随着畜牧行业规模不断扩大,对饲料的需求量逐年增加。目前我国大宗能量饲料资源相对短缺且价格不断上涨,对畜牧行业的可持续发展具有一定的影响[1-2]。农业农村部下达了《饲料中玉米豆粕减量替代工作方案》,方案重点要求推进使用谷物或杂粕减量替代饲料中玉米豆粕。寻找玉米饲料替代品是解决玉米饲料资源短缺、缓解饲料需求压力的重要措施[3]。高粱是全球产量仅次于小麦、水稻、玉米及大麦的禾谷类作物,具有耐旱、耐涝、耐盐碱及耐贫瘠的特点,适宜在干旱及半干旱地区种植[4]。高粱籽粒的营养价值与玉米相近[5],籽粒中的单宁还能够有效对抗农作物病虫害[6]。目前关于饲用高粱在畜禽养殖领域的研究主要集中在青贮饲料方面,在家禽生产中应用的研究主要集中在肉鸡养殖,在蛋鸡生产中的研究较少[7-13]。本试验以不同水平的脱壳白高粱等比例替代日粮中的玉米,探究其对海兰褐蛋鸡的生产性能、蛋品质、营养物质表观消化率及血清抗氧化指标的影响,为其在蛋鸡日粮中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料海兰褐蛋鸡由河北保定环山农业有限公司提供。白高粱,单宁含量为0.45%,由河北农业大学提供;赖氨酸、蛋氨酸购自河北大午饲料有限公司。1.2试验设计选取720只50周龄产蛋率相近的海兰褐蛋鸡,随机分为5组,每组6个重复,每个重复24只鸡。A组为对照组,蛋鸡饲喂玉米-豆粕基础日粮;B组、C组、D组、E组分别在基础日粮中以5%、10%、15%及20%脱壳白高粱等比例替代日粮中的玉米,各组均平衡蛋氨酸及赖氨酸。试验期8周,其中预试期1周,正式试验期7周。试验日粮组成及营养水平见表1。参考GB/T 14699.1—2005采集试验日粮,粉碎,称取1 kg,按“四分法”减少至250 g,分装于样品袋中,标注,-20 ℃冰箱保存。采用钼酸铵比色法进行测定单宁(TA)含量。各组日粮单宁含量见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.009.T001表1试验日粮组成及营养水平(风干基础)项目A组B组C组D组E组原料组成/%玉米53.4548.4543.4538.4532.45豆粕21.2021.4521.4521.5021.50麦麸8.508.508.508.509.50高粱05.0010.0015.0020.00豆油3.002.902.902.902.90石粉8.658.658.658.658.65磷酸氢钙1.451.451.471.471.47预混料3.003.003.003.003.00食盐0.350.350.350.350.35赖氨酸0.250.100.100.060.06蛋氨酸0.150.150.130.120.12合计100.00100.00100.00100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)10.9210.9510.9310.9210.93粗蛋白/%15.3115.3415.3315.3215.32钙/%3.493.493.503.503.50总磷/%0.590.590.600.600.60有效磷/%0.330.330.330.340.34赖氨酸/%0.760.750.750.750.76蛋氨酸/%0.360.360.350.360.35注:1.每千克预混料为日粮提供:锌8 000.0 mg、铁6 000.0 mg、铜800.0 mg、硒30.0 mg、VK 50.0 mg、硫胺素80.0 mg、核黄素250.0 mg、泛酸220.0 mg、烟酸2 000.0 mg、VB 120.0 mg、VA 80万IU、VD 16万IU、VE 500 IU。2.营养水平中粗蛋白、钙、总磷及有效磷含量为实测值,其他均为计算值。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.009.T002表2各试验组日粮单宁含量项目A组B组C组D组E组含量0.110.130.150.160.18注:单宁含量为实测值。%1.3饲养管理蛋鸡采用3层阶梯式笼养,每笼3只鸡,各重复均匀分布。蛋鸡每日8:00、15:00饲喂,自由采食、饮水;每日光照16 h,按常规程序进行免疫。1.4测定指标及方法1.4.1生产性能试验开始后,记录每重复的蛋数、蛋重、鸡死亡数,每周结料,统计耗料量。计算每组产蛋率、平均日采食量和料蛋比。产蛋率=产蛋总数/(试验鸡数×试验天数)×100%(1)平均日采食量=总耗料重/(试验鸡数×试验天数)(2)料蛋比=总耗料重/总蛋重(3)1.4.2蛋品质试验结束,每重复随机选取3枚鸡蛋,标号,4 ℃冰箱保存,测定蛋品质。使用电子天平测量蛋重;取蛋钝端、中间、锐端蛋壳碎片,去掉内、外壳膜后采用测厚仪(Orka Teachnology Ltd)测定蛋壳厚度;使用蛋壳强度测定仪(Orka Technology公司)测定蛋壳强度;使用罗氏比色扇(Robotmation公司)测定蛋黄颜色;使用游标卡尺测量鸡蛋纵径长度及横径长度,计算蛋形指数;使用电子天平称量蛋黄重量;测量蛋黄周围蛋白层中心部分3个等距离点的高度,取其平均值为蛋白高度。蛋形指数=蛋的纵径长度/蛋的横径长度(4)蛋黄相对重=(蛋黄重/蛋重)×100%(5)哈夫单位=100×lg(H-1.7×W0.37+7.57)(6)式中:H为蛋白高度(mm);W为鸡蛋质量(g)。1.4.3营养物质表观消化率试验期最后3 d,以重复为单位,每24 h收集1次排泄物(去除杂物),-4 ℃冷藏保存,65 ℃烘干,粉碎,40目筛,置于密封袋中,-4 ℃保存。参照《饲料分析及饲料质量检测技术》[14]进行检测,采用凯氏定氮法测定粗蛋白(CP)含量;采用钒钼酸铵法测定磷(P)含量;采用高锰酸钾滴定法测定钙(Ca)含量;采用GB/T 6438—1992方法测定酸不溶灰分(AIA)含量。营养物质表观消化率=100%-(粪中养分含量×饲料中AIA含量/饲料中养分含量×粪中AIA含量)×100%(7)1.4.4血清抗氧化指标试验最后1 d禁食12 h,每重复随机抽取1只鸡,采集血液10 mL,常温静置30 min,3 000 r/min离心10 min,收集血清分装至离心管,-20 ℃保存。使用酶标仪按照试剂盒(南京建成生物工程研究所)说明书测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)。1.4.5经济效益根据日粮成本、饲喂量、鸡蛋价格、总产蛋量等费用计算经济效益。经济效益=(总蛋重×蛋价-总耗料量×饲料单价)(8)1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 22.0统计软件进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示,P0.05表示异显著。2结果与分析2.1脱壳白高粱对蛋鸡生产性能的影响(见表3)由表3可知,与A组相比,各试验组蛋鸡的产蛋率、平均日采食量、平均蛋重及料蛋比差异均不显著(P0.05),平均蛋重有降低的趋势。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.009.T003表3脱壳白高粱对蛋鸡生产性能的影响项目产蛋率/%平均日采食量/[g/(只·d)]平均蛋重/(g/枚)料蛋比P值0.520.390.090.22A组80.22±4.43123.07±5.0363.74±3.392.46±0.06B组79.93±5.99122.58±9.7762.79±2.342.45±0.77C组80.64±4.50122.98±7.9262.34±1.892.43±0.08D组81.02±4.91121.97±9.0162.81±5.012.42±0.06E组80.99±3.47122.40±5.7061.23±3.242.41±0.672.2脱壳白高粱对鸡蛋品质的影响(见表4)由表4可知,与A组相比,各试验组鸡蛋蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋黄相对重、蛋形指数、蛋白高度及哈夫单位差异均不显著(P0.05);D组、E组鸡蛋的蛋黄颜色分别降低了9.93%、16.97%(P0.05),D组鸡蛋的蛋黄颜色比B组、C组分别下降了7.27%、5.63%(P0.05),E组蛋黄颜色比B组、C组分别下降了14.61%、13.01%(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.009.T004表4脱壳白高粱对鸡蛋品质的影响项目蛋壳厚度/mm蛋壳强度/N蛋黄颜色蛋黄相对重/%蛋形指数蛋白高度/mm哈夫单位P值0.310.590.040.430.530.600.62A组0.41±0.2534.21±5.877.25±0.82a26.25±1.971.31±0.048.11±0.5289.18±3.71B组0.42±0.2435.29±6.387.05±0.94a28.85±2.011.35±0.477.44±0.4985.40±1.23C组0.41±0.1133.10±5.886.92±0.38ab29.19±2.331.33±0.057.47±0.6085.85±1.37D组0.42±0.0135.54±2.846.53±0.84b27.72±2.431.31±0.028.27±0.4290.43±4.98E组0.41±0.3134.84±4.146.02±1.29b26.69±2.661.29±0.027.91±0.7888.58±3.362.3脱壳白高粱对蛋鸡营养物质表观消化率的影响(见表5)由表5可知,与A组相比,各试验组蛋鸡Ca、P及CP表观消化率差异均不显著(P0.05),其中C组蛋鸡Ca表观消化率最高,C组和D组蛋鸡P表观消化率最高。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.009.T005表5脱壳白高粱对蛋鸡营养物质表观消化率的影响项目CaPCPP值0.830.790.33A组44.07±1.8533.02±2.3456.91±1.27B组44.04±2.5532.83±2.5356.15±2.20C组44.98±1.8532.92±1.6156.80±1.43D组43.68±1.4132.93±2.5156.36±2.26E组43.25±2.7133.35±3.4555.96±3.16%2.4脱壳白高粱对蛋鸡血清抗氧化指标的影响(见表6)由表6可知,与A组相比,各试验组蛋鸡血清MDA含量和GSH-Px、SOD、CAT的活性及T-AOC差异均不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.009.T006表6脱壳白高粱对蛋鸡血清抗氧化指标的影响项目MDA/(μmol/L)GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)T-AOC/(U/mL)CAT/(U/mL)P值0.430.630.530.320.47A组3.32±0.351 213.61±71.04205.68±55.100.48±0.027.96±0.75B组3.39±0.761 180.03±25.44201.63±58.230.49±0.068.03±0.66C组3.51±0.351 177.17±44.67202.28±36.670.48±0.037.87±0.48D组3.41±1.031 118.51±85.06199.37±20.360.47±0.048.13±0.77E组3.41±1.001 162.04±44.61200.09±39.330.49±0.038.07±0.322.5脱壳白高粱对经济效益的影响(见表7)由表7可知,与A组相比,C组、D组、E组饲料单价较分别提高了0.36%、0.73%、1.47%,B组、C组利润分别提高了3.42%、3.59%,D组、E组蛋鸡的利润分别降低了7.96%、9.62%,以C组利润较好。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.009.T007表7脱壳白高粱对蛋鸡经济效益的影响组别饲料单价/(元/kg)饲料用量/kg鸡蛋单价/(元/kg)鸡蛋产量/kg利润/元A组2.72744.336.67386.78555.28B组2.72723.226.67381.02574.24C组2.73713.546.67378.29563.08D组2.74741.306.67381.14511.05E组2.76716.086.67371.55501.853讨论3.1脱壳白高粱对蛋鸡生产性能的影响我国高粱主要应用于生产淀粉,饲用比例较小,随着玉米价格的增长,高粱作为饲料原料逐渐被市场所接受[15]。目前有关高粱籽粒在蛋鸡生产应用中的相关研究较少,且研究结果并不一致。Armanious等[16]研究发现,日粮中添加高粱籽粒对蛋鸡产蛋率无不利影响。闫凤霞等[17]采用两种不同单宁含量的高粱分别替代50%及100%玉米对蛋鸡进行饲喂,结果发现,低单宁高粱(0.15%)及高单宁(1.24%)不同比例替代玉米对蛋鸡产蛋率、平均日采食量、料蛋比均未产生显著影响。陈伟等[18]研究表明,采用低单宁高粱替代日粮中60%玉米对蛋鸭产蛋前期及高峰期产蛋率、料蛋比均无负面影响。但Jacob等[19]研究表明,日粮中添加高粱籽粒能够显著降低蛋鸡的产蛋性能。本试验结果表明,使用脱壳白高粱替代玉米饲喂海兰褐蛋鸡对产蛋率、料蛋比、平均日采食量及料蛋比均无显著影响,与上述研究结果基本一致,原因可能与日粮中单宁含量有关。顾洪娟等[20]认为,鸡饲料中单宁的含量应低于0.5%,本试验选用的高粱为低单宁的白高粱,经过脱壳处理后日粮中单宁含量进一步降低,对蛋鸡生产性能的影响较小。3.2脱壳白高粱对蛋鸡蛋品质的影响蛋壳是鸡蛋抵抗外界压力及微生物入侵的屏障,蛋壳强度、蛋壳厚度是衡量蛋壳质量的重要指标。日粮中添加高粱对蛋鸡蛋壳质量、蛋形指数等无显著影响[16,19,21]。蛋白高度能够反映鸡蛋新鲜度,数值越高表明蛋白越黏稠,蛋品质越好。蛋黄颜色与日粮中类胡萝卜素等脂溶性维生素含量有关,脂溶性维生素含量越高,蛋黄颜色越深。陈伟等[18]研究表明,日粮添加不同比例高粱籽粒对鸭蛋中蛋白高度及哈夫单位均未产生显著影响,但蛋黄颜色会随着高粱添加比例的升高而降低。本试验结果表明,采用不同水平脱壳白高粱替代日粮日粮中的玉米对蛋鸡蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋形指数、蛋白高度、哈夫单位及相对蛋黄重均无显著影响,但添加15%、20%比例脱壳白高粱显著降低了蛋黄颜色,与上述研究结论一致。钙、磷是影响蛋壳质量的主要营养物质,而单宁会与Ca、P结合形成螯合物,影响其在蛋壳中的沉积,进而影响蛋壳质量。脱壳白高粱单宁含量低,对Ca、P在蛋壳中沉积效果的影响较小,不会降低蛋壳质量。单宁会影响蛋白在蛋中的合成,进而影响蛋白高度及哈夫单位。本试验各组单宁含量均较低,对蛋白合成代谢影响较小,蛋白质量未降低。蛋黄颜色主要由沉积在蛋中的叶黄素、类胡萝卜素的含量决定,而玉米是叶黄素的主要来源;当高粱添加水平过高时,玉米含量相对降低,叶黄素在蛋黄中的沉积减少,导致蛋黄颜色变浅。3.3脱壳白高粱对蛋鸡营养物质表观消化率的影响单宁、醇溶蛋白、植酸是高粱主要的抗营养因子。单宁可与蛋白、Ca、P等结合形成复合物,降低单胃动物对营养物质的消化吸收能力[6]。醇溶蛋白分子间交联较多,蛋白与淀粉之间存在很强的结合键,蛋白酶难以对其进行分解[22]。植酸具有很强的螯合能力,可与多种矿物质离子螯合形成不溶性复合物,影响矿物质的吸收,还可与蛋白结合,降低蛋白的利用率[23]。胡贵丽等[24]研究表明,日粮添加不同品种高粱对黄羽肉鸡Ca、P及CP的表观消化率无显著影响。闫凤霞等[17]研究发现,使用高粱替代日粮50%及100%玉米对蛋鸡CP表观消化率无不良影响,陈伟等[18]对蛋鸭的研究结果与其一致。但Iji等[25]研究发现,当日粮中单宁含量高于20 g/kg时可显著降低肉鸡回肠中CP的消化率。本试验结果表明,日粮中添加脱壳白高粱对海兰褐蛋鸡Ca、P及CP的表观消化率均无显著影响。白高粱单宁含量低,且抗营养因子主要存在于高粱壳中,经过脱壳处理后高粱中的单宁、醇溶蛋白及植酸含量进一步降低,从而降低了抗营养因子对营养物质吸收的阻碍作用,表明采用一定水平的脱壳白高粱替代玉米对蛋鸡进行饲喂具有可行性。3.4脱壳白高粱对蛋鸡血清抗氧化指标的影响GSH-Px和SOD是生物体内重要的抗氧化酶,具有清除机体内部氧化自由基的作用,可间接反映机体氧化应激过程。体内自由基增多时,机体产生氧化反应,为清除体内过多的氧化自由基,抗氧化酶活性增强[26]。CAT的主要作用是清除体内的过氧化氢,使细胞免受H2O2的毒害,从而起到抗氧化作用[27]。MDA是脂质过氧化反应的最终产物,能够直接反应机体内脂质过氧化速率及强度,从而判断组织细胞受自由基损伤的程度[28]。T-AOC是反映酶及非酶抗氧化体系总体水平的指标,反映酶及非酶系统对外来刺激的代偿能力及机体内自由基的代谢状况。T-AOC、GSH-Px、SOD及CAT活性越高,MDA含量越低[29]。胡贵丽等[30]研究不同品种高粱替代玉米对黄羽肉鸡血清抗氧化指标的影响时发现,试验前期,各试验组肉鸡血清GSH-Px活性差异均不显著;试验后期,日粮单宁含量较高组的肉鸡血清GSH-Px活性显著低于对照组及单宁含量较低的试验日粮组。赵建飞等[31]研究表明,日粮单宁含量过高可以显著降低肉鸡前期血清T-SOD活性,对后期T-SOD、GSH-Px活性及MDA含量均无显著影响。本试验中,日粮添加不同水平脱壳白高粱等比例替代玉米对海兰褐蛋鸡血清MDA含量和SOD、GSH-Px、CA的活性及T-AOC均无显著影响,与上述结论略有不同。正常情况下,机体代谢产生的自由基和内源性抗自由基活性物质处于动态平衡,但在应激条件下,体内自由基含量增多,降低血清抗氧化能力,MDA含量增加[32]。单宁可通过清除机体代谢产生的活性氧、调控机体还原性谷胱甘肽系统及硫氧还蛋白系统、与金属离子螯合以及调控与氧化应激有关的信号通路发挥抗氧化作用[33-36]。本试验使用脱壳白高粱,单宁含量低,对蛋鸡血清抗氧化性能未起显著的促进作用。4结论使用5%、10%、15%及20%脱壳白高粱等比例替代日粮中的玉米,对海兰褐蛋鸡生产性能、营养物质表观消化率、血清生化指标、抗氧化指标均无显著影响。添加比例为5%及10%组经济效益有所增加。综合考虑各项指标,本试验条件下,使用5%的脱壳白高粱替代日粮中玉米效果最佳。
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