玉米赤霉烯酮（zearalenone，ZEA）是畜禽饲料中的常见毒素，在霉变玉米、小麦、高粱等谷物中广泛存在。研究表明，玉米赤霉烯酮能够造成畜禽氧化应激[1]，损害肝脏功能[2]，影响肠道稳态及肠道屏障[3-4]。因此，关于ZEA对畜禽毒性的作用已成为目前研究热点之一。低聚壳聚糖硒是相对分子质量较小的壳聚糖硒，同时具备有机硒与低聚壳聚糖的作用。低聚壳聚糖硒发挥有机硒作用时，可以提高机体抗氧化能力，调节机体免疫，增强抗病力；发挥低聚壳聚糖作用时，能够降血脂，抗菌，改善动物肠道健康，提高生产性能[5-8]，具有广阔的应用前景。与普通壳聚糖硒相比，聚壳聚糖硒具有更好的溶解度与生物学活性，因此低聚壳聚糖硒的应用效果优于普通壳聚糖硒。研究表明，低聚壳聚糖硒能够改善蛋鸡生产性能，增强蛋鸡血浆及鸡蛋的抗氧化功能，调节盲肠肠道菌群[9]。傅春妮等[10]研究表明，低聚壳聚糖硒能够有效缓解ZEA对猪小肠上皮细胞造成的损伤作用。ZEA能够损害母猪的繁殖机能，导致仔猪肠道形态结构改变、肠道功能异常[11-12]，可能对仔猪生长性能产生影响[12]。但目前未见低聚壳聚糖硒在仔猪体内拮抗ZEA毒性作用的研究报道。因此，本试验研究低聚壳聚糖硒缓解ZEA对断奶仔猪生长性能、血浆生化指标、抗氧化功能以及肠道菌群的作用，为低聚壳聚糖硒的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料低聚壳聚糖硒为天津农学院动物医学实验教学中心实验室配制，硒含量为22.18 g/kg；玉米赤霉烯酮购自上海源叶生物科技有限公司。1.2试验设计与饲养管理选取35日龄健康的“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪60头，随机分为4组，每组5个重复，每个重复3头仔猪。C组仔猪饲喂基础日粮，Z组仔猪饲喂基础日粮+2 mg/kg ZEA，Z+Se1组仔猪饲喂基础日粮+2 mg/kg ZEA+0.3 mg/kg低聚壳聚糖硒，Z+Se2组仔猪饲喂基础日粮+2 mg/kg ZEA+0.5 mg/kg低聚壳聚糖硒。参照《猪饲养标准》（NY/T 65—2004）仔猪营养需要配制仔猪基础日粮。基础日粮组成以及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.15.008.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成/%8~20 kg20~35 kg营养水平8~20 kg20~35 kg合计100.00100.00玉米69.3569.38消化能/(MJ/kg)13.1713.17豆粕13.0014.00粗蛋白/%18.1717.35大豆油1.001.00钙/%0.770.63玉米蛋白粉5.007.00总磷/%0.580.54小麦麸4.004.00有效磷/%0.380.33鱼粉3.000赖氨酸/%1.241.13磷酸氢钙1.001.20蛋氨酸/%0.330.31石粉1.000.80预混料2.002.00食盐0.150.12赖氨酸0.500.50注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 12 000 IU、VD3 4 000 IU、VE 40 IU、VK3 3.0 mg，VB1 4.0 mg、VB2 10 .0mg、VB6 10 mg、VB12 0.04 mg、Fe 100 mg、Mn 20 mg、Zn 100 mg、Cu 8.0 mg、I 0.2 mg、Se 0.1 mg、叶酸1.0 mg、烟酸40 mg、泛酸20 mg、生物素0.2 mg、胆碱800 mg。2.营养水平中粗蛋白、钙和有效磷含量为实测值，其余均为计算值。饲养过程中仔猪自由采食、饮水，常规免疫和饲养管理。预试期7 d，试验期42 d。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能在饲养期间，准确记录每组仔猪日粮消耗量，分别在试验第1 d及试验最后1 d同一时间点，仔猪空腹称重，计算仔猪平均日增重、平均日采食量、料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总耗料量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.3.2血浆生化指标试验第42 d，每组取10头猪采集血样，采血前12 h禁食，正常饮水；前腔静脉采血，制备血浆。采用全自动血液生化分析仪测定血浆谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肌酐（CRE）、尿素氮（BUN）、碱性磷酸酶（AKP）、总蛋白（TP）、胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、血糖（GLU）水平。1.3.3抗氧化指标试验第42 d，前腔静脉采血，制备血浆。血浆谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总抗氧化能力（T-AOC）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、过氧化物酶（CAT）以及丙二醛（MDA）采用南京建成生物工程研究所试剂盒在Alpha-1860Plus紫外可见分光光度计上进行测定。1.3.4肠道菌群试验第42 d，无菌取盲肠内容物，称重，置于无菌EP管，使用无菌生理盐水10倍梯度稀释，分别接种于BBL、LBS、VRBDA和SS培养基上，对双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌沙门氏菌进行厌氧或需氧培养，72 h或24 h后计数。1.4数据统计与分析数据采用SPSS 22.0统计软件中单因素方差分析显著性，LSD法多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1壳聚糖硒缓解ZEA对仔猪生长性能的影响（见表2）由表2可知，各组仔猪的初重、末重和平均日采食量均差异不显著（P0.05）；Z组仔猪的平均日增重极显著低于C组（P0.01），Z+Se2组仔猪的平均日增重极显著高于Z组（P0.01），Z+Se1组和Z+Se2组仔猪的料重比极显著低于Z组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.15.008.T002表2壳聚糖硒缓解ZEA对仔猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日采食量/[g/(头·d)]平均日增重/[g/(头·d)]料重比C组10.34±0.2629.30±0.52839.53±10.76451.43±10.86Aa1.86±0.01DdZ组10.40±0.4226.46±1.27833.81±9.65382.38±20.59Cc2.18±0.02AaZ+Se1组10.94±0.5727.80±1.29830.95±12.20401.43±20.73BCc2.07±0.02BbZ+Se2组10.72±0.4528.68±0.50833.33±10.31427.62±11.86ABb1.95±0.01Cc注：同列数据肩标不同大写字母不同表示差异极显著（P0.01），不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表4、表5与此同。2.2壳聚糖硒缓解ZEA对仔猪血浆生化指标的影响（见表3）由表3可知，Z组仔猪血浆ALT和AST活性极显著高于C组（P0.01）；Z+Se1组仔猪血浆ALT活性显著高于C组（P0.05），TG含量显著低于C组（P0.05），Z+Se1组仔猪血浆ALT、AST活性显著低于Z组（P0.05）；Z+Se2组仔猪血浆CHO、TG含量极显著低于C组（P0.01），Z+Se2组仔猪血浆ALT、AST活性及TG含量均极显著低于Z组（P0.01），CHO含量显著低于Z组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.15.008.T003表3壳聚糖硒缓解ZEA对仔猪血浆生化指标的影响项目C组Z组Z+Se1组Z+Se2组ALT/(U/L)63.09±7.03Bc123.11±9.92Aa94.48±6.23ABb79.68±6.31BbcAST/(U/L)78.48±8.70Bb119.36±10.13Aa88.55±6.36ABb62.38±8.30BbCRE/(μmol/L)67.01±9.4786.59±14.2473.10±15.2481.68±11.23BUN/(mmol/L)3.77±0.404.20±0.464.48±0.323.50±0.28AKP/(U/L)242.77±15.78228.46±18.60209.76±22.55204.32±18.07TP/(g/L)50.01±2.4753.48±2.3252.73±2.3952.51±2.43CHO/(mmol/L)3.08±0.29Aa2.86±0.28ABa2.51±0.25ABab1.74±0.31BbTG/(mmol/L)0.61±0.05Aa0.59±0.06Aab0.47±0.02ABb0.35±0.03BcGLU/(mmol/L)3.86±0.314.34±0.264.17±.344.54±0.33注：同行数据肩标不同大写字母不同表示极显著差异（P0.01），不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。2.3壳聚糖硒缓解ZEA对仔猪抗氧化指标的影响（见表4）由表4可知，Z组仔猪血浆T-SOD活性显著低于C组（P0.05），CAT、GSH-Px活性、T-AOC极显著低于C组（P0.01），MDA含量极显著升高（P0.01）；Z+Se1组仔猪血浆CAT、GSH-Px活性显著低于C组（P0.05），T-AOC极显著低于C组（P0.01）；与Z组相比，Z+Se1组仔猪血浆T-SOD活性极显著升高（P0.01），GSH-Px活性显著升高（P0.05），MDA含量极显著降低（P0.01）；Z+Se2组仔猪血浆MDA含量显著低于C组（P0.05），Z+Se2组仔猪血浆T-SOD、CAT、GSH-Px活性、T-AOC均极显著高于Z组（P0.01），MDA含量极显著低于Z组（P0.01）；Z+Se1组仔猪血浆T-AOC与Z组差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.15.008.T004表4壳聚糖硒缓解ZEA对仔猪抗氧化指标的影响组别T-SOD/(U/mL)CAT/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)T-AOC/(U/mL)MDA/(μmol/L)C组132.06±9.37ABa14.53±0.98Aa427.36±18.20Aa4.37±0.20Aa4.68±0.16BbZ组99.91±8.92Bb9.81±0.67Bb291.81±19.76Bc2.93±0.23Bb5.52±0.22AaZ+Se1组143.72±10.21Aa11.48±0.63ABb363.95±20.35ABb3.33±0.15Bb4.31±0.17BabZ+Se2组142.54±8.57Aa14.49±1.12Aa404.03±16.42Aab4.32±0.20Aa3.88±0.22Bc2.4壳聚糖硒缓解ZEA对仔猪盲肠肠道菌群的影响（见表5）由表5可知，与C组相比，Z组仔猪肠道的沙门氏菌数量极显著升高（P0.01），乳酸菌、双歧杆菌数量极显著降低（P0.01）；与Z组相比，Z+Se1组仔猪肠道的沙门氏菌数量极显著降低（P0.01），双歧杆菌数量显著升高（P0.05）；与Z组相比，Z+Se2组仔猪肠道沙门氏菌数量极显著降低（P0.01），乳酸菌和双歧杆菌数量极显著升高（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.15.008.T005表5壳聚糖硒缓解ZEA对仔猪肠道菌群的影响组别沙门氏菌大肠杆菌乳酸菌双歧杆菌C组7.09±0.17Bb9.09±0.328.61±0.18Aa8.29±0.13AaZ组8.10±0.19Aa8.59±0.197.51±0.20Bc7.68±0.17BbZ+Se1组7.10±0.13Bb8.48±0.267.91±0.19ABbc8.47±0.20ABaZ+Se2组7.35±0.18Bb8.67±0.298.34±0.13Aab8.55±0.16AalgCFU/g3讨论3.1低聚壳聚糖硒缓解ZEA对仔猪生长性能的影响关于ZEA对仔猪生长性能的影响研究结果不同。研究发现，ZEA对断奶仔猪生长性能无影响[13]。但有研究表明，随着日粮玉米赤霉烯酮水平升高，断奶仔猪平均日增重和饲料报酬呈显著性线性降低[12]。因此，本研究在上述研究基础上，将试验周期相应延长至42 d，对ZEA剂量也作一定调整（2.0 mg/kg），结果发现，ZEA能够显著降低仔猪的平均日增重，提高料重比。因此，造成ZEA对仔猪生长性能影响结果不同的原因可能与ZEA在日粮中的含量有关。本研究发现，与Z组相比，Z+Se1组、Z+Se2组仔猪的料重比极显著降低，且Z+Se2组仔猪的平均日采食量极显著高于Z组，表明添加低聚壳聚糖硒能够改善ZEA引起的仔猪生长性能的降低。韩婧娥等[9]研究发现，低聚壳聚糖硒能够提高肉鸡的生产性能。低聚壳聚糖[8]和酵母硒[14]均具有改善仔猪生长性能的作用效果。因此，低聚壳聚糖硒能够有效缓解ZEA引起仔猪生长性能降低，但其具体机制有待研究。3.2低聚壳聚糖硒缓解ZEA对仔猪血浆生化指标的影响ZEA进入机体后，最先影响肝细胞，因此肝毒性是ZEA毒性作用的主要体现之一。ALT和AST活性是反映肝脏损伤的重要指标。研究表明，日粮中添加ZEA能够使动物血清ALT和AST活性升高[2,15]。本试验结果显示，ZEA能够提高仔猪血浆ALT和AST活性，低聚壳聚糖硒可以降低ZEA引起的仔猪ALT和AST活性升高，表明低聚壳聚糖硒能够缓解ZEA造成的肝损伤。王欢欢等[16]在仔猪上运用壳聚糖硒也可以显著降低ZEA所致血清ALT和AST升高；刘莹莹等[17]研究发现，母猪日粮中添加低聚壳聚糖可以显著降低血浆中ALT活性，表明低聚壳聚糖具有改善肝脏健康的作用。因此，低聚壳聚糖硒能够降低ZEA致使的仔猪ALT和AST活性升高，可能与其中低聚壳聚糖的作用的发挥有关。血清CHO、TG能够反映机体脂质代谢状况。苏小庚[18]研究发现，在肉牛日粮中添加硒可以降低血清CHO含量。研究发现，壳聚糖对畜禽具有降脂及降胆固醇效应[19]，分子质量较低的壳聚糖降脂效应更明显。王红卫[20]研究发现，在蛋鸡日粮中添加低聚壳聚糖能够降血脂，调节机体免疫力。本试验结果显示，与C组相比，Z组仔猪的CHO、TG含量差异不显著，添加低聚壳聚糖硒能够降低血浆CHO、TG含量，表明ZEA对仔猪的脂质代谢无影响，而低聚壳聚糖硒能够降低仔猪的血脂水平。因此，低聚壳聚糖硒对仔猪脂质代谢的影响可能是其中有机硒和低聚壳聚糖共同发挥作用的结果。3.3低聚壳聚糖硒缓解ZEA对仔猪抗氧化能力的影响氧化损伤是ZEA发挥毒性作用的主要途径之一。ZEA能够导致断奶母猪的氧化损伤[21]。Wu等[22]在初情期前母猪饲粮中添加ZEA，发现母猪T-AOC和T-SOD活性显著降低[22]。本研究结果表明，与C组相比，添加ZEA能够升高MDA含量，降低CAT、GSH-Px、T-SOD活性以及T-AOC；而添加低聚壳聚糖硒后，可以升高T-SOD、CAT、GSH-Px活性以及T-AOC，降低MDA含量，Z+Se2组能够恢复至与C组不显著，表明添加低聚壳聚糖硒能够较好地缓解ZEA引起的仔猪氧化应激，增强仔猪抗氧化功能，且0.5 mg/kg效果更佳明显。Qin等[23]研究发现，壳聚糖硒能够显著提高肉鸡和鼠的GPH-Px和SOD活性。王欢欢等[16]发现，壳聚糖硒能够拮抗ZEA对仔猪产生的氧化损伤。韩静娥等[9]研究发现，低聚壳聚糖硒能够增强蛋鸡血浆及鸡蛋的抗氧化功能。低聚壳聚糖硒作为相对分子质量较小的壳聚糖硒，比普通壳聚糖硒具有更好的溶解度与生物学活性。因此，推测聚壳聚糖硒的作用效果要优于普通壳聚糖硒。3.4低聚壳聚糖硒缓解ZEA对仔猪盲肠肠道菌群的影响肠道菌群的稳定在维持肠道正常生理功能、食物消化和营养吸收方面起重要作用。ZEA可以使肠道菌群稳态失调[24]。高忠新等[25]研究发现，壳聚糖硒能够提高肉仔鸡盲肠内双歧杆菌和乳酸杆菌数量，减少大肠杆菌数量。韩静娥等[9]研究发现，低聚壳聚糖硒够提高肉仔鸡盲肠内双歧杆菌和乳酸杆菌数量，减少大肠杆菌的数量，具有调节肠道菌群作用。本试验中，ZEA能够极显著提高沙门氏菌数量，极显著降低乳酸菌、双歧杆菌数量；而添加低聚壳聚糖硒对ZEA导致肠道菌群的紊乱具有明显的改善作用；且低聚壳聚糖硒剂量高的处理组作用更加明显。因此，低聚壳聚糖硒能够通过保护有益菌群、抑制有害菌群的方式，拮抗ZEA引起的肠道菌群紊乱。4结论低聚壳聚糖硒能缓解ZEA引起的仔猪生长性能和抗氧化功能的下降，降低了ZEA引起的仔猪血浆ALT和AST升高，缓解了ZEA引起的肠道菌群的失调，仔猪日粮添加低聚壳聚糖硒的量以0.5 mg/kg为佳。