目前,规模化、集约化猪场会采取早期断奶措施,一般在仔猪21日龄断奶,此阶段仔猪胃肠道发育尚不完全,肠道健康出现问题可引起仔猪机体出现氧化应激、腹泻率升高的现象,并且断奶应激会严重阻碍仔猪的生长发育[1]。为缓解仔猪因早期断奶产生的断奶应激综合征,可以在仔猪断奶阶段的饲粮中添加提高机体免疫力及抗氧化功能的饲料添加剂。酵母硒是一种动物机体吸收效果好、低毒副作用的抗氧化剂[2],可以提高动物机体的抗氧化功能[3-4],改善生产性能[5]。黄芪多糖是中药黄芪中主要的活性物质,具有提高动物机体免疫力[6]、改善肠道菌群结构[7]、增强机体抗氧化功能[8]等作用。目前,酵母硒与黄芪多糖单独应用于动物养殖生产中的研究结果较多,但二者联合应用的研究较少。有研究发现,将酵母硒与黄芪多糖联合应用在半番鸭的生产中,可有效改善半番鸭机体的代谢状态及抗氧化功能,从而改善肉品质[9-10]。本研究以断奶仔猪为研究对象,探讨酵母硒与黄芪多糖对仔猪生长性能及血清免疫、抗氧化、生化指标的影响,为酵母硒与黄芪多糖在断奶仔猪生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料酵母硒购自安琪酵母公司,有效含量为3 000 mg/kg;黄芪多糖由某制药集团提供,有效含量大于90%。1.2试验设计试验选取120头21日龄体重相近的断奶仔猪,随机分为4组,每组5个重复,每个重复6头仔猪,分别为对照组(基础日粮)、酵母硒组(基础日粮+0.3%酵母硒)、黄芪多糖组(基础日粮+0.1%黄芪多糖)、复合剂组(基础日粮+0.3%酵母硒+0.1%黄芪多糖)。预试期7 d,正式试验期28 d,共35 d。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.006.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米61.50消化能/(MJ/kg)13.39豆粕21.00粗蛋白/%18.35麸皮6.50钙/%0.72胚芽粕5.00总磷/%0.65鱼粉1.50有效磷/%0.38豆油1.00食盐0.35DL-蛋氨酸0.28L-赖氨酸(98%)0.30磷酸氢钙1.20石粉0.37预混料1.00注:1.预混料购自甘肃天邦饲料有限公司。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验开始前,对试验场地进行消毒处理,通风换气后进行7 d的预试验。预试验期间所有断奶仔猪饲喂基础日粮,进入正式试验期后每组断奶仔猪饲喂相应组别的日粮。试验期间断奶仔猪自由采食、饮水,猪舍环境及免疫程序均按照猪场日常管理进行。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验第1 d和最后1 d称量断奶仔猪的体重,记录每组断奶仔猪的采食量,记录各组猪的健康情况,计算断奶仔猪的平均日增重、平均日采食量、料重比及腹泻率。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)腹泻率=(腹泻仔猪数×腹泻天数)/(试验天数×试验仔猪数)×100%(4)1.4.2血清免疫指标试验结束,每组选择15头断奶仔猪采血10 mL,3 500 r/min离心8 min收集血清,用于检测断奶仔猪的血清免疫指标、血清抗氧化指标和血清生化指标,检测试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。血清免疫指标主要包括免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、补体C3、补体C4、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。1.4.3血清抗氧化指标血清抗氧化指标主要包括总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及丙二醛(MDA)。1.4.4血清生化指标血清生化指标主要包括总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel软件整理,SPSS 20软件进行单因素方差分析,LSD法进行多重比较。结果以平均值和标准误表示,P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1酵母硒与黄芪多糖对断奶仔猪生长性能及腹泻率的影响(见表2)由表2可知,复合剂组断奶仔猪的末重比对照组提高了6.45%(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.006.T002表2酵母硒与黄芪多糖对断奶仔猪生长性能及腹泻率的影响项目初重/kg末重/kg平均日增重/[g/(头·d)平均日采食量/[g/(头·d)料重比腹泻率/%对照组7.2113.95b241.79478.401.99a4.83A酵母硒组7.1814.55ab263.21480.551.83b2.51B黄芪多糖组7.2314.44ab257.50479.871.86b2.15B复合剂组7.2014.85a273.21483.041.77c1.36CSEM0.941.9615.9420.460.250.63P值0.4180.0480.7180.1300.0070.003注:同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P0.05),不同大写字母表示差异极显著(P0.01),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);表4与此同。与对照组相比,酵母硒组、黄芪多糖组和复合剂组断奶仔猪的料重比分别降低了8.04%、6.53%、11.06%(P0.05);仔猪的腹泻率分别降低了48.03%、55.49%、71.84%(P0.01)。2.2酵母硒与黄芪多糖对断奶仔猪血清免疫指标的影响(见表3)由表3可知,与对照组相比,酵母硒组和复合剂组断奶仔猪的IgA、IgM含量显著升高(P0.05);各试验组断奶仔猪IgG含量显著升高(P0.05);复合剂组断奶仔猪补体C3、C4含量显著升高(P0.05);黄芪多糖组和复合剂组断奶仔猪IL-2含量显著升高(P0.05),TNF-α含量显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.006.T003表3酵母硒与黄芪多糖对断奶仔猪血清免疫指标的影响项目对照组酵母硒组黄芪多糖组复合剂组SEMP值IgA/(g/L)1.27b2.53a1.36b2.87a0.310.040IgG/(g/L)3.05b4.14a4.20a4.87a0.520.034IgM/(g/L)0.33b0.45a0.37b0.47a0.070.047C3/(g/L)0.36b0.44ab0.37b0.50a0.090.380C4/(g/L)0.037b0.051ab0.040b0.055a0.020.017IL-2/(ng/L)130.41b134.02b164.33a178.10a6.820.043IL-6/(ng/L)45.7644.5143.8643.074.960.736IL-10/(ng/L)126.83130.95137.05142.528.060.095TNF-α/(ng/L)231.96a225.75a175.93b170.41b12.510.013注:同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P0.05),不同大写字母表示差异极显著(P0.01),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);表5与此同。2.3酵母硒与黄芪多糖对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响(见表4)由表4可知,与对照组相比,酵母硒组和复合剂组断奶仔猪血清SOD活性及T-AOC显著升高(P0.05);各试验组断奶仔猪血清GSH-Px活性均显著升高(P0.05);各试验组断奶仔猪血清MDA含量极显著降低(P0.01)。各组断奶仔猪血清CAT活性差异均不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.006.T004表4酵母硒与黄芪多糖对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响项目T-AOC/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)CAT/(U/mL)SOD/(U/mL)MDA/(μmol/L)对照组2.41b510.45c3.41112.35b4.24A酵母硒组3.58a574.10b3.73143.82a3.04B黄芪多糖组2.45b583.02b3.75115.03b2.95B复合剂组3.88a634.91a3.82160.28a2.31CSEM0.4323.410.425.400.42P值0.0270.0220.3180.0190.0062.4酵母硒与黄芪多糖对断奶仔猪血清生化指标的影响(见表5)由表5可知,与对照组相比,复合剂组断奶仔猪血清BUN含量显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.16.006.T005表5酵母硒与黄芪多糖对断奶仔猪血清生化指标的影响项目对照组酵母硒组黄芪多糖组复合剂组SEMP值TP/(g/L)57.8458.2658.3157.954.510.627ALB/(g/L)32.6232.9533.0333.162.610.418BUN/(mmol/L)5.26a4.73ab5.20a4.14b0.570.024AST/(U/L)44.0643.8543.8943.764.040.385ALT/(U/L)63.3163.4263.2963.245.280.613ALP/(U/L)240.51237.49235.04228.5913.410.734TC/(mmol/L)2.652.602.572.550.300.174TG/(mmol/L)0.460.430.440.400.060.2193讨论3.1酵母硒与黄芪多糖对断奶仔猪生长性能及腹泻率的影响仔猪断奶后,由于环境、日粮等因素改变,会产生严重的断奶应激及氧化应激,此阶段断奶仔猪肠道尚未发育完善,导致断奶仔猪生长受阻、发生腹泻,甚至死亡。硒作为动物机体不可缺少的矿物元素,不仅对机体各种生理功能、代谢功能具有重要作用,也可有效改善机体抗氧化功能。本研究中,酵母硒组断奶仔猪的试验末重具有提高的趋势;与对照组相比,酵母硒组仔猪料重比显著降低8.04%,腹泻率极显著降低48.03%,表明酵母硒可有效改善断奶仔猪的生长性能。蔡世林等[11]研究发现,使用0.3和0.6 g/t的酵母硒均可显著降低断奶仔猪的料重比。Oliveira等[12]在酵母硒对断奶仔猪生长性能的影响的相关研究也得出了类似的结果。罗霄等[13]研究发现,使用0.15、0.30、0.60 mg/kg的酵母硒均有效改善了断奶仔猪的腹泻率。酵母硒改善断奶仔猪的生长性能、降低腹泻率可能与其较强的抗氧化功能有关。酵母硒还能够提高动物机体的抗应激能力及机体对日粮中营养物质的表观消化率[11]。本研究中,日粮中添加黄芪多糖可显著降低断奶仔猪的料重比,极显著降低仔猪腹泻率。原因可能是黄芪多糖具有免疫调节功能,能够增强应激状态下的免疫力,进而促进机体的生长发育[14]。本研究中,酵母硒与黄芪多糖联用的效果优于单独使用,可能是因为二者的生物活性发挥了协同作用。3.2酵母硒与黄芪多糖对断奶仔猪血清免疫指标的影响动物机体免疫系统主要由免疫球蛋白和细胞炎症因子组成,在机体免疫功能方面发挥重要作用。本试验中,与对照组相比,酵母硒组和复合剂组断奶仔猪血清IgA、IgM含量显著升高;各试验组断奶仔猪血清IgG含量均显著升高;复合剂组断奶仔猪血清补体C3、C4含量显著升高;黄芪多糖组和复合剂组断奶仔猪血清IL-2含量显著升高,TNF-α含量低于对照组。表明酵母硒与黄芪多糖增强了断奶仔猪机体体液免疫和细胞免疫功能,且二者联合使用效果优于单独使用。酵母硒提高机体免疫力原因可能是刺激了机内B淋巴的成熟,进而分泌IgA、IgM、IgG,促进机体免疫系统更好地发挥免疫功能[15-16]。黄芪多糖中含有的皂苷与多糖类成分,对动物机体的免疫功能具有一定的增强作用[17]。研究发现,日粮中添加1 g/kg的黄芪多糖对仔猪血清IgG和IL-2含量具有显著的提高作用[18]。在育肥猪的研究中同样发现黄芪多糖能够有效改善机体的免疫力[19]。酵母硒与黄芪多糖可通过提高断奶仔猪提高血清中免疫球蛋白和抗炎因子含量,增强机体免疫,与其富含的生物活性物质及营养物质有关,但具体机制仍需要从分子层面深度研究。3.3酵母硒与黄芪多糖对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响仔猪断奶阶段机体易发生氧化应激,导致机体内的活性氧自由基含量增多,无法及时清除会导致脂质氧化,细胞膜受损,进而损害机体健康。机体内主要抗氧化酶系统主要有GSH-Px、CAT及SOD,在保持机体自由基平衡中发挥重要作用[20]。本试验中,与对照组相比,酵母硒组和复合剂组断奶仔猪血清SOD活性及T-AOC显著升高;各试验组断奶仔猪血清GSH-Px活性均显著升高;各试验组断奶仔猪血清MDA含量极显著降低;各组断奶仔猪血清CAT活性差异均不显著。表明酵母硒与黄芪多糖均很好地提高了断奶仔猪机体的抗氧化功能,且二者联用效果更佳,可能是因为酵母硒与黄芪多糖均是很强的抗氧化剂,二者联合使用抗氧化效果能够起叠加作用。郑嫩珠等[10]发现,在肉鸭在养殖生产中联合使用酵母硒与黄芪多糖对肉鸭机体的抗氧化功能也起到了显著的互作效应,与本研究结果类似。张华杰等[21]研究发现,日粮中添加酵母硒能够显著提高黑猪血清GSH-Px活性和T-AOC,MDA含量显著降低;对黑猪的生长性能及营养物质表观消化率也起到了改善作用。酵母硒改善动物机体抗氧化功能主要是由于硒是GSH-Px的组成成分[22];而黄芪多糖提高动物机体抗氧化功能主要是通过增强了与多糖抗氧化作用的NRF1、P13K/Akt/eNOS、AMPK/PKC、Caspase-3等信号通路[23]。目前有关酵母硒与黄芪多糖联合使用提高抗氧化的作用机制研究较少,未来应进一步深入研究。3.4酵母硒与黄芪多糖对断奶仔猪血清生化指标的影响动物机体血清生化指标可反映机体的健康状态。TP、ALB、BUN可反映机体对蛋白质的吸收、代谢、沉积;AST和ALT可反映机体肝功能情况,若肝功能减弱,二者活性会升高;TC和TG则反映机体脂质代谢情况。本试验中,与对照组相比,复合剂组断奶仔猪血清BUN含量显著降低,表明酵母硒与黄芪多糖联用提高了断奶仔猪机体对蛋白质的代谢,促进蛋白质沉积,进而提高其生长性能;而各组其他血清生化指标数值差异不显著,表明酵母硒与黄芪多糖对机体健康未产生不利影响。李丽等[9]研究发现,半番鸭基础饲料中使用酵母硒与黄芪多糖对其血清BUN含量具有降低作用,与本研究结果类似。4结论本研究结果表明,在断奶仔猪生产中使用酵母硒与黄芪多糖可不同程度地提高其生长性能,降低腹泻率,增强机体免疫力和抗氧化能力。综合各项指标数据,酵母硒与黄芪多糖联合使用效果较好。
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