鲤鱼原产于亚洲，具有肉质细腻、口感鲜美、营养丰富、必需氨基酸含量丰富等特点。2020年，我国已经禁止在饲料中使用抗生素饲料添加剂，因此需要寻找抗生素替代品应用于畜禽养殖中。酵母提取物作为饲料添加剂在畜禽、水产养殖中具有良好的应用效果[1-4]。酵母提取物中含有丰富的生物活性物质包括核苷酸、谷胱甘肽和细胞壁多糖等，细胞壁多糖中尤其是β-葡聚糖和α-木聚糖含量丰富，对动物肠道健康和生长有利[5]。酵母提取物能够提高畜禽和水产动物的生长性能和抗氧化能力，增强免疫抵抗力[6-7]；酵母产品还可改善水中环境，使其对水生生物生长有利。但目前关于酵母提取物在鲤鱼养殖中的研究较少。本试验研究酵母提取物对鲤鱼生长性能、免疫功能、抗氧化能力的影响，旨在为酵母提取物在鲤鱼养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料酵母提取物由华康生物药业有限公司提取，按照《饲料原料 酿酒酵母提取物》（NY/T 3316—2018）从啤酒酵母中提取，主要成分为氨基酸、核苷酸和谷胱甘肽等，营养成分含量为粗蛋白质54%、水分3.0%、粗灰分16.3%、谷胱甘肽16.0%、核苷酸8.4%、总糖0.5%。鲤鱼购自郑州黄河滩鱼苗孵化场。1.2试验设计试验前，鲤鱼进行2周的驯化暂养，暂养期饲喂商品饵料。正式试验在室内水族箱内进行，所有试验鱼分别放在12个水族箱内饲养。选取健康、大小相近、初始体重为（10.12±0.28）g的鲤鱼360尾，随机分为4组，每组3个重复，每个重复30尾，分别投喂4种试验饵料。对照组鲤鱼饲喂基础饵料，T1组、T2组、T3组鲤鱼分别饲喂含有0.075%、0.150%、0.300%酵母提取物的饵料（酵母提取物等量替换基础饵料中的鱼粉），试验期8周。饵料参照《鲤鱼配合饵料》（GB/T 36782—2018）进行配制，基础饵料组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.014.T001表1基础饵料组成及营养水平（风干基础）项目对照组T1组T2组T3组原料组成鱼粉30.00029.92529.85029.700酵母提取物00.0750.1500.300大豆粕16.00016.00016.00016.000面粉20.00020.00020.00020.000菜籽粕12.00012.00012.00012.000玉米麸皮10.00010.00010.00010.000鱼油5.0005.0005.0005.000氯化胆碱0.6000.6000.6000.600石粉1.4001.4001.4001.400食盐1.0001.0001.0001.000磷酸二氢钙3.0003.0003.0003.000预混料1.0001.0001.0001.000合计100.000100.000100.000100.000营养水平粗蛋白35.5535.5535.5535.56粗脂肪9.539.539.539.53粗灰分6.206.206.206.20钙0.680.680.680.68赖氨酸2.132.132.132.13蛋氨酸0.250.250.250.25注：1.预混料为每千克饵料提供：VA 9 600 IU、VD 2 100 IU、VC 53 mg、VE 56 mg、VK 41 mg、VB1 3.3 mg、VB2 9.7 mg、VB6 4.7 mg、VB12 0.11 mg、泛酸钙13.6 mg、叶酸9.8 mg、烟酸33 mg、生物素0.52 mg、铜6.3 mg、铁98 mg、锌5 mg、硒0.2 mg、碘0.6 mg、钴0.02 g。2.营养水平均为计算值。%1.3饲养管理试验水温为（24.0±0.1）℃，pH值在（7.20±0.25），亚硝酸盐不大于0.15 mg/L，溶氧大于5 mg/L，每日换水量约1/3，每隔3 d进行1次消毒。每日9：00、18：00饲喂饵料，投喂量控制在试验鱼重的2.5%左右。每日做好养殖记录，包括养殖环境、饵料投喂量、鱼体情况等。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验开始鱼禁食24 h，称重，试验最后1 d，计算每组剩余活鱼数量，测量每组鱼的重量和体长，试验期间记录饵料投喂量，计算生长性能。增重率=(末重-初重)/平均初重×100%(1)饵料系数=平均消耗饵料总量/(末重-初重)(2)特定生长率=(ln末重-ln初重)/试验天数(3)肥满度=末期体重/末期均体长3×100(4)蛋白质效率=(末重－初重)/平均蛋白质摄入量(5)成活率=试验结束鲤鱼尾数/试验开始鲤鱼尾数×100%(6)1.4.2免疫功能试验结束鱼禁食12 h，统计每箱内鲤鱼的数量，每组随机选取15尾鱼，使用200 mg/L MS-222麻醉，取3 mL一次性注射器在尾静脉抽取血液，10 ℃放置20 h，4 000 r/min离心20 min，－80 ℃保存，用于测定血清免疫指标。使用酶联免疫吸附试验法（ELISA）测定免疫球蛋白M（IgM）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6），试剂盒购自南京建成生物工程研究所，严格依照试剂盒说明操作。使用全自动生化分析仪采用免疫透射比浊法测定补体3（C3）和补体4（C4）含量。1.4.3抗氧化指标采血后剖检鱼体，摘取肝脏，称重，置于冷冻管中，-80 ℃保存，用于测定肝脏抗氧化指标。采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）测定肝脏抗氧化指标，包括总抗氧化能力（T-AOC）以及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、总超氧化歧化酶（T-SOD）活性和丙二醛（MDA）含量，试剂盒购自南京建成生物工程研究所，严格依照试剂盒说明操作。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 22.0软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1酵母提取物对鲤鱼生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，T2组和T3组鲤鱼的末重显著提高（P0.05），T1组、T2组和T3组鲤鱼的增重率显著提高（P0.05），T2组和T3组鲤鱼的饵料系数分别降低14.42%和8.84%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.014.T002表2酵母提取物对鲤鱼生长性能的影响组别初重/g末重/g增重率/%特定生长率/（%/d）蛋白质效率饵料系数平均体长/cm肥满度/（g/cm3）成活率/%对照组10.23±0.2142.81±2.12b318.48±17.62b2.56±0.06b1.31±0.06b2.15±0.03a13.58±0.721.71±0.0294.95±1.64T1组10.10±0.2445.32±1.95ab352.20±21.52a2.68±0.09ab1.37±0.05ab2.06±0.05ab13.79±0.811.73±0.0295.49±1.98T2组10.08±0.2047.11±2.04a370.30±20.84a2.75±0.07a1.44±0.06a1.84±0.02b13.86±0.391.77±0.0397.21±2.03T3组10.18±0.2046.52±2.54a356.97±25.24a2.71±0.08a1.41±0.07a1.96±0.04b13.88±0.581.74±0.0195.86±1.68注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。T2组和T3组鲤鱼的特定生长率分别提高7.42%和5.86%（P0.05），蛋白质效率分别提高9.92%和7.63%（P0.05）。2.2酵母提取物对鲤鱼血清免疫功能的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，T1组、T2组和T3组鲤鱼血清IgM含量分别提高了9.95%、13.43%和11.94%（P0.05）；T2组血清IL-6含量降低了13.77%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.014.T003表3酵母提取物对鲤鱼血清免疫功能的影响组别IgM/(g/L)IL-6/(ng/L)TNF-α/(ng/L)C3/(mg/L)C4/(mg/L)对照组2.01±0.13b117.65±4.12a1 118.48±25.6238.75±3.9818.21±2.23T1组2.21±0.10a112.32±3.95ab1 081.20±21.5239.72±3.4618.54±1.98T2组2.28±0.18a101.45±2.64b1 062.30±22.8439.56±5.7819.23±2.71T3组2.25±0.20a107.52±2.54ab1 079.97±20.2440.13±4.5719.85±2.102.3酵母提取物对鲤鱼血清抗氧化指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，T3组鲤鱼血清GSH-Px活性显著提高了14.17%（P0.05）；T2组血清CAT活性显著提高了14.51%（P0.05），血清MDA含量降低了34.98%（P0.05）。试验各组血清T-SOD活性以及T-AOC均具有升高的趋势（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.014.T004表4酵母提取物对鲤鱼血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)CAT/(U/mL)T-SOD/(U/mL)MDA/(μmol/L)对照组4.83±0.21103.81±2.12b4.48±17.62b62.95±1.643.05±0.15aT1组5.10±0.24109.32±1.95ab4.85±21.52ab64.49±1.982.81±0.12abT2组5.21±0.20111.11±2.04ab5.13±20.84a70.21±2.032.01±0.13bT3组5.18±0.20118.52±2.54a5.07±25.24ab68.86±1.682.31±0.12ab3讨论3.1酵母提取物对鲤鱼生长性能的影响酵母提取物能够提高鱼类的生长性能。张一平等[8]发现，酵母核苷酸能够促进团头鲂生长发育，提高生长性能。曾本和等[9]报道，适量的酵母水解物可显著改善草鱼饵料系数和特定增长率等生长性能的相关指标。彭凯等[10]报道，啤酒酵母提取物和啤酒酵母粉能够改善饵料报酬，显著降低草鱼饵料系数，显著升高特定生长率。酵母提取物中含有丰富的核苷酸、细胞壁多糖，能够改善动物的肠道功能，利于营养物质的消化吸收。酵母提取物中的核苷酸能够补充鱼体所需要的核苷酸[11]，增强代谢酶活性，利于机体合成激素、酶和维生素等活性物质[12]；促进胰蛋白酶分泌，增强肠道消化蛋白质的能力[13]，有利于鱼类肠道消化结构的发育和完善[14]本试验结果表明，添加0%~0.2%酵母提取物可显著提高鲤鱼末重，显著降低饵料系数，鲤鱼的增重率、肥满度与成活率呈先升高后降低的趋势，与上述研究结果相符，可能因为酵母提取物中含有多肽、氨基酸、蛋白质、矿物质、维生素等多种营养物质和促生长因子，从而促进了鲤鱼生长发育。3.2酵母提取物对鲤鱼免疫功能的影响酵母提取物在动物机体免疫应答方面发挥重要作用，是一种动物的免疫调节剂，可调控免疫细胞的产生和功能[15]。IgM作为一种血清免疫球蛋白，在杀灭细菌、消除炎症以及中和机体毒素等方面发挥重要作用，可反映机体体液免疫的强弱[16]。IL-6、TNF-α是血清中的促炎因子，促炎因子是能够促进炎症反应发生或增强炎症反应过程的生物分子，其含量越低表明机体免疫功能越强[17]。罗作明[18]研究表明，适量的酵母多糖可降低血清中促炎因子IL-6和TNF-α含量，有利于提高机体免疫功能。可能是酵母提取物中的核苷酸和细胞壁多糖利于B细胞的完善和成熟，促进T淋巴细胞的功能发挥，增强免疫细胞的活性，促进细胞因子的生成和功能的发挥，从而调节机体的免疫应答，增强机体的免疫功能。酵母提取物所含的细胞壁多糖对有益菌的增殖有利，能够抑制有害菌，促进肠黏膜免疫的功能发挥[19-21]。本研究中，各试验组鲤鱼血清IgM含量显著提高，T2组鲤鱼血清促炎因子血清IL-6和TNF-α含量显著降低。3.3酵母提取物对鲤鱼血清抗氧化指标的影响李赵嘉等[22]研究表明，酵母提取物可提高蛋鸡血清抗氧化能力。彭凯等[16]研究表明，啤酒酵母提取物可以改善花鲈幼鱼血清的抗氧化状态，提高抗低氧胁迫能力。酵母提取物能有效增加抗氧化酶的活性，降低MDA含量[23]。酵母提取物具有抗氧化的作用，可能与酵母提取物含有核丰富的核苷酸、谷胱甘肽和细胞壁多糖等活性物质有关。已有研究表明，这些活性物质能够提高动物的抗氧化能力[24-26]。GSH-Px能够阻断活性氧自由基的脂质过氧化过程，保护细胞膜结构免受过氧化损伤，利于细胞膜功能的发挥；SOD能够清除机体体内自由基，避免自由基对机体的损伤[27-28]。CAT是专一催化H2O2分解成水和氧气，使机体内H2O2的含量趋于平衡，缓解H2O2对机体的损害[29]；MDA是脂质过氧化反应的产物，其含量能够表明机体的受损伤程度；T-AOC是指各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成的抗氧化水平的整体反应[30]。本试验结果表明，添加酵母提取物后，T3组鲤鱼血清GSH-Px活性显著提高，T2组血清CAT活性显著提高、血清MDA含量显著降低，表明酵母提取物使鲤鱼血清的抗氧化指标得到改善。4结论本研究结果表明，饵料添加酵母提取物能够提高鲤鱼生长性能、免疫功能和抗氧化能力，鲤鱼饵料酵母提取物适宜添加量为0.15%。