藏羊是长期生活在高海拔地区的特有品种资源[1]。长期营养摄入不足可导致藏羊掉膘严重，影响藏羊正常生长发育及瘤胃正常发酵功能，导致藏羊病死率升高，养殖效益降低[2-3]。目前，精料补饲的研究主要集中在藏羊繁殖性能[4]、生产性能[5]和养分表观消化率[6]等，关于瘤胃发酵参数指标的研究较少。氨态氮（NH3-N）是瘤胃氮代谢过程中降解的重要产物，也是瘤胃微生物合成微生物蛋白重要的原料[7]。反刍动物的能量主要是由瘤胃碳水化合物发酵产生的乙酸、丙酸和丁酸等提供[8]。瘤胃液pH值也是衡量瘤胃发酵状况的重要指标，合理的瘤胃pH值可维持动物健康生长[9]。占今舜等[10]研究发现，适当提高日粮中的精料量能够提高湖羊瘤胃中的菌群丰度，促进微生物发酵，进而促进湖羊生长发育。李斌昌[11]研究发现，适宜的精料比例可提高9月龄后备牛对日粮中营养物质的利用率，有效降低牛CH4排放量、甲烷能/总能的比值，促进后备牛生长发育。日粮中适当提高精料量，对促进饲料消化利用率具有重要的实践意义，但过高或过低的营养水平均可影响反刍动物的生长发育[12]。反刍动物的生长发育与采食量、营养物质消化吸收能力密切相关，在一定程度上也与瘤胃发酵功能有关[13]。本试验研究精料补饲对育肥期藏羊生长发育和瘤胃发酵参数的影响，旨在为藏羊饲粮的配制提供参考。1材料与方法1.1试验地点试验于2019年10月—2019年12月在青海省贵南县老扎西牧场的草场进行。预试期8 d，正式试验期60 d。1.2试验设计选取50只体况良好、体重（15.04±2.16）kg的2~3月龄藏羊，随机分为2组，每组5个重复，每个重复5只。对照组藏羊仅放牧，不补饲；试验组藏羊在放牧基础上，每只试验羊每日补饲体重1%的精料量。每天8：30放牧，19：00归牧，其他饲养管理完全一致，参考《肉羊饲养标准》（NY/T 816—2004）配制日粮[14]，所有藏羊自由饮水，基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.004.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）项目试验组对照组原料组成/%玉米45.87—麸皮13.35—棉籽粕9.64—菜籽粕12.86—豆粕6.17—小麦5.06—食盐2.58—磷酸氢钙1.83—碳酸氢钠1.64—预混料1.00—合计100.00—营养水平干物质/%85.4286.58粗蛋白/%16.187.76粗脂肪/%2.692.31中性洗涤纤维/%16.1253.75酸性洗涤纤维/%6.9337.83钙/%0.550.43磷/%0.050.03代谢能/(MJ/kg)13.8910.06注：1.预混料为每千克精料提供：Cu 5 mg、Fe 36 mg、Mn 25 mg、Zn 12 mg、I 0.30 mg、Se 0.08 mg、Co 0.08 mg、VA 2 500 IU、VD 250 IU、VE 200 IU。2.营养水平均为实测值。%1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验正式试验期开始前与结束时于晨饲前对所有藏羊空腹称重，计算平均日增重。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)1.3.2瘤胃发酵参数试验结束时，各组选出健康的5只羔羊颈动脉放血处死，屠宰30 min内采集50 mL瘤胃液，测定pH值，3 500 r/min离心20 min，吸取上层液体，混匀，通过4层纱布过滤；摇匀，无菌离心管分装，其中1份加入0.5 mol HCL，-80 ℃冰箱中保存，用于测定NH3-N含量；另外1份添加25%偏磷酸，-80 ℃保存，用于测定瘤胃液挥发性脂肪酸（VFA）浓度。试验藏羊瘤胃液NH3-N浓度测定方法参考苯酚-次氯酸钠比色法[15]；瘤胃液中VFA含量按照用气相色谱方法测定[16]。1.3.3血清免疫及抗氧化指标测定免疫指标为免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）含量。抗氧化指标为丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、总抗氧化能力（T-AOC）。使用江苏酶标生物科技有限公司试剂盒进行检测。1.4数据统计与分析试验数据采用Excel 2010软件进行初步处理，T检验法比较2组数据差异显著性。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1精料补饲对青海藏羊生长性能的影响（见表2）由表２可知，与对照组相比，试验组藏羊末重和平均日增重显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.004.T002表2精料补饲对青海藏羊生长性能的影响项目初重/kg末重/kg平均日增重/[g/(只·d)]P值0.8730.0270.014试验组16.03±0.9522.27±0.67a104.00±6.55a对照组16.14±0.5220.05±0.76b65.17±9.33b注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.004.T003表３精料补饲对青海藏羔羊瘤胃发酵参数的影响项目pH值NH3-N/(mg/L)乙酸/%丙酸/%异丁酸/%丁酸/%乙丙比总挥发性脂肪酸/(mmol/L)P值0.0870.0340.0440.0490.0350.0260.1280.033试验组6.45±0.3360.70±9.70a55.12±0.22b18.04±1.15a1.46±0.28b11.78±1.19a4.03±0.35157.33±9.58a对照组6.13±0.2247.30±7.59b61.38±1.88a15.54±3.26b3.64±0.35a9.24±2.25b4.45±0.76121.53±10.35b2.2精料补饲对青海藏羊瘤胃发酵参数的影响（见表3）由表３可知，与对照组相比，试验组藏羊瘤胃液乙酸和异丁酸含量显著降低（P0.05），NH3-N浓度及总挥发性脂肪酸、丙酸和丁酸含量显著升高（P0.05）。2.3精料补饲对青海藏羊血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，两组藏羊血清IgA、IgG、MDA含量及CAT、GSH-Px活性差异不显著（P0.05）。试验组藏羊血清IgM含量、SOD活性以及T-AOC均显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.004.T004表4精料补饲对青海藏羔羊血清生化指标的影响项目IgA/(mg/L)IgM/(mg/L)IgG/(mg/L)T-AOC/(U/mL)MDA/(μmol/L)CAT/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)P值0.0870.0350.4010.0290.2050.0740.1080.022试验组246.12±30.341 960.79±90.78a57.13±4.2228.29±1.75a10.40±1.1851.58±1.09563.03±21.25252.27±19.61a对照组233.48±40.211 884.73±75.84b56.38±8.1122.14±3.16b9.61±1.5350.54±2.05559.92±30.76212.05±20.23b3讨论3.1精料补饲对青海藏羊生长性能的影响反刍动物的生长性能主要通过平均日增重、饲料利用效率等评价[17-18]。日粮中适宜的营养水平对促进反刍动物的生长发育有利，但精料比例过高时也会起抑制作用，造成饲料浪费，增加饲养成本，精料过低也会降低机体生长性能。青藏高原气候环境恶劣，导致育肥期藏羊营养长期摄入不足，造成生长缓慢。因此，在藏羊育肥时期提供适宜的补饲精料尤为重要。戴东文等[19]研究发现，暖季补饲可提高放牧牦牛的平均日增重和养殖效益，以补饲2.5 kg/d精料较适宜。周力等[20]研究表明，妊娠后期藏母羊的冬季补饲能够为胎儿的生长发育提供必要的营养需求，提高母羊瘤胃液中总挥发性脂肪酸、丙酸和丁酸含量，但在一定程度上影响了瘤胃细菌的多样性。陈浩等[21]研究发现，补饲精料可增强放牧饲养条件下7月龄育成牛的抗氧化能力和免疫功能，提高血清中生长相关激素含量，有效促进生长发育，提高牛的生长性能。吴华卓等[22]研究表明，冷季补饲精料可提高牦牛生长性能和对营养物质的消化率，有助于牦牛冷季保镖，且对犊牦牛的效果优于青年牦牛。本研究中，育肥期藏羊经过补饲精料后末重和平均日增重显著提高，可能是精料补饲增加了饲料中蛋白和能量，进而促进育肥藏羊的生长发育。3.2精料补饲对青海藏羊瘤胃液VFA含量的影响瘤胃pH值是衡量反刍动物微生物代谢平衡和瘤胃发酵状况重要指标，主要与日粮结构、营养水平以及唾液分泌量等有关[23]。Iliĉ等[24]、占今舜等[10]认为，反刍动物饲喂高精料日粮会导致瘤胃内pH值下降。李萍等[25]研究发现，随着日粮精料水平提高，瘤胃内原虫数量、NH3-N浓度均明显升高，反刍动物从日粮中摄入含氮类物质增加，进而满足瘤胃微生物生长所需要的氮源，上述结果与本试验结论基本一致，表明精料补饲导致瘤胃液pH值下降，NH3-N浓度提高。反刍动物瘤胃的健康状况与其结果和功能紧密相关，瘤胃内细菌可产生VFA和蛋白，为机体提供能量和营养物质[26]。王书祥等[27]研究发现，补饲组牦牛瘤胃液乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、总挥发性脂肪酸、异丁酸和异戊酸浓度均显著或极显著高于对照组，而乙酸/丙酸值显著低于对照组。以高山细毛羊为研究对象[28]的试验结果显示，高山细毛羊瘤胃中乙丙比随着补饲料中粗料的增加呈升高趋势。本试验中，对照组藏羊瘤胃的乙酸和异丁酸显著高于试验组，而总挥发性脂肪酸、丙酸和丁酸含量则相反，与上述研究结果一致。3.3精料补饲对青海藏羊血清生化指标的影响反刍动物血清生化指标的变化能够间接反映机体健康状况。免疫球蛋白主要包括IgA、IgM和IgG，在反刍动物中主要起免疫调节作用，其数值升高表示机体免疫功能增强[29]。王彩莲等[30]研究表明，9月龄欧拉型藏系绵羊羯羊经过补饲精料提高了血清IgA、IgG和IgM含量。鲍玉林等[31]研究表明，随着混合日粮中营养水平增加，舍饲牦牛体液免疫指标与细胞免疫指标逐步得到改善。本试验结果显示，补饲牦牛血清中IgA、IgM和IgG含量提高。T-AOC、SOD、CAT和GSH-Px值越大，MDA值越小，表明机体抗氧化越强[32]。施力光等[33]研究表明，在低精料水平下，T-AOC、CAT、GSH-Px活性显著降低，MDA含量显著提高。吴文旋等[34]研究表明，在低营养水平条件下，补饲精料能够显著增强生长期贵州黑山羊血浆抗氧化应激能力，对提高蛋白质利用率有利。本试验中，试验组藏羊血清SOD活性和T-AOC显著高于对照组，原因可能是精料补饲能够满足藏羊营养需要，使组织细胞和瘤胃内环境与微生物代谢正常。4结论本研究结果表明，在生长早期，补饲精料能够显著提高断奶藏羊生长性能，增强藏羊的免疫机能和抗氧化能力，对瘤胃发酵有利。