中草药具有毒副作用小、不产生耐药性、不易残留的优点，是饲料添加剂行业的研究热点方向[1]。但中草药的有效活性成分均被细胞壁包裹存在于胞浆中，有效活性物质无法释放，从而制约了中草药的推广和使用。通过微生物发酵中草药可提高药效，降低副作用，并能够与有益菌产生协同作用，调节动物肠道微生物菌群[2]。蛋鸡在产蛋后期由于机体新陈代谢缓慢，对日粮营养吸收率降低，抗病能力和生产性能下降，产蛋率降低，蛋壳变薄，在产蛋后期提高蛋鸡的生产性能具有重要意义。许栋等[3]研究表明，发酵中草药（党参、白术、白芍、茯苓等，发酵微生物为枯草芽孢杆菌）可降低京红蛋鸡产蛋死亡率，提高后期产蛋率，改善肝脏脂代谢能力和蛋品质。范作良等[4]研究表明，在56周龄的蛋鸡日粮中添加1%发酵中草药（当归、黄芪、川芎、藿香、熟地黄、甘草，发酵微生物为芽孢杆菌），可显著减少蛋种禽应激发生，提高蛋鸡生产性能，降低料蛋比；且与未发酵制剂相比，药效显著增强，可降低用药剂量。杨欣伟[5]研究发现，日粮中添加0.5%发酵中草药（山药、山楂等，发酵微生物为红曲霉）可提高蛋鸡的产蛋率，降低平均日采食量和料蛋比，提高蛋鸡的免疫水平，增强蛋品质。李凤龙等[6]研究发现，日粮添加发酵杜仲叶粉能够改善蛋鸡生产性能、调节血液脂肪代谢，对蛋鸡的血液脂肪代谢、蛋黄胆固醇具有一定的调节作用。本试验研究发酵中草药对罗曼粉蛋鸡后期生长性能和蛋品质的影响，为发酵中草药在蛋鸡产蛋后期应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料发酵中草药由四川本草兴农生物科技有限公司提供。主要成分为黄芪、当归、白术、杜仲叶、党参、山楂、酵母粉、乳酸菌。1.2试验设计选取576只500日龄平均产蛋率为64.64%健康罗曼粉蛋鸡，随机分为4组，每组6个重复，每个重复32只鸡，各重复在试验舍内位置均匀排布。试验Ⅰ组蛋鸡饲喂基础日粮，试验Ⅱ组为基础日粮+0.5%发酵中草药，试验Ⅲ组为基础日粮+1%发酵中草药，试验Ⅳ组为基础日粮+1.5%发酵中草药。所有日粮使用同一批次原料，采用相同工艺生产。日粮中添加的发酵中草药等量替代基础日粮。基础日粮组成及营养水平见表1。预试期3 d，正式试验期28 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.009.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米34.28粗蛋白/%16.00小麦25.00钙/%3.70玉米胚芽粕5.00总磷/%0.53豆粕7.00有效磷/%0.30棉粕3.00可消化赖氨酸/%0.67玉米蛋白粉5.00代谢能/(MJ/kg）11.17玉米DDGS8.00大豆油1.25磷酸氢钙0.94石粉2.50石粉（粒，粗）6.65预混料0.30L-赖氨酸硫酸盐0.40DL-蛋氨酸0.10L-苏氨酸0.01氯化胆碱0.10复合酶制剂0.02氯化钠0.25碳酸氢钠0.20注：1.每千克预混料为日粮提供：VA 318 mg、VB1 45 mg、VB2 187.5 mg、VB6 105 mg、VB12 0.375 mg、VD3 2.25 mg、VE 860 mg、VK 112.5 mg、泛酸30 mg、胆碱88 g、烟酸900 mg、叶酸30 mg、生物素2.25 mg、Fe 2.25 g、Cu 0.63 g、Mn 2.4 g、Zn 2.38 g、I 7 mg、Se 15 mg。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验于四川特驱农牧科技集团有限公司蛋鸡研发基地进行，各处理饲养条件和养殖设备一致，3层叠式笼养早晚补光，每日光照时间16 h，按照饲养程序进行消毒和试验舍清理。每日7：00、13：00、19：00饲喂，采用乳头式饮水器自由饮水。1.4测定指标及方法1.4.1生产性能每日定时记录各重复蛋总数、总蛋重量、破壳蛋数、软壳蛋数、沙壳蛋数和双黄蛋数，计算破蛋率、软蛋率、沙壳蛋率和双黄蛋率；按照重复记录每日采食量，按周计算平均日采食量和料蛋比。平均日采食量=总采食量/试验鸡数(1)料蛋比=总采食量/总蛋重(2)破蛋率=破蛋数/总蛋数×100%(3)软蛋率=软蛋数/总蛋数×100%(4)沙壳蛋率=沙壳蛋数/总蛋数×100%(5)1.4.2蛋品质试验第14、28 d采集蛋样，每个重复收集4枚蛋样，每个处理合计24枚，用于蛋品质指标测定。蛋形指数使用游标卡尺测量蛋样纵径与横径，计算蛋形指数；使用MODEL-Ⅲ蛋壳强度测定仪测定蛋壳强度，分别取蛋钝端、中间和锐端的蛋壳，镊子剔除内壳膜，蛋壳厚度仪测蛋壳厚度，取3点平均值；蛋黄颜色、蛋白高度使用EMT-7300蛋品质全自动测定仪测定，计算哈夫单位。蛋形指数=纵径/横径(6)哈夫单位=100×lg(H-1.7W0.37+7.6)(7)式中：H为蛋白高度（mm）；W为蛋重（g）。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel 2016软件进行初步计算与整理，SPSS 23.0软件进行单因素方差分析（One-way ANOVA），Duncan's法进行多重比较。结果以平均值和标准误表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1日粮添加不同水平发酵中草药对蛋鸡产蛋后期生产性能的影响（见表2）由表2可知，日粮添加发酵中草药对蛋鸡1~14、14~28 d以及全期产蛋率、蛋均重、平均日采食量、料蛋比、破蛋率、软壳蛋率和双黄蛋率均无显著影响（P0.05）。与试验Ⅰ组相比，试验Ⅱ组、试验Ⅲ组和试验Ⅳ组蛋鸡第14~28 d沙壳蛋率显著降低（P0.05），全期沙壳蛋率有降低的趋势（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.009.T002表2日粮添加不同水平发酵中草药对蛋鸡产蛋后期生产性能的影响项目试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组试验Ⅳ组标准误P值1~14 d产蛋率/%63.5663.8663.0760.736.180.835蛋均重/(g/枚)60.4760.7560.5060.760.870.916平均日采食量/[g/(只·d)]103.66104.52103.73104.901.650.514料蛋比2.852.822.833.030.320.661破蛋率/%3.553.142.574.231.830.484软壳蛋率/%1.100.980.430.570.860.496沙壳蛋率/%3.211.382.282.391.690.335双黄蛋率/%0.220.090.280.160.400.88115~28 d产蛋率/%63.1063.2359.2858.817.060.589平均蛋重/(g/枚)60.9160.5260.6260.930.830.801平均日采食量/[g/(只·d)]100.3099.5196.6198.993.490.306料蛋比2.772.742.832.970.330.679破蛋率/%3.683.253.474.861.910.493软壳蛋率/%0.910.620.520.460.790.794沙壳蛋率/%3.74a1.92b1.75b1.34b1.650.046双黄蛋率/%0.160.250.420.000.390.3201~28 d产蛋率/%63.3363.5461.1959.796.400.728平均蛋重/(g/枚)60.6960.6360.5660.840.820.951平均日采食量/[g/(只·d)]101.98102.01100.20101.972.260.445料蛋比2.812.782.833.000.320.668破蛋率/%3.623.213.014.541.670.415软壳蛋率/%1.010.800.480.520.710.555沙壳蛋率%3.461.692.021.881.360.082双黄蛋率/%0.190.180.350.080.290.475注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。2.2日粮添加不同水平发酵中草药对蛋鸡产蛋后期蛋品质的影响（见表3、表4）由表3可知，日粮中添加不同水平发酵中草药的试验各组蛋鸡产蛋第14 d鸡蛋的蛋重、蛋白高度、蛋黄颜色、哈夫单位、蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋形指数均与试验Ⅰ组差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.009.T003表3日粮添加不同水平发酵中草药对蛋鸡产蛋后期蛋品质的影响（14 d）项目蛋重/(g/枚)蛋白高度/mm蛋黄颜色哈夫单位蛋壳强度/（kg/cm2）蛋壳厚度/mm蛋形指数试验Ⅰ组62.726.038.4575.634.205.804.34试验Ⅱ组60.876.128.4776.824.287.824.31试验Ⅲ组60.856.368.5678.754.295.714.31试验Ⅳ组61.796.048.5075.964.225.814.31标准误0.420.110.040.760.080.520.01P值0.3340.6740.8130.4690.9820.4200.624由表4可知，与试验Ⅰ组、试验Ⅱ组相比，试验Ⅲ组、试验Ⅳ组第28 d鸡蛋的蛋白高度显著提高（P0.05），试验Ⅲ组第28 d鸡蛋的哈夫单位显著提高（P0.05）。与试验Ⅰ组相比，试验Ⅲ组、试验Ⅳ组鸡蛋第28 d的哈夫单位显著提高（P0.05）。试验Ⅰ组和试验Ⅱ组鸡蛋28 d的蛋白高度、哈夫单位差异不显著（P0.05）。各试验组鸡蛋28 d的蛋重、蛋黄颜色、蛋壳强度、蛋壳厚度和蛋形指数差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.009.T004表4日粮添加不同水平发酵中草药对蛋鸡产蛋后期蛋品质的影响（28 d）项目蛋重/(g/枚)蛋白高度/mm蛋黄颜色哈夫单位蛋壳强度/（kg/cm2）蛋壳厚度/mm蛋形指数试验Ⅰ组61.125.99b8.3172.38c3.241.003.81试验Ⅱ组59.765.72b8.0874.70bc3.181.023.76试验Ⅲ组61.586.78a8.4381.62a3.381.003.81试验Ⅳ组59.736.85a8.4580.04ab3.260.973.79标准误4.831.300.9411.310.840.100.10P值0.4520.0030.5300.0130.8740.4330.244注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。3讨论3.1日粮添加不同水平发酵中草药对蛋鸡产蛋后期生产性能的影响中草药作为饲料添加剂具有促进动物生长、提高生长性能的作用，原因是中草药具有药用与营养两种属性，富含蛋白质、氨基酸、维生素和微量元素等。孟令楠等[7]研究表明，复方中草药添加剂能够有效提高海兰褐蛋鸡的生产性能，改善机体抗氧化性能。潘璐等[8]研究表明，日粮中添加发酵中药（茯苓、白术、党参和白芍，发酵微生物为枯草芽孢杆菌）能够显著提升52周龄蛋鸡的产蛋率，极显著降低料蛋比。许栋等[3]研究表明，日粮中添加4 g/kg发酵中草药可提高京红蛋鸡产蛋后期的产蛋率，改善蛋品质和脂代谢能力。本试验结果显示，日粮添加发酵中草药对蛋鸡产蛋率、蛋均重、平均日采食量、料蛋比、破蛋率、软壳蛋率、双黄蛋率均无显著影响。原因可能是本试验使用500日龄的罗曼粉蛋鸡处于蛋鸡老龄阶段，所需时间依赖性更长，而本试验期只有28 d；或是因为发酵中草药在发挥促生长性能的效果因动物年龄较大无法体现。王惠等[9]研究表明，产蛋麻鸭日粮添加中药副产物发酵剂能够降低沙壳蛋率。本试验结果表明，日粮中添加1.0%和1.5%发酵中草药显著降低了产蛋后期1~14 d沙壳蛋率，有1~28 d降低沙壳蛋率的趋势。原因可能是蛋壳在输卵管中形成，子宫部是沉积蛋壳的场所，极易受肛周炎上移而引起子宫部炎症，进而导致子宫部壳腺分泌钙质不足，蛋壳沉积均匀度较差、蛋壳色泽与光亮度不足、蛋壳颜色灰暗，形成沙壳蛋。曾佳佳等[10]研究表明，日粮添加中草药-益生菌-胆汁酸复合剂量对蛋鸡生产性能无显著影响，但是能够抑制大肠杆菌生长，促进乳酸杆菌繁殖，影响肠道微生物结构，降低病原菌引起的肠道感染，提高抗病能力。经复合益生菌发酵的绞股蓝可产生大量的次生代谢产物，包括有机酸类、维生素类、小肽等，在调节肠道、提升免疫力等方面发挥重要作用[11]。复方中药（益母草和王不留行）经粪肠球菌、干酪乳杆菌和产朊假丝酵母3种益生菌协同发酵后，发酵产物总生物碱、可溶性总黄酮、粗多糖和总皂苷的含量比生药材提高了127.28%、55.14%、55.42%和49.21%[12]。本试验使用的发酵中药含有黄芪、当归、白术、杜仲叶、党参、山楂，具有抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的作用，经发酵后有效物质如黄酮、生物碱等发挥了抗菌消炎作用，减缓了蛋鸡子宫部炎症，从而有效降低了沙壳蛋率。3.2日粮添加不同水平发酵中草药对蛋鸡产蛋后期蛋品质的影响蛋品质主要以蛋重、蛋壳强度、蛋黄颜色及哈夫单位等指标综合评估[13]。哈夫单位是鸡蛋新鲜度的测量单位，数值越高说明蛋品质越好；哈夫单位随着蛋鸡年龄增长线性下降，25~75周龄鸡产蛋的哈夫单位从90降至75。毛亚芳等[14]研究表明，不同水平杜仲叶粉饲喂绿壳蛋鸡70 d对蛋重、蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋形指数、蛋黄颜色、哈夫单位、蛋白高度均无显著影响。李颖等[15]研究表明，蛋鸡中添加荷叶粉对蛋重、蛋壳强度、蛋黄指数、哈夫单位无显著影响。张新[16]研究表明，日粮中添加中药制剂可显著提高蛋鸡产蛋率和鸡蛋的哈夫单位。杨春雷等[17]研究表明，日粮中添加复合中药（黄芪、杜仲和山楂）具有提高鸡蛋哈夫单位的趋势。陈艳新等[18]研究表明，日粮中添加（五味子、黄芪、益母草、枸杞子、山楂、陈皮、甘草）可显著提高哈夫单位和蛋白高度。范良志[19]研究表明，在34周海兰蛋鸡上中草药（黄栀子55%、膨润土15%、神曲10%、山楂10%、黄芪8%）能够显著提高鸡蛋哈夫单位。闫民朝[20]研究表明，添加生物发酵中药（党参、黄芪、当归、甘草、白术、山药等，发酵微生物为白腐菌、酵母菌）能够显著改善蛋鸡产蛋高峰期的哈夫单位，处于产蛋高峰期的蛋鸡哈夫单位数值较高，提高幅度较小；产蛋后期蛋鸡哈夫单位逐渐降低，改善程度更明显，与本研究中1.0%发酵中草药和1.5%发酵中草药能够显著提高28 d鸡蛋蛋白高度和哈夫单位的结果一致。乔兴宏[21]研究表明，添加发酵黄芪28 d可显著提高蛋鸡产蛋率，降低料蛋比，提高血清中谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性以及总抗氧化力（T-AOC），明显降低血清中丙二醛（MDA）含量。但发酵黄芪在蛋鸡的生物学效应具有时间依赖性，其效果在饲喂15 d后才变得明显。本试验结果显示，发酵中草药对14 d蛋品质无明显影响，28 d鸡蛋的哈夫单位显著提高。添加复合中草药制剂（山楂、陈皮、淫羊藿、党参、黄芪、熟地、当归、连翘、柴胡、苍术、穿心莲、苦参碱、蒜、茯苓等中药）饲喂蛋鸡血清中GSH-Px与SOD活性显著增强，MDA含量显著降低，从而增强机体对体内自由基的清除能力[7]，与张潇屹等[22]、金海莉[23]研究结果一致。输卵管膨大部是蛋清分泌合成的靶器官，约占输卵管长度的50%[24]。输卵管膨大部皱褶黏膜层由具有纤毛和无纤毛的单层柱状上皮细胞排列而成，固有层分布丰富的管状腺，皱褶高度和表面上皮细胞高度是影响蛋清品质的重要因素，蛋清品质与输卵管健康状况密切相关[25]。本研究结果显示，日粮添加发酵中药可显著提升产蛋后期蛋鸡产蛋的蛋白高度和哈夫单位，可能是因为日粮中中草药抗氧化活性物质可缓解产蛋后期蛋鸡的氧化损伤，改善输卵管膨大部组织功能，从而促进蛋清蛋白质的合成和分泌[26]。范作良等[4]研究表明，中草药发酵制剂能够显著减少蛋种禽应激发生，提高蛋鸡生产性能，降低料蛋比，且与未发酵制剂相比，药效明显增强。4结论本研究表明，添加1.0%和1.5%发酵中药能够降低罗曼粉蛋鸡后期沙壳蛋率，提高鸡蛋哈夫单位和蛋白高度，显著改善鸡蛋品质。发酵中草药在改善、产蛋率、料蛋比等生产性能在老龄化动物上效果不显著，考虑添加成本，推荐添加量为1.0%发酵中草药。