山银花提取物具有极高的饲用和药用价值[1]，主要作用为抗炎、抑菌及促生长。山银花提取物主要活性物质为绿原酸[2]，具有抗氧化、抗菌、抗炎、增强免疫及改善肠道健康等多种生物学功能[3-5]。目前，饲料端已经禁止添加抗生素，在无抗条件下保证畜禽健康、使畜禽具有较高的生产水平成为近年的研究热点。关于山银花提取物及其主要成分绿原酸在畜禽养殖中的应用较多[6]，且均具有较高的推广和研究价值。本研究通过在肉鸡日粮中添加不同水平的山银花提取物，观察其对肉鸡生长性能、血清生化指标和屠宰性能的影响，旨在为肉鸡无抗养殖提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验使用的山银花提取物购自斯诺特生物科技有限公司，绿原酸含量为5.0%。试验动物为健康、1日龄左右的爱拔益加（AA）肉鸡，由兴城市金鸡岭英波肉鸡养殖专业合作社提供。1.2试验设计选取360只AA肉鸡随机分为4组，每组6个重复，每个重复15只肉鸡。A组（对照组）、B组、C组、D组分别饲喂添加0、250、500、750 mg/kg山银花提取物的基础日粮，山银花提取物通过等量替代基础日粮中的麸皮添加。基础日粮组成及营养水平见表1。试验期42 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.012.T001表1基础日粮组成及营养水平项目1~21 d22~42 d原料组成/%玉米55.8556.50豆粕33.0132.01菜籽粕2.252.35棉粕2.332.33油粉2.583.03石粉1.231.15磷酸氢钙1.801.73食盐0.320.32DL-蛋氨酸0.240.18L-赖氨酸0.130.14维生素复合预混料0.100.10微量元素复合预混料0.100.1098%氯化胆碱0.060.06合计100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)12.3512.65粗蛋白/%19.8819.02钙/%1.010.85总磷/%0.720.64赖氨酸/%1.091.01蛋氨酸/%0.480.38注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 12 300 IU、VD3 2 000 IU、VE 18.65 mg、VK3 2.64 mg、VB2 5.5 mg、VB12 0.02 mg、生物素0.032 mg、叶酸1.2 mg、D-泛酸10 mg、烟酸44 mg、Cu 5.5 mg、Fe 75 mg，Zn 55 mg、Mn 82 mg、Se 0.10 mg、I 0.35 mg。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。1.3饲养管理试验期间肉鸡饲养于标准鸡舍，保证肉鸡自由采食饮水，每日记录死淘鸡数。试验场地和鸡舍每日清洁卫生，进行正常消毒。试验鸡舍通风良好，其他饲养要求按照养殖场规章制度执行。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验期间，以重复为单位每日记录肉鸡的采食量和死淘数，称重前空腹12 h。统计1、21、42日龄相关的生长性能指标，计算肉鸡平均日采食量、平均日增重、料重比和死淘率。平均日增重=[总末重-(总初重-均初重×死淘数)]/[试验天数×(试验数-死淘数)](1)平均日采食量=总采食量/(试验天数×试验末鸡数+死淘饲养天数×死淘数)(2)料重比=总采食量/总增重(3)死淘率=死淘数/试验初鸡数×100%(4)1.4.2血清生化指标试验结束，各重复随机选择3只与该处理组体重接近的健康肉鸡，翅静脉采血3 mL，促凝管保存，3 000 r/min离心10 min，上清液置于1.5 mL EP管中，-20 ℃保存，用于测定血清生化指标，包括抗氧化指标：总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）及丙二醛（MDA）；免疫指标：免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白A（IgA）；炎性因子：肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）。所有血清生化指标试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，具体操作步骤按照试剂盒说明书。1.4.3屠宰性能试验结束，各重复随机选择2只试验肉鸡屠宰，各部位分割称重，测定全净膛重、半净膛重、全净膛率、半净膛率、屠宰率、胸肌率、腿肌率、腹脂率等指标。屠宰率=屠体重/活重×100%(5)半净膛率=半净膛重/活重×100%(6)全净膛率=全净膛重/活重×100%(7)胸肌率=胸肌重/活重×100%(8)腹脂率=腹脂重/活重×100%(9)腿肌率=腿肌重/活重×100%(10)1.5数据统计与分析试验数据均采用Excel 2007软件进行初步整理，SAS 8.2软件进行单因素方差分析。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1山银花提取物对肉鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，22~42 d，与对照组相比，各试验组肉鸡末重显著提高（P0.05），料重比显著降低（P0.05）；C组、D组肉鸡平均日增重、平均日采食量显著提高（P0.05）。1~42 d，与对照组相比，C组、D组肉鸡平均日增重、平均日采食量显著提高（P0.05），D组肉鸡料重比显著降低（P0.05）。各组肉鸡的死淘率在各阶段差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.012.T002表2山银花提取物对肉鸡生长性能的影响项目A组（对照组）B组C组D组1~21 d初重/g42.32±0.5142.51±1.0242.38±0.8842.48±0.73末重/g773.38±5.38769.48±10.94772.91±7.39776.30±10.24平均日增重/[g/(只·d)]34.81±1.2334.62±0.8734.79±0.7134.94±0.34平均日采食量/[g/(只·d)]60.13±1.2360.24±0.8160.85±0.9760.32±1.03料重比1.73±0.121.74±0.251.75±0.151.73±0.11死淘率/%000022~42 d末重/g2 103.33±23.48c2 186.58±43.44b2 253.86±31.23b2 320.14±34.30a平均日增重/[g/(只·d)]63.33±3.48bc67.48±2.49ab70.52±2.21a73.52±4.31a平均日采食量/[g/(只·d)]138.69±2.71b141.71±3.21ab143.16±1.28a143.36±2.19a料重比2.18±0.03a2.10±0.04b2.03±0.05bc1.95±0.03c死淘率/%4.50±2.413.50±1.711.17±1.272.33±1.611~42 d平均日增重/[g/(只·d)]49.07±1.03b51.05±2.21b52.65±1.38a54.23±1.20a平均日采食量/[g/(只·d)]99.20±1.34b100.29±2.34ab102.22±1.84a102.57±1.57a料重比2.02±0.06a1.96±0.08ab1.94±0.09ab1.89±0.08b死淘率/%4.50±2.413.50±1.711.17±1.272.33±1.61注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。2.2山银花提取物对肉鸡血清生化指标的影响2.2.1山银花提取物对肉鸡血清抗氧化指标的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，C组、D组肉鸡血清T-AOC以及SOD活性显著提高（P0.05）；各试验组GSH-Px活性显著提高（P0.05），但各试验组间差异不显著（P0.05）；各试验组肉鸡血清MDA含量均显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.012.T003表3山银花提取物对肉鸡血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)MDA/(μmol/L)A组（对照组）12.06±1.23c230.25±8.40b152.37±5.21c5.11±0.21aB组12.98±0.94bc271.38±6.39a156.49±4.86bc4.43±0.36bC组14.11±1.16ab280.29±5.11a168.81±6.15b4.02±0.61bcD组16.22±1.57a283.46±6.27a176.20±8.77a3.17±0.45c注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2.2山银花提取物对肉鸡血清炎性因子和免疫指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，各试验组肉鸡血清IL-6、TNF-α含量显著降低（P0.05），IgG和IgM含量显著升高（P0.05）；C组、D组肉鸡血清IL-10、IgA含量显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.012.T004表4山银花提取物对肉鸡血清炎性因子与免疫指标的影响组别IL-6/(ng/L)IL-10/(ng/L)TNF-α/(ng/L)IgA/(μg/L)IgG/(g/L)IgM/(μg/L)A组（对照组）62.49±1.03a40.14±0.87c71.30±1.10a6 638.29±57.39c1.70±0.10c4 815.32±62.10dB组53.27±0.69b42.09±1.06bc66.39±0.97b6 710.08±83.42c1.95±0.07b5 223.31±87.19cC组50.01±0.51c44.96±0.51b65.26±1.23b7 239.51±93.17b2.15±0.10a5 638.00±72.18bD组45.37±0.71d49.37±0.72a60.91±0.82c7 632.13±101.33a2.21±0.12a5 831.00±69.29a2.3山银花提取物对肉鸡屠宰性能的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，各试验组肉鸡的腹脂率均显著降低（P0.05）；C组、D组肉鸡的胸肌率和腿肌率均显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.012.T005表5山银花提取物对肉鸡屠宰性能的影响组别屠宰率半净膛率全净膛率腹脂率胸肌率腿肌率A组（对照组）96.38±0.8785.63±0.4474.15±0.681.32±0.08a23.42±1.33c16.63±0.68bB组96.45±0.6185.67±0.8972.84±1.321.12±0.07b24.35±1.08bc16.22±1.03bC组96.32±0.9485.81±0.6273.28±1.211.08±0.12b27.31±1.16a18.70±0.75aD组96.45±0.7386.34±0.8773.36±1.081.09±0.09b25.88±0.75b19.10±0.81a%3讨论3.1山银花提取物对肉鸡生长性能的影响山银花提取物可改善畜禽生长性能，与其他中药材进行复配也是提高畜禽养殖水平的重要方法[7]。目前，山银花提取物及绿原酸在猪、鸡、奶牛和水产等多种经济动物中均有提高生长性能的相关报道[1,7-10]。王志明等[11]在肉鸡日粮中分别添加0、250、500、1 000 mg/kg山银花提取物和黄芩提取物混合制剂，发现添加500 mg/kg山银花提取物可以显著提高1~42日龄肉鸡的平均日增重，显著降低料重比；500和1 000 mg/kg组肉鸡42日龄的胸腺指数显著提高，500 mg/kg组肉鸡的脾脏指数显著提高；500 mg/kg山银花提取物还可以显著提高42日龄肉鸡回肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度值。本研究中，在肉鸡日粮中添加单一山银花提取物，发现仅D组肉鸡料重比显著下降，但在1~42 d阶段，C组、D组组肉鸡平均日采食量均有所提升，表明山银花提取物对改变肉鸡采食量方面更具优势。3.2山银花提取物对肉鸡血清生化指标的影响绿原酸是山银花提取物主要活性成分。绿原酸为植物中广泛分布的多酚类次生代谢物，其特殊结构可为动物机体内自由基提供结合位点[12]。研究表明，绿原酸可有效螯合金属离子，降低机体超氧阴离子、羟基自由基等水平[13-15]，且绿原酸的抗氧化活性约为维生素E和维生素C活性的10~30倍[16]。山银花提取物中富含绿原酸和黄芩苷，可显著提高动物体内抗氧化能力。吕慧源等[17]在肉鸡日粮中添加500mg/kg以山银花提取物为主的复合提取物制剂，以基础日粮为对照组，基础日粮+125 mg/kg恩拉霉素为阳性对照组，研究复合提取物制剂对肉鸡的影响，结果发现，该制剂可显著提升肉鸡生长性能，显著提高T-AOC以及GSH-Px、SOD活性，改善鸡肉品质，且效果优于恩拉霉素，与本研究结果基本一致，表明山银花提取物可改善肉鸡抗氧化能力。血清中炎性因子和免疫球蛋白水平在一定程度上可反应肉鸡的健康水平。TNF-α由活化的巨噬细胞产生，可促进中性粒细胞吞噬，引起体内发热，是重要的炎症介质[18]。IL-6对维持机体免疫应答、细胞生长与分化具有重要意义，可通过抑制巨噬细胞产生白细胞介素-1（IL-1）和肿瘤坏死因子，进而起保护细胞和抗炎作用。IL-6在炎症反应中具有抗炎和致炎双向功能，过多的IL-6可引起机体一系列炎性损伤[19]。IL-10是动物机体最为重要的抗炎因子，可明显抑制IL-6、白细胞介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子等多种炎性因子[20]。本研究结果表明，山银花提取物既可抑制炎症因子产生，促进抗炎因子产生。免疫球蛋白是动物体内特异性免疫的重要指标。陈义娟[21]在黄羽肉鸡日粮中分别添加1.0%、1.5%、2.0%和3.0%的山银花提取物，发现山银花提取物可提高肉鸡生长性能，提高胸腺指数、脾脏指数及法氏囊指数等免疫指标，提高血清IgA和IgG含量；但因该研究添加量过大，解剖结果表明，在此试验条件下肉鸡脏器组会出现不同程度的损伤。3.3山银花提取物对肉鸡屠宰性能影响李漠等[22]在肉鸡日粮中分别添加0、250、500、1 000 g/t以山银花提取物为主的复合提取物制剂，观察山银花提取物对肉鸡生长性能、免疫器官指数和屠宰性能的影响；发现与对照组相比，500 g/t添加组肉鸡42日龄平均体重及22~42日龄、1~42日龄平均日增重和平均日采食量显著提高；21和42日龄脾脏指数水平及42日龄肉鸡胸腺指数水平显著提高；42日龄肉鸡胸肌率及腿肌率显著提高，与本研究结论类似。4结论本研究结果表明，山银花提取物可促进肉鸡生长性能，提高肉鸡机体抗氧化能力，抑制促炎因子产生，促进抗炎因子产生，提高肉鸡血清免疫球蛋白水平及屠宰性能，总体效果随着添加量提高而提高。本试验条件下，适宜添加量为750 mg/kg。