青海地处青藏高原，具有海拔高、气候干旱等气候特点，是全国春油菜最佳生态适宜种植区之一。油菜是青海农牧的重要收入来源[1-2]，油菜在青海的总播种面积平均达140 400 hm2，油菜籽产量达28.7万t，可收集秸秆量达75.77万t[3]。秸秆的利用途径有肥料、饲料、燃料、基料、原料，秸秆用作饲料能够解决青藏高原饲草短缺的问题[4-6]。油菜秸秆的处理方式包括物理、化学、生物等[7-8]。油菜秸秆营养品质不够优质，蒸汽爆破处理可破坏油菜秸秆的纤维结构，提高纤维素利用率，进而提高油菜秸秆的饲用价值[9-11]。但油菜秸秆单独作为饲料仍然存在营养价值较低、适口性较差等问题[12-14]。饲料间互作可使某些营养成分利用率或采食量高于单一饲料加权值，表明组合产生了正向效应，此类方法成为提高饲料利用率的重要措施之一[15-17]。因此，本试验将青藏高原常见粗饲料（青贮玉米、燕麦干草和小麦秸秆）与蒸汽爆破油菜秸秆按照不同比例组合，探究各配比对体外产气及瘤胃发酵特性的影响，明确蒸汽爆破油菜秸秆与青藏高原常见粗饲料组合的最佳比例及适用性，为高寒地区反刍动物饲料配制及缓解高寒地区饲草压力提供参考。1材料与方法1.1试验材料蒸汽爆破油菜秸秆选用青海省大通县长宁镇青杂5号风干样品，蒸汽爆破加工工艺参数为压强1.90 MPa、预浸水分含量30%、维压时间230 s。玉米青贮、燕麦干草、小麦秸秆采自青海省湟中区丰泰种养殖专业合作社，燕麦干草、小麦秸秆经65 ℃干燥制成风干样，青贮玉米经-40 ℃冻干，所有样品粉碎，过1 mm筛，密封保存。4种粗饲料及试验用精料常规营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T001表14种粗饲料及试验用精料常规营养水平营养水平精料玉米青贮燕麦干草小麦秸秆蒸汽爆破油菜秸秆粗蛋白质11.024.693.924.084.64粗脂肪3.712.062.411.930.73中性洗涤纤维18.0853.2955.9870.9159.88酸性洗涤纤维6.7429.3431.0543.2352.85钙0.711.171.051.011.09磷0.420.340.150.130.08%1.2试验设计饲粮精粗比为4∶6，蒸汽爆破油菜秸秆与青藏高原常见粗饲料（青贮玉米、燕麦干草、小麦秸秆）分别以10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50比例组合，作为底物进行发酵试验，采用单因素试验设计，每个组合重复3次。饲粮体外发酵72 h，测定累积产气量、挥发性脂肪酸、干物质降解率、中性洗涤纤维降解率、酸性洗涤纤维降解率。1.3测定指标及方法1.3.1体外产气试验1.3.1.1试验瘤胃液供体动物本试验的瘤胃液供体为3头装有瘤胃瘘管、体重（280.5±15.0）kg的成年大通牦牛，每日饲喂燕麦青干草2次，自由饮水。1.3.1.2人工瘤胃液配制称取（220.0±0.5）mg组合样品，装入自制尼龙袋，放入100 mL发酵管，内塞上均匀涂抹适量工业凡士林，重复3次，每次试验做3个空白对照。人工瘤胃营养液制备采用Menke等[18]方法。人工瘤胃液组成见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T002表2人工瘤胃液组成项目最终容积/mL5001 0001 5002 000蒸馏水237.50475.00712.50950.00矿物质溶液120.00240.00360.00480.00缓冲液120.00240.00360.00480.00微量元素溶液0.060.120.180.24刃天青0.611.221.832.44蒸馏水23.8047.5071.3095.001 mol/L NaOH1.002.003.004.00Na2S·9H2O168.00336.00504.00672.00mL晨饲前取3头牦牛的瘤胃液，充分混匀，在通入CO2前提下，将人工营养液与瘤胃液以2∶1的体积比混合；每个培养管加入（30.0±0.5）mL混合营养液。排空培养管内全部气体，记录起始刻度值，转入39 ℃的自动振荡人工瘤胃装置培养。1.3.2体外产气量及降解率计算在0、3、6、9、12、24、36、48、60、72 h取出培养管，读数记录，采用产气动力学模型分析数据。GP=a+b(1-e-ct) (1)式中：GP为t时刻的产气量（mL）；a+b为理论总产气量（mL），本文采用B表示；c为慢速降解部分的产气速率（%/h），本文采用C表示；t为发酵时间（h）。培养72 h，培养管置于冰水浴终止发酵。体外干物质降解率(IVDMD)=(1-发酵后样品干物质质量/发酵前样品干物质质量)×100%(2)中性洗涤纤维降解率(NDFD)=[底物NDF(%)-残留底物NDF(%)]/底物NDF(%)×100%(3)酸性洗涤纤维降解率(ADFD)=[底物ADF(%)-残留底物ADF(%)]/底物ADF(%)×100%(4)式中：NDF为中性洗涤纤维；ADF为酸性洗涤纤维。1.3.3组合效应评价方法单项组合效应(SFAEI)＝(实测值-加权值)/加权值(5)加权值=一种饲料实际测定值×所占比例+另一种饲料实际测定值×所占比例(6)多项组合效应(MFAEI)=各单项组合效应之和(7)1.4数据统计与分析数据采用Excel 2010软件进行整理，SPSS 19.0软件进行单因素方差分析，LSD法进行多重比较。结果以平均值和标准误（SEM）表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与粗饲料组合对产气量的影响（见表3~表5）由表3可知，蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米以不同比例组合发酵，体外产气量随着培养时间的延长而增加。发酵36~72 h，蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米比例为10∶90时，产气量、理论最大产气量均最高，随着油菜秸秆比例上升，体外产气量呈下降趋势（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T003表3不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米对累计产气量及参数模型的影响项目GP12 h/mLGP24 h/mLGP36 h/mLGP48 h/mLGP60 h/mLGP72 h/mLB/mLC/(%/h)100%青贮玉米28.30A43.41A50.95A56.30AB59.13AB60.97A62.95A0.062A10∶9027.63AB43.39A51.20A56.97A60.30A62.63A65.14A0.053C20∶8026.47B41.83AB49.11AB53.97BC57.13B59.30AB62.83AB0.051C30∶7026.47B41.33ABC49.61AB54.47ABC57.80AB59.13AB62.81AB0.059B40∶6024.97C39.67C47.78B53.13C56.47B58.47B60.72B0.052C50∶5027.30AB41.17BC48.78AB53.97BC56.80B58.97B61.71B0.043D100%油菜秸秆19.46D32.26D40.00D46.76D50.21C52.05D55.27C0.039ESEM0.630.820.830.740.730.750.720.001P值0.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 1注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。由表4可知，蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草比例为20∶80时，各时间点的体外产气量均极显著高于其余比例（P0.01）；理论最大产气量最高，极显著高于其余比例（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T004表4不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草对累计产气量及参数模型的影响项目GP12 h/mLGP24 h/mLGP36 h/mLGP48 h/mLGP60 h/mLGP72 h/mLB/mLC/(%/h)100%燕麦秸秆24.97D38.67C44.33C51.50C55.37C58.53C62.17CD0.052B10∶9024.97D38.67C44.33C51.50C55.37C58.53C62.17CD0.052B20∶8029.80A46.67A53.00A61.83A66.20A69.20A74.95A0.048C30∶7027.80B42.67B50.00B57.83B61.87B63.20B66.58B0.046C40∶6026.47C40.33C46.17C53.67C57.70C60.37BC65.39BC0.053AB50∶5025.30CD38.33C44.17C51.33C55.37C58.37C61.74D0.055A100%油菜秸秆19.46E32.26D40.00D46.76D50.21D52.05D55.27E0.039DSEM0.680.940.921.061.121.131.290.001P值0.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 1蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草比例为50∶50时，慢速降解速率部分的产气速率最高，与比例为40∶60时的慢速降解速率部分产气速率差异不显著（P0.05），极显著高于其余比例（P0.01）。由表5可知，蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆比例为40∶60时，体外产气量最高，发酵24、72 h时，极显著高于其余比例（P0.01）；理论最大产气量最高，与20∶80及小麦秸秆单一发酵差异不显著（P0.05），极显著高于其余比例（P0.01）。蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆比例为20∶80时，慢速降解部分速率极显著高于其余比例（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T005表5不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆对累计产气量及参数模型的影响项目GP12 h/mLGP24 h/mLGP36 h/mLGP48 h/mLGP60 h/mLGP72 h/mLB/mLC/(%/h)100%小麦秸秆22.80B37.50C43.47B49.80BC52.80BC55.13B58.19A0.047B10∶9022.47BC38.67BC42.97BC48.57CD50.97CD52.47BC54.18CD0.040C20∶8023.97A39.67B45.80A51.97AB53.97AB55.13B57.17AB0.056A30∶7020.47D33.83E39.47D45.80E48.30D50.13C53.01CD0.031E40∶6024.13A41.50A46.97A53.63A56.30A57.97A58.91A0.034D50∶5021.63C35.67D41.13CD46.80DE49.30D50.80C51.99D0.025E100%油菜秸秆19.46D32.26E40.00D46.76DE50.21CD52.05C55.27BC0.039CSEM0.380.710.630.660.640.640.620.002P值0.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 12.2不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与粗饲料组合对挥发性脂肪酸的影响（见表6~表8）由表6可知，总酸、乙酸、丙酸含量随油菜秸秆比例的增加呈降低趋势。青贮玉米单一发酵时，异丁酸含量最高，与10∶90组合差异不显著（P0.05），二者极显著高于其余比例（P0.01）。青贮玉米单一发酵时，丁酸含量最高，极显著高于其余比例（P0.01）。青贮玉米单一发酵时，异戊酸含量最高，与蒸汽爆破油菜秸秆发酵无显著差异（P0.05），极显著高于其余比例（P0.01）。蒸汽爆破油菜秸秆单一发酵时，戊酸含量最高，极显著高于其余比例（P0.01）。蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米比例为50∶50时，乙丙比最高，极显著高于其余比例（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T006表6不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米对挥发性脂肪酸的影响项目乙酸/(mmol/L)丙酸/(mmol/L)异丁酸/(mmol/L)丁酸/(mmol/L)异戊酸/(mmol/L)戊酸/(mmol/L)总酸/(mmol/L)乙丙比100%青贮玉米32.87A18.42A1.49A10.20A2.44A2.55B67.97A1.82C10∶9033.63A18.53A1.45A9.74B2.30B2.62B68.27A1.84C20∶8032.74A17.86A1.40BC9.07C2.06C2.19C65.31AB1.89BC30∶7032.14AB16.94B1.32D8.59C2.02C1.82D62.82B1.97B40∶6032.30AB16.97B1.34CD8.60C2.11C1.75D63.07B1.97B50∶5030.85B15.41C1.21E7.90E1.78D1.68E58.84C2.11A100%油菜秸秆24.14C15.57C1.40BC9.35BC2.36AB3.17A56.03C1.08DSEM0.690.280.020.170.050.121.000.07P值0.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 1由表7可知，除戊酸外，蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草比例为10∶90时，其余挥发性脂肪酸指标均最高。随着蒸汽爆破油菜秸秆比例增加，乙酸含量呈先上升后下降趋势。蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草比例为10∶90和50∶50时，二者异丁酸含量差异不显著（P0.05），10∶90极显著高于其余比例（P0.01）。蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草比例为10∶90、20∶80、30∶70和50∶50时，丁酸和总酸含量无显著差异（P0.05），极显著高于蒸汽爆破油菜秸秆单一发酵（P0.01）。比例为10∶90时，异戊酸含量极显著高于其余比例（P0.01）。比例为50∶50时，戊酸含量极显著高于其余比例（P0.01）。蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草比例为10∶90、20∶80、30∶70、40∶60和50∶50时，乙丙比极显著高于油菜秸秆单一发酵（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T007表7不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草对挥发性脂肪酸的影响项目乙酸/(mmol/L)丙酸/(mmol/L)异丁酸/(mmol/L)丁酸/(mmol/L)异戊酸/(mmol/L)戊酸/(mmol/L)总酸/(mmol/L)乙丙比100%燕麦干草37.19C26.70A2.33D17.92C4.04E4.42B92.58BC1.39B10∶9040.13A27.20A2.65A19.79A4.86A4.47B99.01A1.48A20∶8039.56AB26.70A2.52BC18.92AB4.51BC4.43B96.64AB1.48A30∶7038.40ABC26.97A2.48C19.09A4.36CD4.51B95.81ABC1.42AB40∶6036.68C25.85A2.41CD18.07BC4.21D4.48B91.70C1.42AB50∶5038.03BC26.53A2.61AB19.05A4.61B4.75A95.58ABC1.43AB100%油菜秸秆24.14D15.57B1.40E9.35D2.36F3.17C56.03D1.08CSEM1.160.880.090.760.170.113.150.03P值0.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 1由表8可知，蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆单一发酵时，乙酸含量差异不显著（P0.05），小麦秸秆单一发酵的乙酸含量极显著高于各组合发酵（P0.01）。蒸汽爆破油菜秸秆单一发酵时，总酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸含量均最高，极显著高于其余比例（P0.01）。蒸汽爆破油菜秸秆单一发酵时，乙丙比最低，极显著低于其余比例（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T008表8不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆对挥发性脂肪酸的影响项目乙酸/(mmol/L)丙酸/(mmol/L)异丁酸/(mmol/L)丁酸/(mmol/L)异戊酸/(mmol/L)戊酸/(mmol/L)总酸/(mmol/L)乙丙比100%小麦秸秆25.25A12.19B0.85B6.14B1.28B1.46B47.17B2.20C10∶9023.11BC10.55DE0.74DE5.13D1.13C1.27C41.94CD2.28ABC20∶8023.51B11.21C0.80C5.48C1.12C1.44B43.56C2.22BC30∶7023.12BC10.87CD0.77C5.13D1.15C1.20CD42.24CD2.24ABC40∶6023.54B10.86D0.73DE5.17D0.93D1.16CD42.39CD2.32AB50∶5022.20C10.15E0.72DE4.96D0.97D1.05D40.05D2.34AB100%油菜秸秆24.14AB15.57A1.40A9.35A2.36A3.17A56.03A1.08DSEM0.230.390.050.330.100.151.150.09P值0.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 10.000 12.3不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与粗饲料组合对降解率的影响（见表9~表11）由表9可知，蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米比例为10∶90时，IVDMD最高，与30∶70组合以及青贮玉米单一发酵差异不显著（P0.05），极显著高于其余比例（P0.01）。蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米比例为10∶90时，NDFD最高，与30∶70、40∶60组合及青贮玉米单一发酵差异不显著（P0.05），极显著高于其余比例（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T009表9不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米对降解率的影响项目IVDMDNDFDADFD100%青贮玉米74.19AB56.64AB55.75AB10∶9075.27A58.80A57.62A20∶8071.44BC54.33C52.06C30∶7072.16ABC57.91A55.51AB40∶6069.09CD56.40AB53.81BC50∶5067.17D55.32BC53.51BC100%油菜秸秆57.95E50.16D47.14DSEM1.970.850.69P值0.000 10.000 10.000 1%由表10可知，随着蒸汽爆破油菜秸秆比例上升，IVDMD和NDFD呈现先上升后下降的趋势，均在10∶90组合时达到最高。蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦甘草比例为10∶90时，ADFD最高，极显著高于其余比例（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T010表10不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草对降解率的影响项目IVDMDNDFDADFD100%燕麦干草70.90AB57.90D59.44C10∶9073.88A70.28A69.66A20∶8071.45AB65.24B59.48C30∶7069.87B66.68B65.41B40∶6069.93B61.36C58.07C50∶5069.64B58.60CD56.76C100%油菜秸秆57.95C50.16E47.14DSEM1.121.421.50P值0.000 10.000 10.000 1%由表11可知，蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆比例为10∶90、20∶80、40∶60、50∶50以及小麦秸秆单一发酵时，IVDMD极显著高于30∶70与油菜秸秆单一发酵（P0.01）。10∶90、20∶80、50∶50组合以及油菜秸秆单一发酵时，NDFD极显著高于30∶70组合（P0.01）。10∶90和20∶80组合时，ADFD极显著高于其余比例（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T011表11不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆对降解率的影响项目IVDMDNDFDADFD100%小麦秸秆65.78A48.97B48.26B10∶9063.40A51.54A51.96A20∶8065.24A51.84A51.77A30∶7059.76B42.00C41.00C40∶6063.99A47.33B46.35B50∶5066.13A49.53AB48.13B100%油菜秸秆57.95C50.16AB47.14BSEM1.380.741.31P值0.000 10.000 10.000 1%2.4不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与粗饲料组合的组合效应（见表12~表14）由表12可知，蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米以不同比例混合发酵，产气量、IVDMD和乙酸在各个比例下均出现正组合效应。NDFD和ADFD在20∶80时出现负组合效应，其余比例均为正组合效应。总酸在10∶90时出现正组合效应，其余比例均为负组合效应。丙酸在30∶70、40∶60、50∶50时出现负组合效应，其余比例均为正组合效应。蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米比例为20∶80时，多项组合效应值为负组合效应，其余比例均为正组合效应，比例10∶90时效应值最大，为0.263 6。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T012表12不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米的组合效应项目10∶9020∶8030∶7040∶6050∶50多项组合效应值0.263 6-0.001 80.148 20.178 40.050 8单项组合效应值产气量0.040 70.001 90.014 10.018 30.041 7IVDMD0.035 90.007 00.039 40.020 20.016 4NDFD0.047 8-0.018 70.055 50.041 70.034 7ADFD0.047 4-0.037 80.042 20.028 00.038 6总酸0.021 9-0.004 2-0.025 0-0.002 0-0.053 7乙酸0.048 60.049 40.058 80.090 50.076 0丙酸0.021 30.000 6-0.036 9-0.018 3-0.102 9由表13可知，产气量、IVDMD、NDFD和ADFD均为正组合效应，总酸、乙酸、丙酸均为负组合效应。多项组合效应评估发现，蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草组合比例20∶80时，为正组合效应，其余比例均为负组合效应，最优的蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草组合比例为20∶80。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T013表13不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草组合效应项目10∶9020∶8030∶7040∶6050∶50多项组合效应值-0.000 50.059 1-0.012 2-0.195 7-0.501 5单项组合效应值产气量0.011 10.172 90.104 70.073 40.052 8IVDMD0.057 90.043 90.040 90.060 20.074 9NDFD0.187 20.136 20.166 50.106 80.078 0ADFD0.164 40.042 00.147 70.061 10.061 1总酸-0.145 8-0.123 6-0.179 6-0.196 4-0.288 4乙酸-0.087 8-0.064 6-0.077 7-0.053 8-0.112 4丙酸-0.187 5-0.147 7-0.214 7-0.247 0-0.367 5由表14可知，10∶90、30∶70和50∶50组合的体外产气量为负组合效应，其余为正组合效应。10∶90和30∶70组合的IVDMD为负组合效应，其余为正组合效应。30∶70、40∶60和50∶50组合的NDFD为负组合效应，其余为正组合效应。30∶70、40∶60组合的ADFD为负组合效应，其余为正组合效应。10∶90组合的总酸为正组合效应，其余均为负组合效应，各组合的乙酸、丙酸均为负组合效应。蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆组合各个比例的多项组合效应值均为负组合效应。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.022.T014表14不同比例蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆组合效应项目10∶9020∶8030∶7040∶6050∶50多项组合效应值-0.370 2-0.186 0-0.958 2-0.482 1-0.750 5单项组合效应值产气量-0.044 80.011 2-0.081 30.070 2-0.054 9IVDMD-0.025 20.015 7-0.061 40.021 00.064 5NDFD0.047 60.050 8-0.174 5-0.044 7-0.000 7ADFD0.073 40.072 1-0.168 9-0.031 50.008 9总酸0.145 8-0.123 6-0.179 6-0.196 4-0.288 4乙酸-0.087 8-0.064 6-0.077 7-0.053 8-0.112 4丙酸-0.187 5-0.147 7-0.214 7-0.247 0-0.367 53讨论3.1蒸汽爆破油菜秸秆与青藏高原常见粗饲料组合对体外产气参数的影响体外产气参数是反映瘤胃中微生物对饲料中有机物降解能力的指标，产气量高表明饲料发酵充分[19-20]。本试验中，蒸汽爆破油菜秸秆与青藏高原常见3种粗饲料组合的体外产气量均随着发酵时间的延长而增加，与涂远璐等[21]、唐庆凤等[22]研究结果一致。本试验中，随着蒸汽爆破油菜秸秆比例增加，与青贮玉米和燕麦干草组合时理论最大产气量呈先上升后下降趋势，与小麦秸秆组合时无规律变化；蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米、燕麦干草、小麦秸秆组合时，理论最大产气量最佳比例分别为10∶90、20∶80、40∶60。可能因为牧草品种间营养物质的互补能够提高瘤胃微生物对牧草中营养物质的利用率。青贮玉米和燕麦干草的营养品质相对优于蒸汽爆破油菜秸秆，蒸汽爆破油菜秸秆比例较低时，理论最大产气量较高；小麦秸秆与蒸汽爆破油菜秸秆营养品质相似，比例接近时理论最大产气量达到最佳。张亚格等[23]研究牧草间的组合效应发现，柱花草和王草组合能够显著提高牧草产气量。韩肖敏等[24]研究玉米秸秆与多种粗饲料的组合效应，发现牧草组合的体外产气量高于单种牧草体外产气量，与本试验结果一致。3.2蒸汽爆破油菜秸秆与青藏高原常见粗饲料组合对体外发酵指标的影响反刍动物瘤胃微生物将日粮中碳水化合物发酵为挥发性脂肪酸，是反刍动物的重要能量来源，其浓度及组成成分反映了瘤胃微生物的发酵模式[25-27]。本试验中，随着蒸汽爆破油菜秸秆比例增加，蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米组合的总酸、乙酸、丙酸含量均呈降低趋势；蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草组合的总酸、乙酸呈先上升后降低的趋势，丙酸呈降低趋势。蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆组合，蒸汽爆破油菜秸秆单一发酵时总酸、丙酸含量达到最高；小麦秸秆单一发酵时乙酸含量最高。蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米和燕麦干草组合会提高挥发性脂肪酸含量，可能因为牧草组合提高了可用碳水化合物含量。刁波等[28]探究不同粗饲料组合对瘤胃发酵特性的影响发现，牧草组合会显著提高挥发性脂肪酸含量。蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆组合的挥发性脂肪酸降低，可能因为牧草的营养品质相似、营养价值不够高。IVDMD是体外法评价牧草最重要的指标，可以直接反映牧草可被家畜利用的程度[29-30]。本试验中，蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米、燕麦干草组合干物质降解率先上升后降低，与小麦秸秆组合在50∶50时效果最佳。韩肖敏等[24]研究青贮玉米与稻草等粗饲料结合发现，牧草组合能够有效提高牧草消化率，与本研究结果一致。3.3蒸汽爆破油菜秸秆与青藏高原常见粗饲料组合对组合效应指数的影响SFAEI对粗饲料组合的某一指标进行评价，MFAEI综合多项指标对粗饲料组合进行评价，更具代表性[31-32]。本试验中，蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米组合中10∶90的各项SFAEI均为正组合效应，MFAEI中10∶90、30∶70、40∶60和50∶50均为正组合效应，10∶90时正组合效应值最大。蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草组合中，各个比例组合的SFAEI均出现部分负组合效应，MFAEI中仅20∶80为正组合效应，其余比例均为负组合效应。蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆组合的大部分SFAEI为负组合效应，MFAEI各个比例均为负组合效应。粗饲料组合比例合适时，其营养物质发生互补，大部分组合出现正组合效应[33-35]，与本试验的蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米、燕麦干草组合试验结果相似。但本试验中蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆在各个比例下均出现负组合效应，可能因为两种粗饲料营养物质接近且营养价值均较低。4结论本试验中，蒸汽爆破油菜秸秆与青贮玉米的最佳组合比为10∶90，蒸汽爆破油菜秸秆与燕麦干草最佳组合比为20∶80，蒸汽爆破油菜秸秆与小麦秸秆组合均为负组合效应，不宜组合使用。