羊草是我国天然草场重要牧草，广泛分布于我国东北松嫩平原及内蒙古东部草原，是我国北方草原的优势草种[1]。羊草具有产量高、适应性强、适口性好、返青早、枯黄晚等特点，可较长时间为家畜提供青饲料[2]。羊草既可调制干草也可调制青贮。与调制干草相比，青贮不受天气变化影响，营养物质可较好保存，是理想贮存羊草的方法。但羊草具有可溶性糖含量低、含水量低、乳酸菌附着量低、缓冲能值高等特点，常规青贮较难成功[3]。蒙古韭是百合科葱属的多年生草本植物，别名沙葱，含水量高，具有较高的食用价值、生态价值、经济价值和药用价值。蒙古韭富含氨基酸成分，呈特殊鲜味。蒙古韭作为一种优质牧草，许多家畜喜食，羊食用后能够明显增膘，改善羊肉品质[4-5]，已成为我国西北部分地区主要饲草开发资源[6]。在羊草中添加蒙古韭进行青贮，可改善羊草含水量低的缺点，改善青贮品质，使羊草青贮饲料具有蒙古韭的鲜香味。目前对天然牧草青贮的研究主要集中在混合草群的青贮品质评定[7-8]，以天然牧草单种草为青贮原料的研究较少，本文以锡林郭勒盟毛登牧场典型草原羊草与蒙古韭为材料进行研究，通过对感官品质评定、常规营养品质和发酵品质的测定进行青贮特性评价，以期为天然草地牧草资源的高效利用提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验材料均于2020年7月25日采自内蒙古锡林郭勒盟毛登牧场天然打草场，草地类型为典型草原，以羊草和大针茅为建群种，其中蒙古韭为伴生种。羊草选择长势优良的植株，于抽穗期刈割；蒙古韭于盛花期刈割。刈割后用铡刀铡成2~3 cm小段，将羊草和蒙古韭分别按照按比例混合均匀，称取1 kg带回实验室进行鲜样品质测定，其余作为青贮原料。1.2试验设计试验以青贮原料鲜重为基础，设置T1组（100%羊草）、T2组（75%羊草+25%蒙古韭）、T3组（50%羊草+50%蒙古韭）、T4组（25%羊草+75%蒙古韭）、T5组（100%蒙古韭）共5组，对羊草和蒙古韭进行混合青贮。为防止青贮失败漏气，每组设置4个重复。按青贮总质量为250 g的标准，分别称取相应质量比例的青贮原料混匀，不添加任何添加剂，测定在自然发酵状态下最适混合比例；混匀后装入聚乙烯青贮袋中，塑封机进行真空包装，室温下避光保存，厌氧发酵60 d，开袋进行感官评定、营养品质、发酵品质的测定。1.3测定指标及方法1.3.1感官评定感官评定采用德国农业协会（DLG）青贮感官质量评分法[9]，根据气味、质地和色泽对牧草品质进行综合评分，感官质量评分见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.019.T001表1感官质量评分感官指标评分标准分值气味有很强的丁酸或氨味，几乎无酸味2丁酸味颇重，或有刺鼻的焦煳臭味或霉味4有微弱的丁酸臭味，或较强的酸味，芳香味弱10无丁酸臭味，芳香味浓或有明显的面包香14结构茎叶腐烂或污染严重0茎叶结构保持极差，或发现轻度霉菌或轻度污染1茎叶结构保持较差2茎叶结构保持良好4颜色变色严重，呈墨绿色或黄色0略有变色，呈淡黄色或带有褐色1接近原料原色，烘干后呈淡褐色2注：总分16~20分为1级优等；10~15分为2级尚好；5~9分为3级中等；0~4分为4级腐败。1.3.2营养品质干物质（DM）含量采用65 ℃烘干法进行测定[10]；粗蛋白质（CP）含量采用杜马斯燃烧法进行测定[10]；酸性洗涤纤维（ADF）和中性洗涤纤维（NDF）含量采用ANKOM全自动纤维分析仪进行测定[11]；可溶性碳水化合物（WSC）采用蒽酮-硫酸比色法进行测定分析[12]；粗脂肪（EE）采用索氏脂肪提取法测定[13]；粗灰分（Ash）含量利用灼烧法进行测定[14]。1.3.3发酵品质将青贮样品开袋后，称取10 g样品于聚乙烯无菌拍打袋中，加入90 mL无菌蒸馏水，使用拍打仪拍打2 min过滤，制得青贮浸提液，置于50 mL离心管，用于pH值、有机酸及氨态氮的测定。pH值采用便捷式pH计进行测定[15]；有机酸采用高效液相色谱仪（HPLC）测定，其中包括乳酸（LA）、乙酸（AA）、丙酸（PA）、丁酸（BA）[16]；氨态氮（NH3-N）采用苯酚-次氯酸钠比色法测定[17]。1.4数据统计与分析试验数据采用Excel 2019软件进行整理，SAS 9.4软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1羊草和蒙古韭原料营养水平（见表2）由表2可知，蒙古韭DM含量较低，为19.83%，CP含量较高，为13.78%；羊草CP含量较低，为8.84%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.019.T002表2羊草和蒙古韭原料营养水平项目羊草蒙古韭DM/%FM51.96±0.1219.83±1.33CP/%DM8.84±0.0513.78±0.92ADF/%DM34.18±0.7531.33±0.42NDF/%DM66.83±0.3538.28±1.10EE/%DM2.23±0.0510.13±0.49Ash/%DM6.28±0.056.24±0.04WSC/%DM3.24±0.253.59±0.282.2不同比例的羊草与蒙古韭混合青贮的感官评定（见表3）由表3可知，各混合青贮组感官评定均优于羊草和蒙古韭分别单独青贮。其中T5组有较强的酸味，芳香味较弱，T1组有略微的霉味，呈淡黄色，芳香味较弱。T5组等级为2级尚好，T1组、T2组、T3组、T4组均为1级优等，按分数排名为T2组=T4组T3组T1组T5组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.019.T003表3不同比例羊草与蒙古韭混合青贮的感官评定组别气味/分结构/分颜色/分总分综合评级T1组124117优等T2组144119优等T3组133218优等T4组143219优等T5组113115尚好2.3不同比例羊草与蒙古韭混合青贮的营养品质（见表4）由表4可知，与T1组相比，各组DM含量随着蒙古韭比例的增加而显著降低（P0.05），其中T5组含量最低，为24.04％。CP含量排序为T5组T4组T1组T2组T3组，其中T4组、T5组的CP含量显著高于其他处理组（P0.05），T5组CP含量最高，为9.77％，T3组CP含量最低，为7.95%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.019.T004表4不同比例羊草与蒙古韭混合青贮的营养品质组别DM/%FMCP/%DMADF/%DMNDF/%DMEE/%DMAsh/%DMWSC/%DMT1组47.79±0.44a8.58±0.29b39.83±1.06b64.72±2.75a7.37±0.31c5.98±0.09a2.23±0.14cT2组41.04±2.14b8.32±0.24bc39.99±1.03b62.64±1.96a7.99±0.48bc5.72±0.12b2.73±0.13bT3组34.93±1.62c7.95±0.06c42.01±2.57ab59.56±1.09b7.95±0.18bc5.18±0.21d2.64±0.13bT4组29.15±0.67d9.64±0.57a42.50±1.31ab54.21±1.77c8.55±0.48b5.41±0.11c2.22±0.31cT5组24.04±1.96e9.77±0.48a44.42±2.95a45.36±1.38d9.58±0.78a5.30±0.09cd4.03±0.35a注：1.同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.ND表示未检出；下表同。各组ADF含量随着蒙古韭比例的增加逐渐升高，T5组显著高于T2组、T1组（P0.05）。各组NDF含量随着蒙古韭比例的增加逐渐降低，T5组最低且显著低于其他各组（P0.05），T1组最高，显著高于T3组、T4组、T5组（P0.05）。各组EE含量排序为T5组T4组T2组T3组T1组，其中T5组、T4组EE含量显著高于T1组（P0.05）。Ash含量排序为T1组T2组T4组T5组T3组，其中T1组Ash含量最高，为5.98％，显著高于其他组（P0.05），T3组最低，为5.18％。各组WSC含量排序为T5组T2组T3组T1组T4组，其中T5组WSC含量显著高于其他组（P0.05）；T2组、T3组显著高于T1组、T4组（P0.05）。2.4不同比例羊草与蒙古韭混合青贮的发酵品质（见表5）由表5可知，各组pH值随着蒙古韭比例增加而明显降低，T5组pH值最低，为4.05。T1组LA含量显著低于其他组（P0.05），T4组、T5组显著高于T2组、T3组（P0.05），且T4组LA含量最高。各组AA、PA含量均随着蒙古韭比例的增加而明显提高，其中T5组AA、PA含量最高；仅在T5组中检出少量BA，其余组均未检出BA。各组NH3-N含量随蒙古韭比例增加逐渐降低，T4组、T5组显著低于T1组、T2组、T3组（P0.05）。T5组NH3-N/TN显著低于T1组、T2组、T3组（P0.05），T2组显著高于除T1组外的其他组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.019.T005表5不同比例羊草与蒙古韭混合青贮的发酵品质组别pH值LA/%DMAA/%DMPA/%DMBA/%DMNH3-N/%DMNH3-N/TN/%T1组5.43±0.05a2.97±0.11c1.38±0.14d0.03±0.01cND2.30±0.20ab1.67±0.15abT2组4.72±0.27b3.36±0.20b1.76±0.16c0.05±0.01abND2.52±0.26a1.89±0.19aT3组4.32±0.08c3.54±0.30b1.91±0.26bc0.05±0.01abND1.61±0.74bc1.26±0.57bcT4组4.49±0.07c3.97±0.13a2.21±0.26b0.04±0.01bND1.47±0.41c0.96±0.29cdT5组4.05±0.09d3.93±0.15a2.54±0.12a0.06±0.01a0.02±0.011.07±0.27c0.69±0.19d注：“ND”表示未检出。3讨论3.1不同比例羊草与蒙古韭混合青贮的感官评定分析感官评定是评价青贮饲料最直观且简单的方法，一般通过看颜色、闻气味、识质地、尝味道鉴定[18]。优质青贮饲料颜色应接近原料本色，具有浓厚酸香味，不刺鼻[19]。本试验结果发现，T1组有略微的霉味，颜色呈淡黄色，芳香味较弱，等级为1级优等；T5组有较强的酸味，芳香味较弱，茎叶结构保持良好，等级为2级尚好；混合青贮的T2组、T3组、T4组气味、结构、颜色均优于蒙古韭与羊草单独青贮，原因可能是混合青贮后使原料中含水量增加、WSC含量增加，更利于乳酸菌的生长[20]。其中以T2组、T4组青贮感官评定分值最高。3.2不同比例羊草与蒙古韭混合青贮的营养品质分析青贮能否成功与青贮原料的营养成分及附着微生物数量密切相关[21]，青贮过程中微生物可将WSC转化为LA，并在厌氧环境中降低pH值，从而改善青贮饲料品质[22]。蒙古韭比羊草具有较高的WSC含量，在羊草青贮中加入蒙古韭可以提高青贮原料中的WSC含量，从而更有利于提高青贮饲料营养品质。本试验中，与T1组相比，T2组、T3组中WSC含量显著提高。羊草与蒙古韭的水分含量具有互补性，一定比例混合后能够弥补羊草水分含量过低的特点，提高青贮饲料的营养品质。蒙古韭原料中CP含量高于羊草原料中CP含量，在混合青贮后CP含量呈先降低后增高趋势，以T4组、T5组最高。ADF含量与动物消化率呈负相关[23]，随着蒙古韭比例的增加，ADF含量逐渐增加，动物消化率降低。3.3不同比例羊草与蒙古韭混合青贮的发酵品质分析在青贮饲料中，pH值、NH3-N/TN是评定青贮料发酵效果的重要指标[24]，较好的青贮饲料中pH值和NH3-N/TN较低[25]。NH3-N/TN越低，粗蛋白质分解越少。本研究中，混合青贮处理组pH值显著低于羊草单独青贮，NH3-N/TN随着蒙古韭比例的增加逐渐降低。因此，发酵品质随着蒙古韭比例的增加而提升。LA是乳酸菌的主要代谢产物，也是反映青贮质量的最重要指标[26]，LA含量越多，越利于青贮饲料的发酵，青贮质量越优。本研究中，LA含量随着蒙古韭比例的增加逐渐增加，可能是由于混合青贮后适宜的含水量促进了青贮发酵；WSC是乳酸菌发酵的重要底物，混合青贮后有更加充足的WSC有助于乳酸菌发酵[27]，产生更多的LA，而LA含量升高会导致pH值呈下降趋势。低AA含量是优质青贮饲料的一项认定指标[28]，但一定含量的AA可抑制有害微生物的活性，提高青贮饲料的有氧稳定性[29]。本研究中，AA含量随蒙古韭比例的增加而逐渐增加，表明混合青贮可提升青贮饲料的有氧稳定性。BA由梭菌等有害微生物分解青贮饲料中可溶性碳水化合物产生，发酵过程中会导致蛋白质分解，影响青贮饲料品质。BA含量越高，青贮品质越差。本研究中，仅有T5组检出少量BA，其余组均未检出。因此，添加蒙古韭可有效提高羊草发酵品质。4结论本研究结果表明，综合各组青贮饲料感官评定、营养品质、发酵品质，以25%羊草+75%蒙古韭混合青贮时，青贮饲料营养价值较高、乳酸含量增加、pH值较低，青贮效果较好。