长期在密闭、高密度、高应激环境下生长会导致肉鸡处于免疫力和抗病力低下的状态[1]，易引发传染病。养殖场常采用抗生素防治各类疾病，但随着禁抗政策实施，研究替抗饲料添加剂从而提高动物免疫力和抗病能力，减少抗生素使用已成为目前研究的重点。牛至油（oregano essential oil，OEO）是一种提取自牛至全草的具有芳香味、能够溶于有机溶剂的挥发精油。研究表明，从植物中提取的酚类化合物具有抗微生物的功能，OEO主要由香芹酚、百里香酚、对伞花烃、β-石竹烯和萜品烯等40种成分组成，其中香芹酚和百里香酚具有一定的抗菌活性[2]。目前，OEO因具有抗菌、消炎、提高免疫力的功能在动物生产中应用较多[3]。Yasir等[4]关于OEO对体外培养6种细菌抑菌作用的研究发现，OEO对除炭疽杆菌外的其他5种细菌均具有抗菌活性，表明OEO具有较宽广的抗菌谱。OEO活性成分中的百里香酚和香芹酚能够抑制促炎因子干扰素（IFN）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-β（IL-β）合成，提高抗炎因子白细胞介素-10（IL-10）的水平[5-6]。OEO中的活性成分能够增加动物体内吞噬细胞的数量，提高巨噬细胞的吞噬能力，进而提高动物免疫力[5-6]。本试验主要通过研究OEO对肉鸡生长性能、养分表观代谢率和肉品质的影响，为肉鸡养殖中合理使用OEO提供参考。1材料与方法1.1试验材料20%盐酸金霉素可溶性粉（CTC·HCl，福建浦城正大生化有限公司）；OEO（含量5%，驻马店华中正大有限公司）。1.2试验设计试验分为前期（1~21 d）和后期（22~42 d）两个阶段；第1阶段选择1日龄健康且体重无差异的AA肉鸡240只（公、母各半），随机分为3组，每组8个重复，每个重复10只鸡；第2阶段，在原分组的基础上去掉过大或过小的鸡，每组分为8个重复，每个重复5只鸡。A组肉鸡（对照组）饲喂基础日粮；B组肉鸡饲喂基础日粮+CTC·HCl（试验第1、3、5周在日粮中加入500 mg/kg 20% CTC·HCl，每次给药时间为7 d）；C组肉鸡饲喂基础日粮+300 mg/kg OEO。基础日粮配方按照NRC（1994）的肉仔鸡饲养标准配制。试验日粮分为前期（1~21 d）和后期（22~42 d）两种日粮，前后阶段日粮单独配制，为粉状。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.011.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）项目1~21 d22~42 d原料组成/%玉米58.565.6豆粕33.027.0鱼粉2.01.0豆油3.03.0石粉1.41.3磷酸氢钙1.41.4蛋氨酸0.10.1食盐0.30.3氯化胆碱0.10.1预混料0.20.2合计100.0100.0营养水平代谢能/(MJ/kg)12.4312.66粗蛋白/%20.5017.90脂肪/%3.605.90钙/%0.980.89总磷/%0.640.60有效磷/%0.460.42注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 12 000 IU、VD3 3 000 IU、VE 20 IU、VK3 1.0 mg、VB1 2.0 mg、VB6 3.5 mg、VB12 0.01 mg、铜8 mg、铁100 mg、锰80 mg、锌60 mg、碘0.45 mg、硒0.35 mg、生物素0.15 mg、叶酸1.25 mg、核黄素6 mg、烟酸35 mg、泛酸钙10 mg。2.粗蛋白、钙、总磷含量为测定值，其余均为计算值。1.3饲养管理1~7日龄雏鸡鸡舍温度30~35 ℃，之后每周降2 ℃，降至25 ℃，湿度控制在45%~60%。1~21日龄鸡每日饮20~25 ℃温水，21 d后逐步过渡至饮室温下凉水。鸡舍保持通风，及时清理鸡粪。试验期间鸡舍每日关灯1 h，自由采食。对影响试验效果的鸡作淘汰处理，记录重量和采食量。多层笼养，自然通风，免疫程序为：7日龄新-支二联苗，21日龄新城疫活疫苗。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能记录每日肉鸡的采食量，回收抛洒料；观察记录肉鸡的健康状况、死亡情况以及腹泻情况。分别于21和42 d空腹12 h称重，计算平均日采食量、平均日增重、料重比。平均日采食量=总耗料量/(试验天数×试验鸡数)(1)平均日增重=(末重-初重)/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2代谢试验及相关指标采用全收粪法，鸡笼下设粪盘套黑色垃圾袋，收集第37~39 d的排泄物，及时拣出皮屑、羽毛和饲料等杂物。每日排泄物混匀，滴加10%硫酸以固定氮，-20 ℃保存，试验结束后混匀3 d收集的排泄物，称重、取样，记录总粪重和取样重。60~65 ℃烘干，自然状态下充分回潮24 h，称重记录，粉碎，过40目筛。粗蛋白质（CP）采用GB/T 6432—94测定；粗脂肪（EE）采用GB/T 6433—2006；钙（Ca）采用乙二胺四乙酸二钠络合滴定法测定；磷（P）采用GB/T 6437—2002测定；中性洗涤纤维（NDF）采用GB/T 20806—2006测定；酸性洗涤纤维（ADF）采用Van Soest法测定；酸性洗涤木质素（ADL）采用GB/T 20805—2006测定；粗灰分（Ash）测定采用550 ℃烧灼法。有机物（OM）含量=100%-Ash含量(4)纤维素=ADF-ADL-Ash(5)半纤维素=NDF-ADF(6)饲料和排泄物总能采用IKA-C2000全自动氧弹测热计（IKA公司）测定。样品先用6 mol/L盐酸水解24 h（110 ℃），转移定容，使用0.45 µm滤膜过滤，在日立L-8800型氨基酸自动分析仪上测定氨基酸含量。养分表观代谢率=(饲料养分-排泄物养分)/饲料养分×100%(7)1.4.3屠宰性能试验结束称重后，各组共取6只鸡，公、母各半，进行屠宰和解剖试验。1.4.3.1器官指数宰前称量活重，颈动脉采血，去毛，沥干水分，称量屠体重，测定胸肌重和腿肌重，称量腹部脂肪重，计算屠宰率、全净膛率、胸肌率、腿肌率、腹脂率。称量腺胃、肌胃、心脏、肝脏、胰腺、胸腺、脾和法氏囊的重量，计算各器官与活重的相对比值。取出肠道各部分的食糜，使用生理盐水冲洗肠道内容物，称量肠道各部分的重量，测量肠道各部位的长度，称量宰前活重、胸肌重、肌胃、心脏、肝脏、胰腺、脾的重量。器官指数=器官重量/活体重×100%(8)1.4.3.2肉品质取胸肌和腿肌，使用酸度计分别测定胸肌、腿肌屠宰后1 h和24 h的pH值，鸡肉4 ℃垂直悬挂24 h，取出，吸干鸡肉表面水分，计算失水率；色差计测定鸡肉亮度（L*）、红度（a*）、黄度（b*）。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel 2016软件进行初步处理，SPSS 2013软件进行统计分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1OEO对白羽肉鸡生长性能及养分表观代谢率的影响（见表2、表3）由表2可知，1~21 d，与对照组相比，CTC·HCl组和OEO组肉鸡的平均日增重显著提高（P0.05）。22~42 d，与对照组相比，CTC·HCl组和OEO组肉鸡的料重比显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.011.T002表2OEO对白羽肉鸡生长性能的影响日龄项目对照组CTC·HCl组OEO组1~21 d初重/g49.31±1.1250.12±0.7350.08±0.84末重/g873.21±71.26982.21±62.87969.00±73.25平均日采食量/[g/(只·d)]61.60±5.4165.61±2.8265.51±1.51平均日增重/[g/(只·d)]39.23±1.00b44.40±1.20a43.80±0.60a料重比1.57±0.101.48±0.041.49±0.0222~42 d初重/g930.37±13.15932.28±10.18931.13±9.89末重/g2 207.11±110.292 291.12±121.352 331.18±117.25平均日采食量/[g/(只·d)]114.20±11.70111.30±9.90114.30±5.90平均日增重/[g/(只·d)]60.80±10.8064.70±6.3066.70±3.40料重比1.92±0.15a1.72±0.05b1.71±0.03b注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表4、表8与此同。由表3可知，与对照组相比，CTC·HCl组和OEO组肉鸡CP和Ca的代谢率显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.011.T003表3OEO对肉鸡养分表观代谢率的影响组别OMCPEENDFADFCaP对照组78.17±1.3255.28±2.20b82.01±2.5150.15±3.1827.87±2.8735.06±1.99b45.64±2.30CTC·HCl组79.31±2.1760.56±1.39a84.23±1.3352.36±2.1729.39±1.8741.90±1.01a49.36±1.36OEO组79.81±1.8859.02±3.01a83.63±1.2353.18±2.7927.86±3.1939.57±1.66a47.78±2.56注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表5、表6、表7与此同。%2.2OEO对白羽肉鸡腿肌、胸肌肉品质的影响（见表4）10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.011.T005项目胸肌腿肌对照组CTC·HCl组OEO组对照组CTC·HCl组OEO组剪切力/N15.78±1.23a12.14±1.51b11.37±2.53b16.42±3.6712.75±2.1112.13±1.89L*值54.23±2.1355.13±3.1255.97±2.2155.25±1.2156.47±2.8757.03±2.98a*值3.50±0.42b3.82±0.12ab4.07±0.13a5.13±0.64b5.18±0.12b6.53±0.13ab*值12.25±1.0312.09±0.8611.02±1.9611.98±1.1211.02±1.8710.25±2.59水分/%73.57±0.7572.86±1.7871.98±2.2375.24±1.56a74.56±1.56ab72.18±1.23b肌内粗蛋白/%22.17±1.1323.28±2.1625.27±2.2121.98±1.6723.56±2.3224.86±1.68肌内粗脂肪/%3.71±0.123.69±0.133.71±0.227.81±0.117.82±0.137.78±0.12由表4可知，与对照组相比，OEO组肉鸡胸肌滴水损失、剪切力显著降低（P0.05），a*值显著升高（P0.05）。与对照组相比，OEO组肉鸡腿肌的滴水损失、水分含量显著降低（P0.05），a*值显著升高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.011.T004表4OEO对白羽肉腿肌、胸肌肉品质的影响项目胸肌腿肌对照组CTC·HCl组OEO组对照组CTC·HCl组OEO组pH1 h值6.37±0.176.27±0.056.30±0.086.30±0.166.27±0.176.30±0.08pH24 h值6.02±0.166.07±0.176.01±0.086.03±0.135.97±0.016.04±0.09滴水损失/%4.71±0.61a4.58±0.07a3.30±0.12b4.60±0.13a4.40±0.18a2.78±0.34b蒸煮损失/%30.05±1.2730.61±1.0629.58±2.2430.51±1.1029.65±1.2430.30±2.91系水力/N36.05±3.0336.50±2.8936.81±2.2439.75±1.9039.11±1.0639.64±1.06续表4　OEO对白羽肉鸡肉品质的影响2.3OEO对白羽肉鸡屠宰性能、器官指数及肠道各部分长度的影响（见表5~表7）由表5~表7可知，与对照组相比，CTC·HCl组肉鸡屠宰率、胸肌率显著升高（P0.05），腿肌率显著降低（P0.05）；CTC·HCl组和OEO组肉鸡腹脂率均显著提高（P0.05）；OEO组肉鸡十二指肠、空肠长度显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.011.T006表5OEO对肉鸡屠宰性能的影响组别屠宰率全净膛率胸肌率腿肌率腹脂率对照组92.75±0.42b83.46±0.6110.07±0.30b3.93±0.33a0.61±0.06cCTC·HCl组94.78±0.58a83.73±0.8011.05±0.43a3.23±0.30b0.86±0.00bOEO组93.45±0.65b84.43±0.889.89±0.59b4.23±0.39a1.37±0.37a%10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.011.T007表6OEO对白羽肉鸡器官指数的影响项目肌胃腺胃肝脏心脏胰腺肾脏脾脏法氏囊对照组1.25±0.030.36±0.082.11±0.300.50±0.100.19±0.010.16±0.040.13±0.030.14±0.02CTC·HCl组1.33±0.110.39±0.062.22±0.340.54±0.070.19±0.020.20±0.020.12±0.020.15±0.02OEO组1.20±0.040.37±0.022.13±0.030.52±0.030.21±0.020.20±0.040.13±0.010.19±0.01%10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.011.T008表7OEO对肉鸡肠道各部分长度的影响组别十二指肠空肠回肠盲肠对照组10.28±0.89b67.67±3.40b69.00±1.0018.00±1.41CTC·HCl组10.00±0.50b70.00±1.22b70.33±5.2518.67±1.89OEO组10.97±0.94a75.25±4.44a69.25±4.0217.50±0.87cm2.4OEO对胸肌肉中氨基酸成分的影响（见表8）由表8可知，OEO组肉鸡的天冬氨酸、谷氨酸含量显著高于对照组和CTC·HCl组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.011.T009表8OEO对胸肌肉中氨基酸成分的影响项目对照组CTC·HCl组OEO组天冬氨酸1.92±0.05b1.91±0.03b2.42±0.44a谷氨酸3.01±0.08b3.06±0.02b3.80±0.70a丝氨酸0.57±0.030.53±0.040.68±0.14精氨酸1.52±0.051.52±0.031.78±0.28甘氨酸0.97±0.070.86±0.091.11±0.20苏氨酸0.77±0.030.74±0.010.92±0.19脯氨酸0.80±0.040.70±0.150.93±0.16丙氨酸1.20±0.051.17±0.151.46±0.27缬氨酸3.07±0.483.95±0.723.29±0.59蛋氨酸0.44±0.330.42±0.020.56±0.11异亮氨酸3.11±0.122.68±0.372.82±0.19苯丙氨酸1.02±0.031.09±0.011.28±0.25组氨酸1.16±0.031.02±0.111.15±0.06赖氨酸1.95±0.102.00±0.092.49±0.45酪氨酸0.65±0.020.63±0.060.80±0.15%3讨论3.1OEO对白羽肉鸡生长性能的影响OEO能够提高肉鸡的生长性能，主要体现为提高肉鸡的平均日增重和降低料重比。Ariza等[7]在肉鸡日粮中添加0.125、0.250和0.500 g/kg OEO，结果发现，与对照组相比，添加OEO组肉鸡的营养物质表观代谢率、平均日增重提高，料重比降低。Luna等[8]研究表明，日粮中添加1.33 mmol/kg（约0.2 g/kg）的百里香酚可显著增加35 d肉鸡的体重。魏付梁等[9]对270只天露黄鸡进行模拟生产试验，结果发现，日粮中添加200 mg/kg OEO可显著增加肉鸡日增重，显著降低料重比。Ghazi等[10]研究发现，日粮中添加OEO可提高42 d雄性肉鸡平均日增重，降低料重比，但对平均日采食量影响不显著。Gerardo等[11]关于OEO和土霉素对肉鸡生长性能的研究发现，21~42 d期间OEO组肉鸡的料重比最低。本研究发现，与对照组相比，OEO组肉鸡在1~21 d期间平均日增重显著提高；22~42 d期间料重比显著降低，与Li等[12]、Qu等[13]研究结果基本相似。原因可能是OEO能够起保护胃黏膜、防治胃炎和修复肠道组织的作用，可促进白羽肉鸡对饲料的消化吸收，提高饲料营养利用率，达到降低料重比的效果。OEO对肉鸡养分表观代谢率也具有一定的影响。OEO具有独特的气味，可刺激下丘脑摄食中枢，通过神经系统调节激素和消化酶的分泌促进营养物质的消化吸收[14]。Oso等[15]在日粮中添加CTC·HCl和植物性混合物，结果发现，CTC·HCl组肉鸡的CP表观代谢率显著高于对照组，EE表观代谢率与对照组差异不显著。本试验中，OEO组的肉鸡CP和Ca表观代谢率显著高于对照组，与上述研究结果基本相同，表明OEO能够促进肉鸡对粗蛋白和Ca的代谢能力。3.2OEO对肉鸡肌肉品质的影响改善鸡肉品质是肉鸡养殖的重点[16-17]。OEO能够对肉鸡肌肉的品质产生一定影响，如肌肉pH值、滴水损失和肌肉的颜色等。pH值直接体现肌肉的酸度，影响肉的贮藏性能[18]。肌肉pH值的变化主要取决于屠宰前和屠宰过程中的加工处理条件。动物被屠宰后，机体失血缺氧，肌肉通过糖酵解途径利用肌糖原产生ATP，肌肉中乳酸含量逐渐增多，pH值开始下降；直至糖酵解被抑制，此时pH值最小，约为5.4。pH值下降的速率和程度变异很大，但胸肌（酵解型白肌）pH值下降的速率和程度大于腿肌（氧化型红肌）。本试验中，OEO组肉鸡腿肌的pH1 h值显著低于对照组，与İpçak等[19]研究结果不一致，可能是因为测定时间不同所致。滴水损失是评价肌肉保水力的指标。Hamid等[20]研究发现，日粮中添加OEO能够显著降低肌肉滴水损失。本试验中，OEO组肌肉滴水损失显著降低。肉色能够反映肉质的生理变化，也是消费者评价新鲜禽肉质量的重要感观指标。肉色的变化受多种因素如品种、年龄、营养状况、屠宰处理和肉品贮存等情况的影响。Hernández-Coronado等[18]研究发现，日粮中添加OEO的肉鸡肌肉a*值与对照组差异显著，L*值和b*值无明显差异。本试验中，OEO组肌肉a*值显著高于对照组。3.3OEO对肉鸡屠宰性能的影响屠宰性能指标可从表观上反映营养物质在不同组织及同一组织的不同部位中沉积量差异。产肉量是衡量肉鸡屠宰性能的重要指标，尤其是胸肌产量。Hernández-Coronado等[18]研究发现，日粮中添加OEO能够提高肉鸡的屠体重。本试验结果表明，OEO组肉鸡屠体重和全膛重均有一定提升，胸肌率和腿肌率显著提高。本试验结果与上述结论基本相似，表明OEO对肉鸡屠体重和全膛重等指标产生有利影响。腹脂是肉鸡屠宰中低价值的副产品，过多腹脂会造成肉鸡养殖效益的降低，造成环境污染。OEO能够减少腹脂沉积，降低腹脂率。本试验结果显示，日粮中添加OEO能够增加肉鸡腹脂沉积，显著提高腹脂率，与上述结论不一致，造成差异分析原因可能是饲料营养配比及管理因素如温度及湿度控制问题导致的系统性差异。3.4OEO对肉鸡内脏器官和肠道发育的影响肉鸡内脏器官的发育直接影响其健康状况，器官指数可在一定程度上反映机体健康状况。法氏囊、胸腺和脾脏是禽类最主要的免疫器官，其指数可反映机体的免疫状况。本研究结果显示，添加OEO和CTC·HCl对上述指标均无显著影响。有研究发现，仅在小肠和盲肠中检测出添加在饲粮中的OEO活性成分，表明在消化道前段易被吸收[21]，可能会对肉鸡肠道的绒毛发育产生影响。肠道黏膜的结构完整性及发育程度是保证肉鸡健康和营养吸收的前提。OEO的活性成分（香芹酚、百里香酚）对肠道绒毛的发育具有促进作用，能够提高绒毛高度，提高肠道重量。原因与OEO具有以下功能有关：（1）杀菌。OEO的疏水性使其进入细菌细胞膜而引起膜渗透性增加，导致膜蛋白的凝结和膜电位的破坏，破坏膜结构使细胞内容物泄漏，最终细胞死亡[4]。（2）抗氧化功能。OEO中的酚类化合物可充当氢供体，减少过氧化氢产生；几种植物来源精油的氧化自由基吸收能力（ORAC）对比结果表明，OEO的ORAC大于肉桂、生姜和迷迭香等植物精油[22]。（3）抗炎和提高免疫力。OEO活性成分中的百里香酚和香芹酚能够抑制促炎因子IFN、IL-6和IL-β合成，提高抗炎因子IL-10的水平[5-6]，还能够提高动物体内吞噬细胞的数量、巨噬细胞的吞噬能力，提高动物免疫力[5]。（4）抗病毒。胆固醇常在病毒的包膜上与糖蛋白结合，促进病毒蛋白与细胞脂膜互作。OEO、香芹酚和百里酚可消耗病毒包膜中的胆固醇，从而抑制病毒融合[6]。本研究发现，日粮中添加OEO可显著改善肉鸡十二指肠和空肠的长度，表明OEO可促进肉鸡肠道的发育。3.5OEO替代抗生素对胸肌中氨基酸成分的影响日粮中添加OEO能够影响动物体内的氨基酸成分。谷氨酸具有形成肉鲜味、缓冲酸碱等味道的特殊功效，天冬氨酸是形成肉制品香味所必需的前体氨基酸。李菊等[23]研究表明，CTC·HCl能够提高天冬氨酸和苯丙氨酸的含量，降低谷氨酸的含量。本试验发现，日粮中添加CTC·HCl对肉鸡胸肌天冬氨酸、苯丙氨酸和谷氨酸的含量未产生显著影响；添加OEO后显著提高了风味氨基酸天冬氨酸和谷氨酸的含量，表明添加OEO可能对肉鸡的风味具有一定的改善作用，但具体原因有待进一步分析。4结论本试验条件下，日粮中添加OEO可显著提高肉鸡的生长性能。OEO和CTC·HCl均利于提高鸡肉的屠宰率和胸肌产量，且二者无明显差异。OEO可促进肉鸡十二指肠和空肠的发育，对肌肉肉色和风味具有一定的改善作用。