当归及其提取物作为饲料添加剂在动物日粮中应用能够改善其生产性能。当归药性甘、辛、温,具有润燥滑肠、活血化瘀、调经镇痛等功效[1]。当归中的活性成分包括多糖、萜类、苯酞类等多种化合物[2]。目前广泛使用的当归提取物主要活性成分为藁本内酯和当归多糖,这两种活性成分可促进动物免疫器官发育,提高机体免疫、抗氧化及抗炎能力[3],增强循环系统功能[4],在畜禽生产中应用较广泛[5-6]。在日粮中添加饲料添加剂提高奶牛生产性能、乳品质是提升奶牛养殖经济效益的重要方法[7]。本研究在荷斯坦奶牛日粮中添加不同剂量的当归提取物,测定奶牛生产性能、血清生化指标及乳品质,旨在研究当归提取物在奶牛日粮中的适宜添加量,为奶牛高效养殖提供参考。1材料与方法1.1试验材料当归提取物购自陕西夏州生物科技有限公司,其中藁本内酯含量为1%、当归多糖含量为5%、阿魏酸含量为0.5%。试验场地在河北宏伟养牛专业合作社进行。1.2试验设计选取健康、胎龄2~3胎的荷斯坦奶牛,泌乳期约为120~125 d、平均泌乳量约27 kg/d的48头奶牛随机分为4组,每组6个重复,每个重复2头奶牛。各组分别在TMR混合日粮中添加0(A组,对照组)、0.5%(B组)、1.0%(C组)、1.5%(D组)当归提取物。基础日粮组成及营养水平见表1。预试期7 d,正式试验期60 d。试验奶牛以颈枷控制的形式进行单槽饲喂,自由饮水。奶牛饲喂时间分别为7:00、16:30,每天统计奶牛日采食量与产奶量。奶牛的饲养管理参考养殖场制定的养殖规范与要求进行。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.006.T001表1基础日粮组成及营养水平(风干基础)原料组成含量/%营养水平合计100.00燕麦草23.48泌乳净能/(MJ/kg)6.61苜蓿干草18.63粗蛋白/%15.73青贮玉米秸秆17.89粗脂肪/%3.82玉米17.43中性洗涤纤维/%36.47麸皮5.32酸性洗涤纤维/%20.12豆粕7.32钙/%0.93棉籽粕6.43磷/%0.46菜籽粕1.35石粉0.47磷酸氢钙0.63食盐0.55预混料0.50注:1.预混料为每千克日粮提供:VA 3 000 IU、VD 550 IU、VE 50 IU、Fe 33.3 mg、Cu 6.0 mg、Zn 22 mg、Mn 45.4 mg、I 0.15 mg、Se 0.05 mg。2.营养水平中泌乳净能为计算值,其余均为实测值。1.3测定指标及方法1.3.1生产性能在正式试验开始后,于每日7:00前统计前1天奶牛的泌乳量与采食量。试验结束后,统计奶牛的总产奶量和总采食量,计算奶牛平均日采食量、平均日产奶量以及料奶比等指标。平均日采食量=总采食量/试验天数(1)平均日产奶量=总产奶量/试验天数(2)料奶比=平均日采食量/平均日产奶量(3)1.3.2乳品质试验最后1 d,8:00、12:00、16:00收集每头奶牛的鲜奶样品,混匀,使用全自动乳品分析仪分析鲜奶样品中乳糖、乳脂、乳蛋白、总固形物及体细胞数。1.3.3血清指标试验最后1 d,对每头奶牛尾静脉采血约10 mL,3 500 r/min离心10 min,得上清液,-20 ℃贮存,用于测定抗氧化和免疫指标。使用试剂盒测定总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GHS-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量。使用试剂盒测定免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-10(IL-10)含量。血清生化指标均使用酶联免疫吸附(ELISA)法进行测定。以上试剂盒购自南京建成生物工程研究所,操作步骤按照试剂盒说明进行。1.3.4经济效益奶牛混合日粮的使用成本为3.32元/kg,当归提取物购买价格为84元/kg,鲜奶销售价格平均为3.94元/kg。饲料成本=试验阶段采食量×饲料单价+当归提取物使用成本(4)养殖收入=试验阶段泌乳量×鲜奶销售价格(5)利润=养殖收入-饲料成本(6)1.4数据统计与分析试验数据采用Excel软件进行初步整理,SAS 9.0软件进行单因素方差分析,Duncan's法多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同水平当归提取物对奶牛生产性能的影响(见表2)由表2可知,与对照组相比,C组奶牛的平均日采食量显著升高(P0.05),各试验组奶牛平均日产奶量显著升高(P0.05)。各试验组奶牛的料奶比均低于对照组,C组奶牛料奶比显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.006.T002表2不同水平当归提取物对奶牛生产性能的影响组别平均日采食量/[kg/(头·d)]平均日产奶量/[kg/(头·d)]料奶比A组(对照组)18.36±1.34b27.36±0.85c0.671 1±0.030 0aB组19.27±2.85ab30.58±0.79b0.630 2±0.030 0abC组20.32±1.17a32.89±0.74a0.617 8±0.010 0bD组19.59±2.31ab31.02±0.83ab0.631 5±0.040 0ab注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2不同水平当归提取物对鲜奶品质的影响(见表3)由表3可知,与对照组相比,C组、D组鲜奶中乳脂率显著提高(P0.05),各试验组鲜奶中总体细胞数均显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.006.T003表3不同水平当归提取物对鲜奶品质的影响组别乳糖率/%乳脂率/%乳蛋白率/%总固形物/%总体细胞数/(×104/mL)A组(对照组)3.79±0.143.82±0.11b3.27±0.3511.90±0.9339.28±3.22aB组3.82±0.113.93±0.19ab3.29±0.3911.92±0.8233.49±2.02bC组3.84±0.134.08±0.07a3.39±0.2511.95±1.0126.35±1.82cD组3.84±0.154.12±0.13a3.41±0.3711.96±0.8425.97±3.17c2.3不同水平当归提取物对奶牛血清抗氧化指标的影响(见表4)由表4可知,随着当归提取物的添加量提高,奶牛血清T-AOC呈显著上升趋势(P0.05)。与对照组相比,各试验组奶牛血清GSH-Px、SOD活性显著升高(P0.05),血清MDA含量显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.006.T004表4不同水平当归提取物对奶牛血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)CAT/(U/mL)MDA/(μmol/L)A组(对照组)6.01±0.21d75.21±4.38c72.24±3.18b16..35±2.153.86±0.37aB组6.58±0.33c90.69±3.61b84.42±4.03a15.67±3.472.96±0.57bC组7.38±0.27b91.43±2.21b82.39±3.26a17.82±4.212.91±0.41bD组8.01±0.29a98.54±3.42a85.39±4.88a17.81±3.053.01±0.33b2.4不同水平当归提取物对奶牛血清免疫指标的影响(见表5)由表5可知,与对照组相比,D组奶牛血清IgA含量显著提高(P0.05),各试验组奶牛血清IL-6含量显著降低(P0.05),各试验组血清IL-10含量显著提高(P0.05),C组、D组奶牛血清TNF-α含量显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.006.T005表5不同水平当归提取物对奶牛血清免疫指标的影响组别IgG/(g/L)IgA/(g/L)IgM/(g/L)IL-2/(ng/L)IL-6/(ng/L)IL-10/(ng/L)TNF-α/(μg/L)A组(对照组)1.58±0.03d0.98±0.10b0.32±0.06259.42±16.48304.66±10.25a345.24±36.35b63.37±5.97aB组1.64±0.06c0.96±0.08b0.32±0.04255.67±15.17263.30±3.20b456.18±32.54a59.47±4.81abC组1.78±0.04b0.99±0.06b0.36±0.05252.38±11.49265.43±8.83b468.33±24.11a50.44±3.74bD组1.91±0.05a1.10±0.05a0.35±0.06258.39±13.01260.44±9.42b472.38±31.21a46.90±5.63b2.5不同水平当归提取物对奶牛养殖经济效益的影响(见表6)由表6可知,试验各组每头奶牛所产生的平均利润依次为2 810.59、2 904.92、2 703.32、1 085.69元,仅B组的利润高于对照组,且B组单头奶牛经济效益比对照组提高了94.33元。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.17.006.T006表6不同水平当归提取物对奶牛养殖经济效益的影响组别总采食量/(kg/头)饲料成本/(元/头)当归提取物使用量/kg当归提取物添加成本/元鲜奶总产量/(kg/头)鲜奶销售收入/(元/头)利润/(元/头)A组(对照组)1 101.603 657.31001 641.606 467.902 810.59B组1 156.203 838.585.78485.601 834.807 229.112 904.92C组1 219.204 047.7412.191 024.131 973.407 775.202 703.32D组1 175.403 902.3327.922 345.111 861.207 333.131 085.693讨论3.1不同水平当归提取物对奶牛生产性能的影响奶牛生产性能与健康水平是影响养殖经济效益的主要因素。早期奶牛养殖主要通过在日粮中添加当归粉治疗产后子宫炎、胎衣不下、乳房炎等疾病[8-10]。张世昌等[11]在奶牛产前3 d至产后12 d阶段,分别在日粮中添加0.4%、0.8%当归提取物显著提高了奶牛采食量与泌乳量。本试验中,当归提取物添加量在0.5%~1.0%范围内,奶牛采食量与泌乳量随当归提取物添加量的增加而呈上升趋势,与上述研究结果基本一致。3.2不同水平当归提取物对乳品质的影响奶牛乳品质受遗传因素、生理状态、营养水平、生活环境、乳房疾病等多种因素的影响[12]。张世昌等[11]研究发现,当归提取物不能改善奶牛乳品质。但本试验表明,当归提取物可显著提高乳脂率,并降低鲜奶中体细胞数,造成差异的原因可能与张世昌等[11]试验周期较短有关。当奶牛患有隐性乳房炎时,鲜奶中乳脂率含量会显著下降、体细胞数显著提高[13-15]。高启贤等[16]使用当归复配其他药用植物制成当归红花散,奶牛每日灌服2次。结果表明,奶牛乳房炎在第一疗程治愈率为23.5%,有效率为85.3%;第二疗程治愈率为80.8%,有效率为92.3%;第一至第四疗程治愈率达92.3%。本研究发现,日粮中添加当归提取物可改善奶牛乳房健康,提升乳品质。3.3不同水平当归提取物对奶牛血清指标的影响血清中抗氧化指标可以反映奶牛生理状态和应激水平。T-AOC可以反映奶牛体内综合抗氧化能力,在合理范围内,T-AOC数值越高表明机体抗氧化能力越强。GSH-Px可将过氧化物还原为无毒的羟基化合物,从而保护细胞膜的结构及功能[17]。SOD能够催化超氧阴离子自由基歧化生成氧和过氧化氢,在机体氧化与抗氧化平衡中起至关重要的作用[18]。CAT催化H2O2分解,减少OH·的生成[19]。张世昌等[11]发现,当归提取物可显著提高奶牛血清T-AOC,与本研究结果类似。研究表明,添加0.5%和1.0%的当归提取物可提高血清中T-AOC,同时提高血清中SOD和GSH-Px活性,抑制MDA生成[20],与本研究结果一致。IgG、IgA和IgM是动物体液免疫的主要抗体,其在血清中的含量能够直观反映奶牛免疫应答反应水平[21]。有研究表明,日粮中添加当归提取物可显著提高猪血清IgG和IgA含量[6,20]。IL-2、IL-6,IL-10及TNF-α等细胞因子能够反映奶牛体内炎症水平与健康状况,IL-2、IL-6及TNF-α在一定范围内含量越高表示体内炎症水平越高,而IL-10作为抗炎因子,含量越高表示体内抗炎能力越强。王健[22]认为,当归及其提取物中所含的大量活性成分可以影响体内炎症因子水平,对改善奶牛机体健康和体内炎症水平具有重要作用。本研究发现,在日粮中添加当归提取物可以降低奶牛血清TNF-α、IL-6含量,提高IL-10含量,表明当归提取物对体内炎症具有一定的抑制作用。3.4不同水平当归提取物对奶牛养殖经济效益的影响养殖经济效益是评估饲料原料或添加剂用于奶牛养殖可行性的重要指标。本试验中,当归提取物可有效提高奶牛的生产性能,但由于当归提取物的使用成本偏高,导致C组与D组奶牛养殖经济效益降低。因此,在奶牛生产中,需要选择适宜添加量的当归提取物以提高奶牛的生产性能和经济效益。4结论添加当归提取物可有效提高奶牛生产性能、乳品质、抗氧化能力和免疫能力。但由于当归提取物使用成本过高,超过1.0%添加量可导致养殖经济效益下降,本研究认为0.5%为当归提取物在奶牛日粮中的适宜添加量。
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