牧草是反刍动物重要的饲料资源，富含粗蛋白（CP）、维生素和矿物质等营养物质[1]。近年来，随着牧场退化、牧草利用不当、粗饲料资源需求量提高等问题出现[2-3]，牧草资源得到保护，并取得一定的效果[4]。但牧草中的营养物质能否满足反刍动物的生产需求，还需要对牧草的营养价值进行评估，根据牧草的营养特性进行合理饲喂。瘤胃尼龙袋法是一种国际认可的评估饲料中蛋白质降解效率的方法，操作简便，能够真实反映瘤胃中的消化特性[5]。目前，尼龙袋法测定牧草蛋白质瘤胃降解特性的研究较多[6]。冯仰廉等[7]使用尼龙袋法对奶牛常用的粗饲料蛋白质降解率进行测定。Edmunds等[8]对牧草中的干物质（DM）和蛋白质的动态降解进行了分析。本试验对常见的牧草苜蓿、沙打旺、象草、燕麦草、狗尾草和羊草等进行了DM和CP瘤胃降解特性进行评估，以期为牧草合理饲喂反刍动物提供参考。1材料与方法1.1样品采集苜蓿样品处于盛花期，采自河北省沧州市；沙打旺处于结荚期，采自辽宁省朝阳市；象草和狗尾草处于抽穗期，采自广西壮族自治区南宁市；燕麦草和羊草处于成熟期，采自河北省石家庄市。所有牧草样品采集时间为2019年6月至12月。1.2试验动物选用3只体重相近（70.0±3.6）kg、健康状况相同、装有永久性瘘管的陶赛特肉羊。试验于2020年3月，在内蒙古锡林郭勒大型肉羊养殖场进行。试验羊单圈饲养，自由饮水，每日饲喂2次，日粮按1.3倍维持需要提供，精粗比为4∶6。试验日粮由英美尔饲料有限公司提供。日粮营养水平为DM 92.60%、有机物91.28%、代谢能7.97 MJ/kg、CP 12.45%、中性洗涤纤维（NDF）37.79%、酸性洗涤纤维（ADF）22.15%、钙0.65%和磷0.30%。1.3测定指标及方法1.3.1尼龙袋试验风干样品过2.5 mm孔径的筛子粉碎，准确称2.0 g装入尼龙袋（孔径50 μm，大小12 cm×8 cm）。装有样品的尼龙袋采用“一次投入，分批取出”方式在瘤胃内孵育0、6、12、24、48和72 h。每个样品每个时间点设置2个平行样。尼龙袋取出后使用冷水终止瘤胃微生物，清水洗至水澄清，65 ℃烘箱中烘干至恒重，两个平行样混合装入同一自封袋。1.3.2化学成分测定样品中的DM和有机物（OM）参考张丽英[9]方法测定。CP、NDF和ADF参照Van Soest方法测定[10]。1.3.3瘤胃降解特性1.3.3.1DM和CP实时降解率计算6种牧草DM和CP培养各时间点的降解率。A=[(B-C)/B]×100%(1)式中：A为牧草样品在瘤胃时间点的降解率；B为牧草样品中DM和CP含量（%）；C为样品残渣中DM和CP含量（%）。1.3.3.2DM和CP降解参数和有效降解率根据Фrskov等[11]提出的瘤胃动力学模型计算DM和CP的瘤胃降解参数，指数模型见公式（2）。P=a+b(1-e-ct)(2)式中：P为牧草样品实时降解率；a为牧草中营养成分快速降解部分（%）；b为牧草中营养成分慢速降解部分（%）；c为慢速降解部分的降解速率（%/h）；t为牧草在瘤胃中的孵育时间（h）。根据a、b、c，计算瘤胃有效降解率。ED=a+bc/(k+c)(3)式中：ED为牧草样品中某营养物质的有效降解率；k为牧草样品在瘤胃中的流通速率，本研究中k=0.025 %/h[12]。1.4数据统计与分析数据采用Excel 2007软件进行初步整理，SPSS 28.0软件计算a、b、c数据，实时降解率和降解参数采用单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同牧草的营养成分含量（见表1）由表1可知，各种牧草DM含量均在90.27%~94.65%范围内；除沙打旺牧草OM含量较低外，其余牧草OM含量均高于80%；豆科牧草苜蓿CP含量最高，为19.36%，狗尾草含量次之，为12.37%，燕麦草CP含量最低为6.67%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.15.007.T001表1不同牧草的营养成分含量组别DMOMCPNDFADF羊草90.27±0.1593.45±0.137.12±0.2278.28±1.4841.27±1.16苜蓿94.37±0.0283.22±0.0619.36±0.7343.15±1.3927.68±1.27象草94.05±0.1188.43±0.0810.97±0.3863.18±0.1834.48±0.44燕麦草94.65±0.7895.43±0.036.67±0.2753.47±1.1826.38±1.27狗尾草93.62±0.0388.27±0.1312.37±0.4557.32±0.2532.45±0.65沙打旺92.18±0.0472.47±0.649.28±0.3855.38±1.4538.39±1.38%苜蓿的NDF含量最低，为43.15%；羊草的NDF和ADF含量最高，分别为78.28%和41.27%。2.2不同牧草DM在瘤胃中的实时降解率（见表2）由表2可知，同一时间点的降解率受牧草种类的影响很大，各时间点苜蓿的DM降解率均显著高于其他牧草（P0.05），各时间点羊草的DM降解率均为最低（P0.05）。瘤胃孵育72 h时，燕麦草、狗尾草和沙打旺DM降解率显著高于象草（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.15.007.T002表2不同牧草DM在瘤胃中的实时降解率组别时间/h0612244872羊草12.18±0.23f18.68±0.42e23.47±1.26f27.28±1.76e38.36±1.27e42.69±0.25d苜蓿39.42±0.36a48.07±1.38a63.42±2.74a74.38±1.02a76.24±0.45a77.47±0.39a象草17.98±0.45e24.12±0.51d27.36±0.22e42.01±1.12d45.39±1.48d49.63±0.31c燕麦草37.44±0.65b42.29±0.92b44.38±1.19c53.05±1.28c56.38±2.46c61.48±3.04b狗尾草24.47±1.37d27.68±0.08c41.03±1.89d42.88±1.09d55.02±1.23c60.75±1.08b沙打旺31.26±0.38c42.52±0.97b48.17±1.15b58.34±0.42b60.48±0.78b62.49±0.72b注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表3与此同。%2.3不同牧草CP在瘤胃中的实时降解率（见表3）由表3可知，除0 h外，苜蓿在瘤胃内孵育各时间点的CP降解率均显著高于其他牧草（P0.05），各时间点羊草的CP降解率均为最低（P0.05）。不同牧草在瘤胃内孵育72 h时，燕麦草、狗尾草和沙打旺的CP降解率显著高于象草和羊草（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.15.007.T003表3不同牧草CP在瘤胃中的降解率组别时间/h0612244872羊草12.37±0.21f17.34±0.38e24.87±0.23f29.82±1.62e35.28±1.04e43.35±0.87d苜蓿44.67±0.31b54.67±1.53a71.26±0.68a83.42±0.93a87.17±1.28a87.35±0.24a象草43.17±0.23c45.34±0.44d46.48±0.72e54.47±0.38d59.46±0.27d61.47±0.44c燕麦草47.38±0.89a48.19±1.47b56.25±1.24c63.05±1.45c63.67±1.38c67.49±1.98b狗尾草34.47±0.25d38.45±0.05c53.17±0.15d54.87±0.28d64.76±0.78c72.37±1.68b沙打旺34.38±0.66e44.17±1.67b49.89±2.14b60.28±1.38b65.87±2.24b72.36±1.03b%2.4不同牧草DM和CP瘤胃降解参数（见表4）由表4可知，苜蓿DM的a最高（P0.05），羊草最低（P0.05），燕麦草和沙打旺均高于30%。羊草、苜蓿和狗尾草DM的b显著高于其他牧草（P0.05），且均高于39%；燕麦草和沙打旺最低（P0.05）。苜蓿和沙打旺DM的c值最高（P0.05），羊草最低（P0.05）。苜蓿DM的a+b最高（P0.05）。苜蓿DM的ED最高（P0.05），羊草最低（P0.05），分别为68.45%和29.41%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.15.007.T004表4不同牧草DM和CP瘤胃降解参数项目羊草苜蓿象草燕麦草狗尾草沙打旺DM降解参数a/%12.34±0.63f39.39±0.27a17.07±0.87e38.13±0.77b23.56±0.34d32.68±0.07cb/%42.17±1.63a39.15±0.28ab34.75±1.37cd28.45±0.37f40.17±0.44a30.67±1.12efc/(%/h)0.017±0.003c0.072±0.005a0.036±0.007b0.027±0.009b0.033±0.006b0.067±0.005aa+b/mL54.51±2.84d78.54±1.65a51.82±0.84de66.58±1.17b63.73±1.78bc63.35±1.54cED/%29.41±1.33f68.45±0.89a37.58±1.13e52.90±0.63c46.42±0.57d55.02±1.27bCP降解参数a/%13.27±0.14d42.47±0.54b42.35±0.22b46.96±1.35a33.68±1.35c36.24±0.08cb/%28.85±1.08d40.27±1.28a25.64±0.63c21.38±2.58e28.67±1.44 b37.88±1.29cc/(%/h)0.035±0.004d0.065±0.014a0.032±0.025de0.013±0.029b0.043±0.004bc0.045±0.015bca+b/mL42.12±1.45e82.74±0.18a77.99±0.27b68.34±1.18d72.35±0.54c72.12±2.08cED/%30.10±0.28e71.55±1.15a56.74±2.35c54.27±1.18c51.81±2.03d60.59±1.43b注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。燕麦草CP的a最高（P0.05），为46.96%；羊草最低（P0.05），为13.27%。苜蓿CP的b显著高于其他牧草（P0.05），为40.27%；燕麦草最低（P0.05），为21.38%。苜蓿CP的c、a+b和ED均显著高于其他牧草（P0.05），分别为0.065%/h、82.74%和71.55%。3讨论DM瘤胃降解率与反刍动物干物质采食量有关，饲料原料的木质化程度是影响DM降解的主要因素[13]。本试验结果显示，豆科牧草苜蓿和沙打旺的DM瘤胃降解率和有效降解率较高，表明此两种牧草可有效提高反刍动物采食量，进而对其生长性能产生有利影响；原因可能是苜蓿和沙打旺的NDF和ADF含量低于其他牧草，CP含量高于其他牧草含量，与刘大林等[14]研究结果相似。本试验中，禾本科牧草燕麦草和狗尾草的DM降解率高于其他牧草，与谢昭良等[15]研究结论类似，造成这种结果的原因主要是不同禾本科牧草中的化学成分存在差异。本试验中，豆科牧草苜蓿和沙打旺DM瘤胃降解率在12 h后基本趋于稳定，而禾本科牧草狗尾草、羊草等在24 h才到达平缓期，与柏雪等[16]研究结论一致。本试验中，DM降解率与快速降解部分呈显著正相关；羊草的DM降解率最低，NDF和ADF含量最高，表明NDF和ADF与DM降解率呈负相关。李海英等[17]采用碱液预处理牧草，降低了NDF和ADF，最终DM降解率得到改善，与本研究结论相似。除牧草自身的化学成分直接影响DM降解率外，试验动物、牧草来源和收获期等均可对DM降解率产生一定的影响[18-19]。本试验中，牧草的种类和收获时期是最直接的影响因素，牧草的收获时期决定其营养品质，一般成熟期增加，牧草的木质化程度增加；品质下降，DM降解率下降[20-21]。本试验中，苜蓿的降解率与刘杰淋等[22]研究结果一致，沙打旺的72 h降解率略低于张永根等[23]报道的72.36%，可能与不同苜蓿的化学成分不同有关；燕麦草72 h降解率低于洪金锁等[24]报道，而狗尾草72 h降解率高于冷静等[25]报道。象草的DM有效降解率略高于杨信[26]报道，可能与土壤肥力有关。羊草DM降解特性与王丽娟等[27]报道相似。牧草CP瘤胃降解率的影响因素较多，如蛋白质结构和瘤胃微生物的附着面积等[28]。牧草被反刍动物采食进入瘤胃后，CP被微生物作用生成微生物蛋白，被小肠吸收[29]。牧草中的蛋白质以含氮化合物的形式存在于细胞内，以复杂的木质纤维素结构包裹形成保护壳，阻止牧草中CP降解[30]。本试验结果显示，苜蓿的CP瘤胃降解率最高，与其较低的NDF和ADF含量相关。低NDF和ADF含量利于微生物侵袭，促进CP降解[31]。牧草中CP含量也是影响牧草CP瘤胃降解率的因素之一，一般瘤胃中CP降解性能与牧草自身CP含量呈正相关。本试验中，苜蓿CP含量、CP有效降解率最高，羊草CP含量、CP有效降解率最低，但牧草中CP含量与CP在瘤胃中的降解关系并不一致，本试验中牧草原料CP含量排序与CP瘤胃降解率排序不一致。因此，仅通过化学成分评估其营养成分瘤胃降解性能较片面，应考虑瘤胃微生物的可及性[32]。品种也是影响牧草CP瘤胃降解率的关键因素。本试验中，燕麦草、象草和狗尾草CP有效降解率高于50%，表明其在瘤胃中的降解性能较好。4结论综合分析6种常见牧草DM和CP在瘤胃中的降解特性，豆科牧草在瘤胃12 h后降解基本趋于平缓，而禾本科牧草24 h后才趋于平稳；综合各指标，豆科牧草瘤胃降解优于禾本科牧草。