,记录并计算日增重,结合总增重计算各组试验羊的平均日增重和料重比。采食量=饲喂量-剩料量(1)平均日增重=(末重-初重)/试验天数(2)平均日干物质采食量=(总饲喂量×日粮干物质%-剩料量×剩料量干物质%)/试验天数(3)料重比=平均日干物质采食量/平均日增重(4)1.3.2血清生化指标及抗氧化指标采用一次性真空采血管采集血液。在试验期结束前1 d,每组9只羊早上空腹前腔静脉采血,3 500 r/min离心15 min,使用l mL移液枪吸取血清至1.5 mL EP管,-20 ℃冰箱保存。测定血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素(BUN)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)、钙(Ca)、磷(P)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、乳酸脱氢酶(LDH)水平以及总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)指标,以上指标由北京华英生物技术研究所检测。1.4数据统计与分析试验数据采用Excel 2010进行整理,SPSS 19.0统计软件进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以平均值和总标准误表示,P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1不同组合粗饲料替代部分苜蓿对育肥羊生长性能的影响(见表2)由表2可知,B组、C组、D组、E组育肥羊的平均日增重分别比A组降低了33.3%、33.3%、37.5%、45.8%(P0.01);B组、C组、D组、E组育肥羊的平均日干物质采食量分别比A组降低8.3%、20.5%、14.1%、24.3%(P0.01);B组、C组、D组、E组育肥羊的F/G分别比A组提高了37.5%、19.2%、37.3%、39.5%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.002.T002表2不同组合粗饲料替代部分苜蓿对育肥羊生长性能的影响项目初重/kg末重/kg平均日增重/[g/(只·d)]平均干物质采食量/[kg/(只·d)]F/GA组29.9040.48a238.70A1.56A6.50B组29.8437.02ab163.30B1.43B8.94C组29.7536.83ab161.10B1.24D7.75D组29.0836.70ab152.50B1.34C8.93E组29.5135.37b132.90B1.18D9.07SEM0.590.629.010.01—P值0.9990.1200.0070.000—注:同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),不同大写字母表示差异极显著(P0.01),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);表4与此同。2.2不同组合粗饲料替代部分苜蓿对育肥羊血清生化指标的影响(见表3)由表3可知,与A组相比,C组、E组育肥羊血清GLU含量极显著升高(P0.01),B组、D组GLU含量显著升高(P0.05);C组育肥羊血清ALB含量极显著升高(P0.01),B组的ALB含量显著升高(P0.05);C组育肥羊血清BUN含量显著降低(P0.05);E组育肥羊血清AST活性显著提高(P0.05),ALT活性极显著提高(P0.01);B组育肥羊血清ALP活性极显著升高(P0.01),C组、E组ALP活性显著提高(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.002.T003表3不同组合粗饲料替代部分苜蓿对育肥羊血清生化指标的影响项目A组B组C组D组E组SEMP值GLU/(mmol/L)2.83Bb4.23ABa4.52Aa4.08ABa5.07Aa0.210.007LDH/(U/L)444.65441.80462.63405.86496.7015.600.454CK/(U/L)233.92275.90225.27204.59248.6811.340.337TP/(g/L)55.73ABab61.90ABa62.01ABa51.02Bb63.96Aa1.450.014ALB/(g/L)20.05Bb22.87ABa24.07Aa20.21Bb21.70ABab0.450.010GLB/(g/L)35.68ABab39.02ABa37.93ABab30.80Bb42.26Aa1.240.037BUN/(mmol/L)6.03a5.83ab4.76b5.65ab5.74ab0.180.195AST/(U/L)95.60ABb102ABab104.36ABab86.38Bb126.54Aa4.430.047ALT/(U/L)14.40Bb21.20ABab21.98ABa22.59ABa24.77Aa1.170.053TC/(mmol/L)1.451.281.421.251.460.050.576TG/(mmol/L)0.340.360.350.380.490.020.206HDL/(mmol/L)0.50ab0.61ab0.61ab0.49b0.62a0.020.046LDL/(mmol/L)0.92a0.62b0.75ab0.72ab0.73ab0.030.080ALP/(U/L)195.52Bc290.75Aa231.64ABa206.73Bbc242.91ABab11.170.010Ca/(mmol/L)1.74ABab1.89ABab2.08Aa1.58Bb2.01ABa0.060.030P/(mmol/L)2.472.682.472.382.80.060.200注:同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P0.05),不同大写字母表示差异极显著(P0.01),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05)。2.3不同组合粗饲料替代部分苜蓿对育肥羊血清抗氧化指标的影响(见表4)由表4可知,B组、C组、D组、E组育肥羊血清T-AOC分别比A组降低了22.82%、28.89%、34.18%、36.53%(P0.01)。B组、C组、D组、E组育肥羊血清SOD活性分别比A组分别降低了16.55%、21.72%、27.92%、32.76%(P0.01)。C组、D组、E组育肥羊血清GSH-Px活性分别比A组降低了8.61%、14.97%、24.31%(P0.01),B组育肥羊血清GSH-Px活性比A组降低了5.56%(P0.05)。B组、C组、D组、E组育肥羊血清MDA含量分别比A组提高了29.18%、39.31%、53.67%、69.26%(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.14.002.T004表4不同组合粗饲料替代部分苜蓿对育肥羊血清生化指标的影响项目T-AOC/(U/mL)SOD/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)A组10.21Aa92.04Aa371.91Aa2.57CdB组7.88Bb76.81Bb351.18ABb3.32BcC组7.26BCc72.05BCb339.89BCb3.58BbcD组6.72CDcd66.34Cc316.22Cc3.95ABabE组6.48Dd61.89Dc281.49Dd4.35AaSEM0.262.076.310.13P值0.0000.0000.0000.0003讨论3.1不同粗饲料组合替代苜蓿对绵羊生长性能的影响张锐等[7]利用体外产气法研究苜蓿与羊草在瘤胃液发酵的最佳比例为60∶40时,瘤胃挥发性脂肪酸(VFA)和微生物蛋白(MCP)产量以及正组合效应值最高。燕麦干草与苜蓿干草以1∶3比例组合能够提高奶牛生产性能和营养物质表观消化率,改善乳品质,从而增加收益[8]。不同配比全株玉米青贮(WCS)、小麦秸秆(WS)和苜蓿干草(AH)体外消化性能和组合效应,筛选肉牛全混合日粮的最佳粗饲料组合为70∶20∶10[9]。唐德富等[10]利用体外产气法研究在不同精料水平条件下玉米芯与苜蓿的最佳组合效应,当精料∶玉米芯∶苜蓿为40∶30∶30和30∶10∶60时的单项组合效应指数(SFAEI)(GP、DMD、OMD、NH3-N、TVFA和AE)组合效应最佳。本试验中,利用芦苇和麦草替代部分苜蓿饲喂育肥羊,育肥羊平均日增重和干物质采食量显著降低,料重比增加。在研究低质粗饲料和优质粗饲料间组合效应的最佳比例时,需要考虑低质饲料小麦秸秆中可溶性碳水化合物含量较低,反刍动物瘤胃对其消化利用率也较低的问题[11]。粗饲料中添加适量苜蓿可以提高日粮消化率,但随苜蓿所占比例提升,消化率呈下降趋势,产生负组合效应[12-13];在苜蓿和谷草以1∶3比例组合时消化率达到最高,原因可能是日粮中过高比例的苜蓿使瘤胃内发生了“底物竞争”,抑制了纤维分解菌的增殖,从而使纤维类物质降解率降低[14]。3.2不同粗饲料组合替代苜蓿对绵羊血清生化指标的影响GLU是衡量能量代谢平衡的重要指标,LDH、CK活性影响机体的能量代谢细胞能量运转、ATP再生[15-17]。本试验中,各组试验羊血清GLU含量显著升高,LDH、CK活性差异不显著。张剑霞等[6]利用苜蓿和小麦秸秆组合(50∶50)饲喂羔羊,结果发现,羔羊血清GLU含量以及LDH活性与单独饲喂苜蓿和小麦秸秆差异不显著[9],表明替代部分苜蓿干草对机体能量摄入无不良影响。血清蛋白含量可以反映动物机体的营养状况和蛋白代谢水平。本试验中,利用小麦秸秆和芦苇替代部分苜蓿干草,育肥羊血清TP无明显变化,但AH与WS比值为1∶3时,育肥羊血清ALB含量显著升高。姜婉茹等[18]分别给湖羊饲喂麦秸和苜蓿,结果发现,湖羊血清TP、ALB含量差异不显著,表明饲喂粗饲料小麦秸秆替代部分苜蓿干草对瘤胃微生物蛋白质的合成无不良影响。BUN是动物体蛋白质及其氨基酸代谢的终产物,能够衡量动物氮代谢水平,BUN含量与饲粮氮利用率成反比[19]。本研究中,C组育肥羊血清BUN含量显著降低,其他组差异不显著,表明芦苇和小麦秸秆组合替代苜蓿混合饲喂绵羊未对氮的沉积和氮利用效率造成影响。AST和ALT具有转氨基作用,其活性能够反映蛋白质合成和分解代谢的状况[20-21],也在一定程度上反映动物肝脏健康状况。本试验中,小麦秸秆、芦苇以及芦苇和麦草分别以2∶1替代75%苜蓿干草发现对育肥羔羊血清AST、ALT活性无显著影响,与张剑霞等[6]和姜婉茹等[18]结果相似。本试验中,芦苇和麦草分别以2∶1替代75%苜蓿干草的血清AST和ALT活性均明显升高,表明芦苇和麦草可能对肝脏功能造成一定影响。血清TC、TG、HDL、LDL可以衡量动物机体脂类代谢水平,反映脂肪代谢情况[22-23]。本试验中,试验组育肥羊TC、TG、HDL的含量与A组相比差异不明显;对育肥羊的脂肪代谢未造成不良影响,但B组育肥羊血清HDL含量显著低于A组,表明使用芦苇替代75%苜蓿,可能造成血清脂肪胆固醇输出肝脏水平降低。ALP活性与血Ca浓度相关,可以调节P代谢,由肝脏代谢排出[24]。本试验中,各组间育肥羊血清中Ca、P含量与A组差异不显著,不同粗饲料组合日粮中钙磷比值均大于2∶1水平,试验过程中未发现尿结石情况,钙磷代谢正常。3.3不同粗饲料组合替代苜蓿对绵羊血清抗氧化指标的影响T-AOC代表动物机体抗氧化能力,其含量越高,清除体内自由基能力越强,SOD用于催化超氧阴离子自由基发生歧化反应,是生物体内氧自由基的天然清除剂,GSH-Px作为体内重要的抗氧化剂和自由基清除剂,如与自由基、重金属等结合,从而把机体内的毒物转化为无害的物质,排出体外。MDA是自由基作用于脂质发生过氧化反应的终产物,会引起蛋白质、核酸等生命大分子的交联聚合,且具有细胞毒性[25]。苜蓿中的多糖、苜蓿皂苷和叶蛋白等活性成分具有抗氧化功能[26]。肖俊楠等[27]研究日粮中花生秧和苜蓿不同比例对波尔山羊抗氧化能力的影响,结果表明,花生秧替代75%苜蓿较纯苜蓿组的T-AOC、SOD、GSH-Px分别降低了10.41%、49.34%、15.21%。刘圈炜等[28]采用苜蓿青草饲喂波尔山羊,发现山羊肌肉SOD活性提高,MDA含量降低,但随着饲喂水平提高,抗氧化作用反而有所下降。本试验结果表明,利用芦苇和麦草替代部分苜蓿,试验羊血清T-AOC、SOD、GSH-Px活性均显著降低,MDA含量显著提高,原因可能是不同组合粗饲料替代苜蓿后,羊日粮中苜蓿的活性因子含量降低,导致其抗氧化能力减弱。4结论本试验结果表明,TMR日粮中使用干芦苇和小麦秸秆替代75%苜蓿干草饲喂育肥羊,对育肥羊血清中蛋白质代谢、脂肪代谢、钙磷代谢指标影响较小,但育肥羊血清抗氧化能力减弱。

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