硒在生物体内参与蛋白质合成，是谷胱甘肽过氧化物酶的主要成分，参与机体的多种生理功能。硒在生物体内的主要功能是作为抗氧化剂，通过谷胱甘肽过氧化物酶清除机体内过量的自由基[1-2]。硒具有调节动物机体免疫力、促进机体代谢等功能[3]。有机硒在动物机体内消化、吸收、代谢的生物活性高于无机硒。近年来，富硒酵母在动物养殖生产中得到广泛应用，可以将无机硒转变为有机硒，转化的有机硒安全无毒、易被机体吸收，能够提高硒的利用率[4-5]。目前，富硒酵母在动物生产中的应用主要集中在猪、家禽等方面[6-7]，在反刍动物生产中的应用较少见，尤其是在幼龄反刍动物生产中的应用。羔羊断奶后是养殖的关键阶段，羔羊机体的多项生理功能尚未完全建立，对外界因素应激的抵抗力较弱，断奶饲料转变使羔羊容易感染多种疾病，如消化道、呼吸道疾病等[8]。幼龄羔羊机体缺硒可能导致白肌病[1]。因此，本研究探讨饲料添加不同水平的富硒酵母对羔羊生长性能、血清指标及抗病力的影响，为富硒酵母在其养殖中的合理使用提供参考。1材料与方法1.1试验材料富硒酵母购自安琪酵母有限公司，硒的有效含量为2 000 mg/kg；选用体重约20.0 kg的“杜泊羊×小尾寒羊”杂交公羔羊，已免疫，驱虫。1.2试验设计试验选取体重相近、体况良好、健康的“杜泊羊×小尾寒羊”杂交公羔60只，按照单因素随机试验设计，随机分为4个组，每组5个重复，每个重复3只羔羊。各组羔羊依次饲喂含有0、0.15、0.30、0.45 mg/kg富硒酵母的基础日粮。预试期7 d，正式试验期70 d。试验基础日粮参照《肉羊饲养标准》（NY/T 816—2004）配制，基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.005.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米34.65代谢能/(MJ/kg)10.13玉米皮5.50粗蛋白/%14.86玉米胚芽粕13.00粗脂肪/%3.05豆粕8.50粗灰分/%7.15棉籽粕6.00中性洗涤纤维/%32.51花生壳粉16.00酸性洗涤纤维/%16.74玉米秸秆10.00钙/%0.95食盐0.35磷/%0.47磷酸氢钙0.15小苏打0.85预混料5.00注：1.预混料购自甘肃天邦饲料有限公司。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验开始前，对试验羊舍进行清理和消毒。试验羔羊在试验前注射羊痘、小反刍兽疫等疫苗。预试期试验羔羊饲喂基础日粮，对羔羊进行分组。试验羔羊每日饲喂2次（7：30、17：00），自由饮水。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能正式试验开始前和试验结束时，各组试验羔羊禁食12 h，禁水2 h，空腹称重，统计试验期间内每只羊的平均日增重；试验期间，准确记录每组羔羊的采食量，计算平均日采食量及料重比；观察羔羊的健康状况，记录腹泻羊只数，统计每组羔羊的腹泻率。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)腹泻率=(腹泻头数×腹泻天数)/(试验天数×试验头数)(4)1.4.2血常规指标试验结束每个重复选取2只羔羊，颈静脉采血10 mL，分为两份，1份用于检测血常规、血液生化检测，1份用于免疫、抗氧化指标检测。血常规主要检测白细胞数量、红细胞数量、血细胞比容、平均红细胞血红蛋白浓度、平均红细胞血红蛋白含量、血小板数量，检测仪器为PE-6800VET全自动动物血细胞分析仪。1.4.3血液生化指标生化指标主要检测与蛋白代、脂类代谢、肝功能有关的指标，包括总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、尿素氮（BUN）含量和谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）活性，均采用南京建成生物工程研究所试剂盒进行检测。1.4.4血清免疫指标血液经4 000 r/min离心，取上层血清-20 ℃保存。免疫指标主要检测免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）、干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）含量，均采用南京建成生物工程研究所试剂盒进行检测。1.4.5血清抗氧化指标抗氧化指标主要检测总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）含量，均采用南京建成生物工程研究所试剂盒进行检测。1.5数据统计与分析数据采用SPSS软件进行处理，进行LSD组间比较。结果以平均值和标准误表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同水平富硒酵母对羔羊生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，试验2组羔羊的平均日增重显著提高（P0.05），料重比和腹泻率显著降低（P0.05）。与对照组相比，试验1组和试验3组羔羊的平均日增重、料重比具有改善的趋势，但差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.005.T002表2不同水平富硒酵母对羔羊生长性能的影响项目初重/kg末重/kg平均日增重/[kg/(只·d)]平均日采食量/[kg/(只·d)]料重比腹泻率/%对照组20.2436.400.23b1.827.91a7.42a试验1组20.1838.040.26ab1.857.12ab5.31ab试验2组20.0539.800.28a1.866.64b3.50b试验3组20.1438.540.26ab1.847.08ab3.02bSEM3.054.160.050.250.720.52P值0.4180.1030.0440.3190.0240.006注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2不同水平富硒酵母对羔羊血常规指标的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，试验2组羔羊血液红细胞总数显著升高（P0.05）；试验2组和试验3组羔羊血液平均红细胞血红蛋白含量和白细胞总数均显著升高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.005.T003表3不同水平富硒酵母对羔羊血常规指标的影响项目红细胞总数/(×1012个/L)血红蛋白/(g/L)血细胞比容/%平均红细胞血红蛋白含量/pg平均红细胞血红蛋白浓度/(g/L)血小板总数/(×109个/L)白细胞总数/(×109个/L)对照组9.63b120.3255.6312.54b220.43815.2524.32b试验1组9.85ab126.4057.4312.85b224.60883.5426.76ab试验2组10.53a136.4959.5413.63a228.31895.1030.43a试验3组10.06ab140.0660.1613.80a230.15912.4532.45aSEM1.657.055.311.539.329.523.86P值0.0470.0260.4160.0430.5270.0810.012与对照组相比，富硒酵母组羔羊血液血小板总数具有升高的趋势，但差异不显著（P0.05）。2.3不同水平富硒酵母对羔羊血液生化指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，试验2组和试验3组羔羊血液TP含量显著升高（P0.05）；试验2组羔羊血液BUN含量显著降低（P0.05）；试验2组和试验3组羔羊血液中ALT活性降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.005.T004表4不同水平富硒酵母对羔羊血液生化指标的影响项目TP/(g/L)ALB/(g/L)BUN/(mmol/L)TG/(mmol/L)TC/(mmol/L)AST/(U/L)ALT/(U/L)对照组65.52b33.565.43a0.291.19103.4315.84a试验1组70.17ab34.855.03ab0.271.1595.0114.62ab试验2组73.54a35.704.53b0.261.1094.2613.28b试验3组74.19a34.944.98ab0.261.1393.8112.60bSEM6.413.600.570.070.288.031.49P值0.0390.0950.0370.2180.1040.1210.0482.4不同水平富硒酵母对羔羊血清免疫指标的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，试验2组和试验3组羔羊血清的IgA和IgG含量显著升高（P0.05）；各富硒酵母添加组羔羊血清的IgM均显著升高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.005.T005表5不同水平富硒酵母对羔羊血清免疫指标的影响项目IgA/(g/L)IgM/(g/L)IgG/(g/L)IFN-γ/(ng/L)IL-2/(ng/L)对照组0.60b1.35c10.45b30.54224.95试验1组0.67ab1.46b11.62ab31.05230.51试验2组0.78a1.55a12.70a31.53233.07试验3组0.79a1.64a12.93a31.60240.61SEM0.120.251.303.798.52P值0.0360.0270.0380.5620.6172.5不同水平富硒酵母对羔羊血清抗氧化指标的影响（见表6）由表6可知，与对照组相比，各富硒酵母添加组羔羊血清SOD活性均显著提高（P0.05）；试验2组和试验3组羔羊血清中MDA含量显著降低（P0.05），GSH-Px活性显著提高（P0.05）。研究表明，日粮添加富硒酵母可以提高羔羊机体的抗氧化功能。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.005.T006表6不同水平富硒酵母对羔羊血清抗氧化指标的影响项目T-AOC/(U/mL)SOD/(U/mL)MDA/(μmol/L)GSH-Px/(U/mL)对照组5.6437.05c8.54a132.94b试验1组5.9442.74b7.32ab150.31ab试验2组6.1551.64a6.05b173.06a试验3组6.2053.63a5.93b180.18aSEM0.724.170.638.42P值0.1030.0100.0040.0133讨论3.1不同水平富硒酵母对羔羊生长性能的影响羔羊养殖过程对外界的应激抵抗力较差，易出现腹泻等常见疾病，平均日增重能够反映羔羊的整体养殖效益。本研究中，与对照组相比，试验2组羔羊的平均日增重显著提高，料重比和腹泻率显著降低。与对照组相比，试验1组和试验3组羔羊的平均日增重、料重比具有改善的趋势。聂晨睿等[9]研究发现，在断奶羔羊日粮中使用高、中、低剂量的富硒酵母可以不同程度地改善羔羊的平均日增重，中等水平（1 mg/kg）的富硒酵母效果最好。程连平等[10]研究表明，在湖羊养殖中使用富硒酵母可有效提高湖羊的试验末重、平均日增重，极显著降低湖羊的料重比。因此，在羔羊养殖生产中使用适宜剂量的富硒酵母可有效改善羔羊的生长性能，但各研究中最适添加量不同可能由富硒酵母有效含量不同导致。富硒酵母提高动物生长性能可能与其在动物机体内的高效利用有关，富硒酵母可提高动物机体对日粮中营养物质的消化吸收，进而改善生长性能[10]。3.2不同水平富硒酵母对羔羊血常规及血液生化指标的影响动物机体的血清生化指标可以间接反映动物机体的生理及健康状况。血常规中的白细胞总数可反映机体的免疫状态，白细胞主要包括嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞及淋巴细胞等，可以分泌多种与机体免疫相关的细胞因子[11]。本研究中，富硒酵母可以在一定限度上提高羔羊的白细胞总数，与本研究富硒酵母对血清免疫指标的影响相呼应。红细胞是携带和运输氧的主要物质，能够反映机体的免疫功能[12]。本研究中，给羔羊饲喂0.3 mg/kg的富硒酵母可以显著提高红细胞数目，表明富硒酵母可以增强机体的免疫力。张永翠等[13]研究发现，添加0.8 mg/kg酵母硒可以极显著提高杜寒杂交羊血清中血小板计数及嗜碱性粒细胞数量，与本研究结果类似。本研究中，试验2组和试验3组羔羊血液TP含量显著高于对照组；试验2组羔羊血液中的BUN含量低于对照组；试验2组和试验3组羔羊血液中的ALT活性低于对照组，表明富硒酵母可以提高羔羊机体蛋白质的代谢情况，促进蛋白质沉积，改善肝功能。结合本研究中试验组羔羊腹泻率明显降低，表明饲喂富硒酵母能够提高羔羊机体的抗病力。富硒酵母通过改善动物机体的肠道健康和增强机体的抗氧化及免疫功能，提高机体的抗病力，进而改善生长性能。3.3不同水平富硒酵母对羔羊血清免疫指标的影响动物机体内的免疫系统发挥作用主要是免疫球蛋白和细胞因子，细胞因子能够影响机体免疫应答的水平和类型；免疫球蛋白是机体免疫功能强度的直接体现[14]。本研究中，试验2组和试验3组羔羊的IgA和IgG显著高于对照组；各富硒酵母添加组羔羊的IgM均显著高于对照组，对细胞因子（IL-2和IFN-γ）含量未产生显著影响，表明富硒酵母可通过提高羔羊机体内免疫球蛋白含量提高机体的体液免疫。有研究表明，给奶牛补充硒可有效提高奶牛血清中IgG含量[15]。程连平等[10]研究表明，在湖羊羔羊日粮中添加100 g/t富硒酵母可显著提高湖羊羔羊血清IgA、IgM、IgG含量，显著提高IL-1和白细胞介素-6（IL-6）、含量。王爽等[16]研究发现，富硒酵母可改善黄曲霉毒素感染的雏鸡机体细胞因子水平，增强雏鸡机体的免疫功能。上述结果与本研究类似，表明在动物日粮中使用适宜水平的富硒酵母可提高动物机体的免疫功能。3.4不同水平富硒酵母对羔羊血清抗氧化指标的影响动物机体产生的活性氧自由基过量，会导致机体脂质过氧化，破坏细胞膜的完整性，损害机体健康[17]。硒主要是通过GSH-Px催化还原型谷胱甘肽氧化，清除机体内过量的活性氧自由基。本研究中，富硒酵母组羔羊血清中的SOD活性均显著大于对照组；试验2组和试验3组羔羊血清中MDA含量显著低于对照组，谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于对照组，表明富硒酵母显著增强了羔羊机体的抗氧化功能。白雪等[18]研究发现，酵母硒可以显著提高湖羊血清T-AOC，缓解脂质过氧化，降低MDA含量。有研究发现，使用有机硒可以显著提高奶牛血清中GSH-Px活性[19]。Faixová等[20]研究表明，富硒酵母可以增强羊血清中GSH-Px活性。富硒酵母可以有效增强动物机体的抗氧化功能的原因为硒是动物机体内谷胱甘肽过氧化物酶的主要组成成分，GSH-Px是动物机体内抗氧化系统的主要抗氧化活性物质。因此，在动物日粮中补充硒可以提高其抗氧化功能。4结论本试验条件下，在“杜泊羊×小尾寒羊”杂交公羔羊日粮中添加一定水平的富硒酵母可以有效提高其生长性能，增强机体的免疫力、抗氧化功能及抗病力。综合养殖成本考虑，在羔羊养殖中使用0.3 mg/kg的富硒酵母可取得较好的效果。